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空置猪场的猪流行性腹泻病毒检测 被引量：1
1
作者 李阳 张越 +6 位作者 路浩 邢金超 李振坤 董芳婷 徐盟龙 袁晋 魏战勇 《动物医学进展》 北大核心 2025年第6期7-12,共6页
为探讨猪流行性腹泻病毒(PEDV)在规模化养殖场环境中的分布规律,制定精准有效的猪场生物安全防控措施,采用实时荧光定量PCR方法,对采集自河南省信阳市某空置6个月猪场的366份环境样品进行了PEDV核酸检测。结果显示,该猪场环境样品中有12... 为探讨猪流行性腹泻病毒(PEDV)在规模化养殖场环境中的分布规律,制定精准有效的猪场生物安全防控措施,采用实时荧光定量PCR方法,对采集自河南省信阳市某空置6个月猪场的366份环境样品进行了PEDV核酸检测。结果显示,该猪场环境样品中有124份PEDV核酸阳性,总体阳性率为33.88%;不同区域PEDV检出率由高到低依次为排污系统50.00%(4/8)、猪舍环境33.92%(116/342)、洗消中心25.00%(4/16);值得注意的是,洗消中心的减速带、猪舍环境内的漏粪地板及排污系统的粪沟检出率均为100%。结果表明,该猪场清洗消毒空置6个月后仍有大量PEDV核酸残留。总体来说,研究发现了猪场清洗消毒的部分盲区,讨论了病毒残留点和猪场建设规划,以及空气、饲料和环境等因素间的关系,指出了猪场现有清洗流程的漏洞,为猪场建立完善的生物安全防控体系提供了参考。 展开更多
关键词 空置猪场 猪流行性腹泻病毒 猪场环境 清洗消毒盲区
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猪流行性腹泻病毒BZ01株的分离鉴定及培养特性研究
2
作者 魏凤 张文通 +4 位作者 孟庆伟 吕素芳 王艳 张志亭 李峰 《动物医学进展》 北大核心 2025年第3期6-11,共6页
用已建立的RT-PCR方法对采集的疑似猪流行性腹泻病猪的粪便样品进行检测,选用Vero细胞分离培养检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性的样品,连续传3代后用RT-PCR方法鉴定,对其S1基因进行序列测定和遗传进化分析,并用Vero细胞对分离毒体外培... 用已建立的RT-PCR方法对采集的疑似猪流行性腹泻病猪的粪便样品进行检测,选用Vero细胞分离培养检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性的样品,连续传3代后用RT-PCR方法鉴定,对其S1基因进行序列测定和遗传进化分析,并用Vero细胞对分离毒体外培养所需的接毒时间、收毒时间、接毒剂量及胰蛋白酶浓度进行试验,筛选出该株PEDV体外培养最佳条件。结果表明,该分离株为G2b型,在Vero细胞增殖最佳接毒时间为培养24 h细胞长成单层时,最佳收毒时间为接毒后48 h,最佳接毒剂量为10%,最佳胰蛋白酶浓度为15μg/mL,研究结果可为PEDV的分离培养及提高病毒效价提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 分离 鉴定 培养特性
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口服人参茎叶皂苷微球对猪流行性腹泻病毒灭活疫苗的黏膜免疫增强作用
3
作者 苏菲 毛江昌 +4 位作者 徐丽华 叶十一 李军星 余斌 袁秀芳 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 北大核心 2025年第4期655-663,共9页
本研究旨在探明人参茎叶皂苷聚乳酸羟基乙酸纳米微球[ginseng stem-leaf saponin poly(lactic-co-glycolic acid)nanoparticles,GSLS-NPs]对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)灭活疫苗的黏膜免疫增强效果。选取2... 本研究旨在探明人参茎叶皂苷聚乳酸羟基乙酸纳米微球[ginseng stem-leaf saponin poly(lactic-co-glycolic acid)nanoparticles,GSLS-NPs]对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)灭活疫苗的黏膜免疫增强效果。选取25头“杜+长+大”三元杂交母猪,在产前连续14 d分别用GSLS-NPs、GSLS水溶液、空微球和生理盐水进行饲喂,随后接种PEDV灭活疫苗。分娩后,采集母猪血液和粪便以及仔猪的粪便,用于抗体、细胞因子和生化指标检测。结果显示:与仅接种PEDV灭活疫苗相比,口服GSLS-NPs能够持续增加母猪外周血和肠黏膜内白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的浓度。这种高水平的细胞因子状态能够维持至分娩后7 d以上。此外,口服GSLS-NPs显著促进了母猪肠黏膜内PEDV特异性免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)抗体的产生,该高水平IgA抗体状态能够维持至分娩后21 d。对于新生仔猪,GSLS-NPs显著增强了其体内的母源抗体水平,这种高水平状态可持续至出生后14 d。此外,体外试验表明,GSLS-NPs对猪小肠上皮细胞IPEC-J2生长无显著抑制作用。体内试验也显示,GSLS-NPs对母猪的肝肾功能无显著影响。综上所述,GSLS-NPs是一种安全且极具潜力的黏膜免疫佐剂。本研究不仅为新型PEDV疫苗佐剂的研发提供了有力依据,也为PEDV的防控提供了新的策略。 展开更多
