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猪繁殖与呼吸综合征病毒生命周期的研究进展
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作者 刘爱军 张传亮 +1 位作者 黄晓兵 周彩琴 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1027-1041,共15页
猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的以猪呼吸系统疾病和母猪繁殖障碍为主要特征的传染病,给全球... 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的以猪呼吸系统疾病和母猪繁殖障碍为主要特征的传染病,给全球养猪业造成了巨大的经济损失。然而,PRRS至今仍没有安全有效的疫苗和药物进行防治。全面深入理解PRRSV生命周期可以为PRRS防控提供新的思路。因此,本文在简述PRRSV生命周期的基础上,重点对病毒侵入、复制与转录、翻译及翻译后修饰、组装等过程的研究进展进行综述,以期为PRRSV致病机制及防控研究提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 入侵 复制和转录 翻译及翻译后修饰 组装
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2020-2023年福建省猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查及ORF5基因变异分析
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作者 黄文琳 于慧 +5 位作者 蓝欣 杨圆 陈洪博 范克伟 魏春华 刘建奎 《动物医学进展》 北大核心 2025年第5期9-16,共8页
为了研究2020-2023年福建省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行和变异规律,采用荧光定量RT-PCR方法,对福建不同地区收集的240份疑似PRRSV的组织样品和血清进行PRRSV-1和PRRSV-2检测,对阳性样品采用RT-PCR方法扩增PRRSV ORF5基因,应用... 为了研究2020-2023年福建省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行和变异规律,采用荧光定量RT-PCR方法,对福建不同地区收集的240份疑似PRRSV的组织样品和血清进行PRRSV-1和PRRSV-2检测,对阳性样品采用RT-PCR方法扩增PRRSV ORF5基因,应用分子生物学软件进行同源性和遗传变异分析。结果显示,福建省PRRSV总体阳性率为18.8%(45/240),其中PRRSV-2的阳性率为16.3%(39/240),PRRSV-1的阳性率为2.5%(6/240)。经RT-PCR成功扩增35个PRRSV-2 ORF5基因和3个PRRSV-1 ORF5基因。序列比对分析表明,35个PRRSV-2 ORF5基因核苷酸同源性为81.3%~99.8%,与代表毒株VR2332、NADC30、NADC34、QYYZ和JXA1的核苷酸同源性为80.9%~99.3%。3个PRRSV-1 ORF5基因核苷酸同源性为82.8%~98.5%,与代表毒株LV、Amervac PRRS、FJQEU14、FJEU13等的核苷酸序列同源性为81.5%~99.7%。遗传进化分析表明,福建省PRRSV-2可分为Lineage1、Lineage3和Lineage8,其中Lineage1占比最高,为68.6%(24/35,18株为NADC30-like毒株,6株为NADC34-like毒株),PRRSV-1均属于SubtypeⅠ。氨基酸分析表明,PRRSV-1 GP5蛋白氨基酸变异主要集中于信号肽区域(aa 1-33)和2个胞外域(aa 33-67和aa 89-109);PRRSV-2 GP5蛋白氨基酸变异主要集中于信号肽区域(aa 1-25)、aa 27-36区域和抗原表位C(aa 52-62)。综上表明,PRRSV-1和PRRSV-2同时在福建省流行,NADC30-like PRRSV-2为优势流行毒株且呈现遗传多样性,NADC34-like PRRSV-2和PRRSV-1可能已在福建省潜在流行。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因 序列分析 遗传进化分析 NADC34
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民猪猪繁殖与呼吸综合征恢复力高低组血清代谢组学研究
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作者 孟祥旭 李佳 +5 位作者 任德明 陈奎蓉 和艺云 王立贤 盛熙晖 王立刚 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第4期1689-1699,共11页
