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口服人参茎叶皂苷微球对猪流行性腹泻病毒灭活疫苗的黏膜免疫增强作用
1
作者 苏菲 毛江昌 +4 位作者 徐丽华 叶十一 李军星 余斌 袁秀芳 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 北大核心 2025年第4期655-663,共9页
本研究旨在探明人参茎叶皂苷聚乳酸羟基乙酸纳米微球[ginseng stem-leaf saponin poly(lactic-co-glycolic acid)nanoparticles,GSLS-NPs]对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)灭活疫苗的黏膜免疫增强效果。选取2... 本研究旨在探明人参茎叶皂苷聚乳酸羟基乙酸纳米微球[ginseng stem-leaf saponin poly(lactic-co-glycolic acid)nanoparticles,GSLS-NPs]对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)灭活疫苗的黏膜免疫增强效果。选取25头“杜+长+大”三元杂交母猪,在产前连续14 d分别用GSLS-NPs、GSLS水溶液、空微球和生理盐水进行饲喂,随后接种PEDV灭活疫苗。分娩后,采集母猪血液和粪便以及仔猪的粪便,用于抗体、细胞因子和生化指标检测。结果显示:与仅接种PEDV灭活疫苗相比,口服GSLS-NPs能够持续增加母猪外周血和肠黏膜内白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的浓度。这种高水平的细胞因子状态能够维持至分娩后7 d以上。此外,口服GSLS-NPs显著促进了母猪肠黏膜内PEDV特异性免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)抗体的产生,该高水平IgA抗体状态能够维持至分娩后21 d。对于新生仔猪,GSLS-NPs显著增强了其体内的母源抗体水平,这种高水平状态可持续至出生后14 d。此外,体外试验表明,GSLS-NPs对猪小肠上皮细胞IPEC-J2生长无显著抑制作用。体内试验也显示,GSLS-NPs对母猪的肝肾功能无显著影响。综上所述,GSLS-NPs是一种安全且极具潜力的黏膜免疫佐剂。本研究不仅为新型PEDV疫苗佐剂的研发提供了有力依据,也为PEDV的防控提供了新的策略。 展开更多
关键词 人参茎叶皂苷 聚乳酸羟基乙酸 纳米微球 猪流行性腹泻病毒灭活疫苗 黏膜免疫佐剂
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E515-A对猪流行性腹泻病毒灭活疫苗的佐剂作用 被引量：1
2
作者 麻勇棋 徐伟 +1 位作者 王越珉 胡松华 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期56-61,共6页
E515-A是一种含人参茎叶皂苷(GSLS)的白油佐剂。将E515-A和含猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗原的水相在低剪切力(转速200r·min^(-1))下混合,形成油乳剂疫苗。为观察E515-A对PEDV灭活疫苗的免疫增强作用,将72只ICR小鼠随机分成6组,分别进... E515-A是一种含人参茎叶皂苷(GSLS)的白油佐剂。将E515-A和含猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗原的水相在低剪切力(转速200r·min^(-1))下混合,形成油乳剂疫苗。为观察E515-A对PEDV灭活疫苗的免疫增强作用,将72只ICR小鼠随机分成6组,分别进行2次(间隔2周)皮下注射:(1)0.9%NaCl溶液,(2)PEDV抗原+0.9%NaCl溶液,(3)PEDV抗原+GSLS,(4)PEDV抗原+白油佐剂,(5)PEDV抗原+E515-A和(6)PEDV抗原+氢氧化铝铝胶。于一免后24h采血检测血清IFN-γ水平和NK细胞杀伤活性;于二免后检测血清特异性IgG及IgG1和IgG2a水平,制备脾淋巴细胞检测细胞增殖能力。结果表明,E515-A对于PEDV疫苗诱导的免疫反应具有显著的促进作用,免疫增强效果优于铝胶佐剂。和对照组比较,E515-A油佐剂可以显著促进免疫小鼠的NK细胞杀伤活性,促进细胞因子IFN-γ的产生,增强脾淋巴细胞对刀豆蛋白A(ConA)和脂多糖(LPS)刺激的增殖应答能力,提高血清IgG及其亚类IgG1和IgG2a水平。为增强猪的疫苗免疫效果,E515-A作为猪疫苗的佐剂值得进一步研究。 展开更多
关键词 E515-A 人参茎叶皂甙 猪流行性腹泻病毒疫苗 佐剂
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猪流行性腹泻病毒灭活疫苗临床免疫效果评价 被引量：3
3
作者 刘德琴 肖敏 +2 位作者 卢昌 曹华斌 刘建 《猪业科学》 2022年第4期76-78,共3页
猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)引起猪的腹泻、呕吐、脱水及对仔猪高致死率的一种接触性肠道传染病,猪即使耐过也会降低经济效益。20世纪80年代初PED在我国... 猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)引起猪的腹泻、呕吐、脱水及对仔猪高致死率的一种接触性肠道传染病,猪即使耐过也会降低经济效益。20世纪80年代初PED在我国陆续发生,目前不同阶段不同品系的猪只,对此病均有高度易感性,仔猪死亡率高达80%~100%。自2010年末开始,我国猪场陆续暴发了由PEDV变异毒株引起的“顽固性腹泻”疫情,严重影响我国养猪业健康发展,给我国养猪业造成巨大经济损失。由于PED在现阶段未有特效药能够治疗,在养殖管理中,仔猪免疫防治工作尤为重要。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 顽固性腹泻 养猪业 灭活疫苗 变异毒株 免疫防治 肠道传染病 PEDV
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Eudragit L100修饰的铝锰双金属有机框架作为猪流行性腹泻灭活疫苗口服递送载体的初步评价
4
作者 胡米 沈瑶歆 +4 位作者 范宝超 孙敏 周金柱 郭容利 李彬 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第5期2292-2300,共9页
本研究旨在对制备的Eudragit L100修饰的铝锰双金属有机框架纳米粒作为灭活猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)口服递送载体进行评价。利用金属离子Al3+、Mn2+和2-氨基对苯二甲酸有机配体之间的配位作用,将灭活PED... 本研究旨在对制备的Eudragit L100修饰的铝锰双金属有机框架纳米粒作为灭活猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)口服递送载体进行评价。利用金属离子Al3+、Mn2+和2-氨基对苯二甲酸有机配体之间的配位作用,将灭活PEDV原位封装Al/Mn-MOF中,得到Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒。通过静电相互作用,将阴离子聚合物Eudragit L100结合于Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒表面,得到L100@Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒。采用扫描电子显微镜考察其形态、纳米粒度电位仪测定表面电势、傅里叶红外光谱仪分析组成成分、X射线衍射仪测定晶格结构。采用ELISA和抗原检测卡表征对灭活PEDV的负载效率。配制模拟胃液考察L100@Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒的稳定性,并用ELISA测定灭活PEDV的释放率。使用激光共聚焦观察巨噬细胞对Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒的摄取。采用CCK8法测定不同浓度的纳米粒的细胞毒性。采用ELISA试剂盒测定Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒对巨噬细胞分泌免疫调节因子的影响。结果表明,L100@Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒成功制备,尺寸小于1μm。在PEDV/金属离子/有机配体投料比为0.42∶1∶1时,对灭活PEDV的负载率可达到99.6%。L100@Al/Mn-MOF@PEDV在模拟胃液中孵育2 h仍具有高稳定性,对灭活PEDV的释放率仅为12.73%左右。在小鼠RAW264.7细胞的摄取试验中,用激光共聚焦观察到细胞对Al/Mn-MOF@PEDV摄取情况优于未经负载的灭活PEDV。且Al/Mn-MOF@PEDV能够显著增强RAW264.7细胞中Th1型因子IFN-γ和Th2型因子IL-4的表达。本研究为PED灭活疫苗口服载体的设计提供了新思路,并为后续应用于动物免疫的研究奠定基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 灭活疫苗 纳米载体 金属有机框架 口服递送
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空置猪场的猪流行性腹泻病毒检测 被引量：1
5
作者 李阳 张越 +6 位作者 路浩 邢金超 李振坤 董芳婷 徐盟龙 袁晋 魏战勇 《动物医学进展》 北大核心 2025年第6期7-12,共6页
