猪星状病毒(PAstV)在中国流行的研究进展 被引量：5

1

作者 周以铁 王宇涛 +2 位作者 孙静 苏明俊 宋厚辉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期769-774,共6页

猪星状病毒(Porcine astrovirus,PAstV)是一种无包膜的、单股正链RNA病毒,存在5种基因型,是一种常见的猪肠道传染病病毒。PAstV广泛流行于我国猪群中,常与其他猪肠道病原混合感染而引起腹泻,给我国养猪业带来了严重的经济损失。本文综述... 猪星状病毒(Porcine astrovirus,PAstV)是一种无包膜的、单股正链RNA病毒,存在5种基因型,是一种常见的猪肠道传染病病毒。PAstV广泛流行于我国猪群中,常与其他猪肠道病原混合感染而引起腹泻,给我国养猪业带来了严重的经济损失。本文综述了PAstV在我国2006年~2021年间猪群中的流行情况,系统分析了PAstV在不同年份的阳性率、各省份地区分布情况、与不同猪肠道病原的混合感染情况以及不同基因型的流行特点,为掌握我国PAstV流行情况以及病毒防控提供重要参考。 展开更多

关键词 猪星状病毒 混合感染 不同基因型 肠道病原 地区分布情况 养猪业 肠道传染病 单股正链RNA病毒

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广西猪星状病毒分子流行病学调查 被引量：9

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作者 兰家暖 刘磊 +6 位作者 郭旋 张民秀 卢冰霞 黄福标 覃熊慧 张宁 黄伟坚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期602-606,共5页

为了解猪星状病毒(PAstV)在广西猪群中的流行情况,本研究采用RT-套式PCR(RT-nPCR)方法,对采自广西7个市县29个不同规模化猪场共315份猪腹泻粪便样品进行PAstV检测,并将其中46个PAstV扩增产物进行测序,与PAstV参考株序列进行比对及基因... 为了解猪星状病毒(PAstV)在广西猪群中的流行情况,本研究采用RT-套式PCR(RT-nPCR)方法,对采自广西7个市县29个不同规模化猪场共315份猪腹泻粪便样品进行PAstV检测,并将其中46个PAstV扩增产物进行测序,与PAstV参考株序列进行比对及基因型分析。结果显示,PAstV感染猪场阳性率达82.8%;检测样品阳性率达40.3%;1日龄～30日龄仔猪感染率最高,达44.9%;四季中,春季(2月～4月)感染率最高,为54.3%。另外,遗传进化分析显示本研究克隆获得的46个PAstV序列均属于PAstVⅠ型,其中又可以分为5个亚群。调查结果表明广西猪群普遍存在PAstV感染。 展开更多

关键词 猪星状病毒 分子流行病学 基因型分析

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猪星状病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用 被引量：4

3

作者 商晓桂 郭伟 +4 位作者 杨莲茹 杨志彪 华修国 朱建国 崔立 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1049-1053,共5页

本研究旨在建立一种能够快速、简便、灵敏地检测猪星状病毒的基于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。根据已报道的猪星状病毒ORF2基因序列,设计并合成1对引物,通过PCR扩增ORF2基因片段,将测序正确的ORF2基因片段克隆入pMD18-T载体,转化... 本研究旨在建立一种能够快速、简便、灵敏地检测猪星状病毒的基于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。根据已报道的猪星状病毒ORF2基因序列,设计并合成1对引物,通过PCR扩增ORF2基因片段,将测序正确的ORF2基因片段克隆入pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,经测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线,并对其灵敏性、特异性和重复性进行验证。结果表明,猪星状病毒荧光定量PCR的标准曲线Ct值与模板浓度呈良好的线性关系,熔解曲线特异,灵敏度可达1×101拷贝,是普通PCR检测方法的100倍,特异性和重复性较好。本次建立的猪星状病毒荧光定量PCR检测方法具有快速、简便、敏感等优点,有重要的实用价值。 展开更多