旨在对民猪猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)恢复力高低组血清代谢组学进行研究,为蓝耳病的防控提供参考。本研究从代谢组学的角度出发,选择28日龄民猪15头,体重相近、饲喂环境相同且攻相同蓝耳病毒,从中选取高恢复力组5头、低恢复力组5头,... 旨在对民猪猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)恢复力高低组血清代谢组学进行研究,为蓝耳病的防控提供参考。本研究从代谢组学的角度出发,选择28日龄民猪15头,体重相近、饲喂环境相同且攻相同蓝耳病毒,从中选取高恢复力组5头、低恢复力组5头,基于液相色谱-质谱(LC-MS)对血清样本进行非靶向代谢组学检测,通过正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)、聚类分析等筛选不同恢复力民猪血清差异代谢物并进行通路富集分析。结果表明:在不同恢复力组间可筛选得到39个差异代谢物(P<0.05),进一步注释分析发现,鞘磷脂、靛玉红、花生四烯酸、L-苏氨酸可以作为潜在标志代谢物候选。通路分析发现,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成、花生四烯酸代谢通路等可能通过影响炎性细胞因子水平和炎症介质的产生来减轻炎症反应,最终影响恢复力。综上所述,本研究不仅筛选到鞘磷脂、靛玉红、花生四烯酸等蓝耳病恢复力相关标志代谢物,还在代谢物角度初步诠释了恢复力差异高低的可能机制,为蓝耳病的防控和高恢复力民猪选育提供了理论参考。 展开更多
关键词 民猪 猪繁殖与呼吸综合征 恢复力 代谢组学
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2023年华南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒的遗传变异分析
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作者 李松倍 谢永生 +5 位作者 龙晓琴 张晓晓 陈永杰 张春红 焦茂兴 郭春和 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第1期331-340,共10页
[目的]了解2023年华南地区猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的遗传变异情况,为华南地区PRRSV的防控提供理论依据。[方法]采用实时荧光定量PCR方法对华南地区不同猪场采集的328... [目的]了解2023年华南地区猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的遗传变异情况,为华南地区PRRSV的防控提供理论依据。[方法]采用实时荧光定量PCR方法对华南地区不同猪场采集的328份样品进行PRRSV检测,对来自不同猪场具有代表性的29个PRRSV阳性样品ORF5基因进行测序和遗传进化分析。[结果]所有样本中PRRSV的阳性率为54.27%(178/328),获得29株PRRSV。ORF5基因序列分析结果显示,所获得的PRRSV毒株均属于基因Ⅱ型毒株,29株PRRSV ORF5基因之间的核苷酸序列相似性为83.7%~100%,氨基酸序列相似性为83.0%~100%。其中6株属于以重组毒株NADC30-like为代表的谱系1,2株属于以经典毒株VR2332为代表的谱系5,21株属于以高致病性毒株JXA1为代表的谱系8。ORF5基因氨基酸突变主要集中在2个高变区、1个诱饵表位和3个跨膜区。谱系1的5株毒株的诱饵表位区域发生了V27A突变,谱系5的2株毒株的诱饵表位区域发生了V29A突变。在中和表位区域,谱系1的8株毒株发生了I39L突变,谱系8的5株毒株发生了I39F突变。在毒力相关位点中,部分毒株发生了R13Q、R151K、R151I、R151G突变。此外,谱系1的N-糖基化位点变异较多,主要集中在第30-32、32-34、33-35、34-36、35-37、57-59位氨基酸处,而谱系5和谱系8的N-糖基化位点相对保守。[结论]目前华南地区猪场的PRRSV阳性率仍较高,PRRSV流行以多谱基因Ⅱ型为特征,谱系8和谱系1毒株占比较高,并且变异复杂多样,需加强对PRRSV的监测,以掌握PRRSV毒株之间的遗传变异情况,及时做好防控。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 遗传变异 ORF5基因 谱系
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谱系1和8重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定与遗传进化分析
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作者 邹舟 黎颖 +2 位作者 韦莹莹 刘惠僮 韦祖樟 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期29-37,共9页
