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试剂盒的检测结果比较三种猪伪狂犬病毒gE抗体诊断 被引量：1
1
作者 陆江 叶志树 +2 位作者 米树运 孙如水 梁恒英 《四川畜牧兽医》 2017年第4期32-33,共2页
本试验选取60份猪血清,分别采用三种商用猪伪狂犬病毒gE抗体诊断试剂盒进行检测,然后对三种检测结果的符合程度进行了分析,比较三种试剂盒之间的一致性。
关键词 猪伪狂犬病毒 ge抗体检测 ELISA 试剂盒 比较试验
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猪伪狂犬病病毒gE蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
2
作者 王瑞宁 王勋 +4 位作者 李鸽 李青梅 李存法 杨苏珍 郭军庆 《河南农业科学》 北大核心 2024年第12期167-173,共7页
为了开发检测猪伪狂犬病病毒(PRV)的免疫诊断试剂,使用HEK293F细胞表达的gE重组蛋白免疫BALB/c小鼠。将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)方法筛选阳性杂交瘤细胞株,以... 为了开发检测猪伪狂犬病病毒(PRV)的免疫诊断试剂,使用HEK293F细胞表达的gE重组蛋白免疫BALB/c小鼠。将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)方法筛选阳性杂交瘤细胞株,以期获得对PRV反应性良好的抗gE重组蛋白单克隆抗体。结果显示,获得2株(2B5和8F7)稳定分泌抗PRV gE蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其腹水单克隆抗体的ELISA效价均为1∶1 000000;单克隆抗体亚型鉴定结果表明,2株单克隆抗体的重链均为IgG1亚型,轻链均为Kappa链。单克隆抗体特异性测定结果显示,2株单克隆抗体仅与PRV反应,不与其他常见病毒发生反应;SDS-PAGE结果显示,纯化后的单克隆抗体均在约50 ku和25 ku处有纯度较高的特异性条带;间接免疫荧光试验(IFA)结果表明,制备的2株单克隆抗体与转染gE质粒的293T细胞发生特异性反应。根据Western blot结果,筛选获得的2株单克隆抗体均在120 ku附近出现特异条带,表明这2株单克隆抗体均能特异性识别PRV。综上,成功制备了2株特异性强、效价高的抗gE蛋白单克隆抗体,为后期PRV诊断试剂盒的制备提供重要的生物材料。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 ge蛋白 单克隆抗体 间接免疫荧光试验
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2022—2023年新疆部分地区猪伪狂犬病毒抗体检测及分析 被引量：1
3
作者 刘士哲 陈少鹏 +2 位作者 周齐 陆宣杰 屈勇刚 《现代畜牧兽医》 2024年第8期54-58,共5页
试验旨在了解2022—2023年新疆部分地区猪群中伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染情况和免疫抗体水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒对新疆6个地区13个规模化养猪场的510份血清样品分别进行了PRV-gE和PRV-gB两种蛋白的抗体检测。结果显示,2... 试验旨在了解2022—2023年新疆部分地区猪群中伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染情况和免疫抗体水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒对新疆6个地区13个规模化养猪场的510份血清样品分别进行了PRV-gE和PRV-gB两种蛋白的抗体检测。结果显示,2022—2023年,新疆部分地区的猪群平均PRV-gE蛋白抗体阳性率为21.76%(111/510),不同地区与不同规模化养殖场间的平均PRV-gE蛋白抗体阳性率存在较大的差异。新疆地区规模化猪场平均PRV免疫抗体阳性率为59.41%(303/510),低于国家规定标准(70%),仅有38.46%(5/13)的猪场免疫抗体阳性率达到了国家规定标准,不同地区与不同规模化养殖场间的PRV免疫抗体阳性率存在较大的差异。研究表明,2022—2023年新疆部分地区PRV野毒感染率仍处于较高水平,免疫合格率较低,存在较大的风险,需加强对PRV的免疫防控工作。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 gB抗体 ge抗体
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猪伪狂犬病毒gE蛋白的酵母表达及其单克隆抗体的筛选 被引量：2