关键词 SYBR Green Ⅰ 猪星状病毒 检测

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猪星状病毒的流行病学调查及遗传进化分析 被引量：5

4

作者 李本强 陶洁 +3 位作者 程靖华 石迎 乔长涛 刘惠莉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1046-1050,1073,共6页

为了解上海地区猪群中猪星状病毒(PAstV)的流行现状及其遗传特性,本研究于2016年~2020年间在上海不同地区10个猪场共采集了1416份仔猪腹泻粪便样品,利用RT-PCR方法及生物信息学技术进行检测与分析。结果显示,PAstV的总阳性率为26.2%,PA... 为了解上海地区猪群中猪星状病毒(PAstV)的流行现状及其遗传特性,本研究于2016年~2020年间在上海不同地区10个猪场共采集了1416份仔猪腹泻粪便样品,利用RT-PCR方法及生物信息学技术进行检测与分析。结果显示,PAstV的总阳性率为26.2%,PAstV与其他腹泻病病原的混合感染情况较复杂,二重感染率占比达56.93%,主要以PAstV/猪嵴病毒(PKoV)为主(20.07%);三重感染率占比29.41%,以PAstV/PKoV/猪流行性腹泻病毒(PEDV)(10.09%)感染模式为主;四重感染率为11.4%,以PAstV/牛病毒性腹泻病毒(BVDV)/猪札幌病毒(PoSaV)/猪萨佩罗病毒(PSV)(13.51%)感染为主。猪群中PAstV的流行与气温差有很大关系,在季节交替时节流行率较高,特别是秋冬交替时节。选取其中2个PAstV阳性样品(JS-PAstV和CM-PAstV)进行全基因组序列的测定和分析,结果显示两者的全基因组同源性不高,仅为73.8%。全基因组进化分析显示,CM-PAstV分别与挪威、日本、美国的PAstV 3型的亲缘性较近;而JS-PAstV与匈牙利的PAstV 3型的亲缘性最近。对ORF2基因进行病毒重组分析,显示JS-PAstV和CM-PAstV的ORF2基因均与人星状病毒之间存在重组现象。提示,上海地区猪群中存在PAstV 3型的流行,且遗传距离较远,但存在与人星状病毒重组的风险,需进一步监测关注。本研究数据丰富了国内PAstV的流行病学资料,可为该病的风险防控提供科学数据。 展开更多

关键词 猪星状病毒 混合感染 季节性 遗传进化分析 基因序列重组

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猪星状病毒ORF2基因的克隆及序列分析 被引量：5

5

作者 兰家暖 刘磊 +5 位作者 郭旋 刘欢 卢冰霞 张民秀 廖承球 黄伟坚 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2012年第12期27-31,I0001,共6页

参考GenBank上发表的猪星状病毒亚基因组序列,设计1对引物,对猪星状病毒广西流行株衣壳蛋白ORF2基因进行扩增,最终克隆得到PAstV/NNJG7株的衣壳蛋白完整序列。序列分析发现,其ORF2全长2 358bp,编码786个氨基酸;与猪星状病毒Ⅰ型参考株... 参考GenBank上发表的猪星状病毒亚基因组序列,设计1对引物,对猪星状病毒广西流行株衣壳蛋白ORF2基因进行扩增,最终克隆得到PAstV/NNJG7株的衣壳蛋白完整序列。序列分析发现,其ORF2全长2 358bp,编码786个氨基酸;与猪星状病毒Ⅰ型参考株核苷酸同源性最高,为77.3%～79.4%;在ORF1b和ORF2连接处有一段高度保守的序列,在ORF2 3′端有一段长83bp非翻译序列及一个含43bp高度保守的茎环样基序。本试验不仅丰富了猪星状病毒衣壳蛋白基因序列,也为基因疫苗和诊断试剂盒的研制提供材料及理论依据。 展开更多

关键词 猪星状病毒 ORF2基因 基因克隆 序列分析

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猪嵴病毒和猪星状病毒双重RT-PCR检测方法的建立 被引量：3

