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猪圆环病毒2型病毒样颗粒三倍轴区域嵌合猪细小病毒抗原表位的展示策略及免疫原性
1
作者 蔡云凤 李宏 +8 位作者 黄小铭 何庆 丁振宇 余婉婷 罗施乐 陈方志 王乃东 杨毅 湛洋 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期307-318,共12页
为了探索猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2, PCV2)病毒样颗粒三倍轴区域展示外源抗原表位的潜力,本研究借助结构模拟和蛋白质的三维结构展示,分析了PCV2核衣壳表面氨基酸残基突变后的结构差异。通过分析不同cap基因突变质粒在... 为了探索猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2, PCV2)病毒样颗粒三倍轴区域展示外源抗原表位的潜力,本研究借助结构模拟和蛋白质的三维结构展示,分析了PCV2核衣壳表面氨基酸残基突变后的结构差异。通过分析不同cap基因突变质粒在大肠杆菌表达系统中所表达的突变体蛋白的可溶性和纯化难易程度,确定合适的外源表位嵌合区。将嵌合PPV抗原表位的Cap蛋白经体外组装获得重组的病毒样颗粒,将此病毒样颗粒免疫小鼠,通过抗体检测来评价其免疫原性。结果显示,PCV2核衣壳表面三倍轴区域存在两个适合用于展示外源表位的氨基酸区域(分别命名为Motif A和Motif B),相同表达条件下,Motif A区域的突变蛋白均以可溶性表达为主,且能一步纯化获得目的蛋白,而Motif B区域的突变蛋白多以包涵体形式存在;Motif A区域嵌合PPV表位后,纯化的重组蛋白能在体外组装成cVLPs,并通过间接免疫荧光试验证明其保留有野生型VLPs内化PK15细胞的能力;形成的cVLPs能刺激小鼠机体产生分别针对PCV2 VLPs、B5-E1表位和PPV VP2蛋白的抗体。综上表明,PCV2 Cap蛋白Loop GH区域Motif A能够将外源表位展示在病毒样颗粒外表面,并且能够被机体免疫细胞识别产生特异性抗体。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 病毒样颗粒 三倍轴区域 外源表位
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表达猪圆环病毒2d型Cap蛋白的重组猪伪狂犬病病毒的构建
2
作者 焦显芹 马晓 +3 位作者 田润博 刘颖 马世杰 陈红英 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第5期2278-2286,共9页
【目的】利用同源重组技术和CRISPR/Cas9基因编辑技术,获得表达猪圆环病毒2d型(PCV2d)Cap蛋白的重组猪伪狂犬病病毒(PRV),为开发预防和控制PCV2d和PRV感染的疫苗提供技术支持。【方法】基于PCV2d KF1株ORF 2基因序列设计1对特异引物,以P... 【目的】利用同源重组技术和CRISPR/Cas9基因编辑技术,获得表达猪圆环病毒2d型(PCV2d)Cap蛋白的重组猪伪狂犬病病毒(PRV),为开发预防和控制PCV2d和PRV感染的疫苗提供技术支持。【方法】基于PCV2d KF1株ORF 2基因序列设计1对特异引物,以PCV2d KF1株DNA为模板扩增ORF 2基因。经限制性内切酶Bam HⅠ酶切后将ORF 2基因引入到含有绿色荧光蛋白(EGFP)基因的PRV转移载体pG中,获得重组质粒pG-PCV2d-EGFP。运用转染试剂ZLip2000将质粒pG-PCV2d-EGFP和PRV三基因缺失毒株gE^(-)/gI^(-)/TK^(-)PRV NY DNA共转染至ST单层细胞中拯救重组病毒,并利用CRISPR/Cas9 EGFP基因双敲除质粒敲除重组病毒中EGFP基因。经EGFP基因测序、PCR和Western blotting对获得的重组病毒进行鉴定。【结果】经8轮绿色荧光蚀斑筛选,纯化得到重组病毒rPRV-PCV2d-EGFP。CRISPR/Cas9 EGFP基因双敲除质粒敲除EGFP基因后,经3轮筛选没有绿色荧光的蚀斑,获得重组病毒rPRV-PCV2d。EGFP基因测序结果表明,rPRV-PCV2d中EGFP基因被剪截了1251 bp,PCR和Western blotting结果显示,rPRV-PCV2d携带的ORF 2基因能在ST细胞中转录与表达。【结论】本研究成功构建表达PCV2d Cap蛋白的重组病毒rPRV-PCV2d,为进一步研制重组活载体疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 猪伪狂犬病病毒 重组病毒活载体疫苗
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猪圆环病毒2型灭活疫苗的植物源免疫增强剂筛选
3
作者 李军伟 余秋颖 +3 位作者 张艳芝 王运珂 任红涛 王娜 《河南农业大学学报》 北大核心 2025年第2期243-254,共12页
