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猪圆环病毒2型灭活疫苗的植物源免疫增强剂筛选
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作者 李军伟 余秋颖 +3 位作者 张艳芝 王运珂 任红涛 王娜 《河南农业大学学报》 北大核心 2025年第2期243-254,共12页
【目的】筛选安全、高效的抗猪圆环病毒2型病毒疫苗免疫增强剂,改善现有佐剂的免疫效力及安全性。【方法】以昆明小鼠为研究对象,选取萜类(青蒿素、紫杉醇、穿心莲内酯、熊果酸)、生物碱类(黄连素、石蒜碱、千金藤素、氧化苦参碱)、酚酸... 【目的】筛选安全、高效的抗猪圆环病毒2型病毒疫苗免疫增强剂,改善现有佐剂的免疫效力及安全性。【方法】以昆明小鼠为研究对象,选取萜类(青蒿素、紫杉醇、穿心莲内酯、熊果酸)、生物碱类(黄连素、石蒜碱、千金藤素、氧化苦参碱)、酚酸类(咖啡酸、绿原酸、没食子酸、香豆酸)和黄酮类(山柰酚、槲皮素、木犀草素、原花青素)共16种植物源活性物质,通过测定小鼠体质量比例、IgG抗体水平、脏器指数、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC),开展靶向猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫增强剂的筛选,并对其抗氧化活性进行初步评价。【结果】1)小鼠灌胃植物源活性物质后,体质量呈增加趋势。2)各组抗体水平呈现先上升后下降的趋势。与疫苗组相比,黄连素、石蒜碱、千金藤素、槲皮素、木犀草素和原花青素组可极显著性提高机体的抗体水平,其中以原花青素组效果最佳,比疫苗组抗体水平提高了59.59%。3)槲皮素组小鼠心脏、肝脏和肾脏指数呈显著性升高,黄连素、石蒜碱、原花青素组在统计学意义上无显著差异;其中,槲皮素、原花青素组小鼠脾脏和胸腺指数呈极显著性提高,脾脏指数提高了49.50%和53.23%,胸腺指数提高了121.82%和103.64%,提示其可能在促进免疫器官的发育、分化和成熟,提高机体的免疫功能方面发挥重要作用。4)木犀草素、槲皮素和原花青素组T-SOD活性呈极显著性升高,MDA含量呈极显著性降低,千金藤素、石蒜碱、槲皮素、木犀草素、黄连素和原花青素组T-AOC呈极显著性升高。以原花青素对机体的抗氧化效果较好,T-SOD活性和T-AOC分别提高了9.60%和48.57%,MDA含量降低了26.82%。【结论】原花青素对小鼠的免疫增强效果最佳,可作为靶向猪圆环病毒2型灭活疫苗佐剂研究的候选者。 展开更多
关键词 植物源活性物质 病毒2 疫苗 免疫增强剂
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表达猪圆环病毒2d型Cap蛋白的重组猪伪狂犬病病毒的构建
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作者 焦显芹 马晓 +3 位作者 田润博 刘颖 马世杰 陈红英 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第5期2278-2286,共9页
【目的】利用同源重组技术和CRISPR/Cas9基因编辑技术,获得表达猪圆环病毒2d型(PCV2d)Cap蛋白的重组猪伪狂犬病病毒(PRV),为开发预防和控制PCV2d和PRV感染的疫苗提供技术支持。【方法】基于PCV2d KF1株ORF 2基因序列设计1对特异引物,以P... 【目的】利用同源重组技术和CRISPR/Cas9基因编辑技术,获得表达猪圆环病毒2d型(PCV2d)Cap蛋白的重组猪伪狂犬病病毒(PRV),为开发预防和控制PCV2d和PRV感染的疫苗提供技术支持。【方法】基于PCV2d KF1株ORF 2基因序列设计1对特异引物,以PCV2d KF1株DNA为模板扩增ORF 2基因。经限制性内切酶Bam HⅠ酶切后将ORF 2基因引入到含有绿色荧光蛋白(EGFP)基因的PRV转移载体pG中,获得重组质粒pG-PCV2d-EGFP。运用转染试剂ZLip2000将质粒pG-PCV2d-EGFP和PRV三基因缺失毒株gE^(-)/gI^(-)/TK^(-)PRV NY DNA共转染至ST单层细胞中拯救重组病毒,并利用CRISPR/Cas9 EGFP基因双敲除质粒敲除重组病毒中EGFP基因。经EGFP基因测序、PCR和Western blotting对获得的重组病毒进行鉴定。【结果】经8轮绿色荧光蚀斑筛选,纯化得到重组病毒rPRV-PCV2d-EGFP。CRISPR/Cas9 EGFP基因双敲除质粒敲除EGFP基因后,经3轮筛选没有绿色荧光的蚀斑,获得重组病毒rPRV-PCV2d。EGFP基因测序结果表明,rPRV-PCV2d中EGFP基因被剪截了1251 bp,PCR和Western blotting结果显示,rPRV-PCV2d携带的ORF 2基因能在ST细胞中转录与表达。【结论】本研究成功构建表达PCV2d Cap蛋白的重组病毒rPRV-PCV2d,为进一步研制重组活载体疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 病毒2 伪狂犬病病毒 重组病毒活载体疫苗
