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猪繁殖呼吸综合征病毒S3毒株的分离及其免疫特性研究 被引量:5
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作者 祁贤 张婉华 +2 位作者 叶向阳 朱永军 陆鑫芳 《动物医学进展》 CSCD 2002年第4期87-90,共4页
从某猪场仔猪体内分离到一株 PPRSV毒株 ,该毒株能在 Marc-1 4 5细胞上增殖产生致细胞病变 ,该病变能被 PPRSV美洲型阳性血清所抑制 ,不被乙脑病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒阳性血清所抑制 ,经美洲型 PPRSV荧光抗体染色呈阳性反应 ,电... 从某猪场仔猪体内分离到一株 PPRSV毒株 ,该毒株能在 Marc-1 4 5细胞上增殖产生致细胞病变 ,该病变能被 PPRSV美洲型阳性血清所抑制 ,不被乙脑病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒阳性血清所抑制 ,经美洲型 PPRSV荧光抗体染色呈阳性反应 ,电镜观察到直径 55~ 60 nm的病毒粒子 ,接种阴性仔猪未见临床症状异常 ,但抗体检测阳性。命名该分离毒为 PPRSV-S3毒株。在 S3弱毒株分离鉴定的基础上 ,进一步在猪体上对其致病性和免疫力进行研究。S3毒株接种仔猪后 ,仔猪不表现任何症状 ,也不向外排毒。4~ 5周龄的仔猪接种 S3株后可产生坚强的免疫力 ,免疫后 4~ 6个月能抵抗强毒攻击。后备母猪配种前 2~ 3周免疫接种 S3株 ,怀孕 90~95d攻强毒 ,未发生流产、死胎、木乃伊胎、产弱仔等繁殖障碍现象。结果表明 ,S3是一株自然分离的弱毒株 ,且具有良好的安全性和免疫力。 展开更多
关键词 繁殖呼吸综合征病毒 S3毒株 分离 免疫特性
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猪繁殖呼吸综合征病毒和流行性腹泻病毒对生长猪的生长性能和消化率的影响 被引量:1
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作者 杨仕群 阳刚 《中国饲料》 北大核心 2020年第20期16-19,共4页
本研究旨在评估猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRS)、猪流行性腹泻病毒(PED)及其联合感染对猪生长性能和养分表观消化率的影响。试验将84头平均体重为(16±0.96)kg的青年母猪随机分为4组,每组7个重复,每个重复3头猪。各组分别做如下处理... 本研究旨在评估猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRS)、猪流行性腹泻病毒(PED)及其联合感染对猪生长性能和养分表观消化率的影响。试验将84头平均体重为(16±0.96)kg的青年母猪随机分为4组,每组7个重复,每个重复3头猪。各组分别做如下处理:对照组、PRRS组(感染PRRS病毒)、PED组(感染PED病毒)、PRP组(同时感染PRRS和PED病毒)。结果:试验期间与对照组相比,PRRS组日增重和采食量显著降低了30%和26%(P<0.05),而PED组日增重、采食量和饲料报酬分别显著降低了45%、30%和23%(P<0.05)。与对照组相比,单独PED感染或联合感染使干物质和总能表观消化率分别显著降低了8%和12%(P<0.05),联合感染组氮和有机物表观消化率分别显著降低了13%和3%(P<0.05)。结论:单独或联合应用PRRS和PED病毒可抑制猪的生长速度和采食量。猪的养分表观消化率在PED和PRRS的共同感染下降低,但单独的PRRS感染对其无显著影响。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征 流行性腹泻 生长性能 养分消化
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猪繁殖与呼吸综合征病毒生命周期的研究进展
3
作者 刘爱军 张传亮 +1 位作者 黄晓兵 周彩琴 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1027-1041,共15页
猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的以猪呼吸系统疾病和母猪繁殖障碍为主要特征的传染病,给全球... 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的以猪呼吸系统疾病和母猪繁殖障碍为主要特征的传染病,给全球养猪业造成了巨大的经济损失。然而,PRRS至今仍没有安全有效的疫苗和药物进行防治。全面深入理解PRRSV生命周期可以为PRRS防控提供新的思路。因此,本文在简述PRRSV生命周期的基础上,重点对病毒侵入、复制与转录、翻译及翻译后修饰、组装等过程的研究进展进行综述,以期为PRRSV致病机制及防控研究提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 入侵 复制和转录 翻译及翻译后修饰 组装
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2023年华南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒的遗传变异分析
