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多重PCR同时检测口蹄疫病毒、猪水疱病病毒和水疱性口炎病毒 被引量:10
1
作者 钟金栋 花群义 +5 位作者 肖荣海 夏雪山 杨云庆 周晓黎 董俊 邓祖洪 《动物医学进展》 CSCD 2006年第7期55-58,93,共5页
根据基因库中的口蹄疫病毒(FM-DV),猪水疱病病毒(SVDV)和水疱性口炎病毒(VSV)各基因序列,设计了与FMDV,SVDV和VSV互补的3对特异性引物,对样品中的cDNA模板进行了多重PCR扩增及反应条件的优化,结果同时得到与设计相符合的3条特异性条带,... 根据基因库中的口蹄疫病毒(FM-DV),猪水疱病病毒(SVDV)和水疱性口炎病毒(VSV)各基因序列,设计了与FMDV,SVDV和VSV互补的3对特异性引物,对样品中的cDNA模板进行了多重PCR扩增及反应条件的优化,结果同时得到与设计相符合的3条特异性条带,分别为189 bp,125 bp和300 bp。用这3对引物对病毒样品cDNA模板进行多次扩增,均能稳定得到与设计相符合的3条特异性条带。本试验能特异、敏感、快速地鉴定FMDV,SVDV和VSV。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 水疱病毒 水疱 口炎病毒 多重PCR
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多重RT-PCR检测猪口蹄疫病毒、猪水泡病病毒和猪水疱性口炎病毒的研究 被引量:7
2
作者 祁会彩 龚振华 +6 位作者 杨增岐 郑增忍 潘康锁 李葳 黄秀梅 郭福生 蒋正军 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2006年第3期24-26,共3页
建立了一种同时检测猪口蹄疫病毒(FMDV)、猪水泡病病毒(SVDV)和猪水疱性口炎病毒(VSV)三种病原体的多重RT-PCR方法。参照文献报道的基因序列,设计合成了三对特异性引物;PCR扩增条件进行优化后,用这三对引物对同一样品中的FMDV、SVDV、VS... 建立了一种同时检测猪口蹄疫病毒(FMDV)、猪水泡病病毒(SVDV)和猪水疱性口炎病毒(VSV)三种病原体的多重RT-PCR方法。参照文献报道的基因序列,设计合成了三对特异性引物;PCR扩增条件进行优化后,用这三对引物对同一样品中的FMDV、SVDV、VSVRNA模板进行扩增,结果同时得到了三条特异性条带,大小与试验设计相符:FMDV(208bp)、SVDV(862bp)、VSV(638bp),且对猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)核酸扩增结果为阴性;三种病毒RNA模板检出的最小量均为10fg。试验证明,此方法经济、快速、敏感、特异,可用于FMDV、SVDV和VSV这三种猪水泡性疾病的鉴别诊断及流行病学调查。 展开更多
关键词 多重PCR 口蹄疫病毒 水泡病毒 水疱性口炎病毒
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稳定表达猪水疱病病毒P1基因的PK-15细胞系的建立 被引量:2
3
作者 田宏 吴锦艳 +5 位作者 龚真莉 郑海学 孙世琪 尚佑军 刘湘涛 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期478-482,共5页
从猪水疱病全长感染性cDNA中,应用PCR技术扩增到SVDV结构蛋白P1基因,并在目的片段的5′端引入Kozak序列(Kozak,1987),定向克隆于逆转录病毒载体pBABE puro。经PCR、酶切和序列分析鉴定,获得阳性重组质粒。将该重组质粒与水疱性口炎病毒... 从猪水疱病全长感染性cDNA中,应用PCR技术扩增到SVDV结构蛋白P1基因,并在目的片段的5′端引入Kozak序列(Kozak,1987),定向克隆于逆转录病毒载体pBABE puro。经PCR、酶切和序列分析鉴定,获得阳性重组质粒。将该重组质粒与水疱性口炎病毒载体pVSV-G共转染GP2-293细胞,收获假型病毒,在Polybrene的介导下感染PK-15细胞,嘌呤霉素筛选阳性细胞克隆。免疫荧光连续检测阳性克隆传代细胞,发现在不同代次的细胞中均有SVDV P1蛋白表达,而且表达的蛋白可被SVD阳性血清所识别;同时应用PCR技术,可从体外反复传代阳性细胞基因组中扩增到SVD P1基因。表明本次所筛选的阳性细胞克隆不但能持续稳定地表达SVD P1蛋白,而且可携带外源基因进行传代,具有良好的遗传稳定性。 展开更多