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近年湖南省猪圆环病毒2型感染状况的调查及遗传演化分析
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作者 范杰 邰易润 +7 位作者 朱艳丽 陈志雄 胡巧云 陈智 刘甜甜 李欣 范仲鑫 葛猛 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1376-1385,共10页
本研究旨在掌握近期湖南省各地区猪圆环病毒2型(PCV2)最新的感染和遗传演化情况。本研究运用qPCR方法对2021-2023年采集自湖南省长沙市、岳阳市、怀化市、常德市、株洲市等14个地级市的1244份肥猪的淋巴结、拭子、脑组织及血样通过qPCR... 本研究旨在掌握近期湖南省各地区猪圆环病毒2型(PCV2)最新的感染和遗传演化情况。本研究运用qPCR方法对2021-2023年采集自湖南省长沙市、岳阳市、怀化市、常德市、株洲市等14个地级市的1244份肥猪的淋巴结、拭子、脑组织及血样通过qPCR进行了病毒核酸检测,筛选出PCV2阳性样品,再通过PCR扩增及测序对PCV2的ORF2基因序列进行分析。结果显示,1244份样品中有778份为PCV2阳性,总阳性率达62.54%,其中邵阳市的PCV2阳性率最高,达92.55%(87/94),郴州市最低,为18.28%(17/93);57株PCV2 ORF2基因测序结果表明,PCV2a、PCV2b和PCV2d占比分别为12.28%、7.02%和80.70%;测序毒株间的ORF2基因核苷酸、氨基酸序列相似性分别为88.5%~100.0%和86.3%~100.0%,存在45个氨基酸差异位点,PCV2d间存在15个差异氨基酸位点,选择压力分析表明,PCV2存在3个阳性选择位点。研究表明:目前,PCV2的突变速率较快,各毒株之间存在较多的氨基酸位点差异,与既往报道相同,本研究中PCV2d已成为绝对优势的流行毒株,PCV2的这些变异可能使现有疫苗保护效果减弱,应予以重视。 展开更多
关键词 病毒2 分子流行病学调查 遗传变异 ORF2基因 选择压力
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猪圆环病毒2型、猪肺炎支原体和猪瘟疫苗不同免疫程序的免疫效果比较分析 被引量:3
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作者 马红伟 潘华春 +5 位作者 杨书敏 张可 杨红 蔺肖 阮坤祥 李家奎 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期58-65,共8页
为了评估不同免疫策略对猪场免疫效果和经济效益的影响,以确定最佳的疫苗免疫程序,本试验将处于产前1个月的四胎次健康三元母猪随机分为2个组,A组(联合免疫组)母猪于产前27 d联合免疫猪圆环病毒2型基因工程疫苗、猪肺炎支原体灭活疫苗... 为了评估不同免疫策略对猪场免疫效果和经济效益的影响,以确定最佳的疫苗免疫程序,本试验将处于产前1个月的四胎次健康三元母猪随机分为2个组,A组(联合免疫组)母猪于产前27 d联合免疫猪圆环病毒2型基因工程疫苗、猪肺炎支原体灭活疫苗和猪瘟活疫苗(圆柯欣+柯喘宁+稳柯健),其所产仔猪于21日龄联合免疫圆柯欣、柯喘宁和稳柯健;B组(对照组)母猪于产前34和27 d分别免疫稳柯健、猪圆环病毒疫苗和猪肺炎支原体疫苗二联疫苗(圆-支二联疫苗),其所产仔猪于14日龄免疫圆-支二联疫苗,28日龄免疫稳柯健。统计和分析免疫各组临床指标、生产性能和持续性抗体水平。结果显示,免疫疫苗后,2个组的母猪采食情况均正常;2个组的仔猪整体精神状态良好,哺乳情况正常,均未出现咳嗽和喘气等呼吸道疾病。在试验期间内,2个组的母猪的窝产健仔数和仔猪出生健仔均重并无差别。A组和B组的出生至23日龄死淘率、出生至50日龄死淘率分别为3.77%、5.11%和4.07%、5.43%,A组略优于B组。抗体监测结果显示,A组母猪的CSFV和PCV2抗体水平较B组无显著差异(P>0.05);A组仔猪的CSFV抗体阳性率与B组无明显差异(P>0.05),而PCV2抗体水平在免疫早期阶段(21日龄)明显高于B组(P<0.05)。结果表明,猪圆环病毒2型、猪肺炎支原体和猪瘟疫苗可以联合免疫,且免疫后相互之间不干扰。该联合免疫策略在确保免疫效果的同时,简化了疫苗免疫程序,为确定最佳的疫苗免疫程序提供了有价值的临床应用参考。 展开更多
关键词 瘟活疫苗 猪圆环病毒2型基因工程疫苗 肺炎支原体灭活疫苗 不同免疫程序 免疫效果评价
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猪圆环病毒2型毒株的分离鉴定及其对小鼠的免疫原性分析 被引量:1
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作者 孙瑶 韩伟 +5 位作者 赵辉 杨小蓉 常昊天 付秀花 吴珊珊 王贵华 《中国动物检疫》 2025年第1期103-110,共8页
