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猪流行性腹泻病毒BZ01株的分离鉴定及培养特性研究
1
作者 魏凤 张文通 +4 位作者 孟庆伟 吕素芳 王艳 张志亭 李峰 《动物医学进展》 北大核心 2025年第3期6-11,共6页
用已建立的RT-PCR方法对采集的疑似猪流行性腹泻病猪的粪便样品进行检测,选用Vero细胞分离培养检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性的样品,连续传3代后用RT-PCR方法鉴定,对其S1基因进行序列测定和遗传进化分析,并用Vero细胞对分离毒体外培... 用已建立的RT-PCR方法对采集的疑似猪流行性腹泻病猪的粪便样品进行检测,选用Vero细胞分离培养检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性的样品,连续传3代后用RT-PCR方法鉴定,对其S1基因进行序列测定和遗传进化分析,并用Vero细胞对分离毒体外培养所需的接毒时间、收毒时间、接毒剂量及胰蛋白酶浓度进行试验,筛选出该株PEDV体外培养最佳条件。结果表明,该分离株为G2b型,在Vero细胞增殖最佳接毒时间为培养24 h细胞长成单层时,最佳收毒时间为接毒后48 h,最佳接毒剂量为10%,最佳胰蛋白酶浓度为15μg/mL,研究结果可为PEDV的分离培养及提高病毒效价提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 分离 鉴定 培养特性
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空置猪场的猪流行性腹泻病毒检测
2
作者 李阳 张越 +6 位作者 路浩 邢金超 李振坤 董芳婷 徐盟龙 袁晋 魏战勇 《动物医学进展》 北大核心 2025年第6期7-12,共6页
为探讨猪流行性腹泻病毒(PEDV)在规模化养殖场环境中的分布规律,制定精准有效的猪场生物安全防控措施,采用实时荧光定量PCR方法,对采集自河南省信阳市某空置6个月猪场的366份环境样品进行了PEDV核酸检测。结果显示,该猪场环境样品中有12... 为探讨猪流行性腹泻病毒(PEDV)在规模化养殖场环境中的分布规律,制定精准有效的猪场生物安全防控措施,采用实时荧光定量PCR方法,对采集自河南省信阳市某空置6个月猪场的366份环境样品进行了PEDV核酸检测。结果显示,该猪场环境样品中有124份PEDV核酸阳性,总体阳性率为33.88%;不同区域PEDV检出率由高到低依次为排污系统50.00%(4/8)、猪舍环境33.92%(116/342)、洗消中心25.00%(4/16);值得注意的是,洗消中心的减速带、猪舍环境内的漏粪地板及排污系统的粪沟检出率均为100%。结果表明,该猪场清洗消毒空置6个月后仍有大量PEDV核酸残留。总体来说,研究发现了猪场清洗消毒的部分盲区,讨论了病毒残留点和猪场建设规划,以及空气、饲料和环境等因素间的关系,指出了猪场现有清洗流程的漏洞,为猪场建立完善的生物安全防控体系提供了参考。 展开更多
关键词 空置猪场 猪流行性腹泻病毒 猪场环境 清洗消毒盲区
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猪流行性腹泻病毒蛋白与宿主蛋白相互作用的研究进展 被引量：1
3
作者 周敏 汤德元 +6 位作者 曾智勇 王彬 黄涛 胡雯雯 毛茵茗 周飘 何松 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2600-2612,共13页
猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的高度接触性传染病,主要症状为呕吐、水样腹泻、脱水和体重下降,哺乳仔猪感染后死亡率可高达100%,给全球养猪业带来了巨... 猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的高度接触性传染病,主要症状为呕吐、水样腹泻、脱水和体重下降,哺乳仔猪感染后死亡率可高达100%,给全球养猪业带来了巨大的经济损失。目前尚无有效的治疗药物,且其疫苗也存在一定的局限性。在病毒感染过程中,病毒蛋白与宿主蛋白通过相互作用,一方面促进病毒逃避宿主先天免疫以完成其复制,另一方面调节宿主免疫反应以抑制病毒感染。因此,鉴定病毒蛋白与宿主蛋白相互作用对于了解宿主对病毒感染的防御和病毒性传染病的发病机制至关重要,从而发现新的抗病毒靶点。本文详细阐述了PEDV感染过程中的病毒蛋白与宿主蛋白的相互作用,总结了PEDV的致病机制,以期为设计有效的疫苗或药物来预防和控制PEDV的传播提供新思路。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 病毒蛋白 宿主蛋白 蛋白相互作用
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猪流行性腹泻病毒感染仔猪空肠组织的转录组学分析
4
作者 曾德平 陆颖 +8 位作者 余科辰 卢峥朴 柏家果 秦秋英 隆美金 陈樱 韦祖樟 黄伟坚 欧阳康 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期11-18,共8页
猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染仔猪可引起严重腹泻,导致肠道黏膜损伤、免疫功能低下。为探究PEDV感染仔猪空肠基因组转录水平的变化,筛选宿主免疫应答的差异表达基因,本研究收集PEDV感染仔猪的空肠组织,利用RNA-Seq技术进行转录组学测序... 猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染仔猪可引起严重腹泻,导致肠道黏膜损伤、免疫功能低下。为探究PEDV感染仔猪空肠基因组转录水平的变化,筛选宿主免疫应答的差异表达基因,本研究收集PEDV感染仔猪的空肠组织,利用RNA-Seq技术进行转录组学测序分析。RNA-seq结果显示,与正常未感染仔猪相比,PEDV感染仔猪存在339个显著差异表达基因(DEGs),其中182个上调基因,157个下调基因。GO分子功能结果显示,免疫相关差异表达基因主要与免疫球蛋白和受体结合、T细胞增殖等有关。KEGG通路富集结果显示,差异表达基因主要涉及TNF信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用、Toll样受体信号通路、Janus激酶/信号转导与转录激活子信号通路以及RIG-I受体信号通路等;最后再利用qRT-PCR对差异表达基因进行验证,其结果与转录组学结果基本一致。本研究为进一步研究PEDV感染导致宿主免疫应答变化机制提供了科学依据。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 转录组分析 差异表达 RNA-SEQ 先天免疫
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儿茶提取物对猪流行性腹泻病毒感染幼龄仔猪结肠的保护作用
5
作者 李欢欢 余晨敏 +7 位作者 田晓榕 李瑞 李宗云 张焱焱 赵迪 王蕾 侯永清 吴涛 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1360-1369,共10页
【目的】以7日龄仔猪为研究对象,探究儿茶提取物(TCE)对猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染幼龄仔猪结肠的保护效果及机制。【方法】将体重相近的18头幼龄仔猪随机分为3组:对照组、PEDV组和TCE+PEDV组,每组6头猪。试验周期11 d,0~3 d为适应期,4... 【目的】以7日龄仔猪为研究对象,探究儿茶提取物(TCE)对猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染幼龄仔猪结肠的保护效果及机制。【方法】将体重相近的18头幼龄仔猪随机分为3组:对照组、PEDV组和TCE+PEDV组,每组6头猪。试验周期11 d,0~3 d为适应期,4~11 d为试验期。试验期对照组和PEDV组仔猪灌服人工奶,TCE+PEDV组仔猪灌服含有TCE(0.01 g/kg BW)的人工奶;试验第8天PEDV组及TCE+PEDV组仔猪灌服3 mL 10^(6) TCID _(50)/0.1 mL PEDV,对照组仔猪灌服3 mL DMEM培养基。试验第11天将所有仔猪麻醉后屠宰,采集仔猪结肠组织,测定TCE对PEDV感染仔猪结肠形态结构、抗氧化能力、炎性因子及离子通道相关基因表达的影响。【结果】与对照组相比,PEDV组仔猪结肠组织形态受损,隐窝深度显著增加(P<0.05);灌服TCE可有效缓解PEDV感染导致的仔猪结肠损伤,与PEDV组相比,TCE+PEDV组仔猪结肠隐窝深度显著变浅(P<0.05)。与对照组相比,PEDV感染组仔猪结肠中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著升高(P<0.05);与PEDV组相比,TCE+PEDV组仔猪结肠GSH-Px、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、髓过氧化物酶(MPO)活性均无显著变化(P>0.05)。PEDV感染后可检测到仔猪结肠组织内PEDV M、N、S基因表达,且干扰素(IFN)信号通路相关基因ISG 15、IRF 7,炎性因子基因IL-1β、IL-8、REG 3 G及离子通道相关基因AQP 10、APOB及MMP 13表达量均显著上调(P<0.05),IFN-β基因表达量显著下调(P<0.05);与PEDV组相比,TCE+PEDV组仔猪结肠中PEDV M、N、S基因及ISG 15、IL-1β、IL-8、REG 3 G、IRF 7、APOB、MMP 9基因表达量均显著下调(P<0.05),IFN-β基因表达量显著上调(P<0.05)。【结论】PEDV感染导致幼龄仔猪结肠组织黏膜损伤,灌服0.01 g/kg BW的TCE可缓解PEDV感染导致的结肠组织受损。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 儿茶提取物 结肠 炎症反应
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丁酸抑制猪流行性腹泻病毒体外复制的分子机制
6
作者 张楚妮 徐计东 +3 位作者 高钦 单颖 方维焕 李肖梁 《浙江农业学报》 北大核心 2025年第3期579-590,共12页
猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是一种引起高度接触性急性肠道传染病的冠状病毒,严重威胁生猪产业的健康发展。丁酸作为饲料添加剂,在生猪养殖中广泛应用,其不仅作为能量物质,还参与调控基因表达、抗炎和细胞... 猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是一种引起高度接触性急性肠道传染病的冠状病毒,严重威胁生猪产业的健康发展。丁酸作为饲料添加剂,在生猪养殖中广泛应用,其不仅作为能量物质,还参与调控基因表达、抗炎和细胞周期等生命活动,但丁酸在PEDV感染中的作用机制尚不明确。本研究旨在探讨丁酸对PEDV复制的抑制作用及其潜在机制。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫印迹和免疫荧光等技术检测丁酸处理对PEDV复制的影响,利用细胞周期相关蛋白表达分析和流式细胞术,研究PEDV感染对细胞周期的影响与丁酸的调控作用。结果表明:丁酸处理显著抑制了PEDV在猪肠道上皮细胞(IPEC-J2细胞)中的复制;PEDV感染可以上调细胞周期相关蛋白Cyclin A2的表达,同时诱导细胞S期(DNA合成期)阻滞帮助自身复制。丁酸通过下调Cyclin A2蛋白表达,缓解PEDV诱导的S期阻滞,从而发挥抗病毒作用。综上所述,丁酸通过调控细胞周期,缓解PEDV感染诱导的细胞周期S期阻滞,进而抑制病毒复制。本研究为丁酸在动物生产中作为抗病毒策略的应用提供了理论依据。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 丁酸 细胞周期 Cyclin A2 S期阻滞 抗病毒作用 IPEC-J2细胞
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抗猪流行性腹泻病毒药物研究进展
7
作者 郝小龙 曾晓雨 +7 位作者 武卓雅 刘亚云 戴银 殷冬冬 尹磊 沈学怀 潘孝成 王洁茹 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第6期83-86,共4页
猪流行性腹泻病是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的以急性水样腹泻、呕吐、脱水为主要症状的一种急性肠道传染病。仔猪最易感,死亡率可高达100%,严重影响养猪业健康发展。RNA病毒变异性高导致现有疫苗无法对PEDV流行毒株提供有效免疫保护... 猪流行性腹泻病是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的以急性水样腹泻、呕吐、脱水为主要症状的一种急性肠道传染病。仔猪最易感,死亡率可高达100%,严重影响养猪业健康发展。RNA病毒变异性高导致现有疫苗无法对PEDV流行毒株提供有效免疫保护,导致防控困难。开发新型抗PEDV药物成为当前研究的重要方向。本文综述讨论了病毒和宿主靶向PEDV药物的抗病毒疗效和机制,以期为PEDV的临床用药提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 药物 病毒靶向 宿主靶向 临床应用
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紧密连接蛋白CLDN4促进猪流行性腹泻病毒感染
8
作者 李程程 赵永祥 +6 位作者 曹秋霞 宋旭 李宇鹏 范宝超 郭容利 徐业芬 李彬 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2826-2835,共10页
紧密连接蛋白在多种病毒感染过程中起着重要作用,紧密连接蛋白4(claudin-4,CLDN4)是紧密连接蛋白家族中的主要成员之一,其在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染中作用尚不明确。为探索PEDV感染对CLDN4表达的... 紧密连接蛋白在多种病毒感染过程中起着重要作用,紧密连接蛋白4(claudin-4,CLDN4)是紧密连接蛋白家族中的主要成员之一,其在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染中作用尚不明确。为探索PEDV感染对CLDN4表达的影响以及CLDN4在PEDV感染中的作用,本研究通过荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测了PEDV感染后CLDN4的转录水平与蛋白表达情况。其次,构建了CLDN 4基因的真核表达质粒,设计了靶向CLDN 4的特异性干扰RNA,通过qPCR、Western blot、间接免疫荧光(IFA)和PEDV病毒滴度测定检测了过表达和敲减CLDN4对PEDV复制的影响。最后,检测了过表达CLDN4对PEDV吸附与侵入阶段的影响。结果显示,PEDV感染可上调细胞中CLDN 4的转录与蛋白表达水平,过表达CLDN4显著促进PEDV的复制,而干扰CLDN4表达抑制PEDV复制,并且CLDN4蛋白可促进PEDV的吸附与侵入。本研究表明CLDN4蛋白具有促进PEDV感染与复制的作用,为研究CLDN4的功能与解析PEDV的复制机制提供参考。 展开更多
关键词 CLDN4 猪流行性腹泻病毒 促进 感染
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基于CRISPR/Cas9技术的猪TRIM8基因敲除细胞系构建及其对猪流行性腹泻病毒复制的调控作用
9
作者 王威 毕祯彬 +5 位作者 顾善绅 肖叶懿 周雅静 吴圣龙 包文斌 王海飞 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第8期3790-3799,共10页