【目的】筛选安全、高效的抗猪圆环病毒2型病毒疫苗免疫增强剂,改善现有佐剂的免疫效力及安全性。【方法】以昆明小鼠为研究对象,选取萜类(青蒿素、紫杉醇、穿心莲内酯、熊果酸)、生物碱类(黄连素、石蒜碱、千金藤素、氧化苦参碱)、酚酸... 【目的】筛选安全、高效的抗猪圆环病毒2型病毒疫苗免疫增强剂,改善现有佐剂的免疫效力及安全性。【方法】以昆明小鼠为研究对象,选取萜类(青蒿素、紫杉醇、穿心莲内酯、熊果酸)、生物碱类(黄连素、石蒜碱、千金藤素、氧化苦参碱)、酚酸类(咖啡酸、绿原酸、没食子酸、香豆酸)和黄酮类(山柰酚、槲皮素、木犀草素、原花青素)共16种植物源活性物质,通过测定小鼠体质量比例、IgG抗体水平、脏器指数、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC),开展靶向猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫增强剂的筛选,并对其抗氧化活性进行初步评价。【结果】1)小鼠灌胃植物源活性物质后,体质量呈增加趋势。2)各组抗体水平呈现先上升后下降的趋势。与疫苗组相比,黄连素、石蒜碱、千金藤素、槲皮素、木犀草素和原花青素组可极显著性提高机体的抗体水平,其中以原花青素组效果最佳,比疫苗组抗体水平提高了59.59%。3)槲皮素组小鼠心脏、肝脏和肾脏指数呈显著性升高,黄连素、石蒜碱、原花青素组在统计学意义上无显著差异;其中,槲皮素、原花青素组小鼠脾脏和胸腺指数呈极显著性提高,脾脏指数提高了49.50%和53.23%,胸腺指数提高了121.82%和103.64%,提示其可能在促进免疫器官的发育、分化和成熟,提高机体的免疫功能方面发挥重要作用。4)木犀草素、槲皮素和原花青素组T-SOD活性呈极显著性升高,MDA含量呈极显著性降低,千金藤素、石蒜碱、槲皮素、木犀草素、黄连素和原花青素组T-AOC呈极显著性升高。以原花青素对机体的抗氧化效果较好,T-SOD活性和T-AOC分别提高了9.60%和48.57%,MDA含量降低了26.82%。【结论】原花青素对小鼠的免疫增强效果最佳,可作为靶向猪圆环病毒2型灭活疫苗佐剂研究的候选者。 展开更多
关键词 植物源活性物质 猪圆环病毒2型 疫苗 免疫增强剂
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新疆部分规模化养猪场中猪圆环病毒2型和3型监测
4
作者 齐炜祎 许衡 +3 位作者 刘英玉 郑培 夏利宁 刘俊飞 《新疆农业科学》 北大核心 2025年第2期502-509,共8页
【目的】分析新疆圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)和3型(Porcine circovirus type 3,PCV3)的流行状况。【方法】在2022年10月~2023年9月,采用荧光定量PCR对采集的7个规模化养猪场的1403份样品进行检测和测序。【结果】PCV... 【目的】分析新疆圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)和3型(Porcine circovirus type 3,PCV3)的流行状况。【方法】在2022年10月~2023年9月,采用荧光定量PCR对采集的7个规模化养猪场的1403份样品进行检测和测序。【结果】PCV2总体阳性率为3.20%(45/1403),PCV3总体阳性率为33.00%(463/1403),PCV2和PCV3混合感染率为7.84%(11/1403)。C场PCV2和PCV3阳性检出率最高,PCV2为7.46%(10/134),PCV3为64.18%(36/134),PCV2和PCV3混合感染率为3.73%(5/134)。乳猪睾丸液检出PCV2和PCV3阳性率最高,PCV2阳性率为4.78%(25/523);PCV3检出率为57.36%(300/523)。PCV2和PCV3在一年四季中检出率均较高,且PCV3毒株为PCV3b和PCV3c型。【结论】新疆部分规模化养猪场中存在PCV3感染,PCV3流行率远高于PCV2,PCV3流行毒株为PCV3b和PCV3c型。 展开更多
关键词 圆环病毒3型 圆环病毒2型 荧光定量PCR 猪
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近年湖南省猪圆环病毒2型感染状况的调查及遗传演化分析
5
作者 范杰 邰易润 +7 位作者 朱艳丽 陈志雄 胡巧云 陈智 刘甜甜 李欣 范仲鑫 葛猛 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1376-1385,共10页
本研究旨在掌握近期湖南省各地区猪圆环病毒2型(PCV2)最新的感染和遗传演化情况。本研究运用qPCR方法对2021-2023年采集自湖南省长沙市、岳阳市、怀化市、常德市、株洲市等14个地级市的1244份肥猪的淋巴结、拭子、脑组织及血样通过qPCR... 本研究旨在掌握近期湖南省各地区猪圆环病毒2型(PCV2)最新的感染和遗传演化情况。本研究运用qPCR方法对2021-2023年采集自湖南省长沙市、岳阳市、怀化市、常德市、株洲市等14个地级市的1244份肥猪的淋巴结、拭子、脑组织及血样通过qPCR进行了病毒核酸检测,筛选出PCV2阳性样品,再通过PCR扩增及测序对PCV2的ORF2基因序列进行分析。结果显示,1244份样品中有778份为PCV2阳性,总阳性率达62.54%,其中邵阳市的PCV2阳性率最高,达92.55%(87/94),郴州市最低,为18.28%(17/93);57株PCV2 ORF2基因测序结果表明,PCV2a、PCV2b和PCV2d占比分别为12.28%、7.02%和80.70%;测序毒株间的ORF2基因核苷酸、氨基酸序列相似性分别为88.5%~100.0%和86.3%~100.0%,存在45个氨基酸差异位点,PCV2d间存在15个差异氨基酸位点,选择压力分析表明,PCV2存在3个阳性选择位点。研究表明:目前,PCV2的突变速率较快,各毒株之间存在较多的氨基酸位点差异,与既往报道相同,本研究中PCV2d已成为绝对优势的流行毒株,PCV2的这些变异可能使现有疫苗保护效果减弱,应予以重视。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 分子流行病学调查 遗传变异 ORF2基因 选择压力
