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猪细胞因子IL-2、IL-4和IFN-γ作为免疫增强剂和新型基因工程疫苗的研究 被引量:1
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作者 王洪光 汤德元 +5 位作者 李春燕 曾智勇 罗险峰 甘振磊 刘建 郝飞 《猪业科学》 2014年第1期99-101,共3页
通过综述猪IL-2、IL-4和IFN-γ的基因结构、作为免疫佐剂和作为构建新型基因工程疫苗方面研究进展,以了解细胞因子IL-2、IL-4和IFN-γ的相关研究成果,为细胞因子进行更深入的研究提供参考。
关键词 猪细胞因子 IL-2 IL-4 IFN-Γ 免疫增强剂 新型基因工程疫苗
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猪GM-CSF基因的克隆及其真核表达载体的构建 被引量:1
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作者 黄海军 高其双 +9 位作者 钱运国 邵淑敏 黄远全 陈志华 陶弼菲 向敏 占才耀 夏瑜 王连芳 任远 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期112-115,132,共5页
采用PCR方法从猪外周血液淋巴细胞cDNA中扩增出与预期设计大小相符的GM-CSF基因特异性条带,PCR产物经EcoR I和Xho I双酶切后,插入到载体pIRES2-EGFP构建成真核表达载体pIRES2-EGFP-GM-CSF。经PCR鉴定、限制性内切酶酶切分析和克隆片段... 采用PCR方法从猪外周血液淋巴细胞cDNA中扩增出与预期设计大小相符的GM-CSF基因特异性条带,PCR产物经EcoR I和Xho I双酶切后,插入到载体pIRES2-EGFP构建成真核表达载体pIRES2-EGFP-GM-CSF。经PCR鉴定、限制性内切酶酶切分析和克隆片段序列测定、比较,证实了重组质粒的正确性。将构建好的真核表达质粒转染到山羊胎儿成纤维细胞中进行瞬时表达,荧光检测证实细胞转染成功。pIRES2-EGFP-pGM-CSF真核表达载体的成功构建为下一步在细胞水平研究GM-CSF蛋白功能以及进一步将其开发为高档疫苗佐剂奠定了基础。 展开更多
关键词 细胞-巨噬细胞集落刺激因子 克隆 真核表达载体 瞬时转染
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稳定转染pGM-CSF基因的哺乳动物细胞系的建立
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作者 陶弼菲 高其双 +8 位作者 陈志华 向敏 占才耀 钱运国 夏瑜 华娟 王莲芳 任远 黄海军 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第8期6-8,12,共4页
构建稳定表达猪pGM-CSF基因的细胞系可以为工业化生产猪pGM-CSF并将其应用于新型兽药的开发提供生产细胞源。本试验用脂质体介导法将真核表达载体plRES2-EGFP-pGM-CSF瞬时转染BHK-21细胞,通过不同浓度的G418加压筛选和进一步采用单个克... 构建稳定表达猪pGM-CSF基因的细胞系可以为工业化生产猪pGM-CSF并将其应用于新型兽药的开发提供生产细胞源。本试验用脂质体介导法将真核表达载体plRES2-EGFP-pGM-CSF瞬时转染BHK-21细胞,通过不同浓度的G418加压筛选和进一步采用单个克隆法筛选,建立稳定转染且高效表达pGM-CSF的BHK-21细胞株9个,采用Elisa方法测定稳定转染pGM-CSF的BHK-21细胞株细胞培养上清液中pGM-CSF的表达水平达到329.37±13.76ng/mL。为下一步从细胞培养物中大量提取目的蛋白并最终开发出一种用于提高动物疫苗免疫效力的新型生物制剂奠定基础。 展开更多
关键词 细胞-巨噬细胞集落刺激因子 哺乳动物细胞 稳定转染 蛋白表达
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