【目的】利用CRISPR/Cas9技术构建三方基序蛋白8(tripartite motif 8,TRIM8)基因敲除的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),并探究TRIM8基因敲除对猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的调控作用,为深入理解TRIM8基因在抗病毒天然免疫中的作用机制及开发新... 【目的】利用CRISPR/Cas9技术构建三方基序蛋白8(tripartite motif 8,TRIM8)基因敲除的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),并探究TRIM8基因敲除对猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的调控作用,为深入理解TRIM8基因在抗病毒天然免疫中的作用机制及开发新的PEDV防控策略提供基因资源和理论依据。【方法】在猪TRIM8基因转录本第1外显子区域设计3条sg RNAs(sg RNA1、sg RNA2和sg RNA3),经退火形成双链DNA,与线性化p GK1.2载体连接,产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞进行鉴定。将重组载体转染IPEC-J2细胞。PCR扩增敲除位点附近序列,并通过测序判断sg RNA敲除效率;利用T7核酸内切酶Ⅰ(M0302)酶切鉴定阳性细胞克隆,通过TA克隆测序鉴定敲除序列;利用Western blotting检测基因敲除细胞中TRIM8蛋白表达情况。利用半数组织培养感染剂量(TCID_(50))和实时荧光定量PCR检测TRIM8基因敲除后PEDV复制的变化情况。【结果】重组载体测序结果显示,sg RNAs与p GK1.2成功连接。敲除效率分析发现,3个sg RNAs中只有sg RNA2有敲除效率。PCR产物经T7核酸内切酶Ⅰ(M0302)酶切筛选出8个阳性单克隆细胞。TA克隆测序分析发现,TRIM8基因2个等位基因序列分别缺失5和9bp。Western blotting结果表明,TRIM8基因敲除细胞中未见TRIM8蛋白表达。TCID_(50)和实时荧光定量PCR检测结果显示,与野生型IPEC-J2细胞相比,敲除TRIM8基因后显著上调了PEDV的病毒滴度(P<0.05),且PEDV M基因和N蛋白也显著上调(P<0.05)。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了TRIM8基因敲除的IPEC-J2细胞,并提高了PEDV在宿主细胞中复制的能力。TRIM8基因敲除细胞可为探究TRIM8基因功能及其调控PEDV复制的分子机制提供材料。 展开更多
关键词 猪 TRIM8基因 猪流行性腹泻病毒(PEDV) CRISPR/Cas9技术 病毒复制
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影响猪流行性腹泻病毒复制的关键lncRNA筛选及其功能验证
10
作者 杨荔 杜小妹 +3 位作者 刘梦媛 吴圣龙 包文斌 吴正常 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期792-800,共9页
[目的]探究长链非编码RNA(lncRNA)在猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)感染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)过程中的作用。[方法]利用感染复数(MOI)为1的PEDV感染IPEC-J2细胞构建细胞病变模型,通过RNA-Seq进行lncRNA测... [目的]探究长链非编码RNA(lncRNA)在猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)感染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)过程中的作用。[方法]利用感染复数(MOI)为1的PEDV感染IPEC-J2细胞构建细胞病变模型,通过RNA-Seq进行lncRNA测序,筛选出影响PEDV复制的关键lncRNA;利用实时荧光定量PCR和核质分离检测lncRNA表达和细胞定位;构建RNA干扰载体并转染IPEC-J2细胞,通过病毒拷贝数测定、Western blotting、半数组织培养感染剂量(TCID_(50))以及间接免疫荧光试验(IFA)检测lncRNA表达对PEDV复制水平的影响。[结果]PEDV感染IPEC-J2细胞24 h时,细胞病变最为明显,成功构建细胞病变模型。与对照组相比,PEDV感染组中存在61个差异表达lncRNA,其中19个上调,42个下调,筛选出1个显著上调且差异倍数较大的lncRNA——lncMSTRG.10733.2。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,PEDV感染IPEC-J2细胞后,lncMSTRG.10733.2表达水平显著上调(P<0.05)。核质分离测定结果显示,lncMSTRG.10733.2主要分布在IPEC-J2细胞质中。成功构建了lncMSTRG.10733.2瞬时干扰IPEC-J2细胞,干扰效率为45.9%。实时荧光定量PCR和Western blotting结果显示,lncRNA干扰后,PEDV-M基因mRNA相对表达量和PEDV N蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。TCID_(50)测定结果显示,lncRNA干扰后PEDV滴度极显著上升(P<0.01);IFA结果显示,lncRNA干扰后IPEC-J2细胞中的PEDV N蛋白荧光分布水平明显增加。[结论]本研究基于高通量测序从细胞水平上筛选鉴定出1个与PEDV感染密切相关的lncRNA,其表达水平上调有利于提高猪对PEDV感染的抵抗能力。研究结果揭示了lncRNA在PEDV感染宿主过程中的重要作用,为今后制定PEDV的抗病育种工作策略和筛选分子标记物奠定基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) lncRNA IPEC-J2 病毒复制
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SOX12基因在Vero细胞感染猪流行性腹泻病毒过程中的功能研究
