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用ELISA检测猪生殖-呼吸综合征病毒抗体
1
作者 王占林 《畜牧兽医科技信息》 1997年第10期7-7,共1页
北京动植物检疫局张鹤晓等,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪生殖-呼吸综合征(PRRS)病毒抗体。抗原包被浓度为1.7mg/L,血清的最适稀释度为1:100,酶标兔抗猪IgG的工作浓度为1:2000。比较试验表明,ELISA的敏感性优于间接免疫荧光试验(IFA... 北京动植物检疫局张鹤晓等,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪生殖-呼吸综合征(PRRS)病毒抗体。抗原包被浓度为1.7mg/L,血清的最适稀释度为1:100,酶标兔抗猪IgG的工作浓度为1:2000。比较试验表明,ELISA的敏感性优于间接免疫荧光试验(IFA)。用ELISA检测1996年从美国进口猪的血清76份,阳性率为零。1995年从加拿大进口猪的血清163份,阳性率为5.52％。 展开更多
关键词 猪生殖-呼吸综合征 ELISA检测 阳性率 免疫吸附试验 最适稀释度 病毒抗体 荧光试验 动植物检疫 间接免疫 北京地区
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猪生殖与呼吸综合征病毒JK-100弱毒株生物学和血清学特性研究
2
作者 杜文金 张德鸿 +4 位作者 王志亮 孙融冰 宋翠平 刘卫 况慧星 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期37-39,共3页
通过ＩＦＡ、ＶＮＴ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ等血清学试验及电镜观察，证明ＪＫ－１００株为ＰＲＲＳＶ。本病毒感染ＭＡＲＣ１４５细胞后，３６小时的ＴＣＩＤ_(50)最高，为１０^(-7.83)。把本病毒分别保存在４℃、３７℃各９天，... 通过ＩＦＡ、ＶＮＴ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ等血清学试验及电镜观察，证明ＪＫ－１００株为ＰＲＲＳＶ。本病毒感染ＭＡＲＣ１４５细胞后，３６小时的ＴＣＩＤ_(50)最高，为１０^(-7.83)。把本病毒分别保存在４℃、３７℃各９天，保存在４℃９天后，ＴＣＩＤ_(50)从１０^(-7.83)下降至１０^(-7.32)，３７℃７天已测不到效价。 展开更多
关键词 猪生殖-呼吸综合征病毒 JK-100弱毒株
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肾素-血管紧张素系统:急性呼吸窘迫综合征中的生命之舵
3
作者 张艳丽 蒋澄宇 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第4期487-493,共7页
急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)是一种严重的肺部疾病,其特征为肺部细胞因子风暴、弥漫性肺泡损伤、肺血管通透性增加、急性非心源性肺水肿和难治性低氧血症(PaO2/FIO2≤300 mm),最终导致多器官衰竭。A... 急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)是一种严重的肺部疾病,其特征为肺部细胞因子风暴、弥漫性肺泡损伤、肺血管通透性增加、急性非心源性肺水肿和难治性低氧血症(PaO2/FIO2≤300 mm),最终导致多器官衰竭。ARDS起病快、病情严重并且缺乏有效治疗手段,导致其高病死率(30%~70%),对公共健康构成重大威胁。ARDS可由多种病因引发,包括严重感染(例如SARS-CoV、SARS-CoV-2、H5N1)以及非感染性因素。目前的治疗方法主要是非特异性的处理,包括类固醇、传统中医药、营养支持和机械通气等。2012年更新的柏林标准主要依据发病时间、低氧血症、肺水肿以及相关的放射学和生理学异常来诊断ARDS。最近的研究表明,生物标志物可以提高诊断的灵敏度和特异性。例如,血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)水平升高与重症肺炎的严重程度和预后相关,强调了肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)在ARDS病理机制中的重要作用。ARDS进展的一个关键因素是局部肺组织中RAS的破坏。研究表明,Ang Ⅱ-Ang Ⅱ 1型受体(angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1R)轴的激活会促进肺损伤。ACE2是RAS的关键负调节因子,在缓解Ang Ⅱ过度生成引起的肺损伤中发挥着重要作用。动物模型中ACE2的下调导致RAS失衡,进而引发急性肺损伤。SARS-CoV、SARS-CoV-2和禽流感等病毒感染,以及暴露于某些纳米材料,都能通过降低ACE2水平、破坏RAS平衡,特别是通过激活Ang Ⅱ-AT1R轴,导致Ang Ⅱ的增加,从而诱发ARDS。