关键词 水疱病毒P1基因 重组逆转录病毒载体 PK-15细胞 基因表达
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猪水疱病病毒研究进展 被引量:2
4
作者 成连贵 田相军 司有阁 《动物医学进展》 CSCD 2005年第8期30-33,共4页
猪水疱病是猪的一种急性传染病,与口蹄疫和水疱性口炎等水疱类疫病具有同等的重要性,被世界动物卫生组织(OIE)列为A类疾病。文章主要介绍了本病病原近年来在分子生物学方面的研究概况,主要包括RNA基因组的结构和功能的研究、结构蛋白功... 猪水疱病是猪的一种急性传染病,与口蹄疫和水疱性口炎等水疱类疫病具有同等的重要性,被世界动物卫生组织(OIE)列为A类疾病。文章主要介绍了本病病原近年来在分子生物学方面的研究概况,主要包括RNA基因组的结构和功能的研究、结构蛋白功能的新发现、抗原结构的研究、病毒的诊断研究以及与柯萨奇病毒B5的关系等方面的研究现状。 展开更多
关键词 水疱 水疱病毒 结构蛋白 抗原 诊断
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实时荧光定量RT-PCR检测猪水疱病病毒的研究 被引量:2
5
作者 钟金栋 花群义 +5 位作者 肖荣海 夏雪山 杨云庆 周晓黎 董俊 邓祖洪 《动物医学进展》 CSCD 2006年第8期61-66,共6页
按照猪水疱病病毒结构蛋白VP1基因序列,设计合成引物和探针,经各反应条件的优化,建立了实时荧光定量RT-PCR技术,对猪水疱病病毒进行了特异性、敏感性和重复性试验。结果表明,实时荧光TaqManRT-PCR可检测到每个反应相当于1×102拷贝... 按照猪水疱病病毒结构蛋白VP1基因序列,设计合成引物和探针,经各反应条件的优化,建立了实时荧光定量RT-PCR技术,对猪水疱病病毒进行了特异性、敏感性和重复性试验。结果表明,实时荧光TaqManRT-PCR可检测到每个反应相当于1×102拷贝病毒RNA;与FMDV、VSV等其他水疱性病毒不发生交叉反应;制作的标准曲线中各浓度范围内有极好的线性关系且线性范围宽,相关系数为0.993;与常规的RT-PCR比较,该方法具有快速、特异、敏感、重复性好、可同时检测大量样品等优点。 展开更多
关键词 水疱病毒 荧光TaqMan逆转录 聚合酶链反应 检测
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复方二氯异氰尿酸钠对口蹄疫和猪传染性水疱病病毒的杀灭效力试验
6
作者 丁再棣 何家惠 侯吉波 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 1992年第4期57-58,共2页
以往对口蹄疫和猪传染性水疱病病毒及其流行区域,一般采用工业用烧碱或福尔马林药液消毒。但烧碱有极强的腐蚀性,福尔马林对人畜皮肤粘膜刺激性强,不能直接喷洒畜体,因此都不是很理想的消毒剂。而复方二氯异氰尿酸钠,对皮肤、粘膜无刺激... 以往对口蹄疫和猪传染性水疱病病毒及其流行区域,一般采用工业用烧碱或福尔马林药液消毒。但烧碱有极强的腐蚀性,福尔马林对人畜皮肤粘膜刺激性强,不能直接喷洒畜体,因此都不是很理想的消毒剂。而复方二氯异氰尿酸钠,对皮肤、粘膜无刺激性,对许多微生物有杀灭作用,并具有洗涤去污之功能,能直接喷洒畜体,经试验对以上两种病毒亦有良好的杀灭效力,现报告如下。 展开更多
关键词 水疱 病毒 二氯异氰 尿酸钠
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猪水疱病自杀性DNA疫苗的初步研究 被引量:2
7
作者 孙世琪 郭慧琛 +6 位作者 尹双辉 冯霞 尚佑军 代兴国 刘在新 刘湘涛 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1016-1020,共5页
利用RT-PCR技术,用保真酶扩增获得猪水疱病病毒外壳蛋白1BCD基因,克隆于DNA复制子载体pSCA1中,获得重组质粒pSCA/1BCD。将重组质粒转染BHK-21细胞,RT-PCR法和间接免疫荧光法检测显示,猪水疱病病毒外壳蛋白基因在转染细胞中表达。豚鼠免... 利用RT-PCR技术,用保真酶扩增获得猪水疱病病毒外壳蛋白1BCD基因,克隆于DNA复制子载体pSCA1中,获得重组质粒pSCA/1BCD。将重组质粒转染BHK-21细胞,RT-PCR法和间接免疫荧光法检测显示,猪水疱病病毒外壳蛋白基因在转染细胞中表达。豚鼠免疫试验表明,自杀性DNA疫苗pSCA/1BCD可诱导SVDV特异性抗体和T淋巴细胞增殖。 展开更多