关键词 人参茎叶皂苷 聚乳酸羟基乙酸 纳米微球 猪流行性腹泻病毒灭活疫苗 黏膜免疫佐剂
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中药复方对蕨麻仔猪流行性腹泻治疗效果的研究 被引量：1
4
作者 刘立军 冯泰山 《畜牧兽医杂志》 2025年第4期95-98,共4页
为比较研究中药复方对蕨麻仔猪流行性病毒腹泻治疗效果,筛选并优化出最佳中药复方,代替该病对西药的依赖,从而避免抗生素等西药在猪体内大量残留,提高该病治疗效果。将具有清热解毒、祛湿止泻和一定抗菌消炎的复方中药组方优化后与病毒... 为比较研究中药复方对蕨麻仔猪流行性病毒腹泻治疗效果,筛选并优化出最佳中药复方,代替该病对西药的依赖,从而避免抗生素等西药在猪体内大量残留,提高该病治疗效果。将具有清热解毒、祛湿止泻和一定抗菌消炎的复方中药组方优化后与病毒唑治疗比较试验。从试验结果来看,中药复方Ⅰ组治疗效果最优秀,治疗总有效率高达90.00%,其中治疗效果明显有效率为75.00%,治疗无效率为10.00%。中药复方Ⅱ组试验数据次之,治疗总有效率高达80.00%,其中治疗效果明显有效率为60.00%,治疗无效率为20.00%。用病毒唑治疗相较中药复方效果不理想,其中总有效率为65.00%,效果明显有效率为25.00%,治疗无效率为35.00%,治疗总有效率显著低于复方中药组。中药复方治疗蕨麻仔猪流行性病毒性腹泻效果明显,这可能是各味中药相互配合,协同加强和提高机体各项生理机能,刺激机体特定细胞分泌免疫活性因子,增强免疫力,提高机体抗病毒能力,同时具有抗菌、抑菌的作用,防止细菌交叉感染,达到较好的治疗效果。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 中药复方 腹泻 治疗效果
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2018—2022年国内猪流行性腹泻病原体调查汇总分析
5
作者 徐国栋 张颖 +1 位作者 戈成 骆维 《天津农林科技》 2025年第5期41-46,共6页
为掌握猪流行性腹泻在国内猪群中的流行情况,文章对2018—2022年文献记载的猪PEDV核酸检出率数据进行汇总分析,旨在探明猪流行性腹泻在猪群中的流行规律,以更好地指导猪流行性腹泻病的防治。研究结果表明,在2018—2022年的28篇调查文献... 为掌握猪流行性腹泻在国内猪群中的流行情况,文章对2018—2022年文献记载的猪PEDV核酸检出率数据进行汇总分析,旨在探明猪流行性腹泻在猪群中的流行规律,以更好地指导猪流行性腹泻病的防治。研究结果表明,在2018—2022年的28篇调查文献中,共整理出79条有关猪PEDV核酸检出率的数据,可以看出:(1)累计检测猪样品22 644份,其中PEDV阳性数6 148份,PEDV平均阳性率为27.15%,阳性率区间为4.42%~100%,猪PEDV平均阳性率低于2018年之前的调查结果,随时间的推移,猪PEDV阳性率总体呈逐年下降的趋势;(2)本研究文献所载的猪样品来源于国内24个省(自治区、直辖市),猪平均PEDV阳性率为9.90%~100%,各地区猪群PEDV的感染率并不一致,不能从全国东西南北地域差别上得到猪群PEDV阳性率的分布规律;(3)猪群样品PEDV平均阳性率由低到高的猪群为:成年猪<能繁母猪<肥猪<哺乳仔猪<保育猪<猪<仔猪,其中哺乳仔猪与保育猪、哺乳仔猪与肥猪、哺乳仔猪与能繁母猪、保育猪与能繁母猪样品中的PEDV核酸检出率均存在显著或极显著差异;肥猪与能繁母猪样品中的PEDV核酸检出率差异不显著。 展开更多
关键词 猪 流行性腹泻 病原体 调查
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猪流行性腹泻疫苗研究进展
6
作者 张颖 林静 戈成 《天津农林科技》 2025年第1期39-43,共5页
猪流行性腹泻给养殖业造成严重的经济损失。文章介绍了目前猪流行性腹泻病毒的流行情况和猪流行性腹泻疫苗的研究进展,以期为猪流行性腹泻的防控提供参考。
关键词 猪流行性腹泻 疫苗 研究进展
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猪流行性腹泻病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒的制备
7
作者 冯平 符美静 +3 位作者 张磊 瞿军军 张艳 陈瑞 《现代畜牧科技》 2025年第9期29-32,共4页
为开发针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的高效诊断试剂,该试验通过制备预包被微孔板和酶标抗体,研发出猪流行性腹泻病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒,并开展特异性试验、中和活性试验和临床诊断试验,验证试剂盒性能。结果表明,该试剂盒制备的单... 为开发针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的高效诊断试剂,该试验通过制备预包被微孔板和酶标抗体,研发出猪流行性腹泻病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒,并开展特异性试验、中和活性试验和临床诊断试验,验证试剂盒性能。结果表明,该试剂盒制备的单克隆抗体特异性良好,仅与PEDV相关毒株反应呈阳性,与其他毒株及细胞无交叉反应;各单克隆抗体对不同PEDV毒株有较高中和活性,如PEDV-Mabs-2D5对PEDV-KB2013-4株中和效价达1∶2048;试剂盒最低检出量为1∶256,特异性符合率100%,临床检测结果与预期相符。该试验制备的猪流行性腹泻病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒特异性强、灵敏度高,对于判断猪场PEDV感染情况和评估猪瘟疫苗免疫状况意义重大,为PEDV防控提供了有效检测手段。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 特异性试验 ELISA抗体检测
