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猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因的克隆与表达研究
1
作者
钱坤
《畜禽业》
2019年第11期27-27,共1页
多杀性巴氏杆菌可以直接引起猪肺疫、禽霍乱、牛出血性败血症、猪萎缩性鼻炎等病症,对养殖业影响非常大。据调查研究显示,皮肤坏死外毒素是产毒素多杀性巴氏杆菌的重要因此和保护性抗原。基于此,重点研究猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌tox...
多杀性巴氏杆菌可以直接引起猪肺疫、禽霍乱、牛出血性败血症、猪萎缩性鼻炎等病症,对养殖业影响非常大。据调查研究显示,皮肤坏死外毒素是产毒素多杀性巴氏杆菌的重要因此和保护性抗原。基于此,重点研究猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因克隆与表达。
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关键词
猪源d型产毒素多杀性巴氏杆菌
toxA基因
克隆
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职称材料
猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌毒素基因的原核表达
被引量:
1
2
作者
江涛
谭春萍
+3 位作者
任灵芝
黄百花
刘文娟
陆芹章
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010年第12期64-68,共5页
参照GenBank收录的产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因序列(AF240778),设计一对引物,从猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌中扩增出toxA编码区3 858 bp的片段,将其克隆至原核表达载体PET-32a,转入大肠埃希菌BL21(DE3)中进行融合表达多杀性巴氏杆菌...
参照GenBank收录的产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因序列(AF240778),设计一对引物,从猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌中扩增出toxA编码区3 858 bp的片段,将其克隆至原核表达载体PET-32a,转入大肠埃希菌BL21(DE3)中进行融合表达多杀性巴氏杆菌毒素。SDS-PAGE和Western blot分析证实,该表达产物以包涵体形式存在,大小约175 ku。动物试验结果表明,重组蛋白具有良好的免疫原性、反应原性及一定的生物学活性。通过间接ELISA方法检测抗毒素的猪阳性血清,表达重组蛋白较天然蛋白具有更高的特异性,为多杀性巴氏杆菌毒素进一步应用奠定了基础。
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关键词
猪
源
d
-
型
产
毒素多
杀
巴氏杆菌
毒素
基因
原核表达
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职称材料
猪D型产毒素多杀性巴氏杆菌毒素分段基因的原核表达
3
作者
黄百花
刘文娟
+5 位作者
李志勇
谭春萍
周松峰
谭颖翌
罗佳
陆芹章
《广西农业科学》
CAS
CSCD
2010年第6期598-601,共4页
根据GenBank已发表的产毒素多杀性巴氏杆菌(T+Pm)toxA基因序列(AF240778)设计1对引物,从猪源D型T+Pm中扩增出toxA基因片段(3858 bp),再根据toxA基因序列设计3对引物,分别扩增出ZQ(1084 bp)、ZH(1092 bp)、HM(906 bp)3个分段基因,将其克...
根据GenBank已发表的产毒素多杀性巴氏杆菌(T+Pm)toxA基因序列(AF240778)设计1对引物,从猪源D型T+Pm中扩增出toxA基因片段(3858 bp),再根据toxA基因序列设计3对引物,分别扩增出ZQ(1084 bp)、ZH(1092 bp)、HM(906 bp)3个分段基因,将其克隆至原核表达载体pET32a,转入大肠杆菌BL21中进行融合表达。经SDS-PAGE和West-ern blotting检测分析,发现ZQ、HM基因的表达产物以包涵体形式存在,大小分别为75、50 kDa,ZH基因不表达。动物试验结果表明,HM重组蛋白具有良好的免疫原性、反应原性及一定的生物学活性,而ZQ重组蛋白没有免疫原性、反应原性及生物学活性。通过间接ELISA的方法检测抗毒素的阳性猪血清,结果表明,HM重组蛋白较天然蛋白具有更高的特异性。
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关键词
猪
d
型
产
毒素多
杀
巴氏杆菌
毒素
基因
分段
原核表达
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职称材料
猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究
被引量:
48
4
作者
唐先春
吴斌
+3 位作者
索绪峰
王大林
陈焕春
尹争艳
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期590-595,共6页
用PCR方法配合生化鉴定,从有肺炎症状猪的肺脏及进行性萎缩性鼻炎(Progressive atrophic rhinitis,PAR)症状猪的鼻拭子中分离出66 株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida, Pm)。然后做了药敏试验,并用PCR方法对这66株Pm进行分型及毒...