为获得猪圆环病毒2型(PCV2)候选疫苗株,对疑似PCV2感染猪的淋巴结、脾脏等组织病料进行检测,对阳性病料进行PCV2分离纯化、鉴定、全基因测序和遗传进化分析,并制成PCV2灭活疫苗,进行小鼠免疫原性分析。结果显示;从PCV2阳性病料中成功分... 为获得猪圆环病毒2型(PCV2)候选疫苗株,对疑似PCV2感染猪的淋巴结、脾脏等组织病料进行检测,对阳性病料进行PCV2分离纯化、鉴定、全基因测序和遗传进化分析,并制成PCV2灭活疫苗,进行小鼠免疫原性分析。结果显示;从PCV2阳性病料中成功分离得到1株PCV2毒株,病毒含量不低于10^(6.0) FAID_(50)/mL,间接免疫荧光试验可见绿色荧光;该毒株基因全长约1767 bp,全基因核酸序列与PCV2参考序列ON012565.1、KU960933.1同源性最高为99.9%,与PCV3参考序列PP566974.1同源性最低为45.9%,与多数PCV2参考毒株序列同源性在92%以上,经进化树分析属于PCV2d基因亚型;用该分离毒株制成灭活疫苗免疫小鼠后,测得特异性抗体,且效价较高。结果说明,该分离株具有良好的免疫原性,可作为PCV2疫苗研发的候选毒株。 展开更多
关键词 病毒2 遗传变异 免疫原性分析 疫苗研发
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猪圆环病毒2型疫苗及其效力评价方法比较研究 被引量:1
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作者 徐嫄 彭国瑞 +8 位作者 徐小艾 吴睿智 赵启祖 朱元源 李翠 王团结 邹兴启 李琰 刘业兵 《中国兽药杂志》 2024年第1期87-94,共8页
为探索对不同猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV2)疫苗产品进行统一质量评价的可行性,对国内该类疫苗产品及其现有效力评价方法进行了归纳和比较研究。结果发现,目前猪圆环病毒2型疫苗类产品种类有25个,且疫苗毒株数量多达10... 为探索对不同猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV2)疫苗产品进行统一质量评价的可行性,对国内该类疫苗产品及其现有效力评价方法进行了归纳和比较研究。结果发现,目前猪圆环病毒2型疫苗类产品种类有25个,且疫苗毒株数量多达10余个,效力检验方法包括传统的免疫攻毒法、血清学方法和多种不同的替代方法,但尚没有统一的效力评价体系。本研究可为进一步完善PCV2疫苗效力评价方法、统一评价疫苗效力、提高产品质量提供参考。 展开更多
关键词 病毒2 疫苗 效力评价方法
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山药多糖作为猪圆环病毒2型疫苗佐剂的活性研究 被引量:2
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作者 崔佳硕 宋博文 +2 位作者 赵玥 时瑢宇 谷鹏飞 《动物医学进展》 北大核心 2024年第11期9-15,共7页
山药多糖(Chinese Yam polysaccharide,CYP)是中药山药的主要活性成分之一,具有良好的免疫刺激作用。为了探究山药多糖作为猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)疫苗的佐剂活性,从中药山药中提取分离得到山药多糖,与PCV2灭活... 山药多糖(Chinese Yam polysaccharide,CYP)是中药山药的主要活性成分之一,具有良好的免疫刺激作用。为了探究山药多糖作为猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)疫苗的佐剂活性,从中药山药中提取分离得到山药多糖,与PCV2灭活抗原液混合后对小鼠进行免疫接种。通过测定血清中特异性抗体及亚型的水平,脾脏淋巴细胞中CD4+和CD8+T细胞的活化水平,记忆T细胞活化水平,细胞因子水平以及淋巴结中生发中心(germinal center,GC)B细胞活化水平,从而评估CYP作为PCV2疫苗的佐剂活性。结果显示,CYP作为佐剂能够诱导特异性抗体IgG及亚型IgG1和IgG2a的表达,促进CD4+T细胞的活化,促进CD8+T细胞的中央记忆T细胞活化,增强IFN-γ和IL-6细胞因子的表达,促进淋巴结GC B细胞的活化。以上结果表明,CYP作为PCV2疫苗的佐剂能够同时诱导体液免疫和细胞免疫应答,具有开发成畜禽疫苗佐剂的潜力。 展开更多
关键词 山药多糖 病毒2疫苗 佐剂活性 体液免疫应答 细胞免疫应答
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鉴别猪圆环病毒2型和3型双重TaqMan MGB探针FQ-PCR检测方法研究 被引量:1
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作者 赵雪丽 闫若潜 +8 位作者 王华俊 王淑娟 马震原 谢彩华 柴茂 杨海波 王翠 刘影 王东方 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第2期165-173,共9页