4
作者 王垚 金前跃 +8 位作者 周稳 李旭锋 柴永笑 丁培阳 陈晓 邢云瑞 李艳华 郭军庆 张改平 《河南农业科学》 北大核心 2019年第10期133-139,共7页
为获得具有生物学活性的猪伪狂犬病毒(PRV)gE蛋白及其特异性单克隆抗体,利用电转技术将pPICZαA-gE重组质粒转入毕赤酵母X-33并筛选出阳性克隆,通过SDS-PAGE、Western blot鉴定筛选出PRV gE蛋白表达菌株。通过诱导表达获得gE分泌蛋白,... 为获得具有生物学活性的猪伪狂犬病毒(PRV)gE蛋白及其特异性单克隆抗体,利用电转技术将pPICZαA-gE重组质粒转入毕赤酵母X-33并筛选出阳性克隆,通过SDS-PAGE、Western blot鉴定筛选出PRV gE蛋白表达菌株。通过诱导表达获得gE分泌蛋白,并利用Ni柱进行纯化,应用Western blot、Dot blot、ELISA方法对纯化蛋白进行活性鉴定。同时将纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,细胞融合后通过免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛选单克隆抗体,并对单克隆抗体进行了反应性测定、效价测定及亚型鉴定。结果显示,PRV gE蛋白在毕赤酵母中成功表达,并获得了纯化蛋白,纯度达90%以上,且具有良好的生物学活性,与PRV阳性血清反应性良好;筛选到4株敏感性强、特异性良好的gE单克隆抗体,均可同时特异识别PRV gE蛋白及病毒,分别命名为2F10、4C10、9E1、10C3。综上,用酵母系统成功表达了PRV gE蛋白,并筛选到4株针对PRV gE蛋白的单克隆抗体。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 ge蛋白 毕赤酵母 单克隆抗体
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生猪伪狂犬病毒gB抗体与中和抗体的相关性分析 被引量：9
5
作者 杨涛涛 刘崇灵 +2 位作者 刘晓波 赵墩 余兴龙 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期303-306,共4页
为探索生猪伪狂犬病毒gB–ELISA抗体水平的高低与中和抗体效价的相关性,运用酶联免疫吸附测定(ELISA)法对177份生猪血清进行了伪狂犬病毒gB抗体的检测,同时,用中和试验对上述血清样品进行了伪狂犬病毒中和抗体的测定。试验结果通过生物... 为探索生猪伪狂犬病毒gB–ELISA抗体水平的高低与中和抗体效价的相关性,运用酶联免疫吸附测定(ELISA)法对177份生猪血清进行了伪狂犬病毒gB抗体的检测,同时,用中和试验对上述血清样品进行了伪狂犬病毒中和抗体的测定。试验结果通过生物统计学分析,gE抗体阴性血清的g B抗体平均S/P值和中和抗体效价(SN效价)倒数平均值的相关系数为0.926,说明g B免疫抗体S/P值与其中和抗体效价有很好的相关性。中和抗体水平的高低一般与免疫保护力呈正相关,研究结果表明gB–ELISA抗体水平可以用来评估生猪对当前流行PRV毒株的相对免疫保护力。 展开更多
关键词 猪 伪狂犬病毒 gB抗体 中和抗体 酶联免疫吸附测定
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猪伪狂犬病病毒gE抗体胶体金免疫层析检测方法的建立及应用 被引量：9
6
作者 廖文军 吴健敏 +4 位作者 谭攀 覃绍敏 陈凤莲 马玲 张伟 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第9期12-16,32,共6页
以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)-猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为诊断抗原和胶体金标记物,以羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带,制作检测猪伪狂犬病毒gE抗体的双抗原胶体金试纸条。利用方阵滴定试验筛选出金标抗原最佳... 以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)-猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为诊断抗原和胶体金标记物,以羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带,制作检测猪伪狂犬病毒gE抗体的双抗原胶体金试纸条。利用方阵滴定试验筛选出金标抗原最佳工作浓度为17.6μg,检测线诊断抗原最佳标记量为1.76μg,血清最佳稀释度为1∶10,作用时间15 min,与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪布鲁菌(Brucella)阳性血清和PRVgE缺失疫苗接种的猪免疫血清检测线均不出现红色条带,与PRV标准阳性血清反应检测线出现红色条带。试纸条操作简单,肉眼于15 min内可判定结果;试纸条在室温保存6个月,其特异性和敏感性没有明显变化;与美国IDEXX和法国LSI gE-ELISA抗体检测诊断试剂盒检测结果比较,1 164份猪血清的符合率均为90.55%。制备的胶体金试纸条具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 金标免疫层析法 ge基因 抗体检测