11
作者 向娇娇 元娜 +6 位作者 李慧慧 邵明珠 赵福平 张龙超 王立贤 石丽君 陈斌 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第1期289-297,共9页
[目的]探究SOX12基因对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)复制的影响,以期为抗PEDV育种提供有效分子标记。[方法]本研究合成3条SOX12基因干扰序列(siRNA1、siRNA2、siRNA3)及其阴性对照(siNC)并转染至非洲绿猴... [目的]探究SOX12基因对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)复制的影响,以期为抗PEDV育种提供有效分子标记。[方法]本研究合成3条SOX12基因干扰序列(siRNA1、siRNA2、siRNA3)及其阴性对照(siNC)并转染至非洲绿猴肾细胞(Vero细胞),转染48 h后收集细胞,利用实时荧光定量PCR检测干扰效率。将有效的干扰片段和siNC分别转染至Vero细胞24 h后,用感染复数为0.05的PEDV感染细胞,分为4组:感染PEDV 12 h试验组(12 hpi-siRNA)、感染PEDV 12 h对照组(12 hpi-siNC)、感染PEDV 24 h试验组(24 hpi-siRNA)及感染PEDV 24 h对照组(24 hpi-siNC),利用实时荧光定量PCR检测PEDV N及SOX12基因的表达水平,通过Western blotting检测各组细胞PEDV N蛋白表达水平,利用组织半数感染量(50%tissue culture infective dose, TCID_(50))检测PEDV的病毒滴度,并利用间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay, IFA)法检测各组细胞中PEDV复制情况。通过GeneMANIA网站预测SOX12基因的互作基因,利用实时荧光定量PCR检测抑制SOX12基因表达后其互作基因的表达变化。[结果]SOX12基因3条干扰片段的干扰效率为30%~60%,其中siRNA3干扰效率最高,可达60%。与12 hpi-siNC和24 hpi-siNC组相比,12 hpi-siRNA和24 hpi-siRNA组PEDV N基因的转录和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。病毒滴度表型测定结果表明,12 hpi-siRNA和24 hpi-siRNA组的PEDV病毒滴度显著低于各自对照组(P<0.05);IFA结果也表明,12 hpi-siRNA和24 hpi-siRNA组的PEDV复制明显少于对照组。基因互作预测及实时荧光定量PCR检测结果显示,与siNC组相比,干扰SOX12基因的表达后,其互作基因SOX17、DDX51、ZMIZ2、SSRP1、TAF6和ABCB8的表达水平均显著降低(P<0.05)。[结论]本研究揭示了SOX12基因在PEDV感染Vero细胞过程中的调控作用,发现SOX12基因的下调表达能显著抑制PEDV复制和其互作基因SOX17、DDX51、ZMIZ2、SSRP1、TAF6和ABCB8的表达。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) SOX12基因 VERO细胞 基因干扰
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体外对猪流行性腹泻病毒复制具有抑制效应的物质
12
作者 王运珂 王娜 +4 位作者 岳珂 何坤淼 张兴 刘垚 张改平 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2577-2589,共13页
猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是一种引起仔猪急性腹泻、呕吐、脱水等症状的病毒,由于其高发病率和高致死率,给全球养猪业造成了巨大的经济损失。虽然疫苗接种是当前预防猪流行性腹泻(porcine epidemic diarr... 猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是一种引起仔猪急性腹泻、呕吐、脱水等症状的病毒,由于其高发病率和高致死率,给全球养猪业造成了巨大的经济损失。虽然疫苗接种是当前预防猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)最经济和有效的措施,但PEDV变异株的频繁出现使得现有疫苗的免疫保护效果不佳,因此开发有效的抗病毒药物显得尤为迫切。近年来,研究者致力于筛选和评估具有潜在抗PEDV活性的物质,其主要通过靶向病毒的入侵、复制或装配过程,或通过增强宿主的免疫响应来发挥作用。本文从化学药物、天然产物和其他生物制剂抗PEDV作用及机制进行概述,以期为抗PEDV药物的筛选和研究提供新的方向和思路。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 化学药物 天然产物 生物制剂
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猪流行性腹泻病毒的肠道致病机制及营养调控研究进展 被引量：1
13
作者 杨杰波 严鸿林 +1 位作者 伍爱民 张勇 《动物营养学报》 北大核心 2025年第4期2142-2156,共15页
猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种具有高度传染性的肠道冠状病毒,可导致新生仔猪出现萎缩性肠炎、水样腹泻和脱水,是造成新生仔猪死亡的主要病原。营养物质的供给是维持动物生长和健康所必需的,也可直接或间接作用于病毒,抑制PEDV的复制和... 猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种具有高度传染性的肠道冠状病毒,可导致新生仔猪出现萎缩性肠炎、水样腹泻和脱水,是造成新生仔猪死亡的主要病原。营养物质的供给是维持动物生长和健康所必需的,也可直接或间接作用于病毒,抑制PEDV的复制和活性,并通过增强仔猪的免疫性能、抗氧化和抗炎能力来修复PEDV感染所引起的肠道损伤,从而维持仔猪的肠道健康。营养物质在缓解PEDV对仔猪的影响中主要通过增强仔猪的免疫力和抑制PEDV活性来发挥抗PEDV作用。本文在综述PEDV肠致病机制的基础上,重点介绍了PEDV对仔猪的影响和缓解PEDV的营养调控作用研究进展,以期为深入研究营养调控对PEDV的作用机制和开发抗病毒营养调控技术提供理论参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 致病机制 仔猪 肠道健康 营养调控
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猪流行性腹泻病毒S1蛋白的原核表达及其核酸适配体的筛选
14
作者 张冬萱 王智豪 +3 位作者 乔岩 赵肖肖 范松杰 张超 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期839-850,共12页
本文旨在可溶性原核表达猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S1蛋白的C端结合域(S1-CTD),并利用指数富集的配体系统进化技术筛选靶向S1-CTD蛋白的DNA适配体,为该病毒治疗药物的开发以及检测方法的建立奠定基础。采... 本文旨在可溶性原核表达猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S1蛋白的C端结合域(S1-CTD),并利用指数富集的配体系统进化技术筛选靶向S1-CTD蛋白的DNA适配体,为该病毒治疗药物的开发以及检测方法的建立奠定基础。采用大肠杆菌原核表达系统,将PEDV-S1-CTD质粒与带有麦芽糖结合蛋白(MBP)、小分子泛素样修饰蛋白(SUMO)、反转录终止因子(NusA)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)四种促溶标签的原核表达载体pET21b连接,构建重组质粒pET21b-MBP-S1、pET21b-SUMO-S1、pET21b-NusA-S1、pET21b-GST-S1,将双酶切鉴定和测序正确的重组质粒转入大肠杆菌BL21进行诱导表达,选择可溶性好且表达量高的rMBP-S1重组蛋白进行后续试验,Western blot结果显示该重组蛋白正确表达,间接免疫荧光试验(IFA)结果表明rMBP-S1能与细胞表面受体结合。随后经磁珠法筛选得到111条靶向rMBP-S1重组蛋白的候选DNA适配体,其中Apt-S1-3、Apt-S1-11富集程度最高,分别是18%和16.2%,酶联适配体吸附试验ELASA(enzyme-linked aptamer sorbent assays,ELASA)测定适配体Apt-S1-3的解离常数为2.09 nmol,并且该适配体不与rMBP蛋白、rMBP-gD蛋白、rMBP-GP5蛋白以及BSA蛋白发生交叉反应,表明该适配体具有高亲和力与高特异性。此外,使用在线软件Mfold分析适配体Apt-S1-3形成的二级结构,并且通过分子对接模拟,发现该适配体能够与靶标蛋白形成稳定的复合物。最后的间接免疫荧光试验表明适配体Apt-S1-3能够识别PEDV,流式细胞术试验证实该适配体能够抑制PEDV感染宿主细胞。本研究筛选得到的DNA适配体能够与猪流行性腹泻病毒S1-CTD蛋白高亲和力、高特异性结合,而且能够抑制猪流行性腹泻病毒感染细胞,为PEDV的靶向治疗和检测方法开发奠定基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 S1-CTD蛋白 磁珠法 核酸适配体 亲和力
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猪流行性腹泻病毒临床感染仔猪肠道组织中血管紧张素转化酶2的检测及其与肠道病理变化的关系分析
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作者 李志强 陈雪清 张源淑 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第7期3463-3473,共11页
血管紧张素转化酶2(ACE_(2))可参与机体多种组织器官的功能调节,特别是在维持肠道稳态中的作用已趋于共识,但在动物冠状病毒尤其是在猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染中的作用仍不清晰。通过分析ACE_(2)与PEDV临床感染仔猪小肠组织中的病理... 血管紧张素转化酶2(ACE_(2))可参与机体多种组织器官的功能调节,特别是在维持肠道稳态中的作用已趋于共识,但在动物冠状病毒尤其是在猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染中的作用仍不清晰。通过分析ACE_(2)与PEDV临床感染仔猪小肠组织中的病理变化关系,研究ACE_(2)与PEDV感染的相关性。