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PMA-qPCR方法检测陕西猕猴桃溃疡菌优势病原菌活菌的研究
被引量：
7
1
作者
肖妍
刘芸宏
+4 位作者
高贵田
曹凡
马燕萍
赵武奇
雷玉山
《食品与机