4
作者 李松倍 谢永生 +5 位作者 龙晓琴 张晓晓 陈永杰 张春红 焦茂兴 郭春和 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第1期331-340,共10页
[目的]了解2023年华南地区猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的遗传变异情况,为华南地区PRRSV的防控提供理论依据。[方法]采用实时荧光定量PCR方法对华南地区不同猪场采集的328... [目的]了解2023年华南地区猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的遗传变异情况,为华南地区PRRSV的防控提供理论依据。[方法]采用实时荧光定量PCR方法对华南地区不同猪场采集的328份样品进行PRRSV检测,对来自不同猪场具有代表性的29个PRRSV阳性样品ORF5基因进行测序和遗传进化分析。[结果]所有样本中PRRSV的阳性率为54.27%(178/328),获得29株PRRSV。ORF5基因序列分析结果显示,所获得的PRRSV毒株均属于基因Ⅱ型毒株,29株PRRSV ORF5基因之间的核苷酸序列相似性为83.7%~100%,氨基酸序列相似性为83.0%~100%。其中6株属于以重组毒株NADC30-like为代表的谱系1,2株属于以经典毒株VR2332为代表的谱系5,21株属于以高致病性毒株JXA1为代表的谱系8。ORF5基因氨基酸突变主要集中在2个高变区、1个诱饵表位和3个跨膜区。谱系1的5株毒株的诱饵表位区域发生了V27A突变,谱系5的2株毒株的诱饵表位区域发生了V29A突变。在中和表位区域,谱系1的8株毒株发生了I39L突变,谱系8的5株毒株发生了I39F突变。在毒力相关位点中,部分毒株发生了R13Q、R151K、R151I、R151G突变。此外,谱系1的N-糖基化位点变异较多,主要集中在第30-32、32-34、33-35、34-36、35-37、57-59位氨基酸处,而谱系5和谱系8的N-糖基化位点相对保守。[结论]目前华南地区猪场的PRRSV阳性率仍较高,PRRSV流行以多谱基因Ⅱ型为特征,谱系8和谱系1毒株占比较高,并且变异复杂多样,需加强对PRRSV的监测,以掌握PRRSV毒株之间的遗传变异情况,及时做好防控。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒(PRRSV) 遗传变异 ORF5基因 谱系
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谱系1和8重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定与遗传进化分析
5
作者 邹舟 黎颖 +2 位作者 韦莹莹 刘惠僮 韦祖樟 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期29-37,共9页
2023年从广西疑似发生猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪场的病猪肺脏组织中分离到1株PRRSV,将其命名为GXWZ20230831。采用RT-PCR扩增其全基因组序列并测序,分析遗传进化特点。结果显示,GXWZ20230831能够在Marc-145细胞上增殖,且产... 2023年从广西疑似发生猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪场的病猪肺脏组织中分离到1株PRRSV,将其命名为GXWZ20230831。采用RT-PCR扩增其全基因组序列并测序,分析遗传进化特点。结果显示,GXWZ20230831能够在Marc-145细胞上增殖,且产生明显的细胞病变;该毒株全基因组长度为15019个核苷酸(nt),与基因2型PRRSV谱系1 NADC30-like毒株的同源性最高,为94.0%,与基因1型PRRSV代表毒株Lelystad virus同源性最低,仅为60.0%;通过Nsp2氨基酸序列比对,结果发现GXWZ20230831存在NADC30-like典型的131(111+1+19)个氨基酸的不连续缺失模式;与美洲型代表株VR2332相比,GXWZ20230831的GP5蛋白在非中和抗原表位发生了V27A、V185A以及R191K 3处突变,同时在GP5蛋白中存在4个潜在的N-糖基化位点;构建的全基因组序列、nsp2基因、ORF5基因遗传进化树均显示该毒株处于谱系1的分支;重组分析表明,GXWZ20230831是1株以谱系1经典毒株NADC30为骨架,谱系8毒株提供重组片段的重组毒株,重组断点位于基因组的nsp1(458-1821 nt)和Nsp4(5405-8179 nt)中。研究结果可为掌握广西地区的PRRSV遗传变异规律提供参考,为制定防控措施提供科学依据。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 分离鉴定 重组 遗传进化分析
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桂附散对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抑制作用
6
作者 常可欣 刘博文 +7 位作者 周波 吴琼 张华 崔德凤 刘岩琪 宋嘉芸 张永红 童津津 《北京农学院学报》 2025年第1期62-67,共6页