本文讨论了涉及RAS抑制剂的潜在治疗策略,包括血管紧张素受体拮抗剂(angiotensin receptor blockers,ARB)和补充ACE2。研究表明,ARB(包括洛沙坦),能够显著减少由病毒感染和其他因素引起的ARDS动物模型中的肺损伤,并改善存活率。此外,重组人ACE2通过降低Ang Ⅱ水平和缓解肺损伤表现出保护作用。本文还讨论了ARB在治疗多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfuction syndrom,MODS)中的治疗潜力,因为RAS失调在器官损伤中发挥关键作用。临床试验表明,ARB能够改善COVID-19患者的预后。尽管ARB可能产生低血压和电解质失衡等不良反应,但它们仍然是治疗ARDS和MODS有前景的治疗选择。未来的研究应进一步阐明RAS调节在不同病因背景下的分子机制,并开发个体化治疗策略,以优化临床治疗效果。总而言之,靶向RAS,特别是Ang Ⅱ-AT1R轴,代表了治疗ARDS和MODS的一种新颖而有前景的方法,为危重病人提供了有价值的治疗途径。 展开更多
关键词 肾素-血管紧张素系统 急性呼吸窘迫综合征 新冠病毒 禽流感病毒
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基于ORF7基因的猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-RAA检测方法的建立 被引量：1
4
作者 于娜 马佳镁 +6 位作者 张紫薇 黄春媛 范悦轩 郑佳馨 张艳 刘光亮 曹宗喜 《动物医学进展》 北大核心 2024年第8期117-119,共3页
根据GenBank公布的ORF7基因保守序列设计了特异性引物,建立了PRRSVORF7基因反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)荧光法快速检测方法。结果表明,RT-RAA荧光法在42℃、20min内即可检测到PRRSV特异性扩增曲线,最低检测浓度为9.9×10^(6)... 根据GenBank公布的ORF7基因保守序列设计了特异性引物,建立了PRRSVORF7基因反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)荧光法快速检测方法。结果表明,RT-RAA荧光法在42℃、20min内即可检测到PRRSV特异性扩增曲线,最低检测浓度为9.9×10^(6)copies/μL;与PRVBartha-K61、PCV、CSFV、PRRSVGD、PRRSVXH-GD、PRRSVGM2、PRRSVCH-1a病毒均无交叉反应。分别对157份样品进行荧光RT-RAA法与PCR方法的检测进行比对,结果显示,荧光RT-RAA法敏感性为94.0%,特异性为100%。建立的PRRSV荧光RT-RAA法操作简便,特异性强,灵敏度高。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF7基因 反转录-重组酶介导等温扩增 特异性 灵敏度
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猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30-like株的分离鉴定及基因组分析 被引量：1
5
作者 毛丽萍 潘晓梅 +5 位作者 曹剑 李俊辉 周涛 侯红娟 郑学功 贺笋 《动物医学进展》 北大核心 2024年第7期11-17,共7页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)呈现全球流行,对养猪行业造成巨大的经济损失。为增加PRRSV分离细胞种类的多样性,同时了解新疆地区猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)遗传变异的现状,采用新鲜制备猪骨髓细胞诱导分化成猪骨髓源巨噬细胞,对新疆地... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)呈现全球流行,对养猪行业造成巨大的经济损失。为增加PRRSV分离细胞种类的多样性,同时了解新疆地区猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)遗传变异的现状,采用新鲜制备猪骨髓细胞诱导分化成猪骨髓源巨噬细胞,对新疆地区某猪场疑似患有PRRS的肺脏,接种至猪骨髓源巨噬细胞,分离获得1株PRRSV毒株,命名为XJYQ-2021。通过测序得到全基因组序列,对该毒株NSP2氨基酸序列缺失、ORF5及全基因组序列进行同源性、遗传进化及重组分析;利用间接免疫荧光试验进行鉴定,同时对第10、15、20代病毒液绘制生长曲线。结果显示,诱导分化的猪骨髓源巨噬细胞纯度高达90%以上,XJYQ-2021分离株在该细胞生长良好,可见明显细胞病变;通过生长曲线可观察到病毒含量随代次增加而递增,感染48 h左右病毒滴度达到峰值;该分离株基因组全长15030 nt,与美洲型NADC30同源性为90%;XJYQ-2021分离株与VR2332相比,NSP2氨基酸序列与美洲型NADC30具有相同不连续缺失(111+1+19);全基因重组分析结果表明,XJYQ-2021分离株是重组病毒,有一个重组片段,其中NADC30是亲本毒株,与JXA1之间发生重组获得。研究结果可为PRRSV的病毒分离提供优选细胞种类,同时掌握了新疆地区PRRSV流行毒株的遗传进化现状。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 类NADC30 猪骨髓源巨噬细胞 NSP2 重组分析