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猪流行性腹泻病毒蛋白与宿主蛋白相互作用的研究进展 被引量：1
8
作者 周敏 汤德元 +6 位作者 曾智勇 王彬 黄涛 胡雯雯 毛茵茗 周飘 何松 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2600-2612,共13页
猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的高度接触性传染病,主要症状为呕吐、水样腹泻、脱水和体重下降,哺乳仔猪感染后死亡率可高达100%,给全球养猪业带来了巨... 猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的高度接触性传染病,主要症状为呕吐、水样腹泻、脱水和体重下降,哺乳仔猪感染后死亡率可高达100%,给全球养猪业带来了巨大的经济损失。目前尚无有效的治疗药物,且其疫苗也存在一定的局限性。在病毒感染过程中,病毒蛋白与宿主蛋白通过相互作用,一方面促进病毒逃避宿主先天免疫以完成其复制,另一方面调节宿主免疫反应以抑制病毒感染。因此,鉴定病毒蛋白与宿主蛋白相互作用对于了解宿主对病毒感染的防御和病毒性传染病的发病机制至关重要,从而发现新的抗病毒靶点。本文详细阐述了PEDV感染过程中的病毒蛋白与宿主蛋白的相互作用,总结了PEDV的致病机制,以期为设计有效的疫苗或药物来预防和控制PEDV的传播提供新思路。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 病毒蛋白 宿主蛋白 蛋白相互作用
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猪流行性腹泻疫苗研究进展 被引量：4
9
作者 邬沛伶 李依璇 +4 位作者 王浩杰 李亚菲 刘绍蒙 刘青芸 王湘如 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1042-1058,共17页
猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种传染性肠道疾病,可造成猪群暴发腹泻和初生仔猪大量死亡。2010年,高致病性的PEDV变异毒株出现并在全球范围内传播,... 猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种传染性肠道疾病,可造成猪群暴发腹泻和初生仔猪大量死亡。2010年,高致病性的PEDV变异毒株出现并在全球范围内传播,已成为当前猪腹泻病的主要病原之一,对全球养猪业造成巨大损失。疫苗免疫是防控PED的最主要措施。现有PED商品化疫苗以传统灭活疫苗和弱毒疫苗为主。近年来,随着基因工程技术的发展,亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗、重组活载体疫苗、转基因植物疫苗和核酸疫苗等的研究也都取得了突破性进展。由于PEDV变异频繁,不断给疫苗研发带来新的挑战,高效的疫苗研发平台及基因工程疫苗对未来PED防控至关重要。本文对PEDV的病原学特征和最新的疫苗研究进展进行了系统综述,并展望未来的疫苗发展方向,以期为有效防控PED提供参考依据。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 猪流行性腹泻病毒 灭活疫苗 弱毒疫苗 基因工程疫苗 核酸疫苗
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穿心莲中药复方对患流行性腹泻仔猪抗氧化能力的影响 被引量：2
10
作者 瞿健萍 杨荣芳 +5 位作者 王浩东 曲强 温萍 于明 冀红芹 刘衍芬 《现代畜牧兽医》 2025年第2期41-45,共5页
试验旨在研究穿心莲中药复方对患流行性腹泻(PED)仔猪血清抗氧化指标及肠道菌群的影响。将36头3日龄仔猪随机分成4组,分别为中药复方治疗组、对照药物治疗组、感染不治疗组和空白对照组,每组3个重复,每个重复3头仔猪。空白对照组与其他... 试验旨在研究穿心莲中药复方对患流行性腹泻(PED)仔猪血清抗氧化指标及肠道菌群的影响。将36头3日龄仔猪随机分成4组,分别为中药复方治疗组、对照药物治疗组、感染不治疗组和空白对照组,每组3个重复,每个重复3头仔猪。空白对照组与其他组隔离饲养,其他组仔猪均在3日龄时灌服猪流行性腹泻病毒(PEDV)细胞培养液2.5 mL(10^(6.5) TCID_(50))。各感染组仔猪出现腹泻症状后,中药复方治疗组、对照药物治疗组分别使用穿心莲中药复方、杨树花口服液进行治疗,感染不治疗组不进行治疗。治疗第3天,检测各组仔猪血清抗氧化指标及肠道菌群数量。结果显示,与感染不治疗组相比,空白对照组、中药复方治疗组、对照药物治疗组仔猪血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及总抗氧化能力(T-AOC)均显著提高(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05);仔猪肠道中乳酸杆菌和双歧杆菌数量显著升高(P<0.05),大肠杆菌和肠球菌数量显著降低(P<0.05)。研究表明,穿心莲中药复方能够通过提高仔猪抗氧化能力,改善肠道内环境,抵抗PED给机体造成损伤。 展开更多