2023年从广西疑似发生猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪场的病猪肺脏组织中分离到1株PRRSV,将其命名为GXWZ20230831。采用RT-PCR扩增其全基因组序列并测序,分析遗传进化特点。结果显示,GXWZ20230831能够在Marc-145细胞上增殖,且产... 2023年从广西疑似发生猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪场的病猪肺脏组织中分离到1株PRRSV,将其命名为GXWZ20230831。采用RT-PCR扩增其全基因组序列并测序,分析遗传进化特点。结果显示,GXWZ20230831能够在Marc-145细胞上增殖,且产生明显的细胞病变;该毒株全基因组长度为15019个核苷酸(nt),与基因2型PRRSV谱系1 NADC30-like毒株的同源性最高,为94.0%,与基因1型PRRSV代表毒株Lelystad virus同源性最低,仅为60.0%;通过Nsp2氨基酸序列比对,结果发现GXWZ20230831存在NADC30-like典型的131(111+1+19)个氨基酸的不连续缺失模式;与美洲型代表株VR2332相比,GXWZ20230831的GP5蛋白在非中和抗原表位发生了V27A、V185A以及R191K 3处突变,同时在GP5蛋白中存在4个潜在的N-糖基化位点;构建的全基因组序列、nsp2基因、ORF5基因遗传进化树均显示该毒株处于谱系1的分支;重组分析表明,GXWZ20230831是1株以谱系1经典毒株NADC30为骨架,谱系8毒株提供重组片段的重组毒株,重组断点位于基因组的nsp1(458-1821 nt)和Nsp4(5405-8179 nt)中。研究结果可为掌握广西地区的PRRSV遗传变异规律提供参考,为制定防控措施提供科学依据。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 分离鉴定 重组 遗传进化分析
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一株类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及致病力分析
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作者 李明桃 刘云涛 +4 位作者 邹立宏 柳珊 刘茜 焦玉兰 郁宏伟 《中国畜禽种业》 2025年第2期104-111,共8页
该研究旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30流行毒株的感染模型评价其致病性。从广西某猪场发病猪肺脏组织中分离到1株类NADC30毒株(RP-1株),为探究其对仔猪的致病性,将其作为感染毒株接种易感染猪只,其中感染组3头猪,对照组1头猪,... 该研究旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30流行毒株的感染模型评价其致病性。从广西某猪场发病猪肺脏组织中分离到1株类NADC30毒株(RP-1株),为探究其对仔猪的致病性,将其作为感染毒株接种易感染猪只,其中感染组3头猪,对照组1头猪,感染后每日观察临床症状,测量直肠温度,并采集血液、口腔拭子、肛拭子以检测病毒血症与排毒情况,试验结束后进行病理剖检,观察大体病理变化。结果显示,感染组在感染后体温升高,第7天1头猪出现发热,第9天1头猪直肠温度达到峰值41.16℃;感染后第2天出现病毒血症及排毒,持续至感染后第21天;病理剖检发现肺部呈暗红色,局部发生实质性病变,未感染对照组未出现上述情况。可见,RP-1株可引起易感染猪只发病,并表现出明显的临床症状,但未致死,是一株中等毒力毒株,可为疫苗效力的评价提供毒株来源。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 类NADC30毒株 病毒分离 致病力
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桂附散对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抑制作用
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作者 常可欣 刘博文 +7 位作者 周波 吴琼 张华 崔德凤 刘岩琪 宋嘉芸 张永红 童津津 《北京农学院学报》 2025年第1期62-67,共6页
【目的】基于网络药理学探讨桂附散(GFS)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抑制作用。【方法】通过TCMSP、HERB和ETCM数据库筛选GFS的有效成分及作用靶点,结合CTD、OMIM、GeneCards数据库查找PRRSV的相关靶点,通过STRING数据库构建蛋... 【目的】基于网络药理学探讨桂附散(GFS)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抑制作用。【方法】通过TCMSP、HERB和ETCM数据库筛选GFS的有效成分及作用靶点,结合CTD、OMIM、GeneCards数据库查找PRRSV的相关靶点,通过STRING数据库构建蛋白互作(PPI)网络;运用Cytoscape 3.7.2软件筛选出核心靶点,导入DAVID数据库进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并构建药物-疾病-靶点-通路网络。【结果】结果表明,GFS中发挥抗PRRSV的活性成分有槲皮素、美迪紫檀素、山柰酚、刺芒柄花素、5-甲基-7-甲氧基异黄酮等共136个,核心作用靶点有肿瘤坏死因子、核转录激活蛋白1、细胞肿瘤抗原p53、胱天蛋白酶3和丝裂原激活蛋白激酶14,GO功能和KEGG通路富集分析显示,靶点作用包含生物过程190条、细胞组分14条和分子功能36条,参与趋化因子信号通路、黏着斑、生长激素合成分泌和作用、坏死性凋亡等代谢通路。【结论】综上所述,通过筛选GFS抑制PRRSV的有效成分、关键作用靶点及代谢通路,为GFS抗PRRSV的应用提供了参考依据。 展开更多