为探讨猪流行性腹泻病毒(PEDV)在规模化养殖场环境中的分布规律,制定精准有效的猪场生物安全防控措施,采用实时荧光定量PCR方法,对采集自河南省信阳市某空置6个月猪场的366份环境样品进行了PEDV核酸检测。结果显示,该猪场环境样品中有12... 为探讨猪流行性腹泻病毒(PEDV)在规模化养殖场环境中的分布规律,制定精准有效的猪场生物安全防控措施,采用实时荧光定量PCR方法,对采集自河南省信阳市某空置6个月猪场的366份环境样品进行了PEDV核酸检测。结果显示,该猪场环境样品中有124份PEDV核酸阳性,总体阳性率为33.88%;不同区域PEDV检出率由高到低依次为排污系统50.00%(4/8)、猪舍环境33.92%(116/342)、洗消中心25.00%(4/16);值得注意的是,洗消中心的减速带、猪舍环境内的漏粪地板及排污系统的粪沟检出率均为100%。结果表明,该猪场清洗消毒空置6个月后仍有大量PEDV核酸残留。总体来说,研究发现了猪场清洗消毒的部分盲区,讨论了病毒残留点和猪场建设规划,以及空气、饲料和环境等因素间的关系,指出了猪场现有清洗流程的漏洞,为猪场建立完善的生物安全防控体系提供了参考。 展开更多
关键词 空置猪场 猪流行性腹泻病毒 猪场环境 清洗消毒盲区
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猪流行性腹泻病毒特征及其疫苗研究 被引量：1
6
作者 任红 沈继平 +4 位作者 李培发 刘发金 王金海 高仲业 蒋传丽 《广东饲料》 2025年第6期44-46,共3页
猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒引发的急性肠道传染病,在全球范围内广泛流行,对养猪业造成了严重的损害。文章综述了猪流行性腹泻病毒(PEDV)的病毒学特征、流行病学以及疫苗研究进展,为深入研究PEDV特性及PED防控提供参考依据。
关键词 猪流行性腹泻 α冠状病毒 疫苗 研究进展
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猪流行性腹泻病毒S蛋白结构、功能及疫苗研究进展
7
作者 胡灵子 董婉玉 +3 位作者 宣如刚 周莹珊 宋厚辉 王晓杜 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第3期222-228,共7页
猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的一种使仔猪高度腹泻、脱水和高死亡率的肠道传染病。本文对近年来关于S蛋白的结构和其在病毒入侵宿主细胞、诱导宿主产生中和抗体、病毒复制和决定病毒毒力方面的功能,以及基于S蛋白... 猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的一种使仔猪高度腹泻、脱水和高死亡率的肠道传染病。本文对近年来关于S蛋白的结构和其在病毒入侵宿主细胞、诱导宿主产生中和抗体、病毒复制和决定病毒毒力方面的功能,以及基于S蛋白在疫苗研制中的研究进展进行综述,S基因编码的刺突(S)蛋白主要功能包括:介导PEDV与宿主细胞的结合,是PEDV感染细胞的关键蛋白;介导病毒的组织或细胞嗜性;诱导机体产生中和抗体等方面。国内外相关领域的学者开展了基于PEDV S蛋白功能的PED新型疫苗研发,主要针对亚单位疫苗、病毒载体疫苗、DNA疫苗等新型疫苗开展研究,新型疫苗与常用的灭活苗或弱毒苗相比也更加安全有效。本文的综述为PEDV进一步的基础及应用研究提供了理论支撑。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 S蛋白 结构 功能 疫苗
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猪流行性腹泻病毒BZ01株的分离鉴定及培养特性研究
8
作者 魏凤 张文通 +4 位作者 孟庆伟 吕素芳 王艳 张志亭 李峰 《动物医学进展》 北大核心 2025年第3期6-11,共6页
用已建立的RT-PCR方法对采集的疑似猪流行性腹泻病猪的粪便样品进行检测,选用Vero细胞分离培养检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性的样品,连续传3代后用RT-PCR方法鉴定,对其S1基因进行序列测定和遗传进化分析,并用Vero细胞对分离毒体外培... 用已建立的RT-PCR方法对采集的疑似猪流行性腹泻病猪的粪便样品进行检测,选用Vero细胞分离培养检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性的样品,连续传3代后用RT-PCR方法鉴定,对其S1基因进行序列测定和遗传进化分析,并用Vero细胞对分离毒体外培养所需的接毒时间、收毒时间、接毒剂量及胰蛋白酶浓度进行试验,筛选出该株PEDV体外培养最佳条件。结果表明,该分离株为G2b型,在Vero细胞增殖最佳接毒时间为培养24 h细胞长成单层时,最佳收毒时间为接毒后48 h,最佳接毒剂量为10%,最佳胰蛋白酶浓度为15μg/mL,研究结果可为PEDV的分离培养及提高病毒效价提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 分离 鉴定 培养特性
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猪流行性腹泻病毒疫苗研究现状及其工艺优化