关键词 穿心莲中药复方 猪流行性腹泻 抗氧化能力 肠道菌群
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猪流行性腹泻病毒感染仔猪的免疫器官组织病理学和部分细胞因子变化
11
作者 李豪 徐巧玉 +6 位作者 靳晓慧 陈红英 李庆豪 金鑫 马俊兴 马世杰 魏战勇 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第10期5190-5201,共12页
为探究猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染对仔猪免疫器官的影响,选取8头5日龄健康仔猪作为研究对象,随机分为对照组(n=4)和PEDV感染组(n=4)。PEDV感染仔猪后观察并记录临床症状,在病毒感染2 d后实施安乐死并... 为探究猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染对仔猪免疫器官的影响,选取8头5日龄健康仔猪作为研究对象,随机分为对照组(n=4)和PEDV感染组(n=4)。PEDV感染仔猪后观察并记录临床症状,在病毒感染2 d后实施安乐死并采集胸腺、脾、肠系膜淋巴结、髂下淋巴结、腹股沟淋巴结、肩前淋巴结、下颌淋巴结和肺门淋巴结。利用HE染色观察各免疫器官的病理学变化,通过IHC、Western blot和RT-qPCR分别检测病毒在免疫器官的分布、表达量以及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、干扰素-β(interferonβ,IFN-β)、白细胞介素-1(interleukin 1,IL-1)与白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)表达量的变化。结果显示:仔猪感染PEDV 1 d后发生水样腹泻。第二天剖检观察到各淋巴结有不同程度的肿大。HE染色发现PEDV主要引起脾脏红髓部分增多,脾索和脾窦界限模糊,脾窦中可见大量的细胞破裂;肠系膜淋巴结中小梁增生变厚,淋巴小结结构模糊不清,数量减少。IHC和RT-qPCR结果显示,PEDV在脾脏、肠系膜淋巴结等免疫器官均有分布,其中肠系膜淋巴结内病毒载量最高;而Western blot未能在以上组织中检测到该病毒。RT-qPCR检测脾脏和肠系膜淋巴结结果表明TNF-α、IFN-β和IL-1均有不同程度的升高,IL-6未发生明显变化。上述结果说明PEDV感染仔猪后部分免疫器官结构受到破坏,且影响了脾脏和肠系膜淋巴结中免疫相关因子TNF-α、IFN-β和IL-1的转录水平,这也为深入研究PEDV的致病机制提供了坚实的基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 仔猪 免疫器官 病理损伤 免疫相关因子 病毒分布
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猪流行性腹泻病毒感染仔猪空肠组织的转录组学分析
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作者 曾德平 陆颖 +8 位作者 余科辰 卢峥朴 柏家果 秦秋英 隆美金 陈樱 韦祖樟 黄伟坚 欧阳康 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期11-18,共8页
猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染仔猪可引起严重腹泻,导致肠道黏膜损伤、免疫功能低下。为探究PEDV感染仔猪空肠基因组转录水平的变化,筛选宿主免疫应答的差异表达基因,本研究收集PEDV感染仔猪的空肠组织,利用RNA-Seq技术进行转录组学测序... 猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染仔猪可引起严重腹泻,导致肠道黏膜损伤、免疫功能低下。为探究PEDV感染仔猪空肠基因组转录水平的变化,筛选宿主免疫应答的差异表达基因,本研究收集PEDV感染仔猪的空肠组织,利用RNA-Seq技术进行转录组学测序分析。RNA-seq结果显示,与正常未感染仔猪相比,PEDV感染仔猪存在339个显著差异表达基因(DEGs),其中182个上调基因,157个下调基因。GO分子功能结果显示,免疫相关差异表达基因主要与免疫球蛋白和受体结合、T细胞增殖等有关。KEGG通路富集结果显示,差异表达基因主要涉及TNF信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用、Toll样受体信号通路、Janus激酶/信号转导与转录激活子信号通路以及RIG-I受体信号通路等;最后再利用qRT-PCR对差异表达基因进行验证,其结果与转录组学结果基本一致。本研究为进一步研究PEDV感染导致宿主免疫应答变化机制提供了科学依据。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 转录组分析 差异表达 RNA-SEQ 先天免疫
