一例猪嗜血支原体病的诊断及防治 被引量：1

1

作者 赵朋 《中国动物保健》 2024年第5期119-120,共2页

猪嗜血支原体病是由嗜血支原体侵染猪的血红细胞所引发的一种急性热性、高度接触性传染性疾病,临床上患病猪表现为体温显著升高,贫血并出现溶血性黄疸,呼吸频率逐渐加快,体表皮肤发红,严重的可以导致猪衰竭死亡,对生猪养殖业构成的危害... 猪嗜血支原体病是由嗜血支原体侵染猪的血红细胞所引发的一种急性热性、高度接触性传染性疾病,临床上患病猪表现为体温显著升高,贫血并出现溶血性黄疸,呼吸频率逐渐加快,体表皮肤发红,严重的可以导致猪衰竭死亡,对生猪养殖业构成的危害极大,该类疾病又被称为附红细胞体病。本次研究结合实际病例,探讨了猪嗜血支原体病的诊断与防治,希望对广大同行有所帮助。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体病 诊断 防治措施

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猪嗜血支原体猪体感染试验 被引量：5

2

作者 王帅彪 李玉峰 +3 位作者 常晨 程王琨 马培培 邹垚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1645-1653,共9页

为研究猪嗜血支原体致病机制,将其感染健康猪和切脾猪,从临床症状、血液学和生物化学指标、菌血症、抗体水平以及细胞因子、病理剖检和组织学检查等方面系统研究猪嗜血支原体病的发病过程。结果显示,与不切脾猪相比,切脾猪体内的猪嗜血... 为研究猪嗜血支原体致病机制,将其感染健康猪和切脾猪,从临床症状、血液学和生物化学指标、菌血症、抗体水平以及细胞因子、病理剖检和组织学检查等方面系统研究猪嗜血支原体病的发病过程。结果显示,与不切脾猪相比,切脾猪体内的猪嗜血支原体含量(血液中含量1.0×108拷贝·mL-1)更高,维持时间更长。猪嗜血支原体血液中含量和白细胞计数、血细胞比容、红细胞计数和铁等指标显著相关。仅1头猪产生猪嗜血支原体抗体,3组猪血清中均没有检测到细胞因子IL-4和IFN-γ。本研究复制出猪嗜血支原体病病例,记录了该病的发展过程,为该病的病理机制、预防、诊断等方面的研究奠定基础。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 猪嗜血支原体病 致病机制 相关性

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猪嗜血支原体病原染色检测法的比较研究 被引量：4

3

作者 张晋强 薛翼鹏 +3 位作者 李晓云 詹雅琦 杨姗姗 马海利 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期258-261,共4页

为检测猪嗜血支原体(M.suis)感染,本研究对传统血涂片吖啶橙染色方法进行改良,建立了快速检测M.suis的血液吖啶橙染色方法。结果显示,血液吖啶橙染色法的染色时间比传统血涂片吖啶橙染色法和姬姆萨染色法分别节省约30 min和1 h。利用血... 为检测猪嗜血支原体(M.suis)感染,本研究对传统血涂片吖啶橙染色方法进行改良,建立了快速检测M.suis的血液吖啶橙染色方法。结果显示,血液吖啶橙染色法的染色时间比传统血涂片吖啶橙染色法和姬姆萨染色法分别节省约30 min和1 h。利用血液吖啶橙染色法、血涂片吖啶橙染色法、姬姆萨染色法及PCR法对200份临床血液样品进行检测,结果显示,阳性检出率依次为64.5%、59.5%、48%及68.5%。3种染色方法与PCR的符合率分别为87%、77%、59.5%;与PCR结果相比,前两种染色方法差异不显著(p>0.05),后者差异极显著(p<0.01)。结果表明,血液吖啶橙染色法优于其他两种染色方法,具有操作简单快速、准确度高、检出率高等优点,适用于临床上对M.suis感染快速定性检测和流行病学调查研究。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 吖啶橙染色 临床检测

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猪嗜血支原体PCR及荧光定量PCR检测方法的建立和比较 被引量：4

4

作者 张长莹 张莉莉 +4 位作者 李玉峰 李文良 刘捷 陈闻 姜平 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期443-447,共5页