9
作者 李凯善 葛忠凯 +2 位作者 彭媛芳 尹沛 冯嫣芳 《特种经济动植物》 2025年第6期75-76,138,共3页
猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的急性传染病,对新生仔猪影响较大,死亡率较高,容易造成较大经济损失。疫苗是预防PED的主要措施之一,但现阶段疫苗的生物制品工艺需要优化。对PEDV病毒结构蛋白及功能、疫苗分类及优化... 猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的急性传染病,对新生仔猪影响较大,死亡率较高,容易造成较大经济损失。疫苗是预防PED的主要措施之一,但现阶段疫苗的生物制品工艺需要优化。对PEDV病毒结构蛋白及功能、疫苗分类及优化策略进行阐述,以期为PEDV病毒疫苗生产以及PED防控提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 疫苗 生物制品 工艺 精准优化
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猪流行性腹泻灭活疫苗毒株的培育 被引量：3
10
作者 麻文静 沈娜 +12 位作者 苏红萍 陈瑞 肖普辉 武永杰 代德华 李准 赵光明 杨文欢 吴艳 马飞 王峰 张磊 冯平 《中国动物检疫》 CAS 2024年第3期107-112,共6页
为培育出毒力弱、病毒含量高、免疫原性好的猪流行性腹泻病毒(PEDV)疫苗株,将PEDV-YL株在Vero细胞上连续传代并进行噬斑克隆纯化,测定病毒含量后进行毒力试验及免疫原性试验。结果显示:将健康仔猪接种F22代clone6、clone7毒种后,试验猪... 为培育出毒力弱、病毒含量高、免疫原性好的猪流行性腹泻病毒(PEDV)疫苗株,将PEDV-YL株在Vero细胞上连续传代并进行噬斑克隆纯化,测定病毒含量后进行毒力试验及免疫原性试验。结果显示:将健康仔猪接种F22代clone6、clone7毒种后,试验猪均表现出腹泻症状且均能检测到PEDV,剖检后各脏器未见异常;攻毒保护率为60%,各脏器均未出现病变。健康仔猪接种F32代clone10、clone12毒种后,60%试验猪出现腹泻症状且检出PEDV,剖检后各脏器无明显变化;一次免疫组攻毒保护率为60%~80%,二次免疫组为100%,各脏器均未发生病变。F32代clone10病毒含量略低于clone12且两者免疫原性相当。结果说明:PEDV-YL株F32代clone12更适合作为疫苗研制候选毒株,且二次免疫保护效果更好。本研究为猪流行性腹泻灭活疫苗研发提供了技术支撑。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 培育 病毒含量 毒力试验 免疫原性试验
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猪流行性腹泻病毒蛋白与宿主蛋白相互作用的研究进展 被引量：1
11
作者 周敏 汤德元 +6 位作者 曾智勇 王彬 黄涛 胡雯雯 毛茵茗 周飘 何松 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2600-2612,共13页
猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的高度接触性传染病,主要症状为呕吐、水样腹泻、脱水和体重下降,哺乳仔猪感染后死亡率可高达100%,给全球养猪业带来了巨... 猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的高度接触性传染病,主要症状为呕吐、水样腹泻、脱水和体重下降,哺乳仔猪感染后死亡率可高达100%,给全球养猪业带来了巨大的经济损失。目前尚无有效的治疗药物,且其疫苗也存在一定的局限性。在病毒感染过程中,病毒蛋白与宿主蛋白通过相互作用,一方面促进病毒逃避宿主先天免疫以完成其复制,另一方面调节宿主免疫反应以抑制病毒感染。因此,鉴定病毒蛋白与宿主蛋白相互作用对于了解宿主对病毒感染的防御和病毒性传染病的发病机制至关重要,从而发现新的抗病毒靶点。本文详细阐述了PEDV感染过程中的病毒蛋白与宿主蛋白的相互作用,总结了PEDV的致病机制,以期为设计有效的疫苗或药物来预防和控制PEDV的传播提供新思路。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 病毒蛋白 宿主蛋白 蛋白相互作用
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猪流行性腹泻疫苗研究进展 被引量：4
12
作者 邬沛伶 李依璇 +4 位作者 王浩杰 李亚菲 刘绍蒙 刘青芸 王湘如 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1042-1058,共17页
猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种传染性肠道疾病,可造成猪群暴发腹泻和初生仔猪大量死亡。2010年,高致病性的PEDV变异毒株出现并在全球范围内传播,... 猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种传染性肠道疾病,可造成猪群暴发腹泻和初生仔猪大量死亡。2010年,高致病性的PEDV变异毒株出现并在全球范围内传播,已成为当前猪腹泻病的主要病原之一,对全球养猪业造成巨大损失。疫苗免疫是防控PED的最主要措施。现有PED商品化疫苗以传统灭活疫苗和弱毒疫苗为主。近年来,随着基因工程技术的发展,亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗、重组活载体疫苗、转基因植物疫苗和核酸疫苗等的研究也都取得了突破性进展。由于PEDV变异频繁,不断给疫苗研发带来新的挑战,高效的疫苗研发平台及基因工程疫苗对未来PED防控至关重要。本文对PEDV的病原学特征和最新的疫苗研究进展进行了系统综述,并展望未来的疫苗发展方向,以期为有效防控PED提供参考依据。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 猪流行性腹泻病毒 灭活疫苗 弱毒疫苗 基因工程疫苗 核酸疫苗
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猪流行性腹泻灭活疫苗佐剂筛选 被引量：1
13
作者 沈娜 麻文静 +12 位作者 苏红萍 陈瑞 肖普辉 武永杰 代德华 李准 赵光明 杨文欢 吴艳 马飞 王峰 张磊 冯平 《中国动物检疫》 CAS 2024年第2期108-112,共5页
为探究不同佐剂对猪流行性腹泻灭活疫苗免疫效果的影响,选用水包油佐剂A(O/W)、油包水佐剂B(W/O)和双相佐剂C(W/O/W)3种不同佐剂配制疫苗,分别接种3~5日龄仔猪后攻毒,综合评价不同佐剂的免疫效果。结果显示:A、B佐剂组疫苗免疫猪的抗体... 为探究不同佐剂对猪流行性腹泻灭活疫苗免疫效果的影响,选用水包油佐剂A(O/W)、油包水佐剂B(W/O)和双相佐剂C(W/O/W)3种不同佐剂配制疫苗,分别接种3~5日龄仔猪后攻毒,综合评价不同佐剂的免疫效果。结果显示:A、B佐剂组疫苗免疫猪的抗体水平低于C佐剂组;攻毒后进行猪流行性腹泻病毒检测发现,仅C佐剂组试验猪全部呈阴性;剖检所有疫苗免疫组试验猪均未发现脏器病变。结果说明:双相佐剂制备的灭活疫苗免疫效果明显优于水包油和油包水佐剂疫苗,且安全性较高,可优先选择双相佐剂制备猪流行性腹泻灭活疫苗。本研究为猪流行性腹泻疫苗制备、生产提供了技术支撑。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 灭活疫苗 佐剂 选择
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猪流行性腹泻病毒感染仔猪的免疫器官组织病理学和部分细胞因子变化
14
作者 李豪 徐巧玉 +6 位作者 靳晓慧 陈红英 李庆豪 金鑫 马俊兴 马世杰 魏战勇 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第10期5190-5201,共12页
为探究猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染对仔猪免疫器官的影响,选取8头5日龄健康仔猪作为研究对象,随机分为对照组(n=4)和PEDV感染组(n=4)。PEDV感染仔猪后观察并记录临床症状,在病毒感染2 d后实施安乐死并... 为探究猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染对仔猪免疫器官的影响,选取8头5日龄健康仔猪作为研究对象,随机分为对照组(n=4)和PEDV感染组(n=4)。PEDV感染仔猪后观察并记录临床症状,在病毒感染2 d后实施安乐死并采集胸腺、脾、肠系膜淋巴结、髂下淋巴结、腹股沟淋巴结、肩前淋巴结、下颌淋巴结和肺门淋巴结。利用HE染色观察各免疫器官的病理学变化,通过IHC、Western blot和RT-qPCR分别检测病毒在免疫器官的分布、表达量以及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、干扰素-β(interferonβ,IFN-β)、白细胞介素-1(interleukin 1,IL-1)与白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)表达量的变化。结果显示:仔猪感染PEDV 1 d后发生水样腹泻。第二天剖检观察到各淋巴结有不同程度的肿大。HE染色发现PEDV主要引起脾脏红髓部分增多,脾索和脾窦界限模糊,脾窦中可见大量的细胞破裂;肠系膜淋巴结中小梁增生变厚,淋巴小结结构模糊不清,数量减少。IHC和RT-qPCR结果显示,PEDV在脾脏、肠系膜淋巴结等免疫器官均有分布,其中肠系膜淋巴结内病毒载量最高;而Western blot未能在以上组织中检测到该病毒。RT-qPCR检测脾脏和肠系膜淋巴结结果表明TNF-α、IFN-β和IL-1均有不同程度的升高,IL-6未发生明显变化。上述结果说明PEDV感染仔猪后部分免疫器官结构受到破坏,且影响了脾脏和肠系膜淋巴结中免疫相关因子TNF-α、IFN-β和IL-1的转录水平,这也为深入研究PEDV的致病机制提供了坚实的基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 仔猪 免疫器官 病理损伤 免疫相关因子 病毒分布