6

作者 顾凡 覃娟娟 +5 位作者 蔡雨函 李新琼 黄剑波 朱玲 刘书亮 徐志文 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期279-281,290,共4页

为建立同时检测猪嵴病毒(PKV)和猪星状病毒(Ast V)的检测方法,本研究根据PKV 3D基因和Ast V ORF2基因设计了两对特异性引物,通过优化反应条件,首次建立了PKV和Ast V双重RT-PCR检测方法。该方法可以同时扩增出PKV的358 bp和Ast V的938 b... 为建立同时检测猪嵴病毒(PKV)和猪星状病毒(Ast V)的检测方法,本研究根据PKV 3D基因和Ast V ORF2基因设计了两对特异性引物,通过优化反应条件,首次建立了PKV和Ast V双重RT-PCR检测方法。该方法可以同时扩增出PKV的358 bp和Ast V的938 bp特异性片段,而对猪伪狂犬病病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒及大肠杆菌等病原核酸扩增结果均为阴性,具有较强的特异性;对PKV和Ast V的最低检出量分别为1.51×106拷贝/μL和1.19×106拷贝/μL;利用该方法和单项RT-PCR方法对35份来自四川省部分猪场的仔猪腹泻病料样品进行检测。结果显示,PKV和Ast V的阳性检出率分别为80%和31.4%,两者符合率为100%。本研究建立的方法对PKV和Ast V的鉴别诊断和混合感染检测具有重要的应用价值。 展开更多

关键词 猪嵴病毒 猪星状病毒 双重RT-PCR

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猪星状病毒的分离鉴定及其致病性研究 被引量：3

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作者 兰家暖 郭旋 +5 位作者 刘磊 张民秀 卢冰霞 廖承球 黄福标 黄伟坚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第7期199-203,共5页

猪星状病毒(porcine astrovirus,PAstV)感染猪后可引起腹泻、呕吐、脱水和生长迟缓等临床症状,对断奶前仔猪侵害尤为严重,对养猪业造成一定的经济损失。本研究对猪星状病毒广西流行株用PK-15细胞进行分离,用RT-nPCR、间接免疫荧光、电... 猪星状病毒(porcine astrovirus,PAstV)感染猪后可引起腹泻、呕吐、脱水和生长迟缓等临床症状,对断奶前仔猪侵害尤为严重,对养猪业造成一定的经济损失。本研究对猪星状病毒广西流行株用PK-15细胞进行分离,用RT-nPCR、间接免疫荧光、电镜和免疫印迹分析进行鉴定并进行致病性试验,结果分离到2株具有细胞病变和致病性的猪星状病毒,为进一步研究猪星状病分子生物学、致病机制及构建发病动物模型等奠定了基础。 展开更多

关键词 猪星状病毒 分离 鉴定 动物试验

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猪星状病毒的病原学特征及检测技术研究进展 被引量：4

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作者 庄金秋 梅建国 +2 位作者 姚春阳 王艳 李峰 《猪业科学》 2015年第7期102-103,共2页

猪星状病毒(PAst V)是一种严重危害哺乳期仔猪的人兽共患病病原,给养猪业带来了较大的经济损失。通过对PAst V的病原学特征及检测技术研究进展作一简要概述,为科研人员加强对其的深入研究及了解仔猪病毒性腹泻疫情的整体概况提供参考。

关键词 猪星状病毒 病原学 检测 研究进展

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猪星状病毒2型PCR检测分型方法的建立及初步应用 被引量：2