关键词 桂附散 猪繁殖与呼吸综合征病毒 网络药理学
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猪繁殖与呼吸综合征检测方法研究进展
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作者 罗娟 林远贵 艾青 《中国动物检疫》 2025年第3期50-58,共9页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)在世界范围内普遍存在,给养猪业造成较大损失。建立准确快速、高效安全的PRRS检测方法,对于其防控具有重要意义。PRRS的常规病原学检测方法耗时长,需要专业的仪器设备和人员,多用于科学研究。免疫学检测方法中... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)在世界范围内普遍存在,给养猪业造成较大损失。建立准确快速、高效安全的PRRS检测方法,对于其防控具有重要意义。PRRS的常规病原学检测方法耗时长,需要专业的仪器设备和人员,多用于科学研究。免疫学检测方法中常用的ELISA方法检测成本低,适用于大批量样品检测,但不适用于早期感染检测。分子生物学方法中的逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、荧光定量RT-PCR、数字PCR(dPCR)等,检测速度快,灵敏度和特异性高,被广泛应用于PRRS实验室检测,但无法在基层推广;而等温扩增技术无需复杂设备和繁琐的反应程序,检测时间短,灵敏度更高,适用于PRRS临床快检。不同检测方法的结合使用以及新试剂、新兴技术的兴起,极大促进了PRRS检测技术的发展。本文从常规病原学、免疫学和分子生物学检测技术等方面,对PRRS检测方法研究进展进行综述,分析每种方法的检测优势和局限性,以期为建立更加快速、便捷、准确的PRRS检测方法及应用提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 检测方法 病原学检测 免疫学检测 分子生物学检测
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福建省某规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征的净化
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作者 金艳冬 《中国畜禽种业》 2025年第3期104-113,共10页
为了净化福建省某规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征疾病,该试验对临床发病的猪血清提取核酸后,通过荧光定量PCR、RT-PCR、ORF5基因测序等实验方法进行病原检测,使用DNAStar软件与14种参考序列进行ORF5比对确定毒株类型。采集发病猪血清及... 为了净化福建省某规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征疾病,该试验对临床发病的猪血清提取核酸后,通过荧光定量PCR、RT-PCR、ORF5基因测序等实验方法进行病原检测,使用DNAStar软件与14种参考序列进行ORF5比对确定毒株类型。采集发病猪血清及检测常见病原后,通过敏感性实验和建立标准曲线确定发病猪血清病毒量。将采集的血清按1∶50、1∶100和1∶150比例稀释后分3组对21头试验猪肌注,通过测量肌注后10 d内试验猪的体温和第30、60、90天PRRSV抗体变化后确定血清驯化最佳稀释比例。结果显示:本场分离毒株ORF5序列与参考序列比对后确定感染为JXA1样毒株。病猪血清病原检测PRRSV为阳性,PRV、CSFV、PCV2、ASFV、H1和H3亚型SIV、FMDV阴性。将病毒量为10^(5.4)拷贝/μL的猪血清稀释试验后确定最佳驯化稀释比例为1∶100。将后备母猪转移至新的生产基地、加强生物安全防控、闭群管理、检测淘汰等,同时跟踪母猪血清驯化后35、150、350和420 d PRRSV抗原和抗体,血清驯化后420 d母猪在第2胎时母猪和所产仔猪抗原抗体均为阴性。可见,通过敏感性实验和建立标准曲线确定血清病毒量及通过猪群试验确定血清稀释比例的方法对猪繁殖与呼吸综合征的净化是可行的。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 基因 驯化血清 闭群
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2021-2023年河南部分地区猪场猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征和猪伪狂犬病抗体检测与分析 被引量:1
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作者 王军 韩亚楠 +2 位作者 李月勤 张利卫 彭永帅 《动物医学进展》 北大核心 2024年第10期68-71,共4页