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表达猪流行性腹泻病毒S1基因重组罗伊氏黏液乳杆菌诱导仔猪特异性免疫应答的研究
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作者 国桂海 马茹梦 +9 位作者 尹方洁 刘芯孜 王梓 孟伟静 李佳璇 崔文 姜艳平 唐丽杰 赵海渊 王晓娜 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第9期4581-4592,共12页
旨在研究猪源罗伊氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)作为活菌载体表达猪流行性腹泻病毒保护性抗原S1,口服免疫新生仔猪后进行免疫效果评价,以期研制安全高效的口服黏膜疫苗制剂。本研究构建表达PEDV S1的重组乳酸菌pPG-T7g10-S... 旨在研究猪源罗伊氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)作为活菌载体表达猪流行性腹泻病毒保护性抗原S1,口服免疫新生仔猪后进行免疫效果评价,以期研制安全高效的口服黏膜疫苗制剂。本研究构建表达PEDV S1的重组乳酸菌pPG-T7g10-S1/L.reuteri J31,进行生长特性、重组质粒的遗传稳定性、体外IPEC-J2细胞黏附特性,并进行新生仔猪口服重组菌免疫效果的评估。结果显示,重组菌pPG-T7g10-S1/L.reuteri J31相对于亲本株其生长特性未发生显著改变,质粒能够稳定遗传,在仔猪空肠具有较强的定植能力;新生仔猪口服免疫重组菌后,产生黏膜特异性SIgA抗体与血清特异性IgG抗体,且均具有中和PEDV的活性,能够诱导仔猪产生Th1、Th2和Th17型细胞免疫应答反应。综上所述,本研究成功构建重组乳酸菌pPG-T7g10-S1/L.reuteri J31,口服免疫重组菌可诱导仔猪显著产生体液免疫、黏膜免疫和Th1、Th2和Th17型细胞免疫应答,为开发PEDV的口服疫苗候选制剂奠定了理论和实验基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 猪源罗伊氏黏液乳杆菌 口服疫苗
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儿茶提取物对猪流行性腹泻病毒感染幼龄仔猪结肠的保护作用
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作者 李欢欢 余晨敏 +7 位作者 田晓榕 李瑞 李宗云 张焱焱 赵迪 王蕾 侯永清 吴涛 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1360-1369,共10页
【目的】以7日龄仔猪为研究对象,探究儿茶提取物(TCE)对猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染幼龄仔猪结肠的保护效果及机制。【方法】将体重相近的18头幼龄仔猪随机分为3组:对照组、PEDV组和TCE+PEDV组,每组6头猪。试验周期11 d,0~3 d为适应期,4... 【目的】以7日龄仔猪为研究对象,探究儿茶提取物(TCE)对猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染幼龄仔猪结肠的保护效果及机制。【方法】将体重相近的18头幼龄仔猪随机分为3组:对照组、PEDV组和TCE+PEDV组,每组6头猪。试验周期11 d,0~3 d为适应期,4~11 d为试验期。试验期对照组和PEDV组仔猪灌服人工奶,TCE+PEDV组仔猪灌服含有TCE(0.01 g/kg BW)的人工奶;试验第8天PEDV组及TCE+PEDV组仔猪灌服3 mL 10^(6) TCID _(50)/0.1 mL PEDV,对照组仔猪灌服3 mL DMEM培养基。试验第11天将所有仔猪麻醉后屠宰,采集仔猪结肠组织,测定TCE对PEDV感染仔猪结肠形态结构、抗氧化能力、炎性因子及离子通道相关基因表达的影响。【结果】与对照组相比,PEDV组仔猪结肠组织形态受损,隐窝深度显著增加(P<0.05);灌服TCE可有效缓解PEDV感染导致的仔猪结肠损伤,与PEDV组相比,TCE+PEDV组仔猪结肠隐窝深度显著变浅(P<0.05)。与对照组相比,PEDV感染组仔猪结肠中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著升高(P<0.05);与PEDV组相比,TCE+PEDV组仔猪结肠GSH-Px、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、髓过氧化物酶(MPO)活性均无显著变化(P>0.05)。PEDV感染后可检测到仔猪结肠组织内PEDV M、N、S基因表达,且干扰素(IFN)信号通路相关基因ISG 15、IRF 7,炎性因子基因IL-1β、IL-8、REG 3 G及离子通道相关基因AQP 10、APOB及MMP 13表达量均显著上调(P<0.05),IFN-β基因表达量显著下调(P<0.05);与PEDV组相比,TCE+PEDV组仔猪结肠中PEDV M、N、S基因及ISG 15、IL-1β、IL-8、REG 3 G、IRF 7、APOB、MMP 9基因表达量均显著下调(P<0.05),IFN-β基因表达量显著上调(P<0.05)。【结论】PEDV感染导致幼龄仔猪结肠组织黏膜损伤,灌服0.01 g/kg BW的TCE可缓解PEDV感染导致的结肠组织受损。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(pedV) 儿茶提取物 结肠 炎症反应