9

作者 罗璋 罗季委 +5 位作者 李海锦 贺巨炬 彭旺 李润成 余兴龙 肖朝庭 《湖南畜牧兽医》 2016年第2期39-41,共3页

根据GenBank登的猪星状病毒2型(PAstV2)序列,设计1对引物。通过优化反应条件,首次在湖南地区检测到PAstV2型病毒。用该方法通过提取样品RNA,采用RT-PCR进行扩增,得到一条预期的特异性条带(243bp),将扩增产物进行测序分析,结果表明该序列... 根据GenBank登的猪星状病毒2型(PAstV2)序列,设计1对引物。通过优化反应条件,首次在湖南地区检测到PAstV2型病毒。用该方法通过提取样品RNA,采用RT-PCR进行扩增,得到一条预期的特异性条带(243bp),将扩增产物进行测序分析,结果表明该序列与PAstV2型的参考序列同源性为96%。同时,用该引物检测可引起腹泻的PEDV、TGEV、CSFV和PRRSV四种病毒RNA,RT-PCR结果均为阴性。该RT-PCR的敏感性试验结果表明其最高敏感度为400 pg/μL。采用该方法对湖南境内78份猪肠道和粪便样品进行检测,发现PAstV2型的感染率达到11.5%(9/78)。结果表明该方法可以应用于临床PAstV2检测。 展开更多

关键词 猪星状病毒 基因型 PCR PAstV2

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猪星状病毒实验室检测技术研究进展

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作者 庄金秋 梅建国 +2 位作者 张颖 莫玲 李峰 《养猪》 2021年第5期98-100,共3页

猪星状病毒(PAstV)是一种严重危害哺乳期仔猪的人兽共患病病原,常引起仔猪腹泻、脱水、呕吐甚至死亡,给养猪业带来较大的经济损失。文章就PAstV的最新实验室检测技术研究进展作一简要概述,以期为疾病的有效防控提供参考。

关键词 猪星状病毒 检测 研究进展

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猪星状病毒4型SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量：4

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作者 陈少杰 刘立辉 +7 位作者 吴志勇 肖娜 袁广富 王晶 邢亚茹 刘如月 范京惠 左玉柱 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期404-408,共5页

为建立一种快速检测猪星状病毒4型(PAstV4)的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法,根据已知的猪星状病毒4型序列的ORF1a基因设计了特异性引物,并将扩增片段克隆到pMD19-T载体上;将构建的重组质粒作为标准品建立SYBR GreenⅠ荧光定量RT-... 为建立一种快速检测猪星状病毒4型(PAstV4)的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法,根据已知的猪星状病毒4型序列的ORF1a基因设计了特异性引物,并将扩增片段克隆到pMD19-T载体上;将构建的重组质粒作为标准品建立SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法,并对建立方法的灵敏性、特异性及重复性进行验证。结果显示,建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法最低检测量为50.3拷贝·μL-1,其灵敏度是普通PCR的100倍;与CSFV、PRRSV、PRV、PEDV、PDCoV无交叉反应,特异性较好;建立的标准曲线呈良好的线性关系,相关系数R2=1.00。应用该方法检测了2018-2019年收集的43份临床样品,阳性率为18.6%。本研究为猪星状病毒4型的临床检测建立了一种快速、灵敏、特异性强的方法。 展开更多

关键词 猪星状病毒 荧光定量 SYBR GreenⅠ

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猪星状病毒1型衣壳蛋白的截短表达及多克隆抗体的制备 被引量：5

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作者 王蔚怡 张文超 +2 位作者 郑瑞程 刘欢 黄伟坚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期431-434,共4页