【目的】基于网络药理学探讨桂附散(GFS)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抑制作用。【方法】通过TCMSP、HERB和ETCM数据库筛选GFS的有效成分及作用靶点,结合CTD、OMIM、GeneCards数据库查找PRRSV的相关靶点,通过STRING数据库构建蛋... 【目的】基于网络药理学探讨桂附散(GFS)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抑制作用。【方法】通过TCMSP、HERB和ETCM数据库筛选GFS的有效成分及作用靶点,结合CTD、OMIM、GeneCards数据库查找PRRSV的相关靶点,通过STRING数据库构建蛋白互作(PPI)网络;运用Cytoscape 3.7.2软件筛选出核心靶点,导入DAVID数据库进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并构建药物-疾病-靶点-通路网络。【结果】结果表明,GFS中发挥抗PRRSV的活性成分有槲皮素、美迪紫檀素、山柰酚、刺芒柄花素、5-甲基-7-甲氧基异黄酮等共136个,核心作用靶点有肿瘤坏死因子、核转录激活蛋白1、细胞肿瘤抗原p53、胱天蛋白酶3和丝裂原激活蛋白激酶14,GO功能和KEGG通路富集分析显示,靶点作用包含生物过程190条、细胞组分14条和分子功能36条,参与趋化因子信号通路、黏着斑、生长激素合成分泌和作用、坏死性凋亡等代谢通路。【结论】综上所述,通过筛选GFS抑制PRRSV的有效成分、关键作用靶点及代谢通路,为GFS抗PRRSV的应用提供了参考依据。 展开更多
关键词 桂附散 猪繁殖呼吸综合征病毒 网络药理学
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猪繁殖与呼吸综合征病毒的持续感染和传播特点及防控出路 被引量:3
7
作者 蔡雪辉 徐敏 汤艳东 《猪业科学》 2024年第4期28-31,6,共5页
1PRRS简述。1987年,美国首次暴发猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),随后在世界各国陆续暴发该病,截至目前PRRS已遍布世界主要的养猪业国家,成为各国养猪业最为严重的疫病之一,每年给全球养猪业造成数十亿甚至上百亿美元的经济损失。
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 养猪业 持续感染 传播特点 PRRS 疫病 暴发 经济损失
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不同环节猪群猪繁殖与呼吸综合征监测结果比较分析
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作者 肖兴 蒋小玲 +2 位作者 刘干军 彭鑫 唐金花 《中国动物保健》 2025年第1期117-119,共3页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又名蓝耳病,是一种具有免疫抑制性,对繁殖系统与呼吸系统危害严重的猪群传染病。其中的高致病株,从2006年以来曾经给我国的养猪业造成了极其严重的损失。目前PRRS在猪场的流行范围仍然很广,经济损失难以估量,... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又名蓝耳病,是一种具有免疫抑制性,对繁殖系统与呼吸系统危害严重的猪群传染病。其中的高致病株,从2006年以来曾经给我国的养猪业造成了极其严重的损失。目前PRRS在猪场的流行范围仍然很广,经济损失难以估量,势必成为今后猪场净化的重要病种,而净化又需要可靠的监测结果作为技术支撑。 展开更多
关键词 猪繁殖 监测 呼吸综合征 对比
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猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白原核表达及间接ELISA方法的建立
9
作者 覃建光 姚静 +7 位作者 刘文波 刘嘉琪 陈国昌 任同伟 陈樱 欧阳康 黄伟坚 韦祖樟 《动物医学进展》 北大核心 2024年第9期1-6,共6页
为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)N蛋白多克隆抗体,建立检测PRRSV N蛋白抗体的间接ELISA方法,通过PCR扩增N蛋白基因,将N蛋白基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pE... 为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)N蛋白多克隆抗体,建立检测PRRSV N蛋白抗体的间接ELISA方法,通过PCR扩增N蛋白基因,将N蛋白基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-N。将重组质粒转化至BL21(DE3)感受态细胞中,通过IPTG诱导N蛋白表达,将纯化后的重组N蛋白免疫小鼠,获得N蛋白多克隆抗体。将纯化后的N蛋白作为抗原,建立检测PRRSV N蛋白抗体的间接ELISA方法,并评估该方法的特异性、重复性和准确性。结果表明,表达的重组N蛋白呈可溶性,制备的N蛋白多克隆抗体ELISA效价能达到1∶2048000,IFA和Western blot结果表明制备的鼠多克隆抗体能特异性识别PRRSV N蛋白。建立的间接ELISA方法特异性良好,重复性试验变异系数均小于10%,且与同类型商品化试剂盒结果比较,符合率达到91.10%,可为PRRSV N蛋白的免疫学检测和结构功能的研究提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 N蛋白 原核表达 多克隆抗体 间接ELISA
