猪细小病毒N株弱毒疫苗区域试验 被引量：3

1

作者 白安斌 梁家幸 +6 位作者 梁保忠 姚瑞英 黄安国 杜坚 卢树莲 李斌 蒋玉雯 《广西畜牧兽医》 2007年第5期195-196,共2页

用三批PPV-N株弱毒疫苗分别在三个规模化猪场进行了较大范围的区域试验,共免疫后备母猪32930头,观察其安全性和免疫效力。结果表明,三批苗均能使豚鼠产生良好的抗体反应。猪只注苗后食欲、体温均正常,无任何不良临床反应。平均每胎产健... 用三批PPV-N株弱毒疫苗分别在三个规模化猪场进行了较大范围的区域试验,共免疫后备母猪32930头,观察其安全性和免疫效力。结果表明,三批苗均能使豚鼠产生良好的抗体反应。猪只注苗后食欲、体温均正常,无任何不良临床反应。平均每胎产健活仔10.96头,而死胎仅为0.52头,说明PPV-N株弱毒疫苗是预防猪细小病毒感染安全、有效的弱毒疫苗。 展开更多

关键词 猪细小病毒n株弱毒疫苗 区域试验

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猪细小病毒N株弱毒疫苗免疫产生期最小免疫量和安全性测定 被引量：5

2

作者 白安斌 杜坚 +7 位作者 梁保忠 梁家幸 黄安国 姚瑞英 陈西宁 李斌 卢树莲 蒋玉雯 《猪业科学》 2006年第7期62-63,共2页

关键词 猪细小病毒 最小免疫量 免疫产生期 弱毒疫苗 安全性 细小病毒感染 初产母猪 免疫原性 特性研究

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猪细小病毒弱毒株（PPV_（s－1）A）及其疫苗的免疫效力 被引量：10

3

作者 叶向阳 张婉华 +4 位作者 潘雪珠 徐平 曹伟明 徐亚芬 严贞秀 《上海农业学报》 CSCD 1996年第1期9-13,共5页

以ＰＰＶｓ－１Ａ株弱毒肌肉接种后备母猪２头，每头注射１ｍＬ。接种后第８天的ＨＩ价为１２８～２５６。以后抗体上升，攻毒前ＨＩ价平均为１２８０。对照母猪２头ＨＩ抗体均为阴性。４头母猪配种后，怀孕至３８～４０ｄ时攻毒，结果... 以ＰＰＶｓ－１Ａ株弱毒肌肉接种后备母猪２头，每头注射１ｍＬ。接种后第８天的ＨＩ价为１２８～２５６。以后抗体上升，攻毒前ＨＩ价平均为１２８０。对照母猪２头ＨＩ抗体均为阴性。４头母猪配种后，怀孕至３８～４０ｄ时攻毒，结果从接种母猪的血浆中没有分离到病毒，而对照母猪的血浆中则分离到病毒。攻毒４０ｄ后宰杀，接种母猪共怀２５头胎猪，从它们的脏器中均没有分离到病毒，而对照母猪共怀２３头胎猪，其中有１０头的脏器分离到病毒。４批弱毒苗免疫１１头５．５月龄阴性猪，１周内全部产生抗体反应，１个月时平均ＨＩ价为５９９，免疫后１～７个月攻毒，结果免疫猪的血浆和内脏均未分离到病毒，相反，８头对照猪在攻毒前ＨＩ价保持阴性，攻毒后１周ＨＩ１０２４～４０９６，从血浆和内脏都分离到病毒。试验证明，弱毒苗免疫持续期至少为７个月；保存期１１个月。 展开更多

关键词 猪病 细小病毒 弱毒株 疫苗 免疫性

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猪细小病毒自然弱毒N株非结构蛋白NS1基因原核表达 被引量：4

4

作者 苏乾莲 李斌 +5 位作者 赵武 梁家幸 梁保忠 何颖 秦毅斌 何苹萍 《广西农业科学》 CAS CSCD 2010年第7期710-713,共4页

为进一步探讨猪细小病毒自然弱毒N株(PPV-N株)的分子病原学机理,根据GenBank上已发表的PPV全基因组序列(登录号NC_001718)设计1对引物,通过PCR方法扩增获得PPV-N株NS1全长基因,将其克隆到pMD18-T载体上,进而构建原核表达重组质粒pET32a-... 为进一步探讨猪细小病毒自然弱毒N株(PPV-N株)的分子病原学机理,根据GenBank上已发表的PPV全基因组序列(登录号NC_001718)设计1对引物,通过PCR方法扩增获得PPV-N株NS1全长基因,将其克隆到pMD18-T载体上,进而构建原核表达重组质粒pET32a-NS1,并在BL21(DE3)pLysS中进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳显示NS1在大肠杆菌中得到成功表达,重组蛋白大小约为90.0 kDa;Western blotting分析表明,该蛋白能与PPV阳性血清发生特异性反应,证明该蛋白具有良好生物学活性。NS1在大肠杆菌中成功表达,且具有免疫原性,可作为PPV临床鉴别诊断抗原。 展开更多