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猪生殖-呼吸道综合征国内分离毒株的病毒纯化及其结构蛋白分析 被引量：5
6
作者 蔡雪晖 刘文兴 +4 位作者 郭宝清 李成 谷守林 柴文君 徐哮 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第4期272-274,共3页
本研究主要对猪生殖呼吸道综合征（ Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ） 国内分离毒株（ Ｃ Ｈ Ｉａ） 进行了病毒纯化及其结构蛋白的分析。选用聚乙二醇（ Ｐ Ｅ Ｇ６０００） 沉淀和差速离心法粗提了经 Ｍａｒｃ１４５ 细胞系增殖的猪生殖呼吸... 本研究主要对猪生殖呼吸道综合征（ Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ） 国内分离毒株（ Ｃ Ｈ Ｉａ） 进行了病毒纯化及其结构蛋白的分析。选用聚乙二醇（ Ｐ Ｅ Ｇ６０００） 沉淀和差速离心法粗提了经 Ｍａｒｃ１４５ 细胞系增殖的猪生殖呼吸道综合征病毒（ Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ） 。并采用非线性蔗糖密度梯度离心法纯化了 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ， 经免疫电镜观察纯化病毒， 发现有较多的胶体金颗粒吸附在直径为４２ ～７８ｎｍ 的病毒粒子周围。经 Ｄｏｔ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 测定纯化病毒的滴度可达１ １６００ 以上， 并利用 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 和 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ 两种方法对国内分离毒株（ Ｃ Ｈ Ｉａ） 与欧洲型（ Ｌｅｌｙｓｔａｄ） 、美洲型（ Ｖ Ｒ２３３２） 等参考毒株的病毒结构蛋白组成和部分抗原特性进行了初步的研究。测得国内分离毒株主要结构蛋白的分子量为１４５ Ｋ Ｄ，１９２ Ｋ Ｄ 和２６３ Ｋ Ｄ， 并均能被 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 的高免血清识别， 这与国外的同类报道很相似。 展开更多
关键词 PRRS 猪 生殖呼吸综合征 病毒 纯化
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猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)分离鉴定及其与欧、美PRRSV抗原的比较 被引量：26
7
作者 刘文兴 蔡雪晖 郭宝清 《中国畜禽传染病》 CSCD 1998年第4期193-195,共3页
在我国吉林省某地猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）抗体阳性猪群的４头２日龄弱仔猪实质脏器中分离到２株ＰＲＲＳＶ。间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）结果表明，ＰＲＲＳＶ（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）抗血清与２个分离株呈阳性反应；... 在我国吉林省某地猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）抗体阳性猪群的４头２日龄弱仔猪实质脏器中分离到２株ＰＲＲＳＶ。间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）结果表明，ＰＲＲＳＶ（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）抗血清与２个分离株呈阳性反应；分离到病毒的弱仔猪血清与参考株（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）也呈阳性反应；而分离株与ＨＣＶ、ＰｒＶ、ＰＰＶ、ＴＧＥＶ、ＰＥＤＶ和ＨＥＶ无交叉抗原。以上试验证明，我们已成功地分离到２株地方性ＰＲＲＳＶ。进一步用六种ＰＲＲＳＶ单抗（Ａ～Ｆ）进行ＩＦＡ试验，结果２个分离株与ＶＲ－２３３２的荧光反应谱相同。说明它们之间在抗原结构上具有同源性。 展开更多
关键词 病毒 分离 猪 生殖-呼吸道 PRRSV 综合征 IFA