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猪伪狂犬病毒gB、gC和gD蛋白多抗制备及交叉中和抗体效价测定 被引量：8
7
作者 刘飞 童武 +3 位作者 梁超 杨莘 郑浩 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期73-76,共4页
为研究猪伪狂犬病毒（PRv）主要免疫原性基因的抗原变异情况，本研究构建了PRV变异株JS-2012和弱毒疫苗株Bartha—K61的gB、gc和gD基因重组真核表达质粒。通过基因枪途径免疫新西兰大白兔，对制备的兔源多克隆抗体进行交叉中和抗体效价... 为研究猪伪狂犬病毒（PRv）主要免疫原性基因的抗原变异情况，本研究构建了PRV变异株JS-2012和弱毒疫苗株Bartha—K61的gB、gc和gD基因重组真核表达质粒。通过基因枪途径免疫新西兰大白兔，对制备的兔源多克隆抗体进行交叉中和抗体效价的i／n,4定。结果显示，JS．2012和Bartha．K61株的gC蛋白和gD蛋白多抗对PRVJS．2012变异株、SC经典强毒株和Bartha．K61弱毒疫苗株的交叉中和效价均无显著差异；而两个病毒株的2B蛋白多抗对JS．2012和sc株的中和效价较低，分别为1：29．0～56．7和1：56．2～137．0，对Bartha—K61株以及其他毒力基因缺失弱毒疫苗株的中和效价较高，分别为1：75．0--490．0和1：198．6～986．9，差异显著，推测该结果可能与PRV毒力基因缺失有关。本研究为进一步鉴定PRV流行株的抗原变异奠定基础。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 多克隆抗体 中和抗体效价
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检测猪伪狂犬病病毒gE抗体红细胞凝集试验的建立及应用 被引量：11
8
作者 廖文军 吴健敏 +4 位作者 覃绍敏 袁书智 陈凤莲 华俊 谢彬 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第2期162-165,共4页
以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)—猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为抗原,建立了检测猪伪狂犬病毒gE抗体的红细胞凝集试验。利用方阵滴定试验筛选出最佳抗原工作浓度为55μg/mL,血清最佳稀释度为1∶20,作用时间15 min,与猪... 以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)—猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为抗原,建立了检测猪伪狂犬病毒gE抗体的红细胞凝集试验。利用方阵滴定试验筛选出最佳抗原工作浓度为55μg/mL,血清最佳稀释度为1∶20,作用时间15 min,与猪瘟(CSF)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪乙型脑炎(JE)、猪布氏杆菌病(Brucellosis)阳性血清和PRV gE缺失疫苗接种的猪免疫血清均不出现红细胞凝集现象,与PRV标准阳性血清反应出现肉眼可见的凝集圈。与美国进口的PRV抗体检测gE-ELISA诊断试剂盒检测结果比较,50份猪血清的阴、阳性检出符合率均为100%。红细胞凝集试验检测方法具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 红细胞凝集试验 ge基因 抗体检测
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猪伪狂犬病毒湖北株gE基因的克隆与序列分析 被引量：6
9
作者 郭锐 田永祥 +7 位作者 周丹娜 段正赢 杨克礼 裴小英 王红 廖仁芳 罗咏梅 刘心建 《安徽农业科学》 CAS 2014年第25期8502-8503,8515,共3页