建立一种快速、特异鉴别检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重TaqMan MGB探针FQ-PCR方法,本研究以PCV2的Rep蛋白和PCV3的Cap蛋白基因作为靶基因,各设计1对特异性引物和1条TaqMan MGB探针,经优化各反应条件和进行敏感性... 建立一种快速、特异鉴别检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重TaqMan MGB探针FQ-PCR方法,本研究以PCV2的Rep蛋白和PCV3的Cap蛋白基因作为靶基因,各设计1对特异性引物和1条TaqMan MGB探针,经优化各反应条件和进行敏感性、特异性、重复性和干扰性试验,建立鉴别检测PCV2/PCV3的双重FQ-PCR方法。结果显示:该方法可特异性扩增PCV2、PCV3核酸,与猪伪狂犬病病毒(PRV)等8种病原及阴性对照无交叉反应,特异性较强;对PCV2和PCV3阳性质粒标准品的最低检出限均可达10 copies/μL,敏感性较高;PCV2/PCV3批内/批间重复试验变异系数(CV)值均在3%以下,表明方法稳定性、重复性较好;干扰性试验表明在两种病毒阳性质粒起始模板相差较大时该方法不会影响对其中任一病毒核酸的检出和准确定量。对42份临床疑似PCV感染样品检测结果与PCV2、PCV3基因测序结果符合率100%。本研究建立的双重FQ-PCR方法具有敏感性高达10 copies/μL、特异性强、在同一反应体系中能同时快速鉴别检测PCV2、PCV3等优点,可用于临床PCV2/PCV3感染的快速鉴别检测。 展开更多
关键词 病毒2 rep基因 病毒3 cap基因 双重TaqMan MGB FQ-PCR
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猪GM-CSF基因对猪圆环病毒2型DNA疫苗诱导仔猪免疫反应的调节作用 被引量:7
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作者 宋勤叶 温立斌 +2 位作者 杨汉春 郭鑫 陈艳红 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期120-125,共6页
粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)能够诱导树突状细胞的成熟和存活,并提高其抗原递呈功能,是非常有潜力的分子佐剂之一。为了探讨猪GM-CSF对猪圆环病毒2型(PCV2)DNA疫苗诱导免疫反应的调节作用,本研究将表达猪GM-CSF和PCV2衣壳蛋白... 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)能够诱导树突状细胞的成熟和存活,并提高其抗原递呈功能,是非常有潜力的分子佐剂之一。为了探讨猪GM-CSF对猪圆环病毒2型(PCV2)DNA疫苗诱导免疫反应的调节作用,本研究将表达猪GM-CSF和PCV2衣壳蛋白的重组质粒混合物(pcDNA3.1-gm-csf和pcDNA3.1-orf2)及在同一载体上表达PCV2衣壳蛋白与猪GM-CSF的双表达重组质粒(pIRES-orf2/gm-csf),分别接种于7日龄健康仔猪,共肌肉注射3次,每次间隔2周。结果表明猪GM-CSF基因能够明显增强PCV2DNA疫苗诱导的特异性体液免疫反应,提高外周血淋巴细胞(PBLC)对ConA刺激的增殖活性,增强NK细胞的杀伤功能,影响细胞因子IL-12、IFN-γ、IL-4和IL-10的表达水平。但GM-CSF基因单独表达和与PCV2衣壳蛋白基因在同一载体上表达,对上述4个细胞因子表达的影响有一定差异。 展开更多
关键词 GM-CSF 病毒2 DNA疫苗 免疫调节
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副猪革拉瑟菌影递送猪圆环病毒2型DNA二联疫苗的制备及小鼠免疫效果评价
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作者 王康 刘格言 +10 位作者 王宇 杨振 唐欣巍 曹三杰 黄小波 颜其贵 伍锐 赵勤 杜森焱 文心田 文翼平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1179-1191,共13页