为了解猪嗜血支原体(Mycoplasma haemosuis)对猪群的感染情况并建立该病的检测方法,本研究根据GenBank登录的M.haemosuis 16S rRNA基因序列(FJ263944)设计合成PCR引物以及荧光定量PCR(FQ-PCR)引物和探针。以含16S rRNA基因的重组质粒为... 为了解猪嗜血支原体(Mycoplasma haemosuis)对猪群的感染情况并建立该病的检测方法,本研究根据GenBank登录的M.haemosuis 16S rRNA基因序列(FJ263944)设计合成PCR引物以及荧光定量PCR(FQ-PCR)引物和探针。以含16S rRNA基因的重组质粒为模板,通过对PCR反应条件的优化,建立检测M.haemosuis的PCR和FQ-PCR检测方法。结果表明,这两种检测方法均具有较好的敏感性和特异性,与常规方法相比,FQ-PCR方法的敏感性高1 000倍;用这两种PCR方法检测20份临床样品,常规PCR方法的阳性率为60%(12/20),而FQ-PCR方法的阳性率为75%(15/20)。这两种检测方法的建立为确定M.haemosuis在我国猪群的感染情况和建立该病动物模型提供有效的检测手段。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 常规PCR 荧光定量PCR

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猪嗜血支原体OxaA基因的同义定点突变、克隆及在Vero细胞中的表达 被引量：2

5

作者 刘明明 贾立军 +2 位作者 薛书江 梁晚枫 张守发 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期592-594,共3页

为真核表达猪嗜血支原体(Mycoplasma suis)膜蛋白OxaA基因,本实验采用PCR技术扩增包含OxaA基因全长在内的1 561 bp序列,通过引物突变法对OxaA基因内部的两个编码蛋白障碍的碱基进行同义定点突变,应用Overlap PCR技术将3对引物扩增得到的... 为真核表达猪嗜血支原体(Mycoplasma suis)膜蛋白OxaA基因,本实验采用PCR技术扩增包含OxaA基因全长在内的1 561 bp序列,通过引物突变法对OxaA基因内部的两个编码蛋白障碍的碱基进行同义定点突变,应用Overlap PCR技术将3对引物扩增得到的OxaA片段进行拼接,获得能够正确翻译膜蛋白的OxaA基因序列,将鉴定正确的pVAX-OxaA重组质粒转染Vero细胞,应用IFA和western blot方法鉴定OxaA基因在Vero细胞中的表达。结果显示,突变的OxaA基因经Overlap PCR扩增获得长度为747 bp的基因片段,与GenBank中M.suis基因组的核苷酸序列同源性为98%,IFA检测OxaA基因在Vero细胞中获得瞬时表达,western blot分析表达蛋白的分子量为29 ku,具有较好的反应原性。本实验首次在真核细胞中表达了M.suis的QxaA基因,为M.suis基因疫苗的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 OxaA基因 同义定点突变 真核表达

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猪嗜血支原体酶标单抗阻断ELISA检测方法的建立 被引量：3

6

作者 张长莹 李玉峰 姜平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1591-1597,共7页

为确定猪嗜血支原体(M.suis)在临床的感染情况和进行流行病学调查提供检测方法,本研究以纯化的猪嗜血支原体重组MSG1蛋白和辣根过氧化酶标记的MSG1蛋白单抗建立了检测猪嗜血支原体的阻断ELISA方法。经筛选确定,抗原最佳包被浓度为0.5μg... 为确定猪嗜血支原体(M.suis)在临床的感染情况和进行流行病学调查提供检测方法,本研究以纯化的猪嗜血支原体重组MSG1蛋白和辣根过氧化酶标记的MSG1蛋白单抗建立了检测猪嗜血支原体的阻断ELISA方法。经筛选确定,抗原最佳包被浓度为0.5μg.mL-1,待检血清最佳稀释度为1∶1,作用时间为37℃1.5h,酶标单抗最佳稀释度为1∶10 000,作用时间为37℃1h。通过对100份M.suis阴性血清阻断ELISA检测结果进行统计学分析,确定本方法的判定标准为当阻断率PI≥23.71%时判为阳性,PI≤36.35%时判为阴性,23.71%<PI<36.36%时判为可疑。敏感性、特异性和重复性试验证明该检测方法敏感性高、特异性强、可重复性好,可用于M.suis流行病学调查和疾病诊断。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 MSG1蛋白 酶标单抗 阻断ELISA

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一种基于16SrRNA基因检测猪嗜血支原体PCR方法的建立 被引量：2

7

作者 文辉强 刘永刚 +4 位作者 石文达 武嘉男 姜成刚 张交儿 蔡雪辉 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第9期18-20,23,共4页