用PCR方法配合生化鉴定,从有肺炎症状猪的肺脏及进行性萎缩性鼻炎(Progressive atrophic rhinitis,PAR)症状猪的鼻拭子中分离出66 株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida, Pm)。然后做了药敏试验,并用PCR方法对这66株Pm进行分型及毒素基因的检测, 用豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对产毒素多杀性巴氏杆菌(Toxigenic Pasteurella multocida, T+Pm)进一步鉴定。结果显示PCR鉴定与生化鉴定Pm结果完全一致;PCR分型表明有46株为D型Pm,18株为A型Pm,1株为B型Pm,1株无法定型;有8株用PCR检测为T+ Pm;豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对这8株T+Pm的进一步鉴定也表明均为产毒素菌株。所鉴定的8 株T+ Pm都为D型,都分离于有严重PAR症状的猪。
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关键词
多杀
性
巴氏杆菌
特
性
研究
分离鉴定
生物学
PCR方法
猪
生化鉴定
致死试验
萎缩
性
鼻炎
PCR鉴定
PcR检测
药敏试验
毒素
基因
Pm
进行
性
症状
PAR
分
型
小鼠
坏死
皮肤
豚鼠
d
型
肺脏
肺炎
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职称材料
我国北方地区猪传染性委缩性鼻炎的防治
5
作者
张景军
李晓勤
刘茂胜
《农业与技术》
2005年第3期122-122,128,共2页
猪传染性萎缩性鼻炎是一种慢性接触性传染病。本病又称地方性流行性萎缩性鼻炎,以鼻甲骨及鼻腔周围骨变形、萎缩和消失、慢性鼻炎为特征。由于北方地区冬季寒冷,塑料棚养猪大大增加,因此,随着养猪的集约化和工业化程度的提高,发病率有...
猪传染性萎缩性鼻炎是一种慢性接触性传染病。本病又称地方性流行性萎缩性鼻炎,以鼻甲骨及鼻腔周围骨变形、萎缩和消失、慢性鼻炎为特征。由于北方地区冬季寒冷,塑料棚养猪大大增加,因此,随着养猪的集约化和工业化程度的提高,发病率有增进的趋势,影响仔猪的生长发育,危害着养猪业。本文从病原、流行特点、临床症状、病理变化、诊断方法、预防治疗六个方面进行阐述。
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关键词
猪
传染
性
萎缩
性
鼻炎
支气管败血波
氏杆菌
的I相菌
产
毒素
型
多杀
性
巴氏杆菌
消毒
预防
治疗
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职称材料
题名
猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因的克隆与表达研究
1
作者
钱坤
机构
天津市农业生态环境监测与农产品质量检测中心
出处
《畜禽业》
2019年第11期27-27,共1页
文摘
多杀性巴氏杆菌可以直接引起猪肺疫、禽霍乱、牛出血性败血症、猪萎缩性鼻炎等病症,对养殖业影响非常大。据调查研究显示,皮肤坏死外毒素是产毒素多杀性巴氏杆菌的重要因此和保护性抗原。基于此,重点研究猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因克隆与表达。
关键词
猪源d型产毒素多杀性巴氏杆菌
toxA基因
克隆
分类号
S [农业科学]
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职称材料
题名
猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌毒素基因的原核表达
被引量:
1
2
作者
江涛
谭春萍
任灵芝
黄百花
刘文娟
陆芹章
机构
广西大学动物科学技术学院
固始县动物疫病预防控制中心
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010年第12期64-68,共5页
文摘
参照GenBank收录的产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因序列(AF240778),设计一对引物,从猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌中扩增出toxA编码区3 858 bp的片段,将其克隆至原核表达载体PET-32a,转入大肠埃希菌BL21(DE3)中进行融合表达多杀性巴氏杆菌毒素。SDS-PAGE和Western blot分析证实,该表达产物以包涵体形式存在,大小约175 ku。动物试验结果表明,重组蛋白具有良好的免疫原性、反应原性及一定的生物学活性。通过间接ELISA方法检测抗毒素的猪阳性血清,表达重组蛋白较天然蛋白具有更高的特异性,为多杀性巴氏杆菌毒素进一步应用奠定了基础。
关键词
猪
源
d
-
型
产
毒素多
杀
巴氏杆菌
毒素
基因
原核表达
Keywords
swine
toxigenic Pasteurella multoci
d
a serotype
d
toxA gene
prokaryotic expression
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
猪D型产毒素多杀性巴氏杆菌毒素分段基因的原核表达
3
作者
黄百花
刘文娟
李志勇
谭春萍
周松峰
谭颖翌
罗佳
陆芹章
机构
广西大学动物科学技术学院
出处
《广西农业科学》
CAS
CSCD
2010年第6期598-601,共4页
基金
广西科技攻关项目(桂科攻0537008-313)
文摘
根据GenBank已发表的产毒素多杀性巴氏杆菌(T+Pm)toxA基因序列(AF240778)设计1对引物,从猪源D型T+Pm中扩增出toxA基因片段(3858 bp),再根据toxA基因序列设计3对引物,分别扩增出ZQ(1084 bp)、ZH(1092 bp)、HM(906 bp)3个分段基因,将其克隆至原核表达载体pET32a,转入大肠杆菌BL21中进行融合表达。经SDS-PAGE和West-ern blotting检测分析,发现ZQ、HM基因的表达产物以包涵体形式存在,大小分别为75、50 kDa,ZH基因不表达。动物试验结果表明,HM重组蛋白具有良好的免疫原性、反应原性及一定的生物学活性,而ZQ重组蛋白没有免疫原性、反应原性及生物学活性。通过间接ELISA的方法检测抗毒素的阳性猪血清,结果表明,HM重组蛋白较天然蛋白具有更高的特异性。
关键词
猪
d
型
产
毒素多
杀
巴氏杆菌
毒素
基因
分段
原核表达
Keywords
toxigenic Pasteurella multoci
d
a of swine serotype
d
sub-toxA gene
fragment
prokaryotic expression.