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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白纳米抗体的筛选及其对病毒复制的抑制效应
10
作者 宋雯妍 张瀚文 +5 位作者 吴澳迪 张丽燕 刘照 叶桐桐 陈创夫 盛金良 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期258-270,共13页
为获得猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5蛋白的特异性纳米抗体,并探究其对病毒复制的抑制效应。使用原核表达系统将PRRSV-GP5蛋白大量表达后经镍柱亲和层析法纯化,使用所获的重组... 为获得猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5蛋白的特异性纳米抗体,并探究其对病毒复制的抑制效应。使用原核表达系统将PRRSV-GP5蛋白大量表达后经镍柱亲和层析法纯化,使用所获的重组GP5蛋白免疫羊驼,并于第0、14、28、42天时采血,检测羊驼体内抗体效价后分离全血淋巴细胞,提取细胞总RNA,反转录后使用巢式PCR扩增出重链抗体可变区(VHH)片段,并与pCANTAB-5E载体相连后转化入TG1感受态细胞,利用噬菌体展示技术构建GP5-VHH噬菌体抗体展示文库。经连续三轮特异性噬菌体的筛选与富集后,淘选出与PRRSV-GP5蛋白高结合力的纳米抗体,通过间接ELISA方法鉴定其反应原性,后将所获的纳米抗体基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-)中,利用Lipofectamine3000转染至Marc^(-1)45细胞内,与PRRSV分别共孵育0、24、36、48、60、72 h,以探究所筛针对PRRSV-GP5蛋白的纳米抗体于胞内对病毒复制与转录产生的影响。结果表明,成功对PRRSV-GP5蛋白进行原核表达并纯化,得到浓度为2.16 mg·mL^(-1)的重组蛋白,对羊驼三次免疫14 d后,其体内抗体效价高达1∶819200,构建GP5-VHH噬菌体抗体展示文库,库容量达2.93×107 CFU·mL^(-1),插入率为98%。经对噬菌体抗体文库连续三轮淘选富集后,最终获得2株不同氨基酸序列的纳米抗体。间接ELISA结果显示,2株纳米抗体均与PRRSV-GP5蛋白具有良好的亲和力。将2株纳米抗体转染至Marc^(-1)45细胞内,它们分别于36与60 h时显著阻碍PRRSV的复制与转录,展现出了较好的阻碍病毒复制的能力。本研究首次筛选出针对PRRSV-GP5蛋白的特异性纳米抗体,且经验证所筛纳米抗体具备抑制PRRSV在细胞内复制的能力,研究结果为抗PRRSV新型药物的研发奠定了试验依据与物质基础。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 GP5蛋白 纳米抗体 噬菌体展示技术 病毒复制
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2013—2021年云南省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行与混合感染状况调查 被引量:3
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作者 邓珺文 毕峻龙 +4 位作者 李永能 程美玲 沈学文 杨贵树 尹革芬 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期95-100,共6页
【目的】调查云南省猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的流行规律和混合感染情况。【方法】采用分子生物学方法对2013—2021年间的3112份血液样品进行PRRSV核酸检测,并进一步分析其... 【目的】调查云南省猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的流行规律和混合感染情况。【方法】采用分子生物学方法对2013—2021年间的3112份血液样品进行PRRSV核酸检测,并进一步分析其流行和混合感染情况。【结果】检测样品中,有801份样品为PPRSV阳性,阳性率为25.74%,二重、三重和四重混合感染率分别为41.20%、12.48%和1.87%;不同生长阶段猪群的PRRSV感染程度差异较大,生长育肥猪感染最严重(33.24%);相对于育肥场和散养户,种猪场的感染程度较轻,三者的感染率分别为27.94%、28.94%和14.29%。对不同毒株类型分析发现:高致病性毒株和经典毒株仍是主要的流行毒株,分别占毒株数的58.49%和22.64%,但占比呈逐年下降趋势。于2019年和2021年在云南省内分别发现了类NADC30毒株和类NADC34毒株,分别占毒株数的15.09%和3.77%,其感染率呈逐渐上升趋势。【结论】猪繁殖与呼吸综合征仍是影响云南省生猪产业健康发展最重要的疫病之一,表现形式以和其他疾病混合感染为主。随着新毒株的发现,云南省PRRSV基因更加多样,防控形势愈加复杂。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒(PRRSV) 流行情况 混合感染 新发毒株