为了解河南省猪场主要病毒性疾病抗体水平,于2021-2023年共采集8014份血清样品,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对所采集的样品进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒gE(PRV-gE)、猪伪狂犬病病毒gB(PRV-gB)... 为了解河南省猪场主要病毒性疾病抗体水平,于2021-2023年共采集8014份血清样品,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对所采集的样品进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒gE(PRV-gE)、猪伪狂犬病病毒gB(PRV-gB)的抗体水平进行检测。结果显示,CSFV抗体的总阳性率为85.70%(6868/8014),PRRSV抗体的总阳性率为81.83%(6558/8014),PRV-gE抗体的总阳性率为11.08%(888/8014),PRV-gB抗体的总阳性率为83.10%(6660/8014)。研究表明,CSFV总体疫苗免疫抗体水平良好,能够有效地控制该病在猪场的发生与流行,但猪群仍存在PRRSV和PRV的感染风险,需要完善免疫方案、加强防控。研究结果可为猪场制定合理的免疫程序提供参考,促进养猪行业的健康发展。 展开更多
关键词 猪瘟 猪繁殖与呼吸综合征 猪伪狂犬病 抗体 检测
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猪繁殖与呼吸综合征病毒的持续感染和传播特点及防控出路 被引量:3
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作者 蔡雪辉 徐敏 汤艳东 《猪业科学》 2024年第4期28-31,6,共5页
1PRRS简述。1987年,美国首次暴发猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),随后在世界各国陆续暴发该病,截至目前PRRS已遍布世界主要的养猪业国家,成为各国养猪业最为严重的疫病之一,每年给全球养猪业造成数十亿甚至上百亿美元的经济损失。
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 养猪业 持续感染 传播特点 PRRS 疫病 暴发 经济损失
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一起输入性猪繁殖与呼吸综合征疫情的紧急流行病学调查
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作者 吴雪军 张传亮 +1 位作者 刘俐君 李盛琼 《中国动物检疫》 CAS 2024年第5期20-24,共5页
自2023年6月4日开始,四川省金堂县某生猪代养场引进的仔猪陆续出现异常死亡情况。为确定病因,分析来源,评估传播风险,赴现场开展了紧急流行病学调查。该猪场于2023年5月20—30日分4批共引进仔猪2200头,截至7月14日,共有222头仔猪发病,12... 自2023年6月4日开始,四川省金堂县某生猪代养场引进的仔猪陆续出现异常死亡情况。为确定病因,分析来源,评估传播风险,赴现场开展了紧急流行病学调查。该猪场于2023年5月20—30日分4批共引进仔猪2200头,截至7月14日,共有222头仔猪发病,124头死亡,袭击率为10.09%,病死率为55.86%。经现场临床诊断、病死猪病理剖检、实验室检测及干预治疗效果印证,综合判定病因为猪繁殖与呼吸综合征病毒感染。经追踪调查,该发病猪场无生猪调出,与该猪场有流行病学关联的其他猪场未出现类似发病情况,因此判定疫情扩散风险较低。溯源调查发现发病仔猪的来源种猪场曾发生过猪繁殖与呼吸综合征疫情,现场调查发现该发病猪场生产管理规范,且周边养殖场未出现猪只异常死亡情况,因此综合判定疫情由引进带毒仔猪引起。本起疫情警示,养殖场在引种前应先确认种源场的疾病流行情况,同时加强引种检疫,尽可能避免输入性疫情发生。 展开更多
关键词 紧急流行病学调查 猪繁殖与呼吸综合征 仔猪 猝死
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猪繁殖与呼吸综合征的感染机制与预防措施 被引量:1
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作者 宋雪莹 《现代农村科技》 2024年第6期79-80,共2页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)为高度接触性传染性疾病,给生猪生产带来巨大经济损失。本文对PRRS的病原、感染机制、发病特点、诊断和预防措施进行综述,旨在为防治PRRS提供理论参考。
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 猪繁殖与呼吸综合征病毒 感染机制 诊断
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猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白原核表达及间接ELISA方法的建立 被引量:1