关键词 猪细小病毒 自然弱毒n株 nS1 原核表达

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用豚鼠检测猪细小病毒N株弱毒苗的血凝抑制抗体 被引量：2

5

作者 盘宝进 姚瑞英 +3 位作者 黄安国 白安斌 陈西宁 蒋玉雯 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1999年第12期13-14,共2页

关键词 PPV 豚鼠 猪 n株弱毒苗 疫苗效力检测 免疫性

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猪细小病毒自然弱毒N株VP2基因的克隆及原核表达 被引量：1

6

作者 李斌 苏乾莲 +5 位作者 赵武 梁家幸 梁保忠 何颖 秦毅斌 何苹萍 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第1期310-314,共5页

为了进一步研究猪细小病毒自然弱毒株(PPV-N株)的自然弱毒分子生物学机理,对PPV-N株VP2基因进行克隆、测序和原核表达研究。结果表明,成功构建PPV-N株VP2基因的克隆重组质粒pMD18-T-VP2及表达重组质粒pET32a-VP2,经SDS-PAGE及Western bl... 为了进一步研究猪细小病毒自然弱毒株(PPV-N株)的自然弱毒分子生物学机理,对PPV-N株VP2基因进行克隆、测序和原核表达研究。结果表明,成功构建PPV-N株VP2基因的克隆重组质粒pMD18-T-VP2及表达重组质粒pET32a-VP2,经SDS-PAGE及Western blotting鉴定,PPV-N株VP2基因在BL21(DE3)plysS菌中成功进行融合表达,表达出约85.4 KDa的VP2融合蛋白,且表达的VP2融合蛋白能与PPV阳性血清发生特异性反应。PPV-N株VP2基因的成功克隆及原核表达为今后研究PPV-N株的自然弱毒的分子生物学机理和研制PPV诊断抗原奠定了基础。 展开更多

关键词 猪细小病毒自然弱毒株(PPV-n株) VP2基因 克隆 原核表达

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猪细小病毒N株弱毒苗田间试验 被引量：10

7

作者 白安斌 杜坚 +7 位作者 姚瑞英 梁家幸 梁保忠 黄安国 陈西宁 卢树莲 李斌 蒋玉雯 《广西畜牧兽医》 2006年第6期248-250,共3页

关键词 猪细小病毒 n株弱毒苗 田间试验 细小病毒感染 弱毒疫苗 规模化猪场 免疫原性 后备母猪

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猪细小病毒自然弱毒N株的免疫原性研究 被引量：5

8

作者 杜坚 白安斌 +9 位作者 梁保忠 梁家幸 赵武 李斌 黄安国 郑儒标 冯军 姚瑞英 陈西宁 蒋玉雯 《广西畜牧兽医》 2009年第1期3-6,共4页

用PPV-N株接种抗体阴性后备母猪,5天产生HI抗体,7天达到保护性水平(>1∶256),14天达高峰。用该毒株对4月龄猪、后备母猪和怀孕母猪进行免疫原性试验,结果攻毒后5、7、9天未检测到病毒血症和未分离到病毒。攻毒后第40天剖杀2头怀孕母... 用PPV-N株接种抗体阴性后备母猪,5天产生HI抗体,7天达到保护性水平(>1∶256),14天达高峰。用该毒株对4月龄猪、后备母猪和怀孕母猪进行免疫原性试验,结果攻毒后5、7、9天未检测到病毒血症和未分离到病毒。攻毒后第40天剖杀2头怀孕母猪,见胎儿正常,胎儿心血HI抗体阴性,从胎儿脏器未分离出病毒。自然分娩的母猪,产仔正常,仔猪吃初乳前HI抗体阴性,而对照猪攻毒后产生病毒血症,并产下不同组合异常仔,从死胎儿脏器分离到病毒,活仔HI抗体阳性。试验还表明豚鼠对PPV-N株的抗体应答和猪的相似,可作为PPV弱毒株免疫抗体应答检测的实验动物。本研究结果证明,PPV自然弱毒N株具有良好的免疫原性。 展开更多