[目的]通过对从湖北省某猪场分离获得的伪狂犬病毒的gE基因克隆和测序，分析其遗传变化规律。[方法]参考GenBank中猪伪狂犬痛病毒（Porcine pseudorabies Virus，PRV）gE基因的序列设计1对引物，对PRV湖北株班基因进行PCR扩增和序列分析... [目的]通过对从湖北省某猪场分离获得的伪狂犬病毒的gE基因克隆和测序，分析其遗传变化规律。[方法]参考GenBank中猪伪狂犬痛病毒（Porcine pseudorabies Virus，PRV）gE基因的序列设计1对引物，对PRV湖北株班基因进行PCR扩增和序列分析，PCR产物克隆到pMD18-T载体。对重组质粒进行限制性内切酶分析和基因测序，与GenBank收录的国内外其他地区的标准参考毒株进行同源性分析和比较。[结果]与标准参考毒株的核苷酸序列同源性为95．0％-98．0％，进化树分析表明，PRVHBXS2014株与河南焦作株EU561349-China同属于一个分支，亲缘关系较近，但存在个别位点的基因突变。[结论]为有效防控该病提供参考。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 ge基因 PCR扩增 克隆 序列分析
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山西猪伪狂犬病毒gE基因主要抗原区的遗传变异分析 被引量：3
10
作者 孟帆 樊振华 +5 位作者 吴忻 姚敬明 王娟萍 米瑞娟 薛翼鹏 赵岳 《山西农业科学》 2017年第11期1844-1848,共5页
根据Gen Bank中收录的PRV Becker株的gE基因序列,设计了合成1对引物,对山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE部分基因进行了PCR扩增,并进行克隆与序列分析。经测序,山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE部分基因核苷酸序列长度为997 bp... 根据Gen Bank中收录的PRV Becker株的gE基因序列,设计了合成1对引物,对山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE部分基因进行了PCR扩增,并进行克隆与序列分析。经测序,山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE部分基因核苷酸序列长度为997 bp,编码322个氨基酸。测序后对山西流行株包含主要抗原表位区的gE基因核苷酸序列和推导出的氨基酸序列与18株PRV参考株进行了遗传变异分析,结果显示,山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE基因核苷酸序列与18株PRV参考株之间同源性为97.8%~100%,其中与YY株(湖南)、SC-1-2015株(四川)、HNXX2012株(湖北)、HN-DZ株(广东)及DL14-08株(长春)同源性最高,均为100%,与75V19株(比利时)同源性最低,为97.8%。山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE基因核苷酸序列推导的氨基酸序列与18株PRV参考株之间同源性为96.1%~100%,其中与YY株(湖南)、SC-1-2015株(四川)、HNXX2012株(湖北)、HN-DZ株(广东)及DL14-08株(长春)同源性最高,均为100%,与Rice(美国)同源性最低,为96.1%。山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE基因序列的遗传进化分析表明,山西PRV流行株属于2012年以来分离的PRV变异株群,与YY株和HNXX2012株亲缘关系较近,与欧洲和美洲分离株亲缘关系较远。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 ge基因 抗原区 遗传变异
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猪伪狂犬病毒gE基因在大肠杆菌中的表达 被引量：2
11
作者 孙德刚 黄保续 李晓成 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第9期29-31,共3页
根据Genebank中伪狂犬病毒Min-A株gE基因序列,设计了一对引物,PCR扩增长度为557bp的gE基因去信号肽后的主要抗原区域(157-714bp),将其克隆进测序载体PGEM-Teasy中,成功构建质粒PGEMTeasy-gE。用BamhI和HindIII将gE基因主要抗原区域从PGE... 根据Genebank中伪狂犬病毒Min-A株gE基因序列,设计了一对引物,PCR扩增长度为557bp的gE基因去信号肽后的主要抗原区域(157-714bp),将其克隆进测序载体PGEM-Teasy中,成功构建质粒PGEMTeasy-gE。用BamhI和HindIII将gE基因主要抗原区域从PGEM-Teasy中切出,然后与同样酶处理的原核表达载体PET32A连接,命名为PET-gE。在IPTG的诱导后,经SDS-PAGE电泳发现43ku处出现特异性蛋白条带。经过Western blot分析,表达产物具有很好的免疫原性。该研究成功表达出具有抗原性的目的蛋白,为血清学鉴别诊断方法gE-ELISA的建立打下很好的基础,同时gE-ELISA也能对野毒和疫苗毒进行鉴别。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒ge 基因 大肠杆菌 血清学鉴别
