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猪源肠外致病性大肠杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立
被引量:
1
1
作者
程家园
李亮
+4 位作者
邢刚
刘雪兰
孙裴
魏建忠
李郁
《养猪》
2022年第2期89-94,共6页
利用制备的猪源肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)全菌体蛋白建立一种检测猪源ExPEC抗体的间接ELISA方法。将2株猪源ExPEC SDjie18-10(O;)、HByan18-2(O;)超声裂解的全菌体蛋白作为包被抗原,对反应条件进行优化,建立检测猪源ExPEC抗体的间接EL...
利用制备的猪源肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)全菌体蛋白建立一种检测猪源ExPEC抗体的间接ELISA方法。将2株猪源ExPEC SDjie18-10(O;)、HByan18-2(O;)超声裂解的全菌体蛋白作为包被抗原,对反应条件进行优化,建立检测猪源ExPEC抗体的间接ELISA方法,并进行临床应用与评价。该方法的最佳条件:包被抗原浓度为15μg/m L,37℃1 h+4℃过夜;2%BSA于37℃封闭2 h;血清稀释度为1∶800,37℃孵育30 min;酶标二抗稀释度为1∶5 000,37℃作用30 min;显色时间为37℃15 min。该方法可特异性检测猪源ExPEC抗体,阳性血清稀释至1∶6 400仍可检出,与其他猪病原阳性血清均无交叉反应,批内及批间变异系数均小于10%。应用间接ELISA与MAT进行符合性比较及临床猪血清样品感染抗体的同步检测,两种方法的符合率分别为93.33%和94.50%且无显著性差异(P>0.05),具有较高的均一性,同时间接ELISA的感染抗体阳性检出率(19.00%)略高于MAT(17.50%),两者检测结果高度一致(K=0.816)。基于猪源ExPEC全菌体蛋白建立的猪源ExPEC抗体间接ELISA检测方法,具有良好的特异性、敏感性和重复性以及临床应用的可靠性,可用于猪源ExPEC的免疫监测和流行病学调查。
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关键词
猪源expec
全菌体蛋白
间接ELISA
抗体检测
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题名
猪源肠外致病性大肠杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立
被引量:
1
1
作者
程家园
李亮
邢刚
刘雪兰
孙裴
魏建忠
李郁
机构
安徽农业大学动物科技学院
马鞍山史记动物健康管理有限公司
出处
《养猪》
2022年第2期89-94,共6页
基金
国家星火计划重点项目(2014GA710002)
安徽省重点研究与开发计划(面上攻关)项目(201904a06020013)
+1 种基金
安徽省长三角联合科技攻关项目(1101c0603065)
安徽省生猪产业体系基金[皖农科(2016)84号]。
文摘
利用制备的猪源肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)全菌体蛋白建立一种检测猪源ExPEC抗体的间接ELISA方法。将2株猪源ExPEC SDjie18-10(O;)、HByan18-2(O;)超声裂解的全菌体蛋白作为包被抗原,对反应条件进行优化,建立检测猪源ExPEC抗体的间接ELISA方法,并进行临床应用与评价。该方法的最佳条件:包被抗原浓度为15μg/m L,37℃1 h+4℃过夜;2%BSA于37℃封闭2 h;血清稀释度为1∶800,37℃孵育30 min;酶标二抗稀释度为1∶5 000,37℃作用30 min;显色时间为37℃15 min。该方法可特异性检测猪源ExPEC抗体,阳性血清稀释至1∶6 400仍可检出,与其他猪病原阳性血清均无交叉反应,批内及批间变异系数均小于10%。应用间接ELISA与MAT进行符合性比较及临床猪血清样品感染抗体的同步检测,两种方法的符合率分别为93.33%和94.50%且无显著性差异(P>0.05),具有较高的均一性,同时间接ELISA的感染抗体阳性检出率(19.00%)略高于MAT(17.50%),两者检测结果高度一致(K=0.816)。基于猪源ExPEC全菌体蛋白建立的猪源ExPEC抗体间接ELISA检测方法,具有良好的特异性、敏感性和重复性以及临床应用的可靠性,可用于猪源ExPEC的免疫监测和流行病学调查。
关键词
猪源expec
全菌体蛋白
间接ELISA
抗体检测
Keywords
porcine
expec
enomome protein
indirect ELISA
antibody detection
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
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1
猪源肠外致病性大肠杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立
程家园
李亮
邢刚
刘雪兰
孙裴
魏建忠
李郁
《养猪》
2022
1
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