关键词 猪细小病毒 自然弱毒n株 免疫原性

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猪细小病毒N株弱毒苗的免疫效果观察 被引量：3

9

作者 盘宝进 姚瑞英 +3 位作者 蒋玉雯 黄安国 白安斌 陈西宁 《广西畜牧兽医》 1999年第5期5-7,共3页

关键词 猪细小病毒 n株 弱毒苗 免疫效果

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猪细小病毒自然弱毒N株遗传稳定性研究 被引量：3

10

作者 杜坚 白安斌 +6 位作者 梁家幸 梁保忠 赵武 李斌 黄安国 姚瑞英 蒋玉雯 《猪业科学》 2008年第12期64-66,共3页

本研究将PPV-N株通过敏感猪三代、猪肾传代细胞25代,测定该毒株对敏感猪的致病性,结果表明将PPV-N株连续分别通过PPV HI抗体阴性的4月龄小猪、后备母猪、怀孕母猪三代,均未从试验猪检出病毒血症和分离到病毒,且母猪产仔正常。在IBRS-2... 本研究将PPV-N株通过敏感猪三代、猪肾传代细胞25代,测定该毒株对敏感猪的致病性,结果表明将PPV-N株连续分别通过PPV HI抗体阴性的4月龄小猪、后备母猪、怀孕母猪三代,均未从试验猪检出病毒血症和分离到病毒,且母猪产仔正常。在IBRS-2细胞中连续传代,随着传代次数的增加其细胞病变未见异常,毒价稳定在103.5TCID50/mL。将第1、5、10、15、20、25代病毒培养物接种PPV HI抗体阴性怀孕母猪,未从母猪测出病毒血症和检出病毒,所产仔猪PPV HI抗体阴性,未从弱仔猪脏器分离到病毒,说明该毒株毒力不返强,具有良好的遗传稳定性。这为该弱毒株成为一株良好的自然弱毒疫苗株提供了依据。 展开更多

关键词 猪细小病毒 自然弱毒n株 遗传稳定性

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猪细小病毒N株弱毒苗的保存温度和时间对豚鼠抗体反应的影响

11

作者 盘宝进 姚瑞英 +3 位作者 黄安国 白安斌 陈西宁 蒋玉雯 《广西农业科学》 CSCD 1999年第2期78-79,共2页

用不同保存温度和时间的猪细小病毒Ｎ株弱毒苗注射豚鼠，检测ＰＰＶ—Ｎ株弱毒苗的保存期，结果为４℃至少能保存一年，－２０℃至少能保存３年。根据抗体反应的规律性，证明豚鼠可用作ＰＰＶ弱毒苗抗体检测的试验动物。

关键词 猪 细小病毒 n株弱毒苗 保存温度 抗体反应

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PPV—N株弱毒疫苗有效预防猪细小病毒

12

作者 白安斌 梁家幸 梁保忠 《畜禽业》 2007年第12期38-38,共1页

广西兽医研究所白安斌等，用3批PPV-N株弱毒疫苗分别在3个规模化猪场进行了较大范围的区域试验，共免疫后备母猪32930头，观察其安全性和免疫效力，结果表明，3批苗均能使豚鼠产生良好的抗体反应，猪只注苗后食欲、体温均正常。无任何... 广西兽医研究所白安斌等，用3批PPV-N株弱毒疫苗分别在3个规模化猪场进行了较大范围的区域试验，共免疫后备母猪32930头，观察其安全性和免疫效力，结果表明，3批苗均能使豚鼠产生良好的抗体反应，猪只注苗后食欲、体温均正常。无任何不良临床反应，平均每胎产健活仔10.96头，而死胎仅为0.52头，说明PPV—N株弱毒疫苗是预防猪细小病毒感染安全、有效的弱毒疫苗。 展开更多

关键词 猪细小病毒 弱毒疫苗 PPV 预防 细小病毒感染 免疫效力 规模化猪场 区域试验

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猪流行性腹泻病毒变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株多重RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用 被引量：6

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作者 秦毅斌 卢冰霞 +8 位作者 段群棚 何颖 李斌 梁家幸 苏乾莲 周英宁 蒋冬福 卢敬专 赵武 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第11期2746-2751,共6页