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猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)CH-la株N基因的分子克隆、序列测定及其比较分析 被引量：16
8
作者 仇华吉 童光志 +5 位作者 郭宝清 王柳 张绍杰 王玫 于力 刘宝全 《中国畜禽传染病》 CSCD 1998年第4期217-220,共4页
根据已发表的ＰＲＲＳＶＩＡＦ－ｅｘｐ９１株的核酸序列，设计了一对特异性引物，用ＲＴ－ＰＣＲ扩增了ＰＲＲＳＶＣＨ－ｌａ株的Ｎ基因，经补平和磷酸化后，克隆到ｐＵＣ１８ＳｍａＩ位点上。经电泳分析、酶切和ＰＣＲ鉴定证实后，进... 根据已发表的ＰＲＲＳＶＩＡＦ－ｅｘｐ９１株的核酸序列，设计了一对特异性引物，用ＲＴ－ＰＣＲ扩增了ＰＲＲＳＶＣＨ－ｌａ株的Ｎ基因，经补平和磷酸化后，克隆到ｐＵＣ１８ＳｍａＩ位点上。经电泳分析、酶切和ＰＣＲ鉴定证实后，进行序列测定。序列分析表明ＣＨ－ｌａ株与ＩＡＦ－ｅｘｐ９１株（美洲型）Ｎ基因核苷酸同一性为９３．２％，氨基酸同一性高达９６．７％，而与ＬＶ株（欧洲株）核苷酸同一性为６３％，氨基酸同一性仅为５９％。其推导氨基酸残基分子量为１３．３ｋＤａ。根据ＣＨ－ｌａ株Ｎ基因推导的氨基酸残基缺少欧洲型毒株ＬＶ特有的两个氨基酸片段，表明ＣＨ－１ａ株与ＩＡＦ－ｅｘｐ９１株同源性高于它与ＬＶ株的同源性，而且ＣＨ－１ａ株与鼠乳糖脱氢酶增高症病毒（ＬＤＶ）在进化关系上比ＬＶ株与ＬＤＶ更密切。ＣＨ－１ａ株Ｎ基因推导的氨基酸残基Ｎ－端１／２段约２６％是由Ａｒｇ、Ｌｙｓ和Ｈｉｓ这３种氨基酸组成的，其疏水性侧像图与ＬＶ株和ＶＲ－２３３２株（美洲型）几乎相同，这表明两种基因型的核衣壳蛋白（Ｎ蛋白）具有一定的保守性。由于Ｎ蛋白是ＰＲＲＳＶ所有结构蛋白中免疫原性比较强的病毒蛋白，是现行血清学试验的抗原基础，因此Ｎ基因的分子克隆为研制ＰＲＲ? 展开更多
关键词 猪病 生殖-呼吸道 综合征 PRRSV N基因 分子克隆
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猪生殖-呼吸道综合征病毒抗原在仔猪体内定位的研究 被引量：13
9
作者 尹训南 郭宝清 +2 位作者 司昌德 蔡雪辉 褚桂芳 《中国畜禽传染病》 CSCD 1997年第5期47-49,共3页
试验共用８头３０日龄无ＰＲＲＳ的断乳仔猪，人工滴鼻接种国内分离的ＰＲＲＳＶ，隔离饲养２５天迫杀，取内脏制成恒冷切片，间接荧光抗体染色，荧光显微镜检查。结果表明特异荧光细胞出现的频度，数量及荧光亮度以脾脏最为严重，依次... 试验共用８头３０日龄无ＰＲＲＳ的断乳仔猪，人工滴鼻接种国内分离的ＰＲＲＳＶ，隔离饲养２５天迫杀，取内脏制成恒冷切片，间接荧光抗体染色，荧光显微镜检查。结果表明特异荧光细胞出现的频度，数量及荧光亮度以脾脏最为严重，依次是肾脏，肺脏，淋巴结，肝脏，心脏和中枢神经系统，出现特异荧光的细胞有两类：一类是巨噬细胞，主要分布于肺气管及血管周围的浸润细胞中及增宽的肺泡隔内，脾边缘区，小梁两侧，滤泡的生发中心，淋巴结的淋巴小结生发中心和淋巴索中，肝汇管区及窦内；另一类是各脏器中肿大、变圆、脱落的血管内皮细胞，特别是肾小球和肺，肾，肝，中枢神经系统的小血管和内皮细胞。特异荧光主要出现在这两大类细胞浆中，本文就ＰＲＲＳＶ的定位与病变的关系进行了讨论，认为二者有密切相关性，并就本病病理发生做了进一步阐述。 展开更多
关键词 猪病 生殖呼吸综合症 病毒 抗原 体内定位
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中国华东地区猪生殖-呼吸道综合征病毒(S_1株)ORF_(5～7)基因特征研究 被引量：3
10
作者 姜平 陈溥言 +3 位作者 姜志华 蔡家利 董永毅 蔡宝祥 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第3期194-198,共5页
本研究对我国华东地区猪生殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）分离株Ｓ１主要结构蛋白基因（ＯＲＦ５～７）进行了ＰＣＲ扩增和ＤＮＡ测序分析。结果表明，长度为１５２０ｂｐＤＮＡ序列含有３个阅读框ＯＲＦｓ，即ＯＲＦ５、ＯＲＦ６和... 本研究对我国华东地区猪生殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）分离株Ｓ１主要结构蛋白基因（ＯＲＦ５～７）进行了ＰＣＲ扩增和ＤＮＡ测序分析。结果表明，长度为１５２０ｂｐＤＮＡ序列含有３个阅读框ＯＲＦｓ，即ＯＲＦ５、ＯＲＦ６和ＯＲＦ７，ＯＲＦ５和ＯＲＦ６及ＯＲＦ６和ＯＲＦ７间有部分碱基重叠，且与欧洲型和美洲型ＰＲＲＳＶ相似。ＯＲＦｓ推导的氨基酸序列与美国ＶＲ２３３２和欧洲ＬＶ毒株同源性分析为９９％～１００％和５９％～７８％。ＯＲＦｓ预测的蛋白质分子量、等电点、糖基化位点、亲水性分布图及跨膜螺旋区与ＶＲ２３３２毒株相似。 展开更多
关键词 猪生殖-呼吸道 综合征 ORF5-7基因 PRRSV