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作者 覃建光 姚静 +7 位作者 刘文波 刘嘉琪 陈国昌 任同伟 陈樱 欧阳康 黄伟坚 韦祖樟 《动物医学进展》 北大核心 2024年第9期1-6,共6页
为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)N蛋白多克隆抗体,建立检测PRRSV N蛋白抗体的间接ELISA方法,通过PCR扩增N蛋白基因,将N蛋白基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pE... 为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)N蛋白多克隆抗体,建立检测PRRSV N蛋白抗体的间接ELISA方法,通过PCR扩增N蛋白基因,将N蛋白基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-N。将重组质粒转化至BL21(DE3)感受态细胞中,通过IPTG诱导N蛋白表达,将纯化后的重组N蛋白免疫小鼠,获得N蛋白多克隆抗体。将纯化后的N蛋白作为抗原,建立检测PRRSV N蛋白抗体的间接ELISA方法,并评估该方法的特异性、重复性和准确性。结果表明,表达的重组N蛋白呈可溶性,制备的N蛋白多克隆抗体ELISA效价能达到1∶2048000,IFA和Western blot结果表明制备的鼠多克隆抗体能特异性识别PRRSV N蛋白。建立的间接ELISA方法特异性良好,重复性试验变异系数均小于10%,且与同类型商品化试剂盒结果比较,符合率达到91.10%,可为PRRSV N蛋白的免疫学检测和结构功能的研究提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 N蛋白 原核表达 多克隆抗体 间接ELISA
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基于ORF7基因的猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-RAA检测方法的建立 被引量:1
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作者 于娜 马佳镁 +6 位作者 张紫薇 黄春媛 范悦轩 郑佳馨 张艳 刘光亮 曹宗喜 《动物医学进展》 北大核心 2024年第8期117-119,共3页
根据GenBank公布的ORF7基因保守序列设计了特异性引物,建立了PRRSVORF7基因反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)荧光法快速检测方法。结果表明,RT-RAA荧光法在42℃、20min内即可检测到PRRSV特异性扩增曲线,最低检测浓度为9.9×10^(6)... 根据GenBank公布的ORF7基因保守序列设计了特异性引物,建立了PRRSVORF7基因反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)荧光法快速检测方法。结果表明,RT-RAA荧光法在42℃、20min内即可检测到PRRSV特异性扩增曲线,最低检测浓度为9.9×10^(6)copies/μL;与PRVBartha-K61、PCV、CSFV、PRRSVGD、PRRSVXH-GD、PRRSVGM2、PRRSVCH-1a病毒均无交叉反应。分别对157份样品进行荧光RT-RAA法与PCR方法的检测进行比对,结果显示,荧光RT-RAA法敏感性为94.0%,特异性为100%。建立的PRRSV荧光RT-RAA法操作简便,特异性强,灵敏度高。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF7基因 反转录-重组酶介导等温扩增 特异性 灵敏度
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2016-2020年云南省部分猪场猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体检测分析 被引量:1
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作者 张振兴 胡骑 +3 位作者 杨钦鸿 薛晓岩 赵孝慈 宋建领 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期126-129,共4页
为了解2016年-2020年云南省部分地区猪场猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫情况,采集了云南省9个州市188个健康猪场的4179份血清样品,应用ELISA方法进行猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测,分析不同州市、不同年份的猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体... 为了解2016年-2020年云南省部分地区猪场猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫情况,采集了云南省9个州市188个健康猪场的4179份血清样品,应用ELISA方法进行猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测,分析不同州市、不同年份的猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阳性率。