为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株快速鉴别检测方法,根据Gen Bank中公布的PEDV变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株的S基因和ORF3基因,设计合成2对特异性扩增引物,用以扩增PEDV S基因和ORF3基因,通过目的片段的... 为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株快速鉴别检测方法,根据Gen Bank中公布的PEDV变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株的S基因和ORF3基因,设计合成2对特异性扩增引物,用以扩增PEDV S基因和ORF3基因,通过目的片段的数量和片段大小来判断PEDV的毒株类型;通过对退火温度等反应条件的优化,建立了检测不同PEDV毒株类型的多重RT-PCR鉴别检测方法。结果显示,所建立的多重RT-PCR鉴别检测方法能特异性区分PEDV变异毒株、经典毒株和弱毒疫苗株;PEDV变异毒株扩增出2条目的条带,分别为234 bp的ORF3基因片段和826 bp的S基因片段;PEDV经典毒株扩增出1条目的条带,片段大小为234 bp的ORF3基因片段;而弱毒疫苗株扩增出1条目的条带,片段大小为185 bp的ORF3基因片段;与猪传染性胃肠炎病毒、A群猪轮状病毒、猪嵴病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪乙型脑炎病毒、猪细环病毒及猪细小病毒均无交叉反应;敏感性试验显示,该方法能检测到的最低核酸浓度为2.3×10-4ng/μl;且该方法具有良好的重复性。利用该方法对采集自广西部分地区的91份临床腹泻样品进行检测,样品中PEDV阳性样品有64份,其中变异毒株占89.06%(57/64),经典毒株占4.69%(3/64),弱毒疫苗株占6.25%(4/64)。结果表明,该多重RT-PCR鉴别检测方法特异性强、灵敏度高、操作简单,为猪流行性腹泻的流行病学及病原的鉴别诊断研究提供了可供借鉴的技术手段。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 变异毒株 经典毒株 弱毒疫苗株 RT-PCR 鉴别诊断

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猪细小病毒弱每株(PPVs-1A)对猪的安全性试验 被引量：5

14

作者 叶向阳 张婉华 +3 位作者 潘雪珠 徐平 曹伟明 徐亚芬 《上海畜牧兽医通讯》 北大核心 1995年第6期8-9,共2页

为了证买PPV_(S-1)株的黄全性,以1—4毫升肌注接种5月龄左右阴性猪6只,观察8天,接种猪无明显临床症状,没有发生病毒血症和排毒.以4毫升(TCIDS_(50)10^(7.5)HA:4096)肌注接种孕猪(孕龄38～46天)4只,一头未接种怀孕母猪与接种孕猪同居饲... 为了证买PPV_(S-1)株的黄全性,以1—4毫升肌注接种5月龄左右阴性猪6只,观察8天,接种猪无明显临床症状,没有发生病毒血症和排毒.以4毫升(TCIDS_(50)10^(7.5)HA:4096)肌注接种孕猪(孕龄38～46天)4只,一头未接种怀孕母猪与接种孕猪同居饲养42天.结果5只孕猪都没有发生病毒血症,接种后42天宰杀,共收集到胎猪68只,从68只胎猪中没有分离到PPV. 展开更多

关键词 猪病 细小病毒弱毒株 疫苗接种 安全性

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猪细小病毒病弱毒疫苗的保存期试验 被引量：1

15

作者 张婉华 朱永军 +3 位作者 徐平 曹伟明 何锡忠 彭丽英 《上海农业学报》 CSCD 2015年第5期32-36,共5页

将2批猪细小病毒病弱毒疫苗分别在2—8℃保存11个月、12个月、13个月,-20℃保存22个月、24个月、26个月,进行物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、安全试验及免疫效力试验,探讨不同保存条件和保存期对疫苗的影响。结果表明:... 将2批猪细小病毒病弱毒疫苗分别在2—8℃保存11个月、12个月、13个月,-20℃保存22个月、24个月、26个月,进行物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、安全试验及免疫效力试验,探讨不同保存条件和保存期对疫苗的影响。结果表明:物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验均符合《中国兽药典》的要求。安全试验每批次疫苗接种乳鼠全部健活;以10头份/头的剂量接种PPV HI抗体阴性猪,接种后定期采集血样和鼻肛分泌物进行病毒分离,结果均为阴性。疫苗在2—8℃保存至13个月,-20℃保存至26个月TCID_(50)均≥10^(6.25)笛/头份;接种PPV HI抗体阴性豚鼠抗体全部转为阳性;疫苗免疫PPV HI抗体阴性猪,免疫后1个月、7个月分别用PPV强毒攻击获得100%保护。 展开更多

关键词 猪细小病毒病弱毒疫苗 保存 安全试验 免疫效力试验

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猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗弱毒株的克隆与鉴定 被引量：2