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猪流行性腹泻病毒感染仔猪空肠组织的转录组学分析
15
作者 曾德平 陆颖 +8 位作者 余科辰 卢峥朴 柏家果 秦秋英 隆美金 陈樱 韦祖樟 黄伟坚 欧阳康 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期11-18,共8页
猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染仔猪可引起严重腹泻,导致肠道黏膜损伤、免疫功能低下。为探究PEDV感染仔猪空肠基因组转录水平的变化,筛选宿主免疫应答的差异表达基因,本研究收集PEDV感染仔猪的空肠组织,利用RNA-Seq技术进行转录组学测序... 猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染仔猪可引起严重腹泻,导致肠道黏膜损伤、免疫功能低下。为探究PEDV感染仔猪空肠基因组转录水平的变化,筛选宿主免疫应答的差异表达基因,本研究收集PEDV感染仔猪的空肠组织,利用RNA-Seq技术进行转录组学测序分析。RNA-seq结果显示,与正常未感染仔猪相比,PEDV感染仔猪存在339个显著差异表达基因(DEGs),其中182个上调基因,157个下调基因。GO分子功能结果显示,免疫相关差异表达基因主要与免疫球蛋白和受体结合、T细胞增殖等有关。KEGG通路富集结果显示,差异表达基因主要涉及TNF信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用、Toll样受体信号通路、Janus激酶/信号转导与转录激活子信号通路以及RIG-I受体信号通路等;最后再利用qRT-PCR对差异表达基因进行验证,其结果与转录组学结果基本一致。本研究为进一步研究PEDV感染导致宿主免疫应答变化机制提供了科学依据。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 转录组分析 差异表达 RNA-SEQ 先天免疫
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猪流行性腹泻新型疫苗的研究进展
16
作者 刘晓琳 张传健 +6 位作者 郭仕琦 郭容利 陈赛赛 王志胜 姜平 王继春 白娟 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第3期229-236,共8页
猪流行性腹泻(PED)是一种以呕吐、腹泻脱水和对哺乳仔猪致死率高为特征的高度接触性猪肠道传染病,给猪场造成严重的经济损失。2010年以来,猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异株在我国猪群中暴发,对1周龄内仔猪致死率可达100%。传统的疫苗诱导... 猪流行性腹泻(PED)是一种以呕吐、腹泻脱水和对哺乳仔猪致死率高为特征的高度接触性猪肠道传染病,给猪场造成严重的经济损失。2010年以来,猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异株在我国猪群中暴发,对1周龄内仔猪致死率可达100%。传统的疫苗诱导抗体水平低,黏膜免疫反应不足,已不能提供充足的保护,因此,新型疫苗的研制是控制变异株的关键。目前研制的亚单位疫苗使用安全而免疫原性有待提高;重组病毒活载体疫苗可表达外源抗原,但免疫效力不稳定;细菌活载体疫苗口服可刺激黏膜免疫,但存在毒力返强风险;转基因植物疫苗表达产物安全可靠而产量不高;核酸疫苗花费低、制备简单但输入基因存在不可控性。本文从PED亚单位疫苗、重组病毒活载体疫苗、细菌活载体疫苗、转基因植物疫苗以及核酸疫苗五个方面进行综述,以期为PED的防控提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 亚单位疫苗 重组病毒活载体疫苗 细菌活载体疫苗 转基因植物疫苗 核酸疫苗
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猪流行性腹泻病毒S1蛋白的真核表达及中和性单克隆抗体制备
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作者 李春震 李青梅 +5 位作者 邹婉莹 孟泽锟 孙亚宁 杨苏珍 郭军庆 张改平 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第10期4854-4863,共10页