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紧密连接蛋白CLDN4促进猪流行性腹泻病毒感染
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作者 李程程 赵永祥 +6 位作者 曹秋霞 宋旭 李宇鹏 范宝超 郭容利 徐业芬 李彬 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2826-2835,共10页
紧密连接蛋白在多种病毒感染过程中起着重要作用,紧密连接蛋白4(claudin-4,CLDN4)是紧密连接蛋白家族中的主要成员之一,其在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染中作用尚不明确。为探索PEDV感染对CLDN4表达的... 紧密连接蛋白在多种病毒感染过程中起着重要作用,紧密连接蛋白4(claudin-4,CLDN4)是紧密连接蛋白家族中的主要成员之一,其在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染中作用尚不明确。为探索PEDV感染对CLDN4表达的影响以及CLDN4在PEDV感染中的作用,本研究通过荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测了PEDV感染后CLDN4的转录水平与蛋白表达情况。其次,构建了CLDN 4基因的真核表达质粒,设计了靶向CLDN 4的特异性干扰RNA,通过qPCR、Western blot、间接免疫荧光(IFA)和PEDV病毒滴度测定检测了过表达和敲减CLDN4对PEDV复制的影响。最后,检测了过表达CLDN4对PEDV吸附与侵入阶段的影响。结果显示,PEDV感染可上调细胞中CLDN 4的转录与蛋白表达水平,过表达CLDN4显著促进PEDV的复制,而干扰CLDN4表达抑制PEDV复制,并且CLDN4蛋白可促进PEDV的吸附与侵入。本研究表明CLDN4蛋白具有促进PEDV感染与复制的作用,为研究CLDN4的功能与解析PEDV的复制机制提供参考。 展开更多
关键词 CLDN4 猪流行性腹泻病毒 促进 感染
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猪流行性腹泻病毒S1蛋白的真核表达及中和性单克隆抗体制备
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作者 李春震 李青梅 +5 位作者 邹婉莹 孟泽锟 孙亚宁 杨苏珍 郭军庆 张改平 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第10期4854-4863,共10页
【目的】制备猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S1重组蛋白及其中和性单克隆抗体,为PEDV诊断试剂和新型疫苗研发提供材料。【方法】构建可表达S1蛋白的重组质粒,转染HEK293F细胞,以镍亲和层析和凝胶过滤层析进行... 【目的】制备猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S1重组蛋白及其中和性单克隆抗体,为PEDV诊断试剂和新型疫苗研发提供材料。【方法】构建可表达S1蛋白的重组质粒,转染HEK293F细胞,以镍亲和层析和凝胶过滤层析进行蛋白纯化。将PEDV CH/Hubei/2016毒株接种于Vero细胞进行培养增殖,对病毒液进行浓缩并利用凝胶过滤层析纯化PEDV,以SDS-PAGE及Western blotting对纯化的PEDV进行鉴定后免疫BALB/c小鼠以制备杂交瘤细胞;以间接ELISA及免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛选阳性杂交瘤细胞,并通过病毒中和试验筛选鉴定抗PEDV S1蛋白中和性单克隆抗体。【结果】SDS-PAGE和Western blotting结果显示,S1重组蛋白在HEK293F细胞培养上清中高效表达。获得TCID_(50)为1×10^(-6.5)/0.1 mL纯化的PEDV。筛选获得5株稳定分泌抗PEDV S1重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株2E1E10、4A8C8、8G9B11、9H8H1和10C9A5,其腹水的IPMA和ELISA效价分别为6.4×10^(-4)至1.28×10^(-5)和6.4×10^(-5)至1.024×10^(-7)。病毒中和试验结果显示,单克隆抗体2E1E10和4A8C8对PEDV有显著中和活性,对DR13毒株的半数抑制浓度(IC_(50))分别为1.212和1.203μg/mL,对CHHB毒株的IC 50分别为0.948和1.712μg/mL。【结论】本研究获得了具有良好抗原活性的PEDV S1重组蛋白和抗S1蛋白中和性单克隆抗体,为PEDV诊断试剂和疫苗研发奠定良好的研究基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(pedV) S1蛋白 单克隆抗体 中和活性 广谱反应性