以PED临床感染仔猪为研究对象,分离、截取十二指肠、空肠和回肠等组织,采用PCR、组织病理学、Western blot、RT-qPCR和Spearman相关性分析等方法,明确PEDV感染及在小肠组织中的表达分布,观察小肠组织病理变化,分析小肠组织中ACE_(2)与IFN-α及相关因子的表达变化,探讨ACE_(2)与PEDV感染的作用关系。结果表明,仔猪小肠组织中有PEDV感染且多分布于空肠和回肠;PEDV感染引起小肠上皮细胞坏死、脱落,肠绒毛萎缩、变短等不同程度的病变;小肠组织中Ang II与促炎性因子TNF-α、IL-6、IL-8和IL-1β的含量均显著升高,Ang(1-7)与抗炎性因子TGF-β1和IL-10的含量均显著降低;ACE_(2)、MasR与IFN-α蛋白及其介导的ISG15、ISG54和ISG56 mRNA的表达均显著下调,ACE、AT1R蛋白的表达均显著上调;PEDV感染与ACE_(2)-Ang(1-7)-MasR轴呈负相关,与ACE-Ang II-AT1R轴呈正相关,与IFN-α表达呈负相关,而ACE_(2)与IFN-α表达呈正相关。结果提示,PEDV感染诱发仔猪肠道炎症病变,小肠中IFN-α及其介导的ISGs的表达均被抑制;肠道局部存在肾素血管紧张素系统(RAS)所有成员,其中的两条通路共同参与了PEDV致仔猪肠道的炎性损伤过程,表现为ACE-Ang II-AT1R轴被激活,ACE_(2)-Ang(1-7)-MasR轴被抑制;ACE_(2)与PEDV感染及其诱发的干扰素应答存在密切相关性。 展开更多
关键词 血管紧张素转化酶2 猪流行性腹泻病毒 小肠 干扰素 肠道炎症
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一株GⅡa型猪流行性腹泻病毒的分离与致病性分析
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作者 田茹 付星玮 +2 位作者 胡乐玉 朱明君 童德文 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第8期4101-4111,共11页
本研究旨在探究甘肃省某猪场仔猪腹泻病原及其遗传进化特征与致病性,以期为该猪场的疫病防控提供一定参考。将在该猪场采集的病猪解剖后的小肠组织进行处理,随后进行猪常见腹泻病原的检测,利用Vero E6细胞对病原检测为阳性的病料进行病... 本研究旨在探究甘肃省某猪场仔猪腹泻病原及其遗传进化特征与致病性,以期为该猪场的疫病防控提供一定参考。将在该猪场采集的病猪解剖后的小肠组织进行处理,随后进行猪常见腹泻病原的检测,利用Vero E6细胞对病原检测为阳性的病料进行病毒分离,并开展了分离毒株的鉴定、纯化、遗传进化分析和仔猪致病性评价试验。结果表明,经RT-PCR检测所采集的病料为猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)阳性,CPE观察到细胞轮廓消失,细胞大量脱落,形成空斑,细胞间拉丝成网;IFA观察到细胞出现特异性绿色荧光;Western blot观察在57 ku处显示出目的条带;透射电镜下观察到冠状病毒典型结构特征;纯化后的病毒滴度为10^(6.0) TCID_(50)·mL^(-1);遗传进化分析显示,分离株与SXSL、HK2021亲缘性较近,与PEDV传统毒株CV777存在一定的进化距离;试验动物出现严重的腹泻情况,仔猪腹泻、消瘦、生长发育迟缓,剖检发现小肠壁变薄,小肠胀满,肠系膜充血;病理组织切片观察到肠绒毛缩短、破碎、脱落,出现出血点与淋巴细胞增生、坏死现象;免疫组织化学结果显示,小肠各段中均出现明显的阳性信号,其中回肠中PEDV阳性信号最强。通过遗传进化分析表明,PEDV分离株属于GⅡa型,将其命名为LZ202401株。致病性分析该分离株为强毒株,是该猪场仔猪发生腹泻的主要病原。本研究为进一步探究PEDV的分子特性与遗传进化特征提供理论依据,同时为当下PEDV的防控提供一定参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 分离 遗传进化分析 致病性分析
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LncRNA 18850对猪流行性腹泻病毒复制的影响
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作者 余昕雅 何海健 +5 位作者 王磊 倪语晨 杜静 周莹珊 董婉玉 王晓杜 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1366-1375,共10页
长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200 bp且缺乏蛋白质编码能力的RNA,已有研究表明lncRNA在病毒复制过程中具有重要的生物学作用。本研究分析了猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染细胞的lncRNA表达变化及其对PEDV复制的影响。转录组测序PED... 长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200 bp且缺乏蛋白质编码能力的RNA,已有研究表明lncRNA在病毒复制过程中具有重要的生物学作用。本研究分析了猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染细胞的lncRNA表达变化及其对PEDV复制的影响。转录组测序PEDV感染Vero-E6细胞24h的样品中lncRNA,构建lncRNA 18850过表达质粒,Western blot、qPCR以及TCID 50等方法分析lncRNA 18850过表达对PEDV复制的影响,转录组测序分析lncRNA 18850过表达的Vero-E6细胞差异基因表达,生物信息学分析lncRNA 18850靶向基因及差异蛋白互作关系。结果显示,PEDV感染Vero-E6细胞24和48 h lncRNA 18850的表达量均呈极显著上升(P<0.01);lncRNA 18850的过表达可显著促进PEDV的复制(P<0.05);LIF、IL11、EPHA2、CCND1、DUSP5、CCN 2基因与lncRNA 18850存在靶向关系。PEDV感染可上调Vero-E6细胞内lncRNA 18850的表达,lncRNA 18850可能通过靶向调控多个基因而促进病毒的复制,本研究为深入探析PEDV的复制机制及潜在靶向治疗策略提供了新的视角。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 猪流行性腹泻病毒 转录组测序 Apelin信号通路