关键词 水疱病毒(svdv) 病毒复制子载体 自杀性DNA疫苗
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猪塞内卡病毒研究进展 被引量:6
8
作者 黄健强 吴静波 《动物医学进展》 北大核心 2019年第3期82-88,共7页
塞内卡病毒属小RNA病毒科塞内卡病毒属,可感染各个年龄段的猪群引发猪自发性水疱病,临床表现与口蹄疫、猪水疱病、水疱性口炎、猪传染性水疱病相似,但感染发病率较低,临床症状较轻。2015年以来,塞内卡病毒相关猪自发性水疱病的流行区域... 塞内卡病毒属小RNA病毒科塞内卡病毒属,可感染各个年龄段的猪群引发猪自发性水疱病,临床表现与口蹄疫、猪水疱病、水疱性口炎、猪传染性水疱病相似,但感染发病率较低,临床症状较轻。2015年以来,塞内卡病毒相关猪自发性水疱病的流行区域迅速扩大,包括巴西、美国、加拿大、中国、泰国和哥伦比亚都相继暴发疫情。另外还出现临床症状加重、新生猪病死率升高等新变化,这些变化给生猪养殖业带来了不小的恐慌,也引起了研究人员的高度重视。为充分了解和掌握塞内卡病毒的最新信息,认清研究的重点和方向,论文对病毒生物学与流行病学特征、临床特性、实验室诊断技术等方面进行了综述。 展开更多
关键词 塞内卡病毒 自发性水疱 流行 临床表现 诊断
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A型猪塞内卡病毒流行病学、致病性、诊断研究进展 被引量:1
9
作者 刘存 刘畅 +4 位作者 刘琪 王静 李秀博 崔尚金 梁琳 《养猪》 2020年第1期102-104,共3页
为了进一步了解A型猪塞内卡病毒的特征,通过查阅并总结A型猪塞内卡病毒文献,对A型猪塞内卡病毒流行病学、致病性、诊断方法等方面进行综述,以期提高人们对A型猪塞内卡病毒的认识和防控意识。
关键词 A型塞内卡病毒 新发 小RNA病毒 特发性水疱
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猪水疱病及其研究概况 被引量:4
10
作者 肖淑敏 张新高 +1 位作者 胡思科 林瑞庆 《广东畜牧兽医科技》 2003年第3期6-8,共3页
猪水疱病(Swine vesicular disease,SVD)是由猪水疱病毒引起的一种急性传染病,以口鼻腔粘膜、蹄部等出现水疱或溃烂为特征.本病于1966年10月首先发现于意大利Lombardy的猪群,以后在欧洲的许多国家相继发生猪水疱病的流行蔓延,引起严重... 猪水疱病(Swine vesicular disease,SVD)是由猪水疱病毒引起的一种急性传染病,以口鼻腔粘膜、蹄部等出现水疱或溃烂为特征.本病于1966年10月首先发现于意大利Lombardy的猪群,以后在欧洲的许多国家相继发生猪水疱病的流行蔓延,引起严重的经济损失并导致世界肉食市场的混乱.1973年1月国际兽疫局专门召开会议,研究措施并制定条例.现就本病的研究概况作一综述. 展开更多
关键词 水疱 水疱病毒 流行特点 症状 理变化 诊断 防制
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猪水疱病重组蛋白P1的豚鼠免疫试验
11
作者 田宏 吴锦艳 +4 位作者 尚佑军 郑海学 孙世琪 刘湘涛 谢庆阁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期626-629,共4页
目的:研究重组猪水疱病病毒(SVDV)P1蛋白的免疫活性。方法:将自制的猪水疱病抗原经佐剂乳化免疫豚鼠,并应用T淋巴细胞增殖试验、阻断ELISA及微量细胞中和试验检测了所制备的免疫原免疫豚鼠后在体液免疫和细胞免疫方面进行了全面的评价... 目的:研究重组猪水疱病病毒(SVDV)P1蛋白的免疫活性。方法:将自制的猪水疱病抗原经佐剂乳化免疫豚鼠,并应用T淋巴细胞增殖试验、阻断ELISA及微量细胞中和试验检测了所制备的免疫原免疫豚鼠后在体液免疫和细胞免疫方面进行了全面的评价。结果:前期制备的抗原免疫豚鼠后具有良好的免疫原性。结论:对该亚单位疫苗可做进一步的开发应用。 展开更多
关键词 水疱病毒 亚单位疫苗 豚鼠 免疫试验