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猪伪狂犬病毒gE基因的亚克隆及原核表达 被引量：1
12
作者 裴丽华 左玉柱 +1 位作者 杨震 范京惠 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期80-83,共4页
为建立猪伪狂犬病毒gE-ELISA血清学检测方法,根据Genebank中发表的猪伪狂犬病毒gE基因序列,PCR扩增长度为750bp含gE基因的主要抗原区域,将其克隆到pMDTM19-T载体中,成功构建质粒pMD-gE。用BamHI和HindⅢ对重组质粒pMD-gE进行酶切、... 为建立猪伪狂犬病毒gE-ELISA血清学检测方法,根据Genebank中发表的猪伪狂犬病毒gE基因序列,PCR扩增长度为750bp含gE基因的主要抗原区域,将其克隆到pMDTM19-T载体中,成功构建质粒pMD-gE。用BamHI和HindⅢ对重组质粒pMD-gE进行酶切、回收后与同样酶处理的原核表达载体pET32a连接,命名为pET32a-gE。经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳可检测到约为45ku的目的蛋白条带。经过Western blot分析,表达产物具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 ge基因 原核表达
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猪群进行猪伪狂犬病净化后病毒gE抗体的检测与分析 被引量：2
13
作者 张进隆 唐文雅 +3 位作者 王福厚 贾志江 杨红梅 张潇文 《国外畜牧学（猪与禽）》 2021年第5期55-56,共2页
为了解猪伪狂犬病在规模化猪场的净化效果,采用ELISA对规模化猪场血清检测样品中猪伪狂犬病病毒gE抗体的水平进行判定。结果显示:净化前,3个规模化猪场共检测34份血清样品,其中猪伪狂犬病病毒g E抗体阳性3份,抗体阳性率达8.8%。采取净... 为了解猪伪狂犬病在规模化猪场的净化效果,采用ELISA对规模化猪场血清检测样品中猪伪狂犬病病毒gE抗体的水平进行判定。结果显示:净化前,3个规模化猪场共检测34份血清样品,其中猪伪狂犬病病毒g E抗体阳性3份,抗体阳性率达8.8%。采取净化措施后,3个猪场共检测34份血清样品,未检出猪伪狂犬病病毒gE阳性抗体,净化措施取得明显的效果。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 ge抗体 检测 分析
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两种检测猪瘟和猪伪狂犬病毒抗体方法比较 被引量：1
14
作者 谢玉洁 占松鹤 +3 位作者 何长生 章健 张贺森 李郁 《中国畜禽种业》 2019年第9期92-94,共3页
为评价Wellray CSFV和PRV抗体快速检测方法在临床样品检测中的适用性,将其与IDEXX公司ELISA抗体检测方法进行比较试验。试验对177份血清进行CSFV抗体、PRV gB和PRV gE抗体的对比检测。结果显示,Wellray CSFV抗体快速检测方法与IDEXX公司... 为评价Wellray CSFV和PRV抗体快速检测方法在临床样品检测中的适用性,将其与IDEXX公司ELISA抗体检测方法进行比较试验。试验对177份血清进行CSFV抗体、PRV gB和PRV gE抗体的对比检测。结果显示,Wellray CSFV抗体快速检测方法与IDEXX公司ELISA抗体检测方法的符合率、相对敏感性、相对特异性分别为87.72%、96%、81.25%,Kappa值=0.756,PRVgB抗体分别为92.06%、91.67%、92.59%,Kappa值=0.839,PRVgE抗体分别为84.21%、85.71%、83.33%,Kappa值=0.671。结果表明,Wellray CSFV和PRV抗体快速检测方法与IDEXX公司ELISA抗体检测方法的符合率、相对敏感性、相对特异性都较高,且不需要昂贵复杂的仪器设备,15min内即可完成检测,能更好地适应基层检测的实际需求。 展开更多
关键词 猪瘟病毒抗体 猪伪狂犬病病毒 gB和ge抗体 检测方法 符合率 比较
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免疫程序对猪伪狂犬病毒抗体效价的影响
15
作者 杨加琼 《江苏农业科学》 北大核心 2014年第10期209-210,共2页