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红车轴草异黄酮抗猪圆环病毒2型诱导猪肺泡巨噬细胞炎症的作用机制
6
作者 韦兴克 徐一丹 +6 位作者 魏岩 潘诗琴 欧德渊 曾诚 彭羽 宋旭琴 杨剑 《南方农业学报》 北大核心 2025年第3期900-910,共11页
[目的]阐明红车轴草异黄酮抗猪圆环病毒2型(PCV2)诱导猪肺泡巨噬细胞(3D4/2)炎症的作用机制,为将红车轴草异黄酮开发成兽用抗炎药品提供理论依据。[方法]以PCV2感染诱导建立3D4/2细胞炎症模型,再以不同浓度(0.25、0.50和1.00 mg/mL)的... [目的]阐明红车轴草异黄酮抗猪圆环病毒2型(PCV2)诱导猪肺泡巨噬细胞(3D4/2)炎症的作用机制,为将红车轴草异黄酮开发成兽用抗炎药品提供理论依据。[方法]以PCV2感染诱导建立3D4/2细胞炎症模型,再以不同浓度(0.25、0.50和1.00 mg/mL)的红车轴草异黄酮溶液及地塞米松(DXMS)分别处理3D4/2细胞,通过ELISA和实时荧光定量PCR检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-10(IL-10)等细胞炎症因子的分泌及其基因表达水平,同时采用Western blotting检测NF-κB信号通路和MAPK信号通路相关蛋白(p65、IκB-α和p38)的表达与磷酸化情况。[结果]经PCV2诱导后,3D4/2细胞的生长明显受到抑制,炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-10的含量极显著升高(P<0.01,下同),对应的基因相对表达量也极显著升高;IκB-α蛋白降解水平、p38蛋白表达及p65蛋白的磷酸化与表达水平均极显著提升。以0.25、0.50和1.00 mg/mL红车轴草异黄酮处理PCV2诱导3D4/2细胞,其生长状况与空白对照组相比无明显差异,与PCV2诱导3D4/2细胞相比,促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量及其基因相对表达量呈明显下降趋势,而抗炎因子IL-10含量及其基因相对表达量呈明显上升趋势,且均呈剂量依赖性,以1.00 mg/mL红车轴草异黄酮的效果最佳;此外,不同浓度的红车轴草异黄酮均能极显著抑制p65蛋白磷酸化及IκB-α蛋白降解,同时极显著降低p65和p38蛋白的表达,且其变化趋势基本上呈剂量依赖性,即通过干扰NF-κB信号通路和MAPK信号通路的激活而发挥抗炎作用。[结论]红车轴草异黄酮对PCV2诱导3D4/2细胞具有抗炎作用,其作用机制是通过抑制炎症因子释放,促进抗炎细胞因子IL-10分泌,以及控制NF-κB信号通路和MAPK信号通路的激活来实现。 展开更多
关键词 红车轴草异黄酮 猪肺泡巨噬细胞(3D4/2) 猪圆环病毒2型(PCV2) 炎症因子 信号通路
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一株具有多位点核苷酸替换的新型猪圆环病毒2d亚型毒株的分离与鉴定
7
作者 陈云龙 樊港 +4 位作者 樊心怡 郭永超 张鑫淼 王妍 张仕强 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期3032-3040,共9页
猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)是引起猪圆环病毒相关性疾病(porcine circovirus associated diseases,PCVAD)的主要病原。患病猪表现为发育不良、呼吸困难、生殖障碍等症状。目前,PCV多种亚型在中国流行,给养猪业造成了巨大经济... 猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)是引起猪圆环病毒相关性疾病(porcine circovirus associated diseases,PCVAD)的主要病原。患病猪表现为发育不良、呼吸困难、生殖障碍等症状。目前,PCV多种亚型在中国流行,给养猪业造成了巨大经济损失。为了鉴定一株疑似新型PCV2感染死亡的猪病料,本研究采集疑似PCV感染的病料组织并对病毒进行分离培养,通过PCR,免疫荧光染色和序列测定分析对病毒进行鉴定。并对阳性样品进行全基因组扩增,测序后与GenBank上其他不同国家和地区来源的28株PCV的同源性、系统发育树和重组特性进行分析。使用6周龄BALB/c小鼠模型,感染毒株后观察不同组织病理切片。使用第5代病毒液滴鼻和颈部肌肉注射两种方式感染14周龄健康猪,观察和分析试验猪的体温、增重、病毒血症、各组织病毒载量等评价该毒株的致病性。结果显示,本试验分离到一株PCV2d亚型毒株,命名为SD02,该毒株全基因组大小为1767 bp(GenBank登录号为OQ730503),其中ORF2大小为705 bp,共编码234个氨基酸。SD02相较于其他已报道的PCV2d毒株,在ORF2编码的Cap蛋白羧基末端增加了1个赖氨酸。SD02株与参考毒株基因全序列的核苷酸同源性为94.2%~99.1%,与22625-33毒株(PCV2d)相似性最高,为99.1%。该毒株感染的小鼠出现明显间质性肺炎和坏死性肝炎等症状。该毒株感染后会引起猪消瘦和生长缓慢等现象,病毒血症存在时间超过21 d,并且具有广泛的组织嗜性,其中各淋巴结病毒载量更高,会引起机体的免疫抑制。本研究为PCV流行病学研究和疫苗开发提供了新的参考。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 分离鉴定 遗传变异分析 致病性