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详解猪水疱病 被引量:3
12
作者 李凯年 孟丹 盂昱(编译) 《猪业科学》 2010年第4期26-28,共3页
猪水疱病(Swine vesicular disease, SVD),又称猪传染性水疱病,是猪水疱病病毒(SVDV)引起的一种急性、热性接触性传染病。1966年10月该病首先发现于意大利Lombardy的猪群,以后在欧洲的许多国家相继发生猪水疱病的流行蔓延,引起... 猪水疱病(Swine vesicular disease, SVD),又称猪传染性水疱病,是猪水疱病病毒(SVDV)引起的一种急性、热性接触性传染病。1966年10月该病首先发现于意大利Lombardy的猪群,以后在欧洲的许多国家相继发生猪水疱病的流行蔓延,引起严重的经济损失并导致世界肉食市场的混乱。 展开更多
关键词 水疱病毒 临床意义 详解 防控 接触性传染 经济损失 传染性 意大利
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猪水疱病的综合防治 被引量:5
13
作者 孙凌志 《猪业科学》 2010年第4期42-43,共2页
猪水泡病(swinevesiculardiseaseSVD)又称猪传染性水疱病,是由猪水泡病病毒引起猪的一种急性、热性、接触性传染病。以蹄冠、趾间、蹄踵以及偶见唇、舌、鼻镜和乳头等部位周围皮肤或黏膜上发生水泡为特征。
关键词 水疱 综合防治 水泡病毒 接触性传染 传染性 乳头 鼻镜
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浅谈猪水疱病 被引量:1
14
作者 翁善钢 《今日养猪业》 2011年第4期24-25,共2页
一、病原学猪水疱病病毒(Swine vesicular disease virus,SVDV)属于小RNA病毒科、肠道病毒属。该病毒只有1个血清型,大约有4种不同的基因型。该病毒与人的库克萨基病毒B5型有共同抗原病毒经56℃条件下1小时即可灭活,在pH2.5~12.0环境... 一、病原学猪水疱病病毒(Swine vesicular disease virus,SVDV)属于小RNA病毒科、肠道病毒属。该病毒只有1个血清型,大约有4种不同的基因型。该病毒与人的库克萨基病毒B5型有共同抗原病毒经56℃条件下1小时即可灭活,在pH2.5~12.0环境下可以稳定存在。 展开更多
关键词 水疱病毒 小RNA病毒 VIRUS 肠道病毒 共同抗原 原学 血清型 基因型
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猪塞尼卡病毒A感染
15
作者 万遂如 《养猪》 2018年第6期103-104,共2页
在兽医临床上猪常发生水疱病(VD),一般都认为是由口蹄疫病毒(FMDV,小RNA病毒科口疮病毒属)、水疱性口炎病毒(VSIV.弹状病毒科水疱病毒属)、猪传染性水疱疹病毒(VESV,杯状病毒科水疱疹病毒属)与猪水疱病病毒(SVDV,小RNA病... 在兽医临床上猪常发生水疱病(VD),一般都认为是由口蹄疫病毒(FMDV,小RNA病毒科口疮病毒属)、水疱性口炎病毒(VSIV.弹状病毒科水疱病毒属)、猪传染性水疱疹病毒(VESV,杯状病毒科水疱疹病毒属)与猪水疱病病毒(SVDV,小RNA病毒科肠病毒属)等4种RNA病毒所引起的。 展开更多
关键词 水疱病毒 病毒A 小RNA病毒 水疱性口炎病毒 感染 疱疹病毒 口蹄疫病毒 兽医临床
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4种猪源病毒多重PCR检测方法的建立及初步应用 被引量:8
16
作者 王莹 刘雨田 +5 位作者 孙成友 迟田英 宋芳芳 于小静 吴晓东 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2021年第6期112-117,共6页