本研究旨在研制猪圆环病毒2型(PCV2)-副猪革拉瑟菌(GPS)二联菌影疫苗,并评价其在小鼠上的免疫保护效果。选择GPS 5型菌株SH0165作为疫苗株,利用氢氧化钠最低抑菌浓度法将其制备成菌影,再将PCV2的ORF2基因克隆至pEGFP-N1真核表达质粒,将... 本研究旨在研制猪圆环病毒2型(PCV2)-副猪革拉瑟菌(GPS)二联菌影疫苗,并评价其在小鼠上的免疫保护效果。选择GPS 5型菌株SH0165作为疫苗株,利用氢氧化钠最低抑菌浓度法将其制备成菌影,再将PCV2的ORF2基因克隆至pEGFP-N1真核表达质粒,将GPS菌影作为PCV2 DNA疫苗的载体,构建PCV2-GPS二联菌影疫苗,设计了商品化疫苗组、PCV2-GPS二联菌影疫苗组、菌影组、质粒组、PBS组、空白组,对4周龄BALB/c小鼠进行免疫,测定免疫后PCV2和GPS的IgG抗体效价、PCV2中和抗体、脏器中PCV2病毒载量、血清杀菌率、GPS攻毒保护率以及血清中细胞因子(IFN-γ、IL-12)水平。结果显示:二联菌影疫苗组小鼠血清中PCV2和GPS的IgG抗体水平显著增高,PCV2中和抗体滴度提高,PCV2攻毒后的小鼠淋巴结和肺脏中病毒载量下降,血清杀菌率显著提高,GPS攻毒后免疫保护率达70%(7/10),小鼠血清中IFN-γ含量显著上调。综上表明,PCV2-GPS二联菌影疫苗显著激活了小鼠对PCV2和GPS的体液免疫反应和细胞免疫反应,且能够抑制PCV2在小鼠体内的增殖,对感染GPS的小鼠达到较好的保护效果,为新型安全高效的PCV2、GPS联合疫苗的研制提供了生物材料和实验数据。 展开更多
关键词 病毒2 ORF2基因 革拉瑟菌 菌影 小鼠 免疫保护
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猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗的佐剂筛选 被引量:1
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作者 孙莹慧 赵玉惠 +6 位作者 夏叶 陈鹏飞 丛雁方 于春梅 魏波 李斐 缪德年 《上海畜牧兽医通讯》 2023年第2期10-13,共4页
为筛选适合猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)基因工程亚单位疫苗的佐剂,将重组的PCV2 Cap蛋白抗原与佐剂混合,分别制备氢氧化铝胶佐剂、ISA 15A VG佐剂和IMS 251C VG佐剂疫苗,并选择PCV2阴性仔猪(14日龄)开展动物安全性... 为筛选适合猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)基因工程亚单位疫苗的佐剂,将重组的PCV2 Cap蛋白抗原与佐剂混合,分别制备氢氧化铝胶佐剂、ISA 15A VG佐剂和IMS 251C VG佐剂疫苗,并选择PCV2阴性仔猪(14日龄)开展动物安全性检验和免疫效力检验。安全性检验结果显示:3组免疫高剂量(2倍免疫剂量)佐剂疫苗的仔猪在免疫后14 d内,精神、食欲、呼吸均正常,注射部位及其周围组织未见异常,仅IMS 251C VG佐剂组有2头仔猪出现发热症状(1~2 d)。免疫效力检验结果显示:3种佐剂疫苗免疫攻毒组仔猪免疫当天(接种前)PCV2抗体均为阴性,免疫第28天抗体均为阳性,其中ISA 15A VG佐剂组、IMS 251C VG佐剂组仔猪抗体S/P值均显著高于氢氧化铝胶佐剂组(P<0.05),均极显著高于空白对照组(P<0.01);于免疫第28天进行攻毒实验,攻毒对照组100%(5/5)发病,氢氧化铝胶佐剂组60%(3/5)保护,ISA 15A VG佐剂组和IMS 251C VG佐剂组均100%(5/5)保护。结果表明:ISA 15A VG是PCV2基因工程亚单位疫苗的适宜佐剂。 展开更多
关键词 病毒2 佐剂 疫苗 攻毒
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猪圆环病毒2型疫苗抗原定量方法及其应用
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作者 何召庆 徐晨 +4 位作者 汪爱芬 尹秀凤 南祥祝 邵营格 晁锦 《中国畜牧业》 2024年第4期43-44,共2页
猪圆环病毒病是一种可以给猪场造成严重经济损失的疾病,当前,猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus type 2,PCV2)感染在很多猪场仍有很高的比例,给猪场管理带来了巨大压力。有效的疫苗免疫有利于猪抵抗病毒,减少病毒血症的发生和缩短带毒时... 猪圆环病毒病是一种可以给猪场造成严重经济损失的疾病,当前,猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus type 2,PCV2)感染在很多猪场仍有很高的比例,给猪场管理带来了巨大压力。有效的疫苗免疫有利于猪抵抗病毒,减少病毒血症的发生和缩短带毒时间,因此,疫苗免疫仍是猪场控制PCV2的重要手段。 展开更多
关键词 病毒2 病毒 场管理 病毒血症 PCV2 疫苗免疫 抗原定量
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不同圆环病毒2型疫苗对生长育肥猪影响的研究
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作者 刘小存 杨亚静 +4 位作者 邹赐玺 刘学济 成磊 赵鸿远 李爱赟 《畜牧兽医杂志》 2024年第3期13-17,共5页