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基于ORF7基因的猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-RAA检测方法的建立
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作者 于娜 马佳镁 +6 位作者 张紫薇 黄春媛 范悦轩 郑佳馨 张艳 刘光亮 曹宗喜 《动物医学进展》 北大核心 2024年第8期117-119,共3页
根据GenBank公布的ORF7基因保守序列设计了特异性引物,建立了PRRSVORF7基因反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)荧光法快速检测方法。结果表明,RT-RAA荧光法在42℃、20min内即可检测到PRRSV特异性扩增曲线,最低检测浓度为9.9×10^(6)... 根据GenBank公布的ORF7基因保守序列设计了特异性引物,建立了PRRSVORF7基因反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)荧光法快速检测方法。结果表明,RT-RAA荧光法在42℃、20min内即可检测到PRRSV特异性扩增曲线,最低检测浓度为9.9×10^(6)copies/μL;与PRVBartha-K61、PCV、CSFV、PRRSVGD、PRRSVXH-GD、PRRSVGM2、PRRSVCH-1a病毒均无交叉反应。分别对157份样品进行荧光RT-RAA法与PCR方法的检测进行比对,结果显示,荧光RT-RAA法敏感性为94.0%,特异性为100%。建立的PRRSV荧光RT-RAA法操作简便,特异性强,灵敏度高。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 ORF7基因 反转录-重组酶介导等温扩增 特异性 灵敏度
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青蒿抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的机制分析
13
作者 张玲珑 贺晓霜 +5 位作者 李佳明 黄鹤 杨鸿玮 董虹 王建舫 周双海 《北京农学院学报》 2024年第4期76-81,共6页
【目的】应用网络药理学方法探明青蒿抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用机制。【方法】用TCMSP数据库检索青蒿的可能活性成分和药物作用靶点,通过CTD数据库和GeneCards数据库收集猪繁殖与呼吸综合征病毒疾病靶点,筛选出药物和疾病靶点的交... 【目的】应用网络药理学方法探明青蒿抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用机制。【方法】用TCMSP数据库检索青蒿的可能活性成分和药物作用靶点,通过CTD数据库和GeneCards数据库收集猪繁殖与呼吸综合征病毒疾病靶点,筛选出药物和疾病靶点的交集来构建蛋白质互作网络并进行GO功能与KEGG通路富集分析,对筛选出的主要活性成分与核心靶点进行分子对接验证。【结果】青蒿有19种可能活性成分和268个药物靶点,主要可能活性成分有槲皮素、山奈酚和木犀草素。PRRSV疾病靶点有3366个,其与青蒿的交集靶点有126个。青蒿抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的核心靶点有白介素-6、肿瘤坏死因子(TNF)、白介素-1β、前列腺素内过氧化物合成酶2、基质金属蛋白酶9、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3和AP-1转录因子亚单位等。GO功能富集涉及对外源性物质刺激的反应、基因表达正调控、细胞外间隙、细胞表面、酶结合及蛋白结合等,KEGG通路主要涉及TNF、白介素-17(IL-17)等信号通路。分子对接结果显示青蒿主要活性成分与核心靶点均能实现自发结合。【结论】青蒿抗猪繁殖与呼吸综合征病毒主要有效成分可能为槲皮素、山奈酚、木犀草素,可能通过作用于IL-17和TNF信号通路发挥抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用。 展开更多
关键词 青蒿 猪繁殖呼吸综合征病毒 网络药理学 作用机制
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连翘抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的机制分析
14
作者 杨鸿玮 张玲珑 +5 位作者 黄鹤 李佳明 刘雪威 王建舫 董虹 周双海 《北京农学院学报》 2024年第4期70-75,共6页