将22头35日龄健康长白仔猪分为试验组和空白对照组,试验组20头,空白对照组2头。按免疫时间和免疫剂量设计不同的免疫程序并免疫试验组仔猪。采集免疫前和首次免疫1个月后试验仔猪前腔静脉血液制备血清,采用猪伪狂犬病胶乳凝集试剂盒检... 将22头35日龄健康长白仔猪分为试验组和空白对照组,试验组20头,空白对照组2头。按免疫时间和免疫剂量设计不同的免疫程序并免疫试验组仔猪。采集免疫前和首次免疫1个月后试验仔猪前腔静脉血液制备血清,采用猪伪狂犬病胶乳凝集试剂盒检测各试验猪猪伪狂犬病毒抗体效价,比较不同免疫程序对猪伪狂犬病毒抗体效价的影响。结果表明,试验仔猪免疫前后猪伪狂犬病毒抗体效价差异极显著(P<0.01),免疫后伪狂犬病毒抗体效价在试验仔猪各个体间差异极显著(P<0.01);免疫剂量组A1与A2、A3差异显著(P<0.05);免疫时间组B1与B2、B3差异显著(P<0.05);采用非配对双样本均值分析,试验组与空白对照组的抗体效价差异极显著(P<0.01)。 展开更多
关键词 免疫程序 猪伪狂犬病毒 抗体效价 影响 分析
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2022—2023年云南省昆明地区部分猪场猪伪狂犬gE抗体检测
16
作者 孙绍美 李跃燕 +5 位作者 班福泽 高亮 向斌 杨亮宇 张以芳 柴俊 《山东畜牧兽医》 2025年第6期11-12,共2页
为了解云南省昆明地区猪场PRV的野毒感染情况,本研究运用ELISA-g E抗体检测方法对昆明地区部分猪场的248份血清样品进行PRV-gE抗体检测。结果显示,14份血清样品PRV-gE抗体检测阳性,抗体总阳性率为5.76%;8个猪场中有3个检出PRV-g E抗体阳... 为了解云南省昆明地区猪场PRV的野毒感染情况,本研究运用ELISA-g E抗体检测方法对昆明地区部分猪场的248份血清样品进行PRV-gE抗体检测。结果显示,14份血清样品PRV-gE抗体检测阳性,抗体总阳性率为5.76%;8个猪场中有3个检出PRV-g E抗体阳性,地区阳性率为37.50%。结果表明,云南省昆明地区猪场依然存在PRV野毒感染情况。各地区猪场应定期进行PRV-gE抗体监测、合理制定免疫程序、及时淘汰阳性猪只,才能有效阻断野毒传播,最终实现PRV净化目标。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 ge抗体 ELISA检测
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安徽省桐城市散养户猪群感染伪狂犬病野毒的血清学调查
17
作者 吴程华 《上海畜牧兽医通讯》 2025年第4期35-37,共3页
为评估安徽桐城市散养户猪群感染伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)野毒株情况,于2023年9月—2024年9月,选取该市10个行政村/社区的10户散养户进行猪血清采样,并使用猪伪狂犬gE鉴别ELISA诊断试剂盒检测PRV gE抗体。结果显示:10个行... 为评估安徽桐城市散养户猪群感染伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)野毒株情况,于2023年9月—2024年9月,选取该市10个行政村/社区的10户散养户进行猪血清采样,并使用猪伪狂犬gE鉴别ELISA诊断试剂盒检测PRV gE抗体。结果显示:10个行政村/社区的总体阳性率为6.99%(10/143),其中杨树村阳性率最高(11.1%),水岭村等4个村阳性率为0;长白猪阳性率为7.55%,略高于约克猪(6.67%);公猪阳性率为8.89%,高于母猪(6.12%);6~8月龄猪阳性率为7.53%,高于9~10月龄和大于10月龄猪只。结果表明,桐城市散养户猪群PRV野毒株感染呈低流行态势,但存在地域差异,需有针对性地强化防控措施。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 野毒株 ge抗体 散养户 血清学调查 桐城
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伪狂犬病毒的gE蛋白胞外区真核表达以及单克隆抗体制备 被引量：2
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作者 郎巧利 吴梦 +3 位作者 黄楠 何琦琳 葛良鹏 杨希 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期96-103,共8页