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猪流行性腹泻病毒HNxp23株的分离鉴定及其基因特性分析
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作者 饶丹 秦锋 +11 位作者 阮梦凡 葛雨 张明旭 杨喜梅 李美佳 陈文雪 于林洋 赵攀登 胡静 刘向楠 郑全芳 董建国 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第9期79-86,共8页
为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本试验对2023年9月河南省西平县某规模化猪场疑似感染PEDV的腹泻猪进行样品采集、PCR鉴定、病毒分离、间接免疫荧光鉴定和电子显微镜观察,并对病毒重要基因进行测序分析。结果显示,成功... 为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本试验对2023年9月河南省西平县某规模化猪场疑似感染PEDV的腹泻猪进行样品采集、PCR鉴定、病毒分离、间接免疫荧光鉴定和电子显微镜观察,并对病毒重要基因进行测序分析。结果显示,成功分离得到1株PEDV毒株,命名为HNxp23。遗传进化分析结果显示,HNxp23毒株纤突蛋白基因S、膜蛋白基因M和辅助蛋白基因ORF3均与中国黑龙江分离毒株CH-HLJJS-2022位于同一分支,属于GⅡa亚型。氨基酸同源性分析结果显示,HNxp23毒株S和ORF3蛋白与中国黑龙江分离毒株CH-HLJJS-2022同源性最高,分别为98.7%和99.4%;M蛋白与中国北京分离毒株LZW同源性最高,为99.3%。S蛋白氨基酸抗原表位分析结果显示,与CV777毒株相比,HNxp23毒株S蛋白在抗原表位COE区、SS2区、SS6区和2C10区分别存在19、1、1和0个氨基酸差异。结果表明,本试验分离毒株HNxp23属于PEDV的GⅡa亚型,S蛋白在COE区易发生氨基酸突变。本试验结果可为河南地区PEDV的流行特征分析以及PEDV疫苗和药物的研发提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(pedV) S基因 M基因 ORF3基因
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影响猪流行性腹泻病毒复制的关键lncRNA筛选及其功能验证
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作者 杨荔 杜小妹 +3 位作者 刘梦媛 吴圣龙 包文斌 吴正常 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期792-800,共9页
[目的]探究长链非编码RNA(lncRNA)在猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)感染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)过程中的作用。[方法]利用感染复数(MOI)为1的PEDV感染IPEC-J2细胞构建细胞病变模型,通过RNA-Seq进行lncRNA测... [目的]探究长链非编码RNA(lncRNA)在猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)感染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)过程中的作用。[方法]利用感染复数(MOI)为1的PEDV感染IPEC-J2细胞构建细胞病变模型,通过RNA-Seq进行lncRNA测序,筛选出影响PEDV复制的关键lncRNA;利用实时荧光定量PCR和核质分离检测lncRNA表达和细胞定位;构建RNA干扰载体并转染IPEC-J2细胞,通过病毒拷贝数测定、Western blotting、半数组织培养感染剂量(TCID_(50))以及间接免疫荧光试验(IFA)检测lncRNA表达对PEDV复制水平的影响。[结果]PEDV感染IPEC-J2细胞24 h时,细胞病变最为明显,成功构建细胞病变模型。与对照组相比,PEDV感染组中存在61个差异表达lncRNA,其中19个上调,42个下调,筛选出1个显著上调且差异倍数较大的lncRNA——lncMSTRG.10733.2。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,PEDV感染IPEC-J2细胞后,lncMSTRG.10733.2表达水平显著上调(P<0.05)。核质分离测定结果显示,lncMSTRG.10733.2主要分布在IPEC-J2细胞质中。成功构建了lncMSTRG.10733.2瞬时干扰IPEC-J2细胞,干扰效率为45.9%。实时荧光定量PCR和Western blotting结果显示,lncRNA干扰后,PEDV-M基因mRNA相对表达量和PEDV N蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。TCID_(50)测定结果显示,lncRNA干扰后PEDV滴度极显著上升(P<0.01);IFA结果显示,lncRNA干扰后IPEC-J2细胞中的PEDV N蛋白荧光分布水平明显增加。[结论]本研究基于高通量测序从细胞水平上筛选鉴定出1个与PEDV感染密切相关的lncRNA,其表达水平上调有利于提高猪对PEDV感染的抵抗能力。研究结果揭示了lncRNA在PEDV感染宿主过程中的重要作用,为今后制定PEDV的抗病育种工作策略和筛选分子标记物奠定基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(pedV) lncRNA IPEC-J2 病毒复制