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抗猪流行性腹泻病毒药物的研究进展
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作者 党梦 党寒 +1 位作者 李朝阳 杨丰利 《特种经济动植物》 2025年第3期65-67,共3页
猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)轻则引发新生仔猪腹泻、呕吐、脱水,重则死亡,严重制约着我国生猪养殖业的发展。现行的预防措施主要依赖于疫苗接种,但由于疫苗的有效性、安全性及病毒变异性等问题,PEDV未能完... 猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)轻则引发新生仔猪腹泻、呕吐、脱水,重则死亡,严重制约着我国生猪养殖业的发展。现行的预防措施主要依赖于疫苗接种,但由于疫苗的有效性、安全性及病毒变异性等问题,PEDV未能完全得到控制。本文综合阐述国内外在该领域的研究新动态,旨在为后续新型抗PEDV药物的研发提供思路与方向,助力养猪业的可持续发展,也为相关科研工作者提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 疫苗 药物 研究进展
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猪流行性腹泻病毒检测方法研究进展
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作者 原慧 冯丽丽 《今日养猪业》 2025年第2期1-3,共3页
【目的】探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的病原学特性、流行病学特征以及有效的检测方法,以应对该病毒对生猪养殖业造成的严重影响。【方法】采用文献研究法,综合分析当前国内外关于猪流行性腹泻病毒的病原学、流行病学以及检测方法的最新... 【目的】探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的病原学特性、流行病学特征以及有效的检测方法,以应对该病毒对生猪养殖业造成的严重影响。【方法】采用文献研究法,综合分析当前国内外关于猪流行性腹泻病毒的病原学、流行病学以及检测方法的最新研究成果。【结果】猪流行性腹泻病毒以高致死率危害仔猪,对我国生猪养殖业造成了巨大的经济损失。截至目前,尚未研发出治疗的特效药物和疫苗。因此,加强日常筛查,及时发现并预防猪流行性腹泻病毒的感染成为防控工作的关键。【结论】结合当前猪流行性腹泻的流行态势,建议采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)等多种检测方法,从而实现早发现、早预防的目标。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 PED 检测方法
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猪流行性腹泻病毒RT-RAA-LFD检测方法的建立
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作者 仇德洋 王海燕 +3 位作者 郑佳 杜建才 陈昭 李桂梅 《中国动物检疫》 2025年第7期90-95,共6页
为开发一种可靠、简易、便捷的现场猪流行性腹泻病毒(PEDV)检测方法,基于反转录重组酶介导等温扩增(RT-RAA)和侧向流试纸条(LFD)技术,建立了用于现场检测PEDV的RT-RAA-LFD方法。根据PEDV N基因保守序列进行引物和探针设计,通过试验优选... 为开发一种可靠、简易、便捷的现场猪流行性腹泻病毒(PEDV)检测方法,基于反转录重组酶介导等温扩增(RT-RAA)和侧向流试纸条(LFD)技术,建立了用于现场检测PEDV的RT-RAA-LFD方法。根据PEDV N基因保守序列进行引物和探针设计,通过试验优选出一套引物及一条探针,同时对RT-RAA反应时间和温度条件进行优化。优化后的方法在37℃恒温反应15 min,即可实现对PEDV目的基因片段的有效扩增;与其他常见腹泻病毒无交叉反应,最低检测限为1.23×10^(1) copies/μL;对134份临床样品进行检测,阳性检出率为5.97%,与国标检测方法结果一致。结果表明,本研究建立的PEDV RT-RAA-LFD检测方法操作简便,结果特异、灵敏,不需要专业的实验室设备和实验人员,适用于在资源有限地区对PEDV的检测,能够满足基层临床工作人员的需求。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 重组酶介导等温扩增 侧向层析试纸条
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