【目的】制备猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S1重组蛋白及其中和性单克隆抗体,为PEDV诊断试剂和新型疫苗研发提供材料。【方法】构建可表达S1蛋白的重组质粒,转染HEK293F细胞,以镍亲和层析和凝胶过滤层析进行... 【目的】制备猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S1重组蛋白及其中和性单克隆抗体,为PEDV诊断试剂和新型疫苗研发提供材料。【方法】构建可表达S1蛋白的重组质粒,转染HEK293F细胞,以镍亲和层析和凝胶过滤层析进行蛋白纯化。将PEDV CH/Hubei/2016毒株接种于Vero细胞进行培养增殖,对病毒液进行浓缩并利用凝胶过滤层析纯化PEDV,以SDS-PAGE及Western blotting对纯化的PEDV进行鉴定后免疫BALB/c小鼠以制备杂交瘤细胞;以间接ELISA及免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛选阳性杂交瘤细胞,并通过病毒中和试验筛选鉴定抗PEDV S1蛋白中和性单克隆抗体。【结果】SDS-PAGE和Western blotting结果显示,S1重组蛋白在HEK293F细胞培养上清中高效表达。获得TCID_(50)为1×10^(-6.5)/0.1 mL纯化的PEDV。筛选获得5株稳定分泌抗PEDV S1重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株2E1E10、4A8C8、8G9B11、9H8H1和10C9A5,其腹水的IPMA和ELISA效价分别为6.4×10^(-4)至1.28×10^(-5)和6.4×10^(-5)至1.024×10^(-7)。病毒中和试验结果显示,单克隆抗体2E1E10和4A8C8对PEDV有显著中和活性,对DR13毒株的半数抑制浓度(IC_(50))分别为1.212和1.203μg/mL,对CHHB毒株的IC 50分别为0.948和1.712μg/mL。【结论】本研究获得了具有良好抗原活性的PEDV S1重组蛋白和抗S1蛋白中和性单克隆抗体,为PEDV诊断试剂和疫苗研发奠定良好的研究基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) S1蛋白 单克隆抗体 中和活性 广谱反应性
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儿茶提取物对猪流行性腹泻病毒感染幼龄仔猪结肠的保护作用
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作者 李欢欢 余晨敏 +7 位作者 田晓榕 李瑞 李宗云 张焱焱 赵迪 王蕾 侯永清 吴涛 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1360-1369,共10页
【目的】以7日龄仔猪为研究对象,探究儿茶提取物(TCE)对猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染幼龄仔猪结肠的保护效果及机制。【方法】将体重相近的18头幼龄仔猪随机分为3组:对照组、PEDV组和TCE+PEDV组,每组6头猪。试验周期11 d,0~3 d为适应期,4... 【目的】以7日龄仔猪为研究对象,探究儿茶提取物(TCE)对猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染幼龄仔猪结肠的保护效果及机制。【方法】将体重相近的18头幼龄仔猪随机分为3组:对照组、PEDV组和TCE+PEDV组,每组6头猪。试验周期11 d,0~3 d为适应期,4~11 d为试验期。试验期对照组和PEDV组仔猪灌服人工奶,TCE+PEDV组仔猪灌服含有TCE(0.01 g/kg BW)的人工奶;试验第8天PEDV组及TCE+PEDV组仔猪灌服3 mL 10^(6) TCID _(50)/0.1 mL PEDV,对照组仔猪灌服3 mL DMEM培养基。试验第11天将所有仔猪麻醉后屠宰,采集仔猪结肠组织,测定TCE对PEDV感染仔猪结肠形态结构、抗氧化能力、炎性因子及离子通道相关基因表达的影响。【结果】与对照组相比,PEDV组仔猪结肠组织形态受损,隐窝深度显著增加(P<0.05);灌服TCE可有效缓解PEDV感染导致的仔猪结肠损伤,与PEDV组相比,TCE+PEDV组仔猪结肠隐窝深度显著变浅(P<0.05)。与对照组相比,PEDV感染组仔猪结肠中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著升高(P<0.05);与PEDV组相比,TCE+PEDV组仔猪结肠GSH-Px、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、髓过氧化物酶(MPO)活性均无显著变化(P>0.05)。PEDV感染后可检测到仔猪结肠组织内PEDV M、N、S基因表达,且干扰素(IFN)信号通路相关基因ISG 15、IRF 7,炎性因子基因IL-1β、IL-8、REG 3 G及离子通道相关基因AQP 10、APOB及MMP 13表达量均显著上调(P<0.05),IFN-β基因表达量显著下调(P<0.05);与PEDV组相比,TCE+PEDV组仔猪结肠中PEDV M、N、S基因及ISG 15、IL-1β、IL-8、REG 3 G、IRF 7、APOB、MMP 9基因表达量均显著下调(P<0.05),IFN-β基因表达量显著上调(P<0.05)。【结论】PEDV感染导致幼龄仔猪结肠组织黏膜损伤,灌服0.01 g/kg BW的TCE可缓解PEDV感染导致的结肠组织受损。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 儿茶提取物 结肠 炎症反应