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基于CRISPR/Cas9技术的猪TRIM8基因敲除细胞系构建及其对猪流行性腹泻病毒复制的调控作用
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作者 王威 毕祯彬 +5 位作者 顾善绅 肖叶懿 周雅静 吴圣龙 包文斌 王海飞 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第8期3790-3799,共10页
【目的】利用CRISPR/Cas9技术构建三方基序蛋白8(tripartite motif 8,TRIM8)基因敲除的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),并探究TRIM8基因敲除对猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的调控作用,为深入理解TRIM8基因在抗病毒天然免疫中的作用机制及开发新... 【目的】利用CRISPR/Cas9技术构建三方基序蛋白8(tripartite motif 8,TRIM8)基因敲除的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),并探究TRIM8基因敲除对猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的调控作用,为深入理解TRIM8基因在抗病毒天然免疫中的作用机制及开发新的PEDV防控策略提供基因资源和理论依据。【方法】在猪TRIM8基因转录本第1外显子区域设计3条sg RNAs(sg RNA1、sg RNA2和sg RNA3),经退火形成双链DNA,与线性化p GK1.2载体连接,产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞进行鉴定。将重组载体转染IPEC-J2细胞。PCR扩增敲除位点附近序列,并通过测序判断sg RNA敲除效率;利用T7核酸内切酶Ⅰ(M0302)酶切鉴定阳性细胞克隆,通过TA克隆测序鉴定敲除序列;利用Western blotting检测基因敲除细胞中TRIM8蛋白表达情况。利用半数组织培养感染剂量(TCID_(50))和实时荧光定量PCR检测TRIM8基因敲除后PEDV复制的变化情况。【结果】重组载体测序结果显示,sg RNAs与p GK1.2成功连接。敲除效率分析发现,3个sg RNAs中只有sg RNA2有敲除效率。PCR产物经T7核酸内切酶Ⅰ(M0302)酶切筛选出8个阳性单克隆细胞。TA克隆测序分析发现,TRIM8基因2个等位基因序列分别缺失5和9bp。Western blotting结果表明,TRIM8基因敲除细胞中未见TRIM8蛋白表达。TCID_(50)和实时荧光定量PCR检测结果显示,与野生型IPEC-J2细胞相比,敲除TRIM8基因后显著上调了PEDV的病毒滴度(P<0.05),且PEDV M基因和N蛋白也显著上调(P<0.05)。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了TRIM8基因敲除的IPEC-J2细胞,并提高了PEDV在宿主细胞中复制的能力。TRIM8基因敲除细胞可为探究TRIM8基因功能及其调控PEDV复制的分子机制提供材料。 展开更多
关键词 猪 TRIM8基因 猪流行性腹泻病毒(pedV) CRISPR/Cas9技术 病毒复制
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抗猪流行性腹泻病毒药物研究进展
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作者 郝小龙 曾晓雨 +7 位作者 武卓雅 刘亚云 戴银 殷冬冬 尹磊 沈学怀 潘孝成 王洁茹 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第6期83-86,共4页
猪流行性腹泻病是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的以急性水样腹泻、呕吐、脱水为主要症状的一种急性肠道传染病。仔猪最易感,死亡率可高达100%,严重影响养猪业健康发展。RNA病毒变异性高导致现有疫苗无法对PEDV流行毒株提供有效免疫保护... 猪流行性腹泻病是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的以急性水样腹泻、呕吐、脱水为主要症状的一种急性肠道传染病。仔猪最易感,死亡率可高达100%,严重影响养猪业健康发展。RNA病毒变异性高导致现有疫苗无法对PEDV流行毒株提供有效免疫保护,导致防控困难。开发新型抗PEDV药物成为当前研究的重要方向。本文综述讨论了病毒和宿主靶向PEDV药物的抗病毒疗效和机制,以期为PEDV的临床用药提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(pedV) 药物 病毒靶向 宿主靶向 临床应用
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