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猪繁殖与呼吸综合征病毒重组毒株GX-C4CG6致病性探究
11
作者 王东东 李春梅 +5 位作者 罗小飞 叶敏慧 田小艳 欧阳海平 潘永飞 何晓明 《中国动物检疫》 CAS 2024年第5期104-109,共6页
为评估猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组毒株GX-C4CG6对小猪的致病性,选择PRRSV抗原、抗体均为阴性的小猪进行攻毒试验,然后通过攻毒后猪只体温变化及死亡情况、临床症状评分、血清抗体变化、攻毒后平均日增重、解剖后肺脏眼观及显微... 为评估猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组毒株GX-C4CG6对小猪的致病性,选择PRRSV抗原、抗体均为阴性的小猪进行攻毒试验,然后通过攻毒后猪只体温变化及死亡情况、临床症状评分、血清抗体变化、攻毒后平均日增重、解剖后肺脏眼观及显微病理变化、血清/肺脏病毒拷贝数等指标,对该毒株致病性进行评估。结果显示:GX-C4CG6毒株攻毒组有4头猪出现发烧,平均体温在攻毒后第12、13天大于40℃,最高体温达40.4℃,未出现死亡;被攻毒猪仅表现轻微减料,未表现出明显的呼吸障碍;攻毒后7 d,攻毒组猪只抗体开始转阳,至攻毒后14 d,攻毒组猪只ELISA抗体S/P平均值达最高;攻毒组在攻毒后第1周和对照组平均日增重差异不显著,至第2周差异显著(P<0.05),攻毒组显著低于对照组;被攻毒猪出现肺脏间质性肺炎,血清和肺脏病毒拷贝数浓度较高,分别达9.2×10^(5)和1.6×10^(7)copies/mL。结果表明,PRRSV GX-C4CG6毒株对小猪表现温和致病性。本研究为PRRSV重组毒株流行的控制提供了基础资料。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 重组毒株 致病性 小猪
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金华猪呼吸道疾病综合征主要病原调查分析
12
作者 刘晓峰 顾栩珈 +2 位作者 王金丽 孙睿聪 李君荣 《浙江畜牧兽医》 2025年第2期3-6,共4页
为调查金华市两头乌猪呼吸道疾病综合征的主要病原,于2023年11月-2024年1月对呼吸道疾病综合征发病的3个金华两头乌猪养殖场进行了调查。采集肺脏样品84份,对肺炎支原体(Mhp)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪圆环病毒3型(PCV3)、猪繁殖与呼吸... 为调查金华市两头乌猪呼吸道疾病综合征的主要病原,于2023年11月-2024年1月对呼吸道疾病综合征发病的3个金华两头乌猪养殖场进行了调查。采集肺脏样品84份,对肺炎支原体(Mhp)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪圆环病毒3型(PCV3)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)进行了检测。结果显示,Mhp、PCV2、PRRSV、CSFV、PRV和PCV3的阳性率分别为66.67%、55.95%、21.42%、7.14%、9.52%和11.90%。Mhp与病毒混合感染的阳性率为53.58%。PCV2与其他病原混合感染率为63.83%。39.28%的患病猪为二重感染,Mhp和PCV2的混合感染率最高,达19.05%。因此Mhp和PCV2是引起金华市两头乌猪呼吸道疾病综合征的主要病原。 展开更多
关键词 金华两头乌猪 猪呼吸道疾病综合征 肺炎支原体 病毒 混合感染
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猪呼吸道疾病综合征的病因与防治 被引量：1
13
作者 王明宇 《中国畜牧业》 2025年第4期88-89,共2页
猪呼吸道疾病综合征通常由蓝耳病毒(PRRSV)、副猪嗜血杆菌、巴氏杆菌或肺炎链球菌等病原感染引起。此外,一些寄生虫(如肺弓形虫、肺螺旋体)也可能导致该疾病。病原体的侵袭会引发猪只呼吸道炎症,并造成肺组织损伤,严重影响猪只生长及养... 猪呼吸道疾病综合征通常由蓝耳病毒(PRRSV)、副猪嗜血杆菌、巴氏杆菌或肺炎链球菌等病原感染引起。此外,一些寄生虫(如肺弓形虫、肺螺旋体)也可能导致该疾病。病原体的侵袭会引发猪只呼吸道炎症,并造成肺组织损伤,严重影响猪只生长及养殖效益。因此,深入了解该综合征的病因及防控措施,对于提高养猪业的生产效率具有重要意义。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 呼吸道炎症 猪呼吸道疾病综合征 病原感染 养猪业 巴氏杆菌 弓形虫 蓝耳病毒
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猪繁殖与呼吸综合征病毒促进猪链球菌2型感染猪肺泡巨噬细胞的初步研究 被引量：19
14
作者 宋冬 全映颖 +5 位作者 高树基 申娅敏 高梦霞 王瑜欣 魏颖 汪洋 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期385-391,共7页