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究
被引量:
48
4
作者
唐先春
吴斌
索绪峰
王大林
陈焕春
尹争艳
机构
华中农业大学动物病原微生物实验室
海口市美兰区罗牛山兽医站
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期590-595,共6页
基金
国家自然科学基金项目资助(30471292)
文摘
用PCR方法配合生化鉴定,从有肺炎症状猪的肺脏及进行性萎缩性鼻炎(Progressive atrophic rhinitis,PAR)症状猪的鼻拭子中分离出66 株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida, Pm)。然后做了药敏试验,并用PCR方法对这66株Pm进行分型及毒素基因的检测, 用豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对产毒素多杀性巴氏杆菌(Toxigenic Pasteurella multocida, T+Pm)进一步鉴定。结果显示PCR鉴定与生化鉴定Pm结果完全一致;PCR分型表明有46株为D型Pm,18株为A型Pm,1株为B型Pm,1株无法定型;有8株用PCR检测为T+ Pm;豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对这8株T+Pm的进一步鉴定也表明均为产毒素菌株。所鉴定的8 株T+ Pm都为D型,都分离于有严重PAR症状的猪。
关键词
多杀
性
巴氏杆菌
特
性
研究
分离鉴定
生物学
PCR方法
猪
生化鉴定
致死试验
萎缩
性
鼻炎
PCR鉴定
PcR检测
药敏试验
毒素
基因
Pm
进行
性
症状
PAR
分
型
小鼠
坏死
皮肤
豚鼠
d
型
肺脏
肺炎
Keywords
Pm
T +Pm
PCR
typing
me
d
icine sensitivity
分类号
S858.315.1 [农业科学—临床兽医学]
S858.31 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
我国北方地区猪传染性委缩性鼻炎的防治
5
作者
张景军
李晓勤
刘茂胜
机构
黑龙江省虎林市宝东镇农业技术综合服务中心
黑龙江省虎林市东方红镇农业技术综合服务中心
出处
《农业与技术》
2005年第3期122-122,128,共2页
文摘
猪传染性萎缩性鼻炎是一种慢性接触性传染病。本病又称地方性流行性萎缩性鼻炎,以鼻甲骨及鼻腔周围骨变形、萎缩和消失、慢性鼻炎为特征。由于北方地区冬季寒冷,塑料棚养猪大大增加,因此,随着养猪的集约化和工业化程度的提高,发病率有增进的趋势,影响仔猪的生长发育,危害着养猪业。本文从病原、流行特点、临床症状、病理变化、诊断方法、预防治疗六个方面进行阐述。
关键词
猪
传染
性
萎缩
性
鼻炎
支气管败血波
氏杆菌
的I相菌
产
毒素
型
多杀
性
巴氏杆菌
消毒
预防
治疗
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因的克隆与表达研究
钱坤
《畜禽业》
2019
0
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职称材料
2
猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌毒素基因的原核表达
江涛
谭春萍
任灵芝
黄百花
刘文娟
陆芹章
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010
1
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职称材料
3
猪D型产毒素多杀性巴氏杆菌毒素分段基因的原核表达
黄百花
刘文娟
李志勇
谭春萍
周松峰
谭颖翌
罗佳
陆芹章
《广西农业科学》
CAS
CSCD
2010
0
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职称材料
4
猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究
唐先春
吴斌
索绪峰
王大林
陈焕春
尹争艳
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
48
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职称材料
5
我国北方地区猪传染性委缩性鼻炎的防治
张景军
李晓勤
刘茂胜
《农业与技术》
2005
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