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猪圆环病毒2型毒株的分离鉴定及其对小鼠的免疫原性分析 被引量：1
8
作者 孙瑶 韩伟 +5 位作者 赵辉 杨小蓉 常昊天 付秀花 吴珊珊 王贵华 《中国动物检疫》 2025年第1期103-110,共8页
为获得猪圆环病毒2型(PCV2)候选疫苗株,对疑似PCV2感染猪的淋巴结、脾脏等组织病料进行检测,对阳性病料进行PCV2分离纯化、鉴定、全基因测序和遗传进化分析,并制成PCV2灭活疫苗,进行小鼠免疫原性分析。结果显示;从PCV2阳性病料中成功分... 为获得猪圆环病毒2型(PCV2)候选疫苗株,对疑似PCV2感染猪的淋巴结、脾脏等组织病料进行检测,对阳性病料进行PCV2分离纯化、鉴定、全基因测序和遗传进化分析,并制成PCV2灭活疫苗,进行小鼠免疫原性分析。结果显示;从PCV2阳性病料中成功分离得到1株PCV2毒株,病毒含量不低于10^(6.0) FAID_(50)/mL,间接免疫荧光试验可见绿色荧光;该毒株基因全长约1767 bp,全基因核酸序列与PCV2参考序列ON012565.1、KU960933.1同源性最高为99.9%,与PCV3参考序列PP566974.1同源性最低为45.9%,与多数PCV2参考毒株序列同源性在92%以上,经进化树分析属于PCV2d基因亚型;用该分离毒株制成灭活疫苗免疫小鼠后,测得特异性抗体,且效价较高。结果说明,该分离株具有良好的免疫原性,可作为PCV2疫苗研发的候选毒株。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 遗传变异 免疫原性分析 疫苗研发
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猪圆环病毒2型和弓形虫双重TaqMan荧光定量PCR法的建立及应用
9
作者 王海燕 仇德洋 +5 位作者 蔺雅婷 杜建才 姚方方 吕延飞 刘洋 郑佳 《中国动物检疫》 2025年第6期92-98,共7页
猪圆环病毒2型(PCV2)感染和弓形虫病(toxoplasmosis)在临床症状上具有一定的相似性因而难以准确辨别。为建立可同时鉴别PCV2和弓形虫(Toxoplasma gondii,Tox)的检测方法,针对PCV2 ORF2和Tox基因组529重复序列(Rep G529)设计特异性引物和... 猪圆环病毒2型(PCV2)感染和弓形虫病(toxoplasmosis)在临床症状上具有一定的相似性因而难以准确辨别。为建立可同时鉴别PCV2和弓形虫(Toxoplasma gondii,Tox)的检测方法,针对PCV2 ORF2和Tox基因组529重复序列(Rep G529)设计特异性引物和Taq Man探针,经过优化引物、探针浓度和反应条件,建立了同时检测这两种病原的双重Taq Man荧光定量PCR方法。该方法仅特异性扩增PCV2和Tox,与其他病原无交叉反应,特异性强;对PCV2质粒标准品的最低检测限为1.21×10~1 copies/μL,对Tox质粒的最低检测限为1.17×10~1 copies/μL,具有较高的敏感性;组内和组间变异系数均小于5%,具有良好的重复性。应用本试验建立方法和国标荧光定量PCR方法同时检测187份血清、脾脏临床样品,结果PCV2和Tox的阳性符合率分别为93.33%和100%。该方法的建立为PCV2和Tox的批量、快速和特异性鉴别检测提供了技术支撑。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 弓形虫 双重荧光定量PCR
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规模化猪场猪圆环病毒2型流行病学调查
10
作者 李升涛 《中国畜牧业》 2025年第7期121-122,共2页
猪圆环病毒(Porcine Circovirus,PCV)属于圆环病毒科圆环病毒属,是目前已发现的最小病毒之一。据报道,PCV已有四种基因型,分别为PCV1、PCV2、PCV3和PCV4。其中,PCV1无致病力,PCV2可导致妊娠母猪繁殖障碍、断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS... 猪圆环病毒(Porcine Circovirus,PCV)属于圆环病毒科圆环病毒属,是目前已发现的最小病毒之一。据报道,PCV已有四种基因型,分别为PCV1、PCV2、PCV3和PCV4。其中,PCV1无致病力,PCV2可导致妊娠母猪繁殖障碍、断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、育肥猪呼吸系统综合征(PRDC)、皮炎肾病综合征(PDNS)等。2016年,美国猪场首次发现PCV3,该病毒主要引起猪皮炎肾病综合征和繁殖障碍。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 流行病学调查
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河南省猪细小病毒2型流行特征和遗传进化分析 被引量：1