为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)对不同毒力猪链球菌2型(SS2)感染巨噬细胞的影响,本研究建立了高致病性PRRSV Li11株和SS2强毒株HA或无毒菌株T1/5共感染永生化猪肺泡巨噬细胞(iPAM)的模型,实验分为4组:HA单独感染组(HA组)、PRRSV-H... 为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)对不同毒力猪链球菌2型(SS2)感染巨噬细胞的影响,本研究建立了高致病性PRRSV Li11株和SS2强毒株HA或无毒菌株T1/5共感染永生化猪肺泡巨噬细胞(iPAM)的模型,实验分为4组:HA单独感染组(HA组)、PRRSV-HA共感染组(PRRSV-HA组)、T1/5单独感染组(T1/5组)和PRRSV-T1/5共感染组(PRRSV-T1/5组),利用该模型通过黏附试验、侵入试验和细胞内存活试验检测PRRSV对HA和T1/5黏附、侵入iPAM细胞及对该细胞存活率的影响,进一步利用荧光定量PCR方法检测各感染组iPAM模型细胞中细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-8、IFN-β)的转录水平。黏附试验结果显示,HA感染2 h后,PRRSV-HA组细菌对细胞的黏附水平极显著高于HA组(P<0.01或P<0.001);T1/5感染6 h后,PRRSV-T1/5组细菌对细胞的黏附水平极显著高于T1/5组(P<0.001),表明PRRSV与HA或T1/5共感染可以促进HA和T1/5对iPAM模型细胞的黏附,且HA对iPAM细胞的黏附水平高于T1/5。侵入试验结果显示,感染4 h后,共感染组细菌侵入iPAM细胞中的数量比单独感染组极显著增多(P<0.01或P<0.001)。细胞内存活试验结果显示,感染2 h后,共感染组细菌的存活率比单独感染组极显著升高(P<0.001)。荧光定量PCR试验结果显示,感染4 h时,共感染组iPAM细胞中细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-8、IFN-β)的转录水平极显著高于单独感染组(P<0.001)。本研究首次建立了高致病性PRRSV Li11株和SS2强毒株HA或无毒菌株T1/5共感染i PAM的模型,基于该模型研究首次发现PRRSV感染不仅促进了不同毒力SS2对i PAM细胞的黏附、侵入及SS2在iPAM细胞内的存活,还可以协同SS2显著提高该细胞中细胞因子的转录水平。本研究为进一步探究PRRSV和SS混合感染的机制提供了参考依据。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪链球菌 永生化猪肺泡巨噬细胞 共感染
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猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核蛋白基因在原核系统中的高效表达与初步应用 被引量：14
15
作者 周艳君 童光志 +4 位作者 薛强 仇华吉 王云峰 赵永刚 王玫 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期401-404,共4页
将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH_1a株核蛋白基因克隆至原核表达载体pET30a的多克隆位点中 ,经鉴定后得到重组质粒pET30a_N ,将此重组质粒转化到受体菌BL2 1中 ,用诱导剂IPTG分别以不同浓度进行诱导 ,并在不同诱导时间进行采样 ,经处理后做S... 将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH_1a株核蛋白基因克隆至原核表达载体pET30a的多克隆位点中 ,经鉴定后得到重组质粒pET30a_N ,将此重组质粒转化到受体菌BL2 1中 ,用诱导剂IPTG分别以不同浓度进行诱导 ,并在不同诱导时间进行采样 ,经处理后做SDS_PAGE、Western_blot分析 ,并以此为包被抗原进行ELISA检测 ,结果发现以终浓度为 1mmol/L的IPTG进行诱导 ,4小时后表达可达到高峰 ,其大小约为 2 3kD ,薄层扫描结果表明该蛋白表达量约占菌体蛋白总量的 32 % ,该蛋白不仅与PRRSV阳性血清能发生特异性反应 ,而且可被PRRSV抗N蛋白单抗所识别 ,证实此大量表达的蛋白为核蛋白。将此表达产物应用ProBondTM纯化系统进行纯化 ,其纯度可达到 91% ,纯化后的蛋白以 5 0 μg/孔包被 96孔板 ,检测来自不同地区送检的猪血清 ,同时以全病毒ELISA为对照 ,结果发现二者的符合率高达 93.3% ,而应用该蛋白进行检测其反应更为敏感 ,且背景低 ,制备过程简单 ,这将为今后应用该蛋白作诊断抗原检测PRRSV奠定了基础。 展开更多
关键词 猪 CH-1A株 核蛋白基因 原核系统 应用 PRRSV 繁殖呼吸综合征病毒 基因表达