本试验目的是建立一种基于16SrRNA基因检测猪嗜血支原体的PCR方法。根据GenBank上猪嗜血支原体16S rRNA基因(ID:U88565)设计特异引物,对哈尔滨采集病料进行PCR并克隆pMD18-T,测序所扩增的片段为411bp,同源性分析表明,该序列与参考序列... 本试验目的是建立一种基于16SrRNA基因检测猪嗜血支原体的PCR方法。根据GenBank上猪嗜血支原体16S rRNA基因(ID:U88565)设计特异引物,对哈尔滨采集病料进行PCR并克隆pMD18-T,测序所扩增的片段为411bp,同源性分析表明,该序列与参考序列同源性97.57%。特异性和敏感性试验表明,所建立的PCR诊断方法对猪肺炎支原体、大肠杆菌、沙门菌、葡萄球菌无交叉反应;血液基因组DNA最小检出量为0.75fg/μL。该方法具有快速、特异、敏感等特点,为猪嗜血支原体病的快速诊断及流行病学调查提供了新的手段。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 PCR 16S RRNA基因

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猪嗜血支原体ORF9的全基因合成及原核表达 被引量：1

8

作者 周栋 刘建柱 +6 位作者 张璐 成子强 牛绪东 刘海涛 刘永夏 杨笃宝 王淑静 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期985-987,共3页

为原核表达猪嗜血支原体(M.haemosuis)ORF9蛋白,本研究根据GenBank登录的AJ504999的ORF9基因序列,采用重叠延伸PCR技术(SOE-PCR),选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成4对寡核苷酸片段,人工合成ORF9基因。将其克隆于表达载体pET-32a中... 为原核表达猪嗜血支原体(M.haemosuis)ORF9蛋白,本研究根据GenBank登录的AJ504999的ORF9基因序列,采用重叠延伸PCR技术(SOE-PCR),选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成4对寡核苷酸片段,人工合成ORF9基因。将其克隆于表达载体pET-32a中构建重组表达质粒pET-ORF9,转化大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。经SDS-PAGE和western blot鉴定表明,重组蛋白的分子量约为34 ku。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 ORF9 全基因合成 原核表达

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新疆阿拉尔垦区猪嗜血支原体PCR检测方法的建立 被引量：1

9

作者 赵爱云 何强 井波 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第14期8619-8621,共3页

[目的]掌握阿拉尔垦区猪嗜血支原体的流行现状。[方法]根据GenBank上发表的猪嗜血支原体16S rRNA基因组序列(U88565)设计1对特异性引物,对采自新疆阿拉尔垦区的样品进行PCR扩增,并将其产物克隆到pBR322载体后测序。[结果]扩增出的片段为... [目的]掌握阿拉尔垦区猪嗜血支原体的流行现状。[方法]根据GenBank上发表的猪嗜血支原体16S rRNA基因组序列(U88565)设计1对特异性引物,对采自新疆阿拉尔垦区的样品进行PCR扩增,并将其产物克隆到pBR322载体后测序。[结果]扩增出的片段为0.836 kb。同源性分析结果表明,该序列与猪嗜血支原体参考基因组序列同源性为99.47%,反映出我国分离株与国外株基因同源性较高。[结论]建立了一种猪嗜血支原体PCR检测方法,该方法为猪嗜血支原体病的快速诊断及流行病学调查提供了新的手段,并为相关基因的表达及功能研究奠定了基础。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 PCR 克隆

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单味中药对猪嗜血支原体黏附红细胞的影响 被引量：5

10

作者 梁睿 董耀泽 +3 位作者 石泽宇 张晋强 陈建闪 马海利 《中兽医医药杂志》 2017年第4期13-16,共4页

研究单味中药对猪嗜血支原体(M.suis)黏附红细胞作用的影响,筛选具有抑制M.suis黏附红细胞作用的中药。应用悬滴镜检法、血液直接PCR法筛选M.suis阳性血液和M.suis阴性血液;利用qPCR技术研究单味中药与M.suis阳性红细胞、M.suis、红细... 研究单味中药对猪嗜血支原体(M.suis)黏附红细胞作用的影响,筛选具有抑制M.suis黏附红细胞作用的中药。应用悬滴镜检法、血液直接PCR法筛选M.suis阳性血液和M.suis阴性血液;利用qPCR技术研究单味中药与M.suis阳性红细胞、M.suis、红细胞作用后,红细胞黏附M.suis的拷贝数变化。结果显示,青蒿、黄芩、槟榔、甘草、秦皮、苦参、丹参作用于M.suis阳性红细胞,可极显著降低红细胞黏附M.suis的拷贝数(P<0.01);青蒿、黄芩、槟榔、甘草、秦皮、苦参、丹参作用于M.suis可极显著减少红细胞黏附M.suis拷贝数(P<0.01);青蒿、黄芩、槟榔、甘草作用于红细胞,可极显著抑制红细胞黏附M.suis拷贝数(P<0.01)。结果表明,青蒿、黄芩、槟榔、甘草、秦皮、苦参、丹参可抑制M.suis对红细胞的黏附,可用于预防和治疗M.suis感染和猪附红细胞体病中药的研发。 展开更多