11
作者 许夕雅 韩紫薇 +3 位作者 杨寒 高冬生 王永生 陈陆 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第9期23-29,共7页
为了解河南省猪细小病毒2型(PPV2)的遗传进化和流行特征,本试验对2021—2022年河南省不同地区猪养殖场送检的759份临床样品进行PCR检测,选取4份不同地区的PPV2阳性样品,对其进行全基因组测序,并与35条国内外PPV2参考序列进行同源性分析... 为了解河南省猪细小病毒2型(PPV2)的遗传进化和流行特征,本试验对2021—2022年河南省不同地区猪养殖场送检的759份临床样品进行PCR检测,选取4份不同地区的PPV2阳性样品,对其进行全基因组测序,并与35条国内外PPV2参考序列进行同源性分析、系统发育分析和重组分析。结果显示,送检临床样品PPV2检出率为15.81%(120/759),与猪细小病毒7型(PPV7)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的混合感染率依次为35.83%、25.00%和20.83%。鉴定的4株PPV2分别命名为PPV2XM-15/2021、PPV2ZMD-20/2021、PPV2ZK-9/2021和PPV2SQ-16/2021。4株PPV2鉴定株的全基因组核苷酸同源性为95.0%~99.7%,处在不同进化分支,亲缘性较远,与35株PPV2参考株的全基因组核苷酸同源性为93.9%~99.8%、NS基因核苷酸和氨基酸同源性均为92.6%~99.8%、Cap基因核苷酸和氨基酸同源性均为88.7%~100%。PPV2ZMD-20/2021株、PPV2ZK-9/2021株和PPV2SQ-16/2021株可能为重组毒株。结果表明,河南省猪场PPV2检出率较高,且与多种病原混合感染,其中与PPV7混合感染最常见;PPV2遗传进化差异较大,存在重组现象,且重组位置不唯一。 展开更多
关键词 猪细小病毒2型 全基因组 流行特征 遗传进化分析 重组分析
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2020—2022年安徽省猪圆环病毒2型和3型流行情况调查 被引量：2
12
作者 周迎春 段倩倩 +7 位作者 王倩 王军 王维 沈艳 刘华 苗文萍 何长生 朱良强 《中国动物检疫》 CAS 2024年第3期1-4,共4页
为了解安徽省猪圆环病毒病(PCVAD)流行情况,2020—2022年于安徽省13个定点监测点采集950份病原学样品和650份血清学样品,采用荧光PCR方法进行猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)病原检测,采用间接ELISA方法进行PCV2抗体检测。结... 为了解安徽省猪圆环病毒病(PCVAD)流行情况,2020—2022年于安徽省13个定点监测点采集950份病原学样品和650份血清学样品,采用荧光PCR方法进行猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)病原检测,采用间接ELISA方法进行PCV2抗体检测。结果显示:安徽省PCV2抗体阳性率逐年升高,大型养殖场的抗体阳性率显著高于中、小型养殖场(P<0.05);PCV2病原阳性率呈下降趋势,PCV3呈上升趋势,且同一年份的PCV2病原阳性率均显著高于PCV3(P<0.05);屠宰场的PCV2和PCV3病原阳性率均显著高于养殖场(P<0.05);大型养殖场的PCV2和PCV3病原阳性率均显著高于小型养殖场(P<0.05)。结果表明:安徽省PCVAD防控取得一定成效,但是PCV2仍存在广泛感染,PCV3愈加流行,屠宰场和大型养殖场感染风险高。建议持续做好PCV2免疫工作,加强屠宰场的风险监测及大型养殖场的饲养管理和生物安全管理,严防PCV2和PCV3在养殖和屠宰环节流通传播。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 猪圆环病毒3型 病原学 血清学 安徽省
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鉴别猪圆环病毒2型和3型双重TaqMan MGB探针FQ-PCR检测方法研究 被引量：1
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作者 赵雪丽 闫若潜 +8 位作者 王华俊 王淑娟 马震原 谢彩华 柴茂 杨海波 王翠 刘影 王东方 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第2期165-173,共9页
建立一种快速、特异鉴别检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重TaqMan MGB探针FQ-PCR方法,本研究以PCV2的Rep蛋白和PCV3的Cap蛋白基因作为靶基因,各设计1对特异性引物和1条TaqMan MGB探针,经优化各反应条件和进行敏感性... 建立一种快速、特异鉴别检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重TaqMan MGB探针FQ-PCR方法,本研究以PCV2的Rep蛋白和PCV3的Cap蛋白基因作为靶基因,各设计1对特异性引物和1条TaqMan MGB探针,经优化各反应条件和进行敏感性、特异性、重复性和干扰性试验,建立鉴别检测PCV2/PCV3的双重FQ-PCR方法。