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猪小肠黏膜上皮细胞原代培养
被引量:
6
1
作者
王静
张彦明
周宏超
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009年第8期46-49,共4页
分别采用酶消化法和组织块培养法,建立了猪小肠黏膜上皮细胞原代培养的方法。酶消化法于37℃分为4个处理组进行。处理1以2.5 g/L的胰蛋白酶消化30 min;处理2以2.0 g/L胶原酶Ⅰ消化70 min;处理3以50 mg/L嗜热菌蛋白酶消化50 min;处理4以5...
分别采用酶消化法和组织块培养法,建立了猪小肠黏膜上皮细胞原代培养的方法。酶消化法于37℃分为4个处理组进行。处理1以2.5 g/L的胰蛋白酶消化30 min;处理2以2.0 g/L胶原酶Ⅰ消化70 min;处理3以50 mg/L嗜热菌蛋白酶消化50 min;处理4以50 mg/L嗜热菌蛋白酶+2.0 g/L胶原酶Ⅰ消化70 min。采用柠檬酸胰酶法分离纯化细胞。结果表明,组织块法原代培养获得的细胞活性较强。
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关键词
猪小肠黏膜上皮细胞
原代培养
组织块培养
纯化
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职称材料
猪传染性胃肠炎病毒N蛋白在猪小肠黏膜上皮细胞中的表达及对细胞周期的影响
被引量:
1
2
作者
常嵘
张琪
+2 位作者
何亚鹏
童德文
许信刚
《动物医学进展》
北大核心
2015年第8期7-10,共4页
为鉴定猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N蛋白在猪小肠黏膜上皮细胞(SIEC)中的表达并检测其对细胞周期的影响,将构建的含有TGEV N基因的重组质粒pEGFP-N1-N采用脂质体介导法瞬时转染SIEC,通过RT-PCR和Western blot方法分别从分子水平和蛋白水...
为鉴定猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N蛋白在猪小肠黏膜上皮细胞(SIEC)中的表达并检测其对细胞周期的影响,将构建的含有TGEV N基因的重组质粒pEGFP-N1-N采用脂质体介导法瞬时转染SIEC,通过RT-PCR和Western blot方法分别从分子水平和蛋白水平检测N蛋白的表达,采用流式细胞术检测N蛋白对IEC细胞周期的影响。结果表明,N蛋白在SIEC中成功表达,并使细胞的S期延长。研究结果为深入研究TGEV N蛋白功能提供新的理论依据,并为进一步探讨TGEV的致病机理奠定基础。
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关键词
猪
传染性胃肠炎病毒
N蛋白
猪小肠黏膜上皮细胞
细胞
周期
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职称材料
题名
猪小肠黏膜上皮细胞原代培养
被引量:
6
1
作者
王静
张彦明
周宏超
机构
西北农林科技大学动物医学院
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009年第8期46-49,共4页
基金
陕西省自然科学基金项目(2007C106)
文摘
分别采用酶消化法和组织块培养法,建立了猪小肠黏膜上皮细胞原代培养的方法。酶消化法于37℃分为4个处理组进行。处理1以2.5 g/L的胰蛋白酶消化30 min;处理2以2.0 g/L胶原酶Ⅰ消化70 min;处理3以50 mg/L嗜热菌蛋白酶消化50 min;处理4以50 mg/L嗜热菌蛋白酶+2.0 g/L胶原酶Ⅰ消化70 min。采用柠檬酸胰酶法分离纯化细胞。结果表明,组织块法原代培养获得的细胞活性较强。
关键词
猪小肠黏膜上皮细胞
原代培养
组织块培养
纯化
Keywords
porcine epithelial cell
primary culture
explant culture
purification
分类号
Q343.6 [生物学—遗传学]
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
猪传染性胃肠炎病毒N蛋白在猪小肠黏膜上皮细胞中的表达及对细胞周期的影响
被引量:
1
2
作者
常嵘
张琪
何亚鹏
童德文
许信刚
机构
西北农林科技大学动物医学院
出处
《动物医学进展》
北大核心
2015年第8期7-10,共4页
基金
西北农林科技大学"基本科研业务费专项资金项目"(QN2012017)
文摘
为鉴定猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N蛋白在猪小肠黏膜上皮细胞(SIEC)中的表达并检测其对细胞周期的影响,将构建的含有TGEV N基因的重组质粒pEGFP-N1-N采用脂质体介导法瞬时转染SIEC,通过RT-PCR和Western blot方法分别从分子水平和蛋白水平检测N蛋白的表达,采用流式细胞术检测N蛋白对IEC细胞周期的影响。结果表明,N蛋白在SIEC中成功表达,并使细胞的S期延长。研究结果为深入研究TGEV N蛋白功能提供新的理论依据,并为进一步探讨TGEV的致病机理奠定基础。
关键词
猪
传染性胃肠炎病毒
N蛋白
猪小肠黏膜上皮细胞
细胞
周期
Keywords
Transmissible gastroenteritis virus
N protein
swine intestinal epithelial cell
cell cycle
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
S852.21 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪小肠黏膜上皮细胞原代培养
王静
张彦明
周宏超
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009
6
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职称材料
2
猪传染性胃肠炎病毒N蛋白在猪小肠黏膜上皮细胞中的表达及对细胞周期的影响
常嵘
张琪
何亚鹏
童德文
许信刚
《动物医学进展》
北大核心
2015
1
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