关键词 单味中药 猪嗜血支原体 黏附 红细胞

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猪嗜血支原体病研究进展 被引量：9

11

作者 王凡 杨锐 +3 位作者 智晓莹 王会宝 邓瑞雪 董金杰 《中兽医医药杂志》 CAS 2020年第6期97-100,共4页

猪嗜血支原体可引起猪传染性贫血或猪嗜血支原体病,该病原体在世界范围内分布范围广,严重阻碍养猪业的发展。笔者等从猪嗜血支原体病的病原学、致病机理、临床症状、诊断及防制等方面进行综述,拟为该病的研究提供参考。

关键词 猪嗜血支原体 猪嗜血支原体病 病原学 致病机理

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复方中药对猪嗜血支原体感染预防作用的研究 被引量：8

12

作者 董耀泽 李晓云 +4 位作者 张晋强 石泽宇 陈建闪 李宏全 马海利 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期404-410,共7页

为研究复方中药对猪嗜血支原体(M.suis)感染的预防效果,将复方中药Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和强力霉素分别与M.suis阳性血液在细胞培养液中进行培养,间隔12h用qPCR检测培养物中M.suis拷贝数。选取临床健康的35日龄仔猪进行M.suis PCR检测,将50头M.sui... 为研究复方中药对猪嗜血支原体(M.suis)感染的预防效果,将复方中药Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和强力霉素分别与M.suis阳性血液在细胞培养液中进行培养,间隔12h用qPCR检测培养物中M.suis拷贝数。选取临床健康的35日龄仔猪进行M.suis PCR检测,将50头M.suis PCR阳性仔猪随机分为5组,每组10头,每组隔离饲养。三个复方中药组采用拌料方式连续喂服7d,强力霉素组拌料喂服5d,对照组饲料中不添加任何药物。分别于用药前、用药后第10、20、30天前腔静脉采血,对血液M.suis拷贝数、红细胞SOD活力、红细胞膜ATP酶(Na+K+-ATPase、Ca2+Mg2+-ATPase)活力、淋巴细胞(T、B)增殖率、血清IgG含量进行检测。结果显示,三种复方中药在体外培养时均可极显著降低培养物中M.suis拷贝数(P<0.01);在仔猪预防试验中,与对照组和强力霉素组相比,复方中药Ⅰ可以极显著降低血液中M.suis拷贝数(P<0.01),提高红细胞SOD活力与B淋巴细胞增殖率(P<0.05或P<0.01);复方中药Ⅱ可以提高红细胞SOD活力、Na+K+-ATPase活力与淋巴细胞增殖率(P<0.05),但无法长时间抑制M.suis生长;复方中药Ⅲ可以极显著降低血液中M.suis拷贝数(P<0.01),显著提高红细胞SOD活力(P<0.05)。结果说明:复方中药Ⅰ对M.suis自然感染有良好的预防作用。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 复方中药 仔猪 预防

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猪嗜血支原体诊断方法的比较 被引量：1

13

作者 陈福斌 赵爱云 +2 位作者 刘婷 何强 井波 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第20期12219-12220,共2页

[目的]建立猪嗜血支原体的PCR诊断方法,并与常规染色镜检诊断方法进行比较。[方法]对采自新疆阿拉尔垦区的疑似样品分别采用吖啶橙、姬姆萨染色镜检,采用温度法将嗜血支原体从红细胞上解离下来,提取其基因。根据GenBank上发表的猪嗜血... [目的]建立猪嗜血支原体的PCR诊断方法,并与常规染色镜检诊断方法进行比较。[方法]对采自新疆阿拉尔垦区的疑似样品分别采用吖啶橙、姬姆萨染色镜检,采用温度法将嗜血支原体从红细胞上解离下来,提取其基因。根据GenBank上发表的猪嗜血支原体16S rRNA基因组序列(U88565)设计1对特异性引物,进行PCR扩增,建立猪嗜血支原体的PCR诊断方法。[结果]比较了3种诊断方法,指出了各自的优劣。所建立的PCR方法为猪嗜血支原体病的快速诊断及流行病学调查提供了新手段。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 PCR 镜检