结果显示:该方法可特异性扩增PCV2、PCV3核酸,与猪伪狂犬病病毒(PRV)等8种病原及阴性对照无交叉反应,特异性较强;对PCV2和PCV3阳性质粒标准品的最低检出限均可达10 copies/μL,敏感性较高;PCV2/PCV3批内/批间重复试验变异系数(CV)值均在3%以下,表明方法稳定性、重复性较好;干扰性试验表明在两种病毒阳性质粒起始模板相差较大时该方法不会影响对其中任一病毒核酸的检出和准确定量。对42份临床疑似PCV感染样品检测结果与PCV2、PCV3基因测序结果符合率100%。本研究建立的双重FQ-PCR方法具有敏感性高达10 copies/μL、特异性强、在同一反应体系中能同时快速鉴别检测PCV2、PCV3等优点,可用于临床PCV2/PCV3感染的快速鉴别检测。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 rep基因 猪圆环病毒3型 cap基因 双重TaqMan MGB FQ-PCR
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2017年~2023年河南省猪圆环病毒2型的流行调查及遗传变异分析 被引量：1
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作者 冷超粮 马秀秀 +14 位作者 宋佳静 王佳宝 贾楠 田想 刘华 李峻婕 段竹君 刘思 翟洪月 张腾 史鸿飞 李娜 姚伦广 阚云超 田志军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期960-966,共7页
为了解河南省猪圆环病毒2型(PCV2)的流行及变异情况,本研究采集该地区规模化猪场2017年1月~2023年6月939份表现为繁殖障碍和呼吸道症状的病猪血液或组织样品,采用PCR方法进行PCV2检测。结果显示,PCV2总阳性率为31.42%(295/939);2017年~2... 为了解河南省猪圆环病毒2型(PCV2)的流行及变异情况,本研究采集该地区规模化猪场2017年1月~2023年6月939份表现为繁殖障碍和呼吸道症状的病猪血液或组织样品,采用PCR方法进行PCV2检测。结果显示,PCV2总阳性率为31.42%(295/939);2017年~2022年PCV2阳性率逐年降低,分别为58.65%(61/104)、49.48%(48/97)、28.57%(36/126)、16.15%(31/192)、11.52%(19/165)和7.87%(7/89),而2023年迅速上升,达到56.02%(93/166)。利用PCR扩增29份PCV2阳性样品的全基因组序列并测序,采用Meg Align分析PCV2流行株全基因组序列与Gen Bank中4株PCV2参考株全基因组序列的同源性;采用MEGA 11软件利用NJ法构建PCV2流行株ORF2基因与Gen Bank中24株PCV2参考株ORF2基因的系统发育树;采用Meg Align分析PCV2流行株Cap蛋白氨基酸序列的变异特征;采用RDP4和Sim Plot分析PCV2流行株全基因组的重组特征。全基因组同源性分析结果显示,本研究鉴定的PCV2全基因组序列之间的同源性为95.1%~100%,与PCV2参考株的同源性为93.7%~98.6%,其中与疫苗株PCV2a LG(HM038034)、PCV2b DBN-SX07-2(HM641752)和PCV2d SH(AY686763)的同源性分别为94.8%~96.2%、95.3%~98.6%和96.6%~97.8%,与来自丹麦的代表株PCV2c DK1980PMWSfree株(EU148503)的同源性为93.7%~95.1%。此外,两株2023年的PCV2流行株HN230522和HN231217与参考株的同源性仅为94.5%~97.9%。进化树结果显示,有19株PCV2流行株与PCV2d基因型参考株聚为一个分支,10株与PCV2b基因型参考株聚为一个分支。其中今年出现的PCV2流行株HN230522和HN231217株虽然属于PCV2d基因型,但处于一个相对独立的分支。Cap蛋白氨基酸序列分析结果显示,与疫苗株PCV2a LG(HM038034)、PCV2b DBN-SX07-2(HM641752)和PCV2d SH株(AY686763)相比,部分PCV2流行株在构象表位区(aa47~aa85和aa165~aa200)存在R^(48)H、A^(59)K/R、G^(85)D、P^(151)T、N^(178)S、R^(180)K和G^(197)S的突变,在基因型特异性结构域(aa190~aa191/aa206/aa210)存在K^(206)I的突变,且HN230522株在核定位信号区(NLS)(aa1~aa41)存在特有的V^(30)L突变,HN231217株在基因型特异性结构域(aa89~aa91)存在特有的^(89)RTV^(91)残基。重组分析结果显示,有高达65.52%(19/29)的PCV2流行株存在疑似的重组片段,且重组片段全部位于ORF1中。上述结果表明,今年以来河南省猪场PCV2阳性率快速上升,且流行株出现了较大变异,应加强对PCV2流行动态和遗传变异的监测。本研究为河南省PCV2分子流行病学、疫苗研究提供了参考依据。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 流行病学调查 序列分析 CAP蛋白 遗传变异
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猪圆环病毒2型疫苗及其效力评价方法比较研究 被引量：1