为评估不同圆环病毒2型疫苗对生猪生长肥育期免疫效果,本试验选择国产和进口两种疫苗,对同一批23日龄断奶长大二元杂交去势仔猪360头,随机分成A、B、C三组,每组120头,A组免疫国产SEPPIC佐剂PCV2a全病毒灭活疫苗(WH株)、B组免疫进口水质... 为评估不同圆环病毒2型疫苗对生猪生长肥育期免疫效果,本试验选择国产和进口两种疫苗,对同一批23日龄断奶长大二元杂交去势仔猪360头,随机分成A、B、C三组,每组120头,A组免疫国产SEPPIC佐剂PCV2a全病毒灭活疫苗(WH株)、B组免疫进口水质佐剂亚单位疫苗(PCV2a Cap蛋白),C组不做任何处理。结果显示,与国产圆环病毒2型疫苗相比,进口疫苗在生长性能、抗体水平及免疫保护期等方面均表现出了较强的优势,经济效益较为显著。 展开更多
关键词 病毒2疫苗 生长育肥 生长性能 抗体水平 成活率
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猪支原体肺炎疫苗与猪圆环病毒2型疫苗联合免疫效果评价
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作者 杨利锋 蔡芬奇 《河南畜牧兽医》 2024年第23期3-6,共4页
研究旨在评价猪支原体肺炎疫苗与猪圆环病毒2型疫苗分开免疫、混合免疫的免疫效果。试验选取体质量相近、7日龄、健康仔猪60头,随机分成A组(联合免疫组)、B(分开免疫组)、C组(对照组),每组20头,通过统计分析疫苗接种不良反应、死淘率、P... 研究旨在评价猪支原体肺炎疫苗与猪圆环病毒2型疫苗分开免疫、混合免疫的免疫效果。试验选取体质量相近、7日龄、健康仔猪60头,随机分成A组(联合免疫组)、B(分开免疫组)、C组(对照组),每组20头,通过统计分析疫苗接种不良反应、死淘率、PCV2抗体水平、日均增重和肺脏损伤程度对两种接种方式效果进行评价。结果显示,A组不良反应率、死淘率和肺脏损伤程度均低于B组,且A组PCV2抗体水平高,持续时间长,日均增重高于B组,但差异不显著(P>0.05)。研究结果表明,两种疫苗混合免疫接种效果优于分开单独免疫。 展开更多
关键词 支原体肺炎疫苗 病毒2疫苗 联合免疫 免疫效果
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猪圆环病毒2型减少猪肺泡巨噬细胞中伪狂犬病疫苗载量和CD80-CD86基因转录 被引量:1
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作者 杨倩 周维依 +1 位作者 于红欣 周双海 《北京农学院学报》 2016年第4期52-55,共4页
【目的】探明猪圆环病毒2型(PCV2)干扰伪狂犬病疫苗(PRV)免疫效果的可能机制。【方法】用PCV2与PRV在体外分别单接种和共接种仔猪肺泡巨噬细胞(AM),在接种后不同时间用荧光定量PCR技术检测PRV载量与共刺激分子CD80-CD86mRNA水平的动态... 【目的】探明猪圆环病毒2型(PCV2)干扰伪狂犬病疫苗(PRV)免疫效果的可能机制。【方法】用PCV2与PRV在体外分别单接种和共接种仔猪肺泡巨噬细胞(AM),在接种后不同时间用荧光定量PCR技术检测PRV载量与共刺激分子CD80-CD86mRNA水平的动态变化。【结果】PRV组上清中PRV载量在接种后都显著(P<0.05)高于PCV2+PRV组。与对照组相比,在接种后48h内,PRV组CD80mRNA水平在接种后增加并在48h时达到显著水平,而PCV2组与PCV2+PRV组的CD80 mRNA水平都显著减少;在接种后48h内,CD86mRNA水平在PRV组都显著增加,在PCV2+PRV组则都显著减少,但在PCV2组仅在接种后48h显著减少。【结论】PCV2能够减少猪AM中PRV载量与CD80-CD86基因转录,这可能是PCV2抑制PRV免疫效果的机制之一。 展开更多
关键词 病毒2 伪狂犬病疫苗 肺泡巨噬细胞 CD80-CD86
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2种佐剂在猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗中的效果比较 被引量:1
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作者 胡江锋 张志刚 +2 位作者 董剑辉 陈瑞 黄文强 《今日畜牧兽医》 2021年第1期11-12,共2页