旨在构建gE基因胞外区真核表达载体,在HEK293F细胞中表达并纯化得到稳定的可溶性蛋白,并通过杂交瘤筛选获得表达gE蛋白的特异性单克隆抗体。生物信息学方法分析gE基因序列,构建gE胞外区真核表达载体pcDNA3.4-gE-6×His和pcDNA3.4-gE... 旨在构建gE基因胞外区真核表达载体,在HEK293F细胞中表达并纯化得到稳定的可溶性蛋白,并通过杂交瘤筛选获得表达gE蛋白的特异性单克隆抗体。生物信息学方法分析gE基因序列,构建gE胞外区真核表达载体pcDNA3.4-gE-6×His和pcDNA3.4-gE-m Fc,通过瞬时转染的方法在HEK293F细胞中进行表达并进一步纯化。通过Western blot和SDS-PAGE鉴定和比较gE-6×His和gE-mFc融合蛋白表达情况。利用伪狂犬灭活全病毒免疫小鼠,电融合获得杂交瘤融合细胞,通过gE-mFc蛋白和IFA筛选出稳定且特异性结合gE蛋白的阳性杂交瘤细胞株。结果表明,成功构建pcDNA3.4-gE-6×His和pcDNA3.4-gE-mFc表达载体,表达纯化得到gE-6×His和gE-mFc可溶性蛋白。比较发现gE-6×His蛋白表达量低,稳定性差。而gE-mFc蛋白表达量高,稳定性好,一次性纯化后纯度可达85%。进一步利用gE-mFc筛选获得9株稳定性和特异性高的阳性杂交瘤细胞株。首次利用哺乳动物细胞表达系统表达并获得稳定的可溶性gE蛋白,并利用其筛选获得g E特异性单克隆杂交瘤细胞株。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 ge 真核表达 单克隆抗体
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猪伪狂犬病毒贵州分离株gE基因的克隆及遗传信息分析 被引量：2
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作者 敖清莹 曾智勇 +6 位作者 徐国 杨霞 何祥艳 何小莉 张爱琼 咸文 叶百川 《山地农业生物学报》 2018年第2期80-84,共5页
为了解贵州地区猪伪狂犬病毒的分子流行现状,本研究提取实验室分离并保存的PRV GZJS2017株病毒核酸作为PCR扩增模板,并对其进行TA克隆、序列测定和用生物学软件进行遗传信息分析。结果表明:本次分离得到的GZJS2017株gE基因所测长度1740 ... 为了解贵州地区猪伪狂犬病毒的分子流行现状,本研究提取实验室分离并保存的PRV GZJS2017株病毒核酸作为PCR扩增模板,并对其进行TA克隆、序列测定和用生物学软件进行遗传信息分析。结果表明:本次分离得到的GZJS2017株gE基因所测长度1740 bp,GC含量为73.97%,通过系统进化树分析结果显示PRV不同地域毒株之间同源率达98.8%~99.9%,说明该毒株gE基因具有高度的保守性。本研究可为今后深入开展PRV gE基因的功能研究提供一些依据。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 ge基因 克隆 序列分析
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猪伪狂犬病病毒gE蛋白原核表达及野毒抗体间接ELISA检测方法的建立与应用 被引量：3
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作者 郭忠欣 王天奇 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第2期126-132,共7页
为了建立一种简单、快速的猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒抗体检测方法,试验采用原核表达技术对PRV流行毒株的gE蛋白进行了原核表达,以表达的重组蛋白作为包被抗原建立了检测PRV野毒抗体的间接ELISA检测方法。结果表明:获得了以包涵体形式表... 为了建立一种简单、快速的猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒抗体检测方法,试验采用原核表达技术对PRV流行毒株的gE蛋白进行了原核表达,以表达的重组蛋白作为包被抗原建立了检测PRV野毒抗体的间接ELISA检测方法。结果表明:获得了以包涵体形式表达的重组gE蛋白,经Western blot鉴定表明重组gE蛋白具有良好的免疫学活性,以该蛋白作为包被抗原建立的检测PRV野毒抗体的间接ELISA方法检测PRV疫苗免疫血清、CSFV、PRRSV、PCV-2、PPV、PEDV、FMDV阳性血清均为阴性,检测PRV野毒阳性血清的最低检出效价为1∶10240,批内和批间重复性试验的变异系数分别为2.19%~3.33%和3.01%~4.40%,与国外商品化gE-ELISA试剂盒的符合率达98.72%,应用该ELISA检测河南省部分地区采集的1128份猪血清样品,PRV野毒抗体阳性率为8.07%。说明建立的PRV野毒抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性、敏感性、重复性和临床适用性,为PRV野毒抗体的流行病学监测和净化提供了技术支持。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 ge蛋白 原核表达 野毒抗体 间接ELISA
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