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新疆阿克苏地区猪嗜血支原体感染血清流行病学调查 被引量：1

14

作者 王静 杨光 +2 位作者 董贵 陶大勇 齐萌 《湖北畜牧兽医》 2021年第10期7-8,共2页

为了深入研究新疆阿克苏地区猪嗜血支原体的感染状况,通过双抗原夹心法对新疆阿克苏地区8个猪场的共530份猪血清进行了测定,并分析了不同区域、季节以及年龄段猪感染嗜血支原体的情况。结果显示,所有猪只血清的总阳性率为12.54%。其中... 为了深入研究新疆阿克苏地区猪嗜血支原体的感染状况,通过双抗原夹心法对新疆阿克苏地区8个猪场的共530份猪血清进行了测定,并分析了不同区域、季节以及年龄段猪感染嗜血支原体的情况。结果显示,所有猪只血清的总阳性率为12.54%。其中沙雅县猪血清阳性率最高(17.20%),阿克苏市最低(10.00%);新和县、乌什县、柯坪县、阿瓦提县、温宿县和库车市猪血清阳性率分别为11.53%、10.81%、13.64%、13.80%、10.71%和12.90%;该病全年均有感染,夏季感染率最高(15.20%),冬季最低(8.65%);母猪血清阳性率最高(13.46%),其次是育肥猪(12.50%),仔猪最低(10.00%)。该病感染范围较广,对阿克苏地区养猪业造成较大经济损失,通过抽样调查,可为阿克苏地区对该病的有效防治提供参考。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 双抗夹心法 血清 流行病学调查

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云南某地区猪嗜血支原体的诊断及生物信息学分析 被引量：3

15

作者 周玉照 张小苗 +2 位作者 李明 张雅娜 张雷 《山东畜牧兽医》 2021年第10期11-14,20,共5页

为了解云南某地区的猪嗜血支原体病的流行情况。采用血液涂片镜检、PCR鉴定、同源性比对与遗传进化分析。结果云南某地区猪嗜血支原体的感染率为2%;同源性比对与E.suis的同源性在97.2%~96.9%;遗传进化与U88565、AF029394为同一分支,亲... 为了解云南某地区的猪嗜血支原体病的流行情况。采用血液涂片镜检、PCR鉴定、同源性比对与遗传进化分析。结果云南某地区猪嗜血支原体的感染率为2%;同源性比对与E.suis的同源性在97.2%~96.9%;遗传进化与U88565、AF029394为同一分支,亲缘关系较近,说明云南某地区存在猪嗜血支原体流行,这为该病的治疗提供科学依据。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 镜检 PCR鉴定

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新疆地区某猪场猪嗜血支原体病的检测与分析

16

作者 刘淑华 李超群 +3 位作者 梁樊鑫 陈鑫 候梦哲 李莲瑞 《现代畜牧兽医》 2024年第9期1-5,共5页

为了解新疆地区某猪场猪嗜血支原体的感染情况,试验采集新疆地区某猪场保育仔猪的抗凝血200份,采用血液压片、血涂片瑞氏染色镜检和普通PCR方法检测猪嗜血支原体,并利用猪嗜血支原体16SrRNA基因引物,以血液DNA为模板,扩增、克隆、鉴定... 为了解新疆地区某猪场猪嗜血支原体的感染情况,试验采集新疆地区某猪场保育仔猪的抗凝血200份,采用血液压片、血涂片瑞氏染色镜检和普通PCR方法检测猪嗜血支原体,并利用猪嗜血支原体16SrRNA基因引物,以血液DNA为模板,扩增、克隆、鉴定后送测序,进行同源性比对与遗传进化分析。结果显示,经血液压片、血液涂片及PCR检测共检出58份猪嗜血支原体阳性样本;以猪嗜血支原体16SrRNA基因引物、血液DNA为模板成功克隆猪嗜血支原体基因,命名为XJP1(已被Genbank收录,登录号:PP526316)。同源性比对与遗传进化分析结果显示,XJP1与猪嗜血支原体(登录号:KC907396)、猪嗜血支原体(登录号:HQ259257)为同一分支,亲缘关系较近,同源性为96.9%~99.6%。研究表明,该猪场保育猪感染了猪嗜血支原体,试验结果将为该猪场防控猪嗜血支原体感染以及该病的深入研究提供基础数据。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 16SrRNA序列 新疆地区

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