【目的】用网络药理学方法探明连翘抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的潜在有效成分和作用机制。【方法】在TCMSP数据库收集连翘的潜在活性成分与作用靶点,在CTD数据库和GeneCards数据库收集PRRSV疾病靶点,获取两者的交集靶点后构建蛋白... 【目的】用网络药理学方法探明连翘抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的潜在有效成分和作用机制。【方法】在TCMSP数据库收集连翘的潜在活性成分与作用靶点,在CTD数据库和GeneCards数据库收集PRRSV疾病靶点,获取两者的交集靶点后构建蛋白-蛋白互作网络,并进行基因本体(GO)功能富集分析和KEGG通路分析,之后对筛选出的主要活性成分和核心靶点进行分子对接验证。【结果】连翘有24种潜在活性成分和243个潜在作用靶点,PRRSV疾病有3368个作用靶点,两者有122个交集靶点。GO功能富集得到890个条目,主要涉及基因表达的正向调控、对外源性刺激的反应、细胞外空间、胞外区等、酶的结合及相同蛋白的结合等。KEGG通路分析共获得176个条目,主要涉及磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、白介素-17(IL-17)和肿瘤坏死因子(TNF)等信号通路。进一步分析显示,连翘抗PRRSV的主要潜在活性成分有槲皮素、山奈酚、木犀草素及连翘酯苷A等,核心靶点有TNF、白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤蛋白p53、基质金属蛋白酶9、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、前列腺素内过氧化物合成酶2和表皮生长因子受体。分子对接结果显示连翘的潜在主要活性成分与核心靶点之间均能实现良好结合。【结论】连翘抗PRRSV主要活性成分可能为槲皮素、山奈酚、木犀草素及连翘酯苷A,可能主要通过PI3K-Akt、MAPK、IL-17和TNF等信号通路发挥作用。 展开更多
关键词 连翘 猪繁殖呼吸综合征病毒 网络药理学 作用机制
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不同疫苗接种对商品猪群感染猪繁殖与呼吸综合征病毒的影响
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作者 王江平 彭小红 +1 位作者 龙娉 李润成 《动物医学进展》 北大核心 2024年第11期57-63,共7页
为评价不同免疫方案对商品猪猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的防控效果,在一规模化猪场选取240头未经PRRS疫苗免疫且无PRRSV感染的断奶仔猪分成3组,组内包含15头耳牌跟踪猪。其中混合免疫组、弱毒疫苗组在25 d免疫PRRS经典毒株弱毒... 为评价不同免疫方案对商品猪猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的防控效果,在一规模化猪场选取240头未经PRRS疫苗免疫且无PRRSV感染的断奶仔猪分成3组,组内包含15头耳牌跟踪猪。其中混合免疫组、弱毒疫苗组在25 d免疫PRRS经典毒株弱毒疫苗,混合免疫组在50 d免疫PRRS经典毒株灭活疫苗;对照组不接种PRRS疫苗。试验前称重并记录各组耗料情况,于44 d(首免后20 d)或猪群出现PRRSV感染后每隔10 d采血监测PRRSV病毒血症以及抗体产生情况,试验后称取各组试验猪重量。结果显示,2个组猪在首免后抗体出现上升,于99 d(二免后49 d)猪群产生了较高的抗体水平,并持续到试验结束。而混合免疫组在二免后20 d,对照组在69 d监测到有猪开始出现PRRSV病毒血症,弱毒疫苗组于89 d发现有猪出现病毒血症。表明对试验猪免疫1次PRRS弱毒疫苗,可显著降低猪只感染PRRSV后的病毒血症几率,以及病毒血症持续时间;与未接种疫苗的猪相比,接种PRRS疫苗的猪在料肉比方面没有表现出明显的差异;接种该弱毒疫苗免疫25 d的基础上,加免1针灭活疫苗没有显示出明显优势。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 弱毒疫苗 灭活疫苗 抗体 病毒血症
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欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒GD2022株的分离鉴定及遗传进化分析
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作者 邓可辉 王修武 +3 位作者 郭智轩 韩淑杰 孙守湖 贺东生 《动物医学进展》 北大核心 2024年第3期34-41,共8页