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猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株非结构基因的分子克隆及其基因特征的研究 被引量：31
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作者 刘光清 薛强 +3 位作者 仇华吉 蔡雪晖 童光志 郭宝清 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期81-87,共7页
对猪繁殖与呼吸综合征病毒的非结构基因 (ORF1)和非编码区分别进行了克隆和测序 ,并对其基因特征作了分析。结果表明 ,CH_1a株ORF1全长 11882nt,其中ORF1a长 75 12nt、ORF1b长 4374nt。它们与VR2 332株的核苷酸同源性分别为 89%、92 % ;... 对猪繁殖与呼吸综合征病毒的非结构基因 (ORF1)和非编码区分别进行了克隆和测序 ,并对其基因特征作了分析。结果表明 ,CH_1a株ORF1全长 11882nt,其中ORF1a长 75 12nt、ORF1b长 4374nt。它们与VR2 332株的核苷酸同源性分别为 89%、92 % ;与LV株的核苷酸同源性分别为 5 4%、6 3.3%。ORF1编码两个聚合蛋白 ,其中ORF1a编码的聚合蛋白经裂解后产生 6个成熟的非结构蛋白 (Nsp1α、Nsp1β、Nsp2_5 ) ,以Nsp2的变异性最为显著 ,它与LV株的氨基酸同源性为 41%。ORF1b编码的聚合蛋白经裂解后 ,产生 4个成熟的非结构蛋白 (RdRpCP2_4) ,其中RdRp为病毒的复制酶 ,CP4表现出较大的变异性 ,与LV株的氨基酸同源性为 48%。在ORF1a_ORF1b的衔接区有保守的庚核苷酸滑动序列和拟节结构 ,它们是核糖体移码翻译所必需的结构。在基因组末端存在非编码区 ,其中 5’NCR长 190nt,比LV株 5’NCR短 31nt,其核苷酸同源性为 6 1%。 3’NCR长 15 1nt,比LV株 3’NCR长 37nt,保守性稍高 ,其与VR2 332株和LV株的核苷酸同源性分别为 95 .4%和 78.2 %。在 3’NCR末端有一个poly(A)尾巴 ,长 2 0nt。在Poly(A)尾上游有保守的八核苷酸序列 ,是复制酶识别并结合的区域。 展开更多
关键词 猪 繁殖 呼吸综合征病毒 CH-1A株 非结构基因 分子克隆 基因特征 序列分析 非结构蛋白编码区
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猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗不同接种途径对母猪生殖道黏膜淋巴细胞分布的影响 被引量：6
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作者 金光明 刘胜兵 +1 位作者 杨倩 李玉磊 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期124-126,共3页
16头 5月龄长白×大约克夏二元杂交母猪 ,通过不同途径接种猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)弱毒疫苗 ,采用组织学方法研究其对母猪生殖道黏膜淋巴细胞分布的影响。结果表明 ,与对照组相比 ,鼻腔和肌注接种可使猪子宫角、子宫体和子... 16头 5月龄长白×大约克夏二元杂交母猪 ,通过不同途径接种猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)弱毒疫苗 ,采用组织学方法研究其对母猪生殖道黏膜淋巴细胞分布的影响。结果表明 ,与对照组相比 ,鼻腔和肌注接种可使猪子宫角、子宫体和子宫颈黏膜上皮内淋巴细胞的数量极显著增加 (P <0 0 1 ) ,生殖道接种则使淋巴细胞的数量极显著减少(P <0 0 1 )。鼻腔与肌注接种间无明显差异。经生殖道接种疫苗时 ,子宫黏膜上皮变得不规则 ,有些部位上皮变薄。而经鼻腔和肌注接种时 ,黏膜固有层中多见淋巴细胞聚集 ,形成淋巴细胞群 ,并向黏膜腔表面排放。 展开更多
关键词 猪 繁殖呼吸综合征病毒 疫苗接种途径 生殖道黏膜 淋巴细胞 分布
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一例猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染的诊治 被引量：1
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作者 何玉华 徐志文 《云南畜牧兽医》 2024年第5期12-15,共4页