结果显示,4179份血清样品中,阳性样品2932份、阴性样品1247份,总体抗体阳性率为70.16%;2016-2018年云南省部分地区抗体阳性率分别为76.97%、76.32%、75.75%,达到我国农业农村部要求的猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阳性率70%的标准;2019-2020年抗体阳性率分别为63.68%、56.50%,未达到农业农村部规定的标准。9个州市中,保山、楚雄、红河、普洱、版纳、玉溪的抗体阳性率分别为84.85%、70.75%、76.46%、80.67%、76.82%、81.39%,达到农业农村部规定标准;大理、昆明、曲靖抗体阳性率分别为61.89%、67.42%、57.88%,未达到农业部规定标准。结果表明,云南省部分地区总体猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阳性率呈现下降趋势,各州市抗体阳性率也存在差异性。为了降低猪繁殖与呼吸综合征疫情发生风险,建议定期做好猪繁殖与呼吸综合征病毒血清学、病原学监测,优化猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫策略,制定更加科学合理的综合防控方案,从而进一步保障云南省生猪养殖业高质量发展。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 抗体检测 酶联免疫吸附试验 血清学
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连翘抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的机制分析 被引量:1
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作者 杨鸿玮 张玲珑 +5 位作者 黄鹤 李佳明 刘雪威 王建舫 董虹 周双海 《北京农学院学报》 2024年第4期70-75,共6页
【目的】用网络药理学方法探明连翘抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的潜在有效成分和作用机制。【方法】在TCMSP数据库收集连翘的潜在活性成分与作用靶点,在CTD数据库和GeneCards数据库收集PRRSV疾病靶点,获取两者的交集靶点后构建蛋白... 【目的】用网络药理学方法探明连翘抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的潜在有效成分和作用机制。【方法】在TCMSP数据库收集连翘的潜在活性成分与作用靶点,在CTD数据库和GeneCards数据库收集PRRSV疾病靶点,获取两者的交集靶点后构建蛋白-蛋白互作网络,并进行基因本体(GO)功能富集分析和KEGG通路分析,之后对筛选出的主要活性成分和核心靶点进行分子对接验证。【结果】连翘有24种潜在活性成分和243个潜在作用靶点,PRRSV疾病有3368个作用靶点,两者有122个交集靶点。GO功能富集得到890个条目,主要涉及基因表达的正向调控、对外源性刺激的反应、细胞外空间、胞外区等、酶的结合及相同蛋白的结合等。KEGG通路分析共获得176个条目,主要涉及磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、白介素-17(IL-17)和肿瘤坏死因子(TNF)等信号通路。进一步分析显示,连翘抗PRRSV的主要潜在活性成分有槲皮素、山奈酚、木犀草素及连翘酯苷A等,核心靶点有TNF、白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤蛋白p53、基质金属蛋白酶9、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、前列腺素内过氧化物合成酶2和表皮生长因子受体。分子对接结果显示连翘的潜在主要活性成分与核心靶点之间均能实现良好结合。【结论】连翘抗PRRSV主要活性成分可能为槲皮素、山奈酚、木犀草素及连翘酯苷A,可能主要通过PI3K-Akt、MAPK、IL-17和TNF等信号通路发挥作用。 展开更多
关键词 连翘 猪繁殖与呼吸综合征病毒 网络药理学 作用机制
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猪繁殖与呼吸综合征病原学特征与疫苗研究进展 被引量:3