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猪流行性腹泻病毒HNxp23株的分离鉴定及其基因特性分析
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作者 饶丹 秦锋 +11 位作者 阮梦凡 葛雨 张明旭 杨喜梅 李美佳 陈文雪 于林洋 赵攀登 胡静 刘向楠 郑全芳 董建国 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第9期79-86,共8页
为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本试验对2023年9月河南省西平县某规模化猪场疑似感染PEDV的腹泻猪进行样品采集、PCR鉴定、病毒分离、间接免疫荧光鉴定和电子显微镜观察,并对病毒重要基因进行测序分析。结果显示,成功... 为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本试验对2023年9月河南省西平县某规模化猪场疑似感染PEDV的腹泻猪进行样品采集、PCR鉴定、病毒分离、间接免疫荧光鉴定和电子显微镜观察,并对病毒重要基因进行测序分析。结果显示,成功分离得到1株PEDV毒株,命名为HNxp23。遗传进化分析结果显示,HNxp23毒株纤突蛋白基因S、膜蛋白基因M和辅助蛋白基因ORF3均与中国黑龙江分离毒株CH-HLJJS-2022位于同一分支,属于GⅡa亚型。氨基酸同源性分析结果显示,HNxp23毒株S和ORF3蛋白与中国黑龙江分离毒株CH-HLJJS-2022同源性最高,分别为98.7%和99.4%;M蛋白与中国北京分离毒株LZW同源性最高,为99.3%。S蛋白氨基酸抗原表位分析结果显示,与CV777毒株相比,HNxp23毒株S蛋白在抗原表位COE区、SS2区、SS6区和2C10区分别存在19、1、1和0个氨基酸差异。结果表明,本试验分离毒株HNxp23属于PEDV的GⅡa亚型,S蛋白在COE区易发生氨基酸突变。本试验结果可为河南地区PEDV的流行特征分析以及PEDV疫苗和药物的研发提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) S基因 M基因 ORF3基因
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紧密连接蛋白CLDN4促进猪流行性腹泻病毒感染
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作者 李程程 赵永祥 +6 位作者 曹秋霞 宋旭 李宇鹏 范宝超 郭容利 徐业芬 李彬 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2826-2835,共10页
紧密连接蛋白在多种病毒感染过程中起着重要作用,紧密连接蛋白4(claudin-4,CLDN4)是紧密连接蛋白家族中的主要成员之一,其在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染中作用尚不明确。为探索PEDV感染对CLDN4表达的... 紧密连接蛋白在多种病毒感染过程中起着重要作用,紧密连接蛋白4(claudin-4,CLDN4)是紧密连接蛋白家族中的主要成员之一,其在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染中作用尚不明确。为探索PEDV感染对CLDN4表达的影响以及CLDN4在PEDV感染中的作用,本研究通过荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测了PEDV感染后CLDN4的转录水平与蛋白表达情况。其次,构建了CLDN 4基因的真核表达质粒,设计了靶向CLDN 4的特异性干扰RNA,通过qPCR、Western blot、间接免疫荧光(IFA)和PEDV病毒滴度测定检测了过表达和敲减CLDN4对PEDV复制的影响。最后,检测了过表达CLDN4对PEDV吸附与侵入阶段的影响。结果显示,PEDV感染可上调细胞中CLDN 4的转录与蛋白表达水平,过表达CLDN4显著促进PEDV的复制,而干扰CLDN4表达抑制PEDV复制,并且CLDN4蛋白可促进PEDV的吸附与侵入。本研究表明CLDN4蛋白具有促进PEDV感染与复制的作用,为研究CLDN4的功能与解析PEDV的复制机制提供参考。 展开更多
关键词 CLDN4 猪流行性腹泻病毒 促进 感染
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