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作者 徐嫄 彭国瑞 +8 位作者 徐小艾 吴睿智 赵启祖 朱元源 李翠 王团结 邹兴启 李琰 刘业兵 《中国兽药杂志》 2024年第1期87-94,共8页
为探索对不同猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV2)疫苗产品进行统一质量评价的可行性,对国内该类疫苗产品及其现有效力评价方法进行了归纳和比较研究。结果发现,目前猪圆环病毒2型疫苗类产品种类有25个,且疫苗毒株数量多达10... 为探索对不同猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV2)疫苗产品进行统一质量评价的可行性,对国内该类疫苗产品及其现有效力评价方法进行了归纳和比较研究。结果发现,目前猪圆环病毒2型疫苗类产品种类有25个,且疫苗毒株数量多达10余个,效力检验方法包括传统的免疫攻毒法、血清学方法和多种不同的替代方法,但尚没有统一的效力评价体系。本研究可为进一步完善PCV2疫苗效力评价方法、统一评价疫苗效力、提高产品质量提供参考。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 疫苗 效力评价方法
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猪瘟病毒和猪圆环病毒2型引起猪免疫抑制的研究进展
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作者 岳锋 周娟娟 +4 位作者 夏黎明 王华泽 潘耀谦 吉川尧 王选年 《动物医学进展》 北大核心 2024年第10期72-77,共6页
猪瘟病毒和猪圆环病毒2型主要侵害猪的免疫系统,使机体免疫力降低,给养猪业带来巨大的经济损失,目前对该病尚无有效治疗方案,疫苗免疫仍是主要的防控途径。因此,开展猪瘟病毒和猪圆环病毒2型的免疫学致病机制研究具有十分重要的意义。... 猪瘟病毒和猪圆环病毒2型主要侵害猪的免疫系统,使机体免疫力降低,给养猪业带来巨大的经济损失,目前对该病尚无有效治疗方案,疫苗免疫仍是主要的防控途径。因此,开展猪瘟病毒和猪圆环病毒2型的免疫学致病机制研究具有十分重要的意义。论文综述了猪瘟病毒和猪圆环病毒2型通过引起免疫细胞数量减少、免疫细胞和器官损伤、免疫相关因子和细胞因子表达失衡以及免疫检查点分子过表达等方面造成机体淋巴细胞衰竭和免疫抑制的相关研究进展,为猪瘟病毒和猪圆环病毒2型的科学防控提供理论依据。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 免疫抑制 致病机制
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藏猪猪细小病毒(XZ-PPV株)生物信息学分析
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作者 叶霄霞 罗侣 +7 位作者 聂浩洋 刘福洲 李海洋 廉帅 纪菁蕊 韦明邦 商鹏 强巴央宗 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第8期53-61,共9页
为阐述藏猪猪细小病毒(PPV)非结构蛋白1(NS1)和结构蛋白2(VP2)的生物信息学特征,本试验对疑似患病西藏本土藏猪血液样本进行聚合酶链式反应(PCR)和全基因组测序鉴定,阳性样本进行病毒分离并观察细胞病变效应(CPE),绘制PPV分离株遗传进... 为阐述藏猪猪细小病毒(PPV)非结构蛋白1(NS1)和结构蛋白2(VP2)的生物信息学特征,本试验对疑似患病西藏本土藏猪血液样本进行聚合酶链式反应(PCR)和全基因组测序鉴定,阳性样本进行病毒分离并观察细胞病变效应(CPE),绘制PPV分离株遗传进化树进行亲缘性分析;运用在线网站和软件对PPV分离株的NS1和VP2蛋白氨基酸进行生物信息学分析,获取2种蛋白的理化性质和空间结构。结果显示,经PCR和全基因组测序鉴定,分离获得1株西藏本土PPV,其基因组序列的大小为4336 bp,根据地域特点命名为PPV/China/XZ(XZ-PPV);进化树分析结果显示,XZ-PPV与国内参考株KX233726TJ、KJ201927和德国参考株JN4005167a、JN4005178a等PPV参考株处于同一分支,亲缘关系最近;生物信息学分析结果显示,XZ-PPV的NS1和VP2蛋白都属于亲水性稳定蛋白,二者均无信号肽序列和跨膜结构域,在二级结构中均以无规则卷曲为主要空间结构,且这2种蛋白的空间构象均相对稳定。综上所述,本试验发现XZ-PPV与目前已知PPV毒株的氨基酸亲水性位点和蛋白空间结构存在差异,如NS1和VP2蛋白存在亲水区域的氨基酸位点以及二级结构(α螺旋和β转角等)所占比例存有异同,可为后续PPV的诊断和相关疫苗研发提供数据支撑,也可为其防控和治疗提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 藏猪 猪细小病毒(ppv) 生物信息学分析 二级结构 NS1蛋白 VP2蛋白
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保育仔猪猪圆环病毒2型和副猪嗜血杆菌混合感染的诊疗
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作者 薛翼鹏 吴忻 《天津农业科学》 CAS 2024年第6期44-48,共5页