为制备猪星状病毒1型(PAstV1)Cap蛋白高变区特异性多克隆抗体,本研究根据PAstV-GX1株Cap蛋白Cs(aa420~aa669)基因序列设计引物,PCR扩增该片段(Cs)后克隆于pET-32a(+)原核表达载体,构建重组表达质粒pET32a-Cs,将其转化E. coli BL21感受... 为制备猪星状病毒1型(PAstV1)Cap蛋白高变区特异性多克隆抗体,本研究根据PAstV-GX1株Cap蛋白Cs(aa420~aa669)基因序列设计引物,PCR扩增该片段(Cs)后克隆于pET-32a(+)原核表达载体,构建重组表达质粒pET32a-Cs,将其转化E. coli BL21感受态细胞,经终浓度1 mmol/L的IPTG在37℃诱导6 h后经SDS-PAGE检测表达产物,结果显示在大约47 ku处出现目的蛋白,且该蛋白以可溶性形式表达。将重组Cs蛋白经Ni柱纯化后乳化,按100μg/只免疫6周龄BALB/c小鼠,三免后5 d采血分离血清,经western blot和间接免疫荧光检测结果显示,获得的Cap蛋白高变区多克隆抗体可特异性识别PAstV-GX1感染的PK15细胞表达的病毒蛋白。本研究首次制备的PAstV Cap蛋白高变区纯化蛋白及其多克隆抗体为后续PAstV病原学研究奠定了基础。 展开更多

关键词 猪星状病毒 衣壳蛋白 原核表达 多克隆抗体

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猪星状病毒GX1株衣壳蛋白表达及分析 被引量：1

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作者 张文超 崔真毓 +3 位作者 王蔚怡 刘心 刘欢 黄伟坚 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第6期165-172,共8页

本研究旨在对猪星状病毒GX1株ORF2基因进行克隆构建、表达与其生物信息学分析,首先采用昆虫杆状病毒表达系统表达猪星状病毒(PAst V)GX1株衣壳蛋白,并对衣壳蛋白序列进行生物信息学分析。将RT-PCR扩增得到的PAstV-GX1 ORF2基因片段克隆... 本研究旨在对猪星状病毒GX1株ORF2基因进行克隆构建、表达与其生物信息学分析,首先采用昆虫杆状病毒表达系统表达猪星状病毒(PAst V)GX1株衣壳蛋白,并对衣壳蛋白序列进行生物信息学分析。将RT-PCR扩增得到的PAstV-GX1 ORF2基因片段克隆至杆状病毒表达载体pFastBac-Dual中,获得重组质粒pFastBac-Dual-ORF2;随后将重组质粒转化至DH10Bac大肠杆菌感受态细胞,经蓝白斑筛选获得重组杆粒Bacmid-ORF2。将重组杆粒转染至sf9细胞中获得重组杆状病毒,待出现明显细胞病变后收取细胞毒,Western blot检测到Cap蛋白的成功表达。利用ExPASy和CBS等在线软件对PAstV-GX1 Cap蛋白的基本性质进行分析与预测。本试验通过昆虫表达系统Bac-to-Bac成功表达ORF2蛋白,并对其进行生物信息学分析,为PAstV1抗体的制备、检测试剂盒的研发及三维结构解析奠定基础。 展开更多

关键词 猪星状病毒 衣壳蛋白 杆状病毒表达系统 生物信息学分析

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谨防冬春季猪腹泻新病原

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作者 李勇 汪志恒 +5 位作者 万春云 于福来 欧伟业 赖庆光 陈文钦 向金梅 《猪业科学》 2024年第10期60-62,共3页

0前言腹泻是猪最常见的问题之一,在冬春季猪更易发生腹泻。近几年越来越多的新病原参与到猪腹泻的病程,本文主要讲猪萨佩罗病毒(Porcine Sapelovirus,PSV)、猪诺如病毒(Porcine Norovirus,PNo V)、猪札如病毒(Porcine Sapovirus,PSa V)... 0前言腹泻是猪最常见的问题之一,在冬春季猪更易发生腹泻。近几年越来越多的新病原参与到猪腹泻的病程,本文主要讲猪萨佩罗病毒(Porcine Sapelovirus,PSV)、猪诺如病毒(Porcine Norovirus,PNo V)、猪札如病毒(Porcine Sapovirus,PSa V)、猪星状病毒(Porcine astrovirus,PAst V)等四种新病原。目前,这四种病毒也已经从国内的不少猪场内发现,需要引起高度重视。 展开更多

关键词 猪腹泻 猪萨佩罗病毒 猪星状病毒 新病原 诺如病毒 猪札如病毒 冬春季 PSV

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