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作者 李德龙 石军 +2 位作者 钟佳欢 张诗琦 吴长德 《养猪》 2024年第4期38-42,共5页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种引起仔猪死亡、呼吸道症状和怀孕母猪流产、死胎、木乃伊胎以及公猪呼吸症状和精液质量下降等繁育障碍为特征的高度接触性传染病。猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)可分型为欧洲型(PRRSV-1),美洲型(PRRSV-... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种引起仔猪死亡、呼吸道症状和怀孕母猪流产、死胎、木乃伊胎以及公猪呼吸症状和精液质量下降等繁育障碍为特征的高度接触性传染病。猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)可分型为欧洲型(PRRSV-1),美洲型(PRRSV-2),中国目前正在流行的PRRSV病毒分有1、3、5、8四个谱系。疫苗是目前防控PRRSV的有效措施之一,但由于PRRSV的变异性高以及病毒和病毒、病毒和疫苗之间交叉重组现象严重,导致PRRSV防控难度加大。PRRSV生物学特征以及疫苗的研究成为目前研究的热点。本文对PRRS病原学特征和疫苗研究进展进行综述,为PRRS有效防控提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 基因组结构 疫苗 防控
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猪繁殖与呼吸综合征检测与监测技术要点 被引量:3
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作者 张宝真 刘明杰 +4 位作者 陈盛楠 颜广智 涂常松 黄良宗 白挨泉 《猪业科学》 2024年第4期36-39,共4页
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)引起的一种严重危害全球养猪生产的传染病,其主要危害是引起母猪繁... 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)引起的一种严重危害全球养猪生产的传染病,其主要危害是引起母猪繁殖障碍和生长猪呼吸道疾病以及发病猪群的继发感染。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 猪繁殖障碍 呼吸道疾病 继发感染 PRRSV 技术要点
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基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒快速检测方法的建立 被引量:1
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作者 于晶雪 韦珊珊 +9 位作者 覃绍敏 吴健敏 杨丽华 陈凤莲 许力士 秦树英 华俊 韦珏 方芳 刘金凤 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3237-3246,共10页
[目的]本研究将CRISPR/Cas12a系统与反转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA)结合,拟建立一种基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)快速检测方法。[方法]... [目的]本研究将CRISPR/Cas12a系统与反转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA)结合,拟建立一种基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)快速检测方法。[方法]分析不同基因型PRRSV全基因组序列,在3′-UTR端保守区设计重组酶介导等温核酸扩增技术(RAA)引物、crRNA及DNA报告底物分子,筛选RT-RAA最佳引物对。表达纯化AsCas12a蛋白,并以质粒为标准品,经RT-RAA扩增后,将产物加入CRISPR/Cas12a系统,建立PRRSV的CRISPR/Cas12a-RT-RAA检测方法,分别以PRRSV、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)核酸为模板验证建立方法的特异性,以不同浓度的pMD18T-PRRSV为模板验证建立方法的敏感性。以5.62×10^(6)、5.62×10^(3)、5.62拷贝数/μL的质粒为模板进行重复性试验,最后进行临床效果评价,将所建立的方法与实时荧光定量逆转录PCR方法进行比较。[结果]本研究成功表达并纯化获得具有良好剪切活性的AsCas12a蛋白,蛋白分子质量大小为196 ku;所建立的CRISPR/Cas12a-RT-RAA方法的检测下限可达5.62拷贝/μL;该方法具有良好的特异性,可特异性检测出PRRSV,不能检出其他猪病病毒PCV2、PEDV、CSFV和PRV,并具有良好的重复性。应用该方法对121份猪组织样品进行检测,与实时荧光定量逆转录PCR的阳性符合率为93.75%,阴性符合率为99.05%,总符合率为99.17%。[结论]本研究成功建立基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的PRRSV快速检测方法,该方法特异性强、灵敏性高、重复性好且不依赖复杂设备,可在现场和基层实验室使用。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 反转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA) CRISPR/Cas12系统
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