为了解广东省欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV-1)流行情况,将RT-PCR检测PRRSV-1阳性的病料(肺脏和淋巴结)接种猪肺泡巨噬细胞(PAMs)进行病原分离鉴定,以分离毒株核酸作为模板,对分离的PRRSV-1进行全基因克隆和测序,并与国内外PRRSV-... 为了解广东省欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV-1)流行情况,将RT-PCR检测PRRSV-1阳性的病料(肺脏和淋巴结)接种猪肺泡巨噬细胞(PAMs)进行病原分离鉴定,以分离毒株核酸作为模板,对分离的PRRSV-1进行全基因克隆和测序,并与国内外PRRSV-1和PRRSV-2参考毒株序列进行同源性及遗传进化分析。结果显示,成功分离1株PRRSV-1,命名为GD2022株,其接种PAMs可引起典型的细胞病变,从出现病变的F5细胞中提取核酸,用PCR分段扩增出PRRSV-1 GD2022株10个基因组片段,分别连接到pCE2 TA/Blunt-Zero载体进行测序,拼接后获得PRRSV-1 GD2022株全基因组长15058个核苷酸(不包含polyA尾)。同源性分析显示,该分离株全基因组序列与PRRSV-1参考毒株(LV株)和PRRSV-2参考毒株(VR2333株)核苷酸序列同源性分别为87%和59.7%。遗传进化树分析显示,全基因序列和ORF5基因与国内外PRRSV-1毒株为同一进化分支,且与疫苗毒分支较远,推断分离株为1株PRRSV-1,属于基因亚型1。氨基酸序列比对分析显示,ORF3和ORF4重叠区域缺失3个核苷酸,导致GP3蛋白和GP4蛋白分别在第245和第65氨基酸位点缺失了1个氨基酸,且与LV株比对,GD2022毒株GP5的氨基酸序列在中和抗原表位第33氨基酸位点(D→A)出现点突变,在高变区第56氨基酸位点(D→A)和第63氨基酸位点(G→D)出现两处突变。重组分析显示,GD2022毒株未发生重组事件。成功分离鉴定1株PRRSV-1毒株,为国内PRRSV-1生物学特性研究提供了材料,也为了解广东省内PRRSV-1流行情况及变异特点提供参考依据。 展开更多
关键词 欧洲型猪繁殖呼吸综合征病毒 分离鉴定 全基因组测序 遗传进化分析
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基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒快速检测方法的建立
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作者 于晶雪 韦珊珊 +9 位作者 覃绍敏 吴健敏 杨丽华 陈凤莲 许力士 秦树英 华俊 韦珏 方芳 刘金凤 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3237-3246,共10页
[目的]本研究将CRISPR/Cas12a系统与反转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA)结合,拟建立一种基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)快速检测方法。[方法]... [目的]本研究将CRISPR/Cas12a系统与反转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA)结合,拟建立一种基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)快速检测方法。[方法]分析不同基因型PRRSV全基因组序列,在3′-UTR端保守区设计重组酶介导等温核酸扩增技术(RAA)引物、crRNA及DNA报告底物分子,筛选RT-RAA最佳引物对。表达纯化AsCas12a蛋白,并以质粒为标准品,经RT-RAA扩增后,将产物加入CRISPR/Cas12a系统,建立PRRSV的CRISPR/Cas12a-RT-RAA检测方法,分别以PRRSV、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)核酸为模板验证建立方法的特异性,以不同浓度的pMD18T-PRRSV为模板验证建立方法的敏感性。以5.62×10^(6)、5.62×10^(3)、5.62拷贝数/μL的质粒为模板进行重复性试验,最后进行临床效果评价,将所建立的方法与实时荧光定量逆转录PCR方法进行比较。[结果]本研究成功表达并纯化获得具有良好剪切活性的AsCas12a蛋白,蛋白分子质量大小为196 ku;所建立的CRISPR/Cas12a-RT-RAA方法的检测下限可达5.62拷贝/μL;该方法具有良好的特异性,可特异性检测出PRRSV,不能检出其他猪病病毒PCV2、PEDV、CSFV和PRV,并具有良好的重复性。应用该方法对121份猪组织样品进行检测,与实时荧光定量逆转录PCR的阳性符合率为93.75%,阴性符合率为99.05%,总符合率为99.17%。[结论]本研究成功建立基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的PRRSV快速检测方法,该方法特异性强、灵敏性高、重复性好且不依赖复杂设备,可在现场和基层实验室使用。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒(PRRSV) 反转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA) CRISPR/Cas12系统
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猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光层析抗体检测方法的建立