为查清山西省吕梁市中阳县某猪场从山东购买的保育仔猪大量出现的急性死亡、关节发炎、呼吸困难、高热等症状的病原,无菌采集病猪并带回实验室进行临床剖检,随后采集血液、淋巴结、肺、肾脏和脾脏进行实验室诊断,做出初步判断,制定综合... 为查清山西省吕梁市中阳县某猪场从山东购买的保育仔猪大量出现的急性死亡、关节发炎、呼吸困难、高热等症状的病原,无菌采集病猪并带回实验室进行临床剖检,随后采集血液、淋巴结、肺、肾脏和脾脏进行实验室诊断,做出初步判断,制定综合防治策略,病情得到控制。本研究采用灵敏度和准确度较高的实时荧光PCR技术定性检测病料样品中的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、非洲猪瘟病毒(ASFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)和副猪嗜血杆菌(HPS)。结果表明:中阳县某猪场保育仔猪为PCV2与HPS混合感染。基于诊断结论对保育猪免疫治疗程序和消毒进行合理调整,综合防治13 d后,猪群无新增发病率和新增死亡率,最大程度地减少了经济损失。本研究为猪场后续的治疗与预防提供了诊断依据。 展开更多
关键词 保育仔猪 猪圆环病毒2型(PCV2) 副猪嗜血杆菌病(HPS) 混合感染 诊疗
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猪圆环病毒2型、猪肺炎支原体和猪瘟疫苗不同免疫程序的免疫效果比较分析 被引量：3
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作者 马红伟 潘华春 +5 位作者 杨书敏 张可 杨红 蔺肖 阮坤祥 李家奎 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期58-65,共8页
为了评估不同免疫策略对猪场免疫效果和经济效益的影响,以确定最佳的疫苗免疫程序,本试验将处于产前1个月的四胎次健康三元母猪随机分为2个组,A组(联合免疫组)母猪于产前27 d联合免疫猪圆环病毒2型基因工程疫苗、猪肺炎支原体灭活疫苗... 为了评估不同免疫策略对猪场免疫效果和经济效益的影响,以确定最佳的疫苗免疫程序,本试验将处于产前1个月的四胎次健康三元母猪随机分为2个组,A组(联合免疫组)母猪于产前27 d联合免疫猪圆环病毒2型基因工程疫苗、猪肺炎支原体灭活疫苗和猪瘟活疫苗(圆柯欣+柯喘宁+稳柯健),其所产仔猪于21日龄联合免疫圆柯欣、柯喘宁和稳柯健;B组(对照组)母猪于产前34和27 d分别免疫稳柯健、猪圆环病毒疫苗和猪肺炎支原体疫苗二联疫苗(圆-支二联疫苗),其所产仔猪于14日龄免疫圆-支二联疫苗,28日龄免疫稳柯健。统计和分析免疫各组临床指标、生产性能和持续性抗体水平。结果显示,免疫疫苗后,2个组的母猪采食情况均正常;2个组的仔猪整体精神状态良好,哺乳情况正常,均未出现咳嗽和喘气等呼吸道疾病。在试验期间内,2个组的母猪的窝产健仔数和仔猪出生健仔均重并无差别。A组和B组的出生至23日龄死淘率、出生至50日龄死淘率分别为3.77%、5.11%和4.07%、5.43%,A组略优于B组。抗体监测结果显示,A组母猪的CSFV和PCV2抗体水平较B组无显著差异(P>0.05);A组仔猪的CSFV抗体阳性率与B组无明显差异(P>0.05),而PCV2抗体水平在免疫早期阶段(21日龄)明显高于B组(P<0.05)。结果表明,猪圆环病毒2型、猪肺炎支原体和猪瘟疫苗可以联合免疫,且免疫后相互之间不干扰。该联合免疫策略在确保免疫效果的同时,简化了疫苗免疫程序,为确定最佳的疫苗免疫程序提供了有价值的临床应用参考。 展开更多
关键词 猪瘟活疫苗 猪圆环病毒2型基因工程疫苗 猪肺炎支原体灭活疫苗 不同免疫程序 免疫效果评价
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2022-2023年新疆部分地区猪圆环病毒2型抗体检测及分析 被引量：1
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作者 陆宣杰 周齐 +3 位作者 刘士哲 陈少鹏 李彦芳 屈勇刚 《现代畜牧兽医》 2024年第7期54-57,共4页
研究旨在了解2022—2023年新疆部分地区猪圆环病毒2型(PCV2)的抗体水平,以期为该病的科学防控提供参考。试验采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对来自3个地区11个猪场的296份血清样品进行PCV2抗体检测。结果显示,PCV2抗体平均阳性率为85.... 研究旨在了解2022—2023年新疆部分地区猪圆环病毒2型(PCV2)的抗体水平,以期为该病的科学防控提供参考。试验采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对来自3个地区11个猪场的296份血清样品进行PCV2抗体检测。结果显示,PCV2抗体平均阳性率为85.47%(253/296),高于国家规定标准(70%);在调查的11个规模化猪场中,除A场和C场的PCV2抗体水平未达到国家规定标准外,81.82%(9/11)的猪场PCV2抗体水平均达到群体免疫的抗体水平和免疫标准。研究表明,新疆地区猪场PCV2的整体免疫效果较好,但部分猪场的PCV2抗体水平较低,需要对现有免疫程序进行调整和完善,确保各猪群健康。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 ELISA 抗体检测 新疆地区
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