为建立同时检测非洲猪瘟病毒(ASFV)、尼帕病毒(NiV)、猪水疱病病毒(SVDV)以及口蹄疫病毒(FMDV)等4种猪源病毒的多重PCR检测方法,根据相关文献和GenBank中登录的参考病毒株序列,针对保守区域设计特异性引物,在单一PCR基础上对多重PCR条... 为建立同时检测非洲猪瘟病毒(ASFV)、尼帕病毒(NiV)、猪水疱病病毒(SVDV)以及口蹄疫病毒(FMDV)等4种猪源病毒的多重PCR检测方法,根据相关文献和GenBank中登录的参考病毒株序列,针对保守区域设计特异性引物,在单一PCR基础上对多重PCR条件进行优化。通过各项反应条件优化,确定ASFV、NiV、FMDV、SVDV引物体积比为2:1:1:1,退火温度为57℃以及35个循环时,扩增效果最好。敏感性试验显示,ASFV、NiV、FMDV和SVDV的最低检测限分别为390.0、46.0、20.9以及37.0 copies/μL。特异性试验显示,建立的多重PCR方法不与猪圆环病毒(PCV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)发生非特异性反应。利用本研究建立的多重PCR方法对48份临床样品进行检测,得到的检测结果与单一PCR一致。结果表明,建立的多重PCR方法具有敏感性高、特异性强、重复性好的优点。本方法的建立为ASFV、NiV、FMDV和SVDV 4种猪病的快速检测、临床诊断和流行病学调查提供了新技术手段。 展开更多
关键词 非洲 尼帕病毒 口蹄疫 水疱 源疫 多重PCR
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猪口蹄疫与传染性水疱病的鉴别诊断
17
作者 李成珍 唐式校 《养殖技术顾问》 2013年第3期102-102,共1页
1口蹄疫 猪口蹄疫是重要的危害严重的人兽共患病,具有急性、发热性高度接触传染的特性。主要感染偶蹄家畜,如猪、牛、羊、鹿、骆驼等。猪口蹄疫的临床特征是蹄冠、趾问、蹄踵皮肤发生水疱疮的烂斑,少数病猪口腔黏膜和鼻盘也有同样... 1口蹄疫 猪口蹄疫是重要的危害严重的人兽共患病,具有急性、发热性高度接触传染的特性。主要感染偶蹄家畜,如猪、牛、羊、鹿、骆驼等。猪口蹄疫的临床特征是蹄冠、趾问、蹄踵皮肤发生水疱疮的烂斑,少数病猪口腔黏膜和鼻盘也有同样变化。口蹄疫是世界性的疫病,许多国家和地区均有发生,而且扑灭相当困难。目前已查清的口蹄疫病毒具有7个型,即甲型、乙型、丙型、南非1—3型、亚洲1型。 展开更多
关键词 口蹄疫 水疱 鉴别诊断 传染性 口蹄疫病毒 人兽共患 接触传染 临床特征
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猪传染性水疱病的流行特点和防控 被引量:5
18
作者 王学明 《当代畜禽养殖业》 2016年第11期51-51,共1页
猪传染性水泡病是一种急性传染病,流行性强,发病率高,临床症状和口蹄疫类似,常被误诊为口蹄疫。本文详细分析了猪传染性水泡病的主要临床症状、流行特点和鉴别诊断方法,以期提高人们对此病的认识,制定科学的防治措施。
关键词 水疱 水疱病毒 流行特点 诊断 防控
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猪水疱病和水疱型口炎的诊治 被引量:4
19
作者 许园园 冯丽芳 《当代畜禽养殖业》 2017年第6期23-24,共2页
1猪水泡病猪水泡病是由水泡病毒引起的一种急性、热性、接触性传染病。该病只发生于猪,不感染牛、马、羊。其主要特征是猪蹄、鼻、口腔、乳房及皮肤出现水疱和烂斑,与猪口蹄疫的临症表现很相似。该病流行无明显的季节性,不同品种、年龄... 1猪水泡病猪水泡病是由水泡病毒引起的一种急性、热性、接触性传染病。该病只发生于猪,不感染牛、马、羊。其主要特征是猪蹄、鼻、口腔、乳房及皮肤出现水疱和烂斑,与猪口蹄疫的临症表现很相似。该病流行无明显的季节性,不同品种、年龄的猪均可感染发病,传染快,发病率高,可达70%~80%,但病死率很低。(1)病原分析。病原体是肠道病毒属的猪水泡病病毒,与人的肠道病毒柯萨奇B5有抗原关系。 展开更多
关键词 水疱 水泡 口蹄疫 烂斑 肠道病毒 特征性症状 隐性型 热性 接触性传染 水疱性口炎
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猪水疱病的综合防治 被引量:4
20
作者 陈庆勋 孙凌志 荣兵 《中国猪业》 2008年第12期39-40,共2页
猪水泡病(swine vesicular disease SVD)又称猪传染性水疱病,是由猪水泡病病毒引起猪的一种急性、热性、接触性传染病。以蹄冠、趾间、蹄踵以及偶见唇、舌、鼻镜和乳头等部位周围皮肤或黏膜上发生水泡为特征。
关键词 水疱 综合防治 水泡病毒 接触性传染 传染性 乳头 鼻镜
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