为给猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗选择一种理想的佐剂,以增强机体对抗原的适应性免疫应答,协同提高动物免疫力。实验用水包油Merckinade SDA 25佐剂和双向Montanide ISA 206佐剂,分别按各自说明制备猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗... 为给猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗选择一种理想的佐剂,以增强机体对抗原的适应性免疫应答,协同提高动物免疫力。实验用水包油Merckinade SDA 25佐剂和双向Montanide ISA 206佐剂,分别按各自说明制备猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗,再对两种佐剂的疫苗进行稳定性、黏度、安全及效力检验,比较评价出猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗的理想佐剂。结果表明,两种佐剂疫苗的稳定性、黏度、安全均合格,无明显差异;但Montanide ISA 206佐剂疫苗较Merckinade SDA 25佐剂疫苗诱导抗体效价更高。据此,笔者认为,Montanide ISA 206佐剂是猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗比较理想的佐剂。 展开更多
关键词 病毒2基因工程亚单位疫苗 佐剂 比较
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猪圆环病毒2型PCR检测方法建立及检测限探讨 被引量:1
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作者 李思雨 王翠 +8 位作者 马涛 覃艳然 卢丽飞 许宗丽 梁兆斌 刘文波 覃一峰 严斯刚 韦祖樟 《中国猪业》 2024年第6期76-82,共7页
近年来,猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)在自然界中的流行毒株越来越多样,为更便捷地检测自然界中的猪圆环病毒,本研究建立了一种检测PCV2流行毒株感染的PCR方法,为PCV2流行病学调查提供技术支持。本研究根据GenBank中公开的PCV2全... 近年来,猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)在自然界中的流行毒株越来越多样,为更便捷地检测自然界中的猪圆环病毒,本研究建立了一种检测PCV2流行毒株感染的PCR方法,为PCV2流行病学调查提供技术支持。本研究根据GenBank中公开的PCV2全基因序列,设计特异引物,经过构建阳性质粒、灵敏度试验、特异性试验,建立了PCR检测方法。结果显示,建立的PCR方法检测极限为500 copies/μL,以猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪塞内卡病毒、猪盖塔病毒、猪流行性腹泻病毒、猪伪狂犬病病毒和猪圆环病病毒3型的cDNA/DNA作为模板,用该方法扩增的猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪塞内卡病毒、猪盖塔病毒、猪流行性腹泻病毒、猪伪狂犬病病毒和猪圆环病病毒3型等的结果均为阴性,表明建立的方法特异性良好;应用该方法检测了疑似猪圆环病毒组织样品279份,检测到猪圆环病毒2型阳性样品118份,PCV2的阳性率为42.29%。本研究成功建立了检测PCV2感染的PCR方法,为进一步流行病学调查和生物学特性研究奠定了基础。 展开更多
关键词 病毒2 PCR检测 流行病学 检测限 PCV 基因序列
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甲醛灭活猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液的最佳条件研究
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作者 胡江锋 张志刚 +1 位作者 陈瑞 张小娟 《四川畜牧兽医》 2021年第4期26-28,共3页
为探究甲醛对猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液最佳的灭活条件,本试验采用10%的甲醛溶液与猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液混匀,使甲醛终浓度分别达到0.05%、0.07%、0.10%、0.15%、0.20%,在4~8℃下经过不同时间的灭活,通... 为探究甲醛对猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液最佳的灭活条件,本试验采用10%的甲醛溶液与猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液混匀,使甲醛终浓度分别达到0.05%、0.07%、0.10%、0.15%、0.20%,在4~8℃下经过不同时间的灭活,通过对灭活液不同时间点的无菌检验及灭活检验,综合判定灭活效果。结果显示:猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液在甲醛终浓度为0.07%时灭活72h,或甲醛终浓度为0.10%和0.15%时灭活60h,或甲醛终浓度为0.20%时灭活48h,均取得可靠的灭活效果。考虑到甲醛的毒副作用,笔者认为4~8℃下用0.07%甲醛终浓度灭活72h是比较理想的灭活条件。 展开更多