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作者 张皓淳 赵刚 +6 位作者 白雪 杨作丰 张小辉 原小燕 元娜 姜斌 李松励 《养猪》 2024年第5期68-73,共6页
为了给临床诊断提供准确便捷的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)检测方法,本试验以镧系快速高敏荧光定量检测系统为基础,通过研制PRRSV(美洲型)抗体荧光微球检测卡,建立具备简便、快速、定量等优势的荧光层析抗体检测方法。试验结果:特异... 为了给临床诊断提供准确便捷的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)检测方法,本试验以镧系快速高敏荧光定量检测系统为基础,通过研制PRRSV(美洲型)抗体荧光微球检测卡,建立具备简便、快速、定量等优势的荧光层析抗体检测方法。试验结果:特异性试验中5份特异性质控血清的检测结果均为阴性;敏感性试验中同一批次试纸的阳性检出率均为100%(20/20),阴性检出率均为100%(20/20);临床试验中共检测482份血清,与市售试剂盒的阴性符合率为84.7%,阳性符合率为91.3%,符合率为91.07%。结论:本试验建立的荧光层析抗体检测方法在PRRSV(美洲型)的检测中表现出较好的特异性和敏感性,对PRRSV(美洲型)的快速诊断和检测具有重要临床意义。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征(PRRS) 荧光定量检测 荧光层析抗体检测
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一例猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪附红细胞体、猪链球菌混合感染的诊治和分析
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作者 卢军霞 杨威 +7 位作者 韩昱 胡晓悦 谌志伟 高英 王珏 王芸萌 孙慈云 张宁 《中国动物保健》 2024年第10期141-143,共3页
2023年3月,河北省廊坊市固安县某猪场发生疫病,死亡率达50%。根据流行病学调查、临床症状及病理解剖观察,结合实验室染色图片镜检,核酸测序比对、荧光定量RCR检测分析,结果证实为一例猪繁殖与呼吸综合征病毒、附红细胞体、链球菌三种病... 2023年3月,河北省廊坊市固安县某猪场发生疫病,死亡率达50%。根据流行病学调查、临床症状及病理解剖观察,结合实验室染色图片镜检,核酸测序比对、荧光定量RCR检测分析,结果证实为一例猪繁殖与呼吸综合征病毒、附红细胞体、链球菌三种病原混合感染。随后采取合理的综合防治措施,并进行治疗。临床上混合感染病例较为常见,且极为严重,需凭借专业检验,深入分析诊断,才能有效避免疾病恶化,推动生猪健康成长,不断提升经济效益,推动行业有序发展。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸障碍综合征 猪附红细胞体病 猪链球菌病 混合感染 诊治
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2019—2022年天津地区猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因遗传演化分析 被引量:1
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作者 李文军 王欢欢 +3 位作者 邵笑 刘野 李文忠 孙英峰 《天津农学院学报》 CAS 2024年第1期71-77,共7页
为分析研究天津地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的分子遗传进化关系,对2019—2022年收集的20份天津地区PRRSV阳性样品进行ORF5克隆测序,以开展遗传变异研究和系统发育分析。遗... 为分析研究天津地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的分子遗传进化关系,对2019—2022年收集的20份天津地区PRRSV阳性样品进行ORF5克隆测序,以开展遗传变异研究和系统发育分析。遗传进化结果显示,20株毒株有11株属于谱系1.8,3株属于谱系1.5,5株属于谱系8,1株为谱系5,表明该地区PRRSV毒株流行呈现多样性。ORF5基因及推导氨基酸同源性和位点进行分析,其中11株谱系1.8毒株与NADC30毒株核苷酸同源性为91.2%~93.0%,氨基酸同源性为89.6%~93.5%;3株1.5谱系毒株与NADC34毒株核苷酸同源性为93.4%~96.5%,氨基酸同源性为92.5%~95.5%;4株分离株与HP-PRRSV毒株同源性最高,核苷酸同源性为90.0%~95.5%,氨基酸同源性为86.6%~91.0%;1株分离株与经典毒株CH-1a同源性最高,核苷酸和氨基酸同源性分别为90.0%和89.1%,1株谱系5毒株与VR2332毒株核苷酸和氨基酸同源性分别为97.8%和96.0%。在关键的氨基酸位点上存在一定程度突变,这些关键突变很可能造成病毒致病力差异,并导致病毒逃逸发生。本研究对天津地区PRRS防控提供数据支持。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 ORF5 遗传演化
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