16

作者 蔡家利 蔡宝祥 +1 位作者 姜平 马志永 《西南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 1999年第2期115-119,共5页

自美国和荷兰引进的猪繁殖与呼吸综合征（ＰＲＲＳ）疫苗弱毒株，经ＭＡＲＣ－１４５细胞培养复壮，采取有限稀释法对疫苗株进行纯化克隆。克隆毒株在ＭＡＲＣ－１４５细胞上培养７２ｈ出现典型的细胞病变（ＣＰＥ）。取接种病毒后３６... 自美国和荷兰引进的猪繁殖与呼吸综合征（ＰＲＲＳ）疫苗弱毒株，经ＭＡＲＣ－１４５细胞培养复壮，采取有限稀释法对疫苗株进行纯化克隆。克隆毒株在ＭＡＲＣ－１４５细胞上培养７２ｈ出现典型的细胞病变（ＣＰＥ）。取接种病毒后３６ｈ的ＭＡＲＣ－１４５细胞作超薄切片电镜观察，于感染细胞浆内及空泡化内质网内均有散在的病毒颗粒，大小约５０～６０ｎｍ。疫苗毒株经ＥＬＩＳＡ鉴定，并以ＭＡＲＣ－１４５细胞上的病毒培养物初步纯化作为抗原，检测了ＰＲＲＳ可疑猪场的血清８０份，其中阳性３４份，阳性率为４２．５％，并探讨了疫苗毒株作为抗原的可能性。 展开更多

关键词 猪 繁殖-呼吸综合征 病毒 疫苗 克隆 鉴定 弱毒株

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猪细小病毒弱毒冻干疫苗的检测报告 被引量：1

17

作者 张婉华 叶向阳 +2 位作者 祁贤 朱永军 陆鑫芳 《上海畜牧兽医通讯》 2002年第3期21-21,共1页

关键词 繁殖障碍 检测实验 安全性 免疫原性 猪 细小病毒 弱毒冻干疫苗

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猪细小病毒病弱毒冻干疫苗预防猪细小病毒病

18

作者 张婉华 叶向阳 +2 位作者 祁贤 朱永军 陆鑫芳 《上海畜牧兽医通讯》 2001年第4期24-24,共1页

关键词 猪细小病毒病 弱毒冻干疫苗 预防

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猪细小病毒（PPV）弱毒株选育及其某些生物学特性 被引量：4

19

作者 叶向阳 潘雪珠 《上海农业学报》 CSCD 1992年第A10期65-69,共5页

关键词 猪 细小病毒 弱毒株 选育

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豚鼠对猪细小病毒弱毒苗抗体反应的研究 被引量：10

20

作者 盘宝进 白安斌 +3 位作者 姚瑞英 陈西宁 黄安国 蒋玉雯 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期467-470,共4页

用不同批次、不同剂量、不同保存时间的猪细小病毒N株弱毒苗接种豚鼠 ,观察豚鼠对PPVN株弱毒苗的抗体反应。结果 4种不同剂量和 3个不同批次的PPVN株弱毒苗接种豚鼠后第 14天均产生抗体反应 ,其PPVHI效价在 1∶16～ 1∶6 4之间 ,0 .1ml... 用不同批次、不同剂量、不同保存时间的猪细小病毒N株弱毒苗接种豚鼠 ,观察豚鼠对PPVN株弱毒苗的抗体反应。结果 4种不同剂量和 3个不同批次的PPVN株弱毒苗接种豚鼠后第 14天均产生抗体反应 ,其PPVHI效价在 1∶16～ 1∶6 4之间 ,0 .1ml和 1ml剂量接种豚鼠产生的PPVHI抗体水平相近 ,抗体持续长达 12个月以上。在 4℃保存 0天、12个月和 - 2 0℃保存 2年、3年的PPVN株弱毒苗接种豚鼠 ,其PPVHI价在 1∶16～ 1∶32之间 ,说明该苗在 4℃至少能保存 12个月 ,- 2 0℃能保存 3年以上。比较了不同批次疫苗接种猪和豚鼠所产生的抗体反应 ,结果两者相似。用 3批引起豚鼠产生抗体反应的PPVN株弱毒苗接种 76 8头后备母猪 ,共产仔 7136头 ,其中健活仔 6 5 75头 ,平均每窝产健活仔 8.5 6头 ,产死仔仅 0 .73头。证明豚鼠是监测PPV弱毒苗抗体的首选实验动物。 展开更多

关键词 豚鼠 猪 细小病毒 PPV n株弱毒苗 抗体反应

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