2024年1月,四川省大邑县某规模化种猪场妊娠母猪出现高热、消瘦、食欲减退、流产等症状。为了确定病因,采集流产胎儿样本送至实验室进行诊断。经聚合酶链反应(PCR)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测,发现猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV... 2024年1月,四川省大邑县某规模化种猪场妊娠母猪出现高热、消瘦、食欲减退、流产等症状。为了确定病因,采集流产胎儿样本送至实验室进行诊断。经聚合酶链反应(PCR)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测,发现猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)呈阳性,而其他病原体均为阴性。结合临床诊断和实验室检测结果,确定该场此次疫情暴发的原因是PRRSV和PCV2的混合感染。基于这一诊断结果和猪场实际情况,该场采取了全群接种PRRSV和PCV2疫苗及加强生物安全防控等措施,疫情在2周后得到控制。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒 混合感染 PCR
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猪捷申病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的多重RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量：13
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作者 刘杉杉 赵亚荣 +4 位作者 胡峰 吕超超 胡泉博 王贵华 崔尚金 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期704-708,共5页
为建立同时检测猪捷申病毒(PTV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重RT-PCR(mRT-PCR)检测方法,本研究以PRRSV ORF6基因、CSFV Erns基因和PTV 5'-UTR基因为对象,建立检测3种病毒的mRT-PCR方法。特异性试验表明,... 为建立同时检测猪捷申病毒(PTV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重RT-PCR(mRT-PCR)检测方法,本研究以PRRSV ORF6基因、CSFV Erns基因和PTV 5'-UTR基因为对象,建立检测3种病毒的mRT-PCR方法。特异性试验表明,该方法可以特异扩增3种病毒的基因,对大肠杆菌、猪圆环病毒Ⅱ型、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒和猪流感病毒呈阴性反应;敏感性试验表明,PRRSV、CSFV和PTV的最低核酸检出量分别为7.11×102拷贝、7.81×103拷贝和8.43×102拷贝,略低于单一RT-PCR敏感性;应用该方法对69份送检样品进行检测,其中PRRSV、CSFV和PTV单纯感染检出率分别为28.99%、27.54%和56.52%,PRRSV和CSFV混合感染检出率为4.35%,PRRSV和PTV的混合感染检出率为11.59%,CSFV和PTV的混合感染检出率为13.04%,3种病毒的混合感染检出率为8.70%,与单一RT-PCR检测结果符合率为98.6%。本研究建立的检测方法快速简便,可以用于疾病的初步筛选,对临床早期诊断和流行病学调查具有重要意义。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 猪捷申病毒 mRT-PCR
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猪繁殖-呼吸综合征病毒上海株的分离鉴定 被引量：10
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作者 严亚贤 孙建和 +2 位作者 王恒安 陆雅君 刘永德 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第3期161-163,共3页
从上海地区 5个发病猪场的病料中 ,分离到 3株致Marc_145细胞病变的病毒 :SH1、SH2 和SH3,理化特性研究表明 ,3株分离毒均对氯仿、乙醚、甲醛、热 (5 6℃ )、酸 (pH6以下 )、碱 (pH8以上 )敏感。负染可见病毒以大小不等的具囊膜的球形... 从上海地区 5个发病猪场的病料中 ,分离到 3株致Marc_145细胞病变的病毒 :SH1、SH2 和SH3,理化特性研究表明 ,3株分离毒均对氯仿、乙醚、甲醛、热 (5 6℃ )、酸 (pH6以下 )、碱 (pH8以上 )敏感。负染可见病毒以大小不等的具囊膜的球形粒子为主 ,囊膜上有纤突 ,直径为 6 0～ 10 0nm ;超薄切片可见病毒粒子分散在细胞浆内 ,直径为 45～ 80nm。间接免疫荧光试验表明 ,3株分离毒均与PRRSV高免血清呈强阳性反应 ,而与HCV、PPV、PRV、TGEV高免血清的反应均呈阴性。综上可见 。 展开更多
关键词 猪繁殖-呼吸综合征病毒 分离 鉴定 上海株
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