关键词 甲醛 灭活 病毒2基因工程亚单位疫苗 抗原液
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猪圆环病毒Ⅱ型感染3D4/2细胞的转录组学分析
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作者 陈虹伶 赵怡 +5 位作者 陈家骥 韦秋旭 李禧梦 冯国越 胡焜翔 胡庭俊 《中国畜牧兽医》 CSCD 北大核心 2024年第1期42-51,共10页
【目的】通过转录组测序筛选猪圆环病毒Ⅱ型(Porcine circovirus typeⅡ,PCV2)感染猪肺泡巨噬细胞系(3D4/2)差异表达基因,为了解PCV2感染宿主免疫细胞机制和抗PCV2感染药物研发奠定基础。【方法】用感染复数(multiplicity of infection,... 【目的】通过转录组测序筛选猪圆环病毒Ⅱ型(Porcine circovirus typeⅡ,PCV2)感染猪肺泡巨噬细胞系(3D4/2)差异表达基因,为了解PCV2感染宿主免疫细胞机制和抗PCV2感染药物研发奠定基础。【方法】用感染复数(multiplicity of infection, MOI)为1的PCV2 NJ2002株处理3D4/2细胞,利用Illumina NovaSeq 6000测序平台进行转录组测序。使用DeSeq 2.0软件进行差异表达基因分析,并对差异表达基因进行基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能分析及转录因子靶向分析,选取免疫及凋亡相关基因进行实时荧光定量PCR验证,用Western blotting技术检测细胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)及磷酸化胞内磷脂酰肌醇激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达水平。【结果】转录组测序结果显示,与对照组相比,PCV2感染组共获得713个差异表达基因,其中313个上调,400个下调。GO功能和KEGG通路富集分析显示,差异表达基因与免疫应答等相关,主要富集在细胞外基质受体互作通路、新陈代谢通路、HIF-1信号通路、病毒致癌作用、PI3K-Akt等信号通路。实时荧光定量PCR结果与转录组测序的基因表达水平保持一致。Western blotting检测结果显示,PCV2感染3D4/2细胞24 h后PI3K和Akt蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05)。转录因子靶向分析表明,差异表达基因与核转录因子Y亚基β(NFYB)和ETS转录因子(ELK4)联系紧密。【结论】PCV2可能通过PI3K-Akt信号通路影响下游炎症信号通路和凋亡信号通路增强自身复制能力。NFYB和ELK4转录因子在PCV2感染过程中可能发挥重要作用,可考虑作为抗PCV2药物靶点。研究结果为深入了解PCV2感染宿主免疫细胞机制和相关药物开发提供了理论基础。 展开更多
关键词 病毒 3D4/2细胞 转录组测序 差异表达基因 转录因子
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猪圆环病毒2型疫苗的研究进展 被引量:41
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作者 王一平 郭龙军 +1 位作者 唐青海 刘长明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1337-1345,共9页
猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,给全球养猪业造成了巨大经济损失。PCV2感染可以破坏动物机体的免疫系统,造成严重的免疫抑制,容易诱发多种细菌及病毒的混合感染与继发感染,给疾病的诊断和治疗带... 猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,给全球养猪业造成了巨大经济损失。PCV2感染可以破坏动物机体的免疫系统,造成严重的免疫抑制,容易诱发多种细菌及病毒的混合感染与继发感染,给疾病的诊断和治疗带来巨大的困难。疫苗免疫接种是防控PCV2感染的有效手段,有关PCV2疫苗的研究已成为国内外学者的关注热点。迄今为止,欧美几家跨国公司已先后推出商品化的PCV2灭活疫苗、亚单位疫苗及嵌合病毒疫苗,国内也已研制出PCV2灭活疫苗,这些疫苗的推广应用为有效防控猪圆环病毒病发挥了重要作用。鉴于这些疫苗尚不能完全阻断PCV2传播,无法彻底清除体内感染的病毒,因此,开发高效、价廉的新型活载体疫苗、核酸疫苗及标记疫苗是今后研究的趋势。笔者在本文中概括地介绍了目前商品化的PCV2疫苗的特性和免疫效力,并对近年来有关PCV2活载体疫苗、核酸疫苗及标记疫苗等新型疫苗的研究进展进行综述,以期为猪圆环病毒病的防制提供参考。 展开更多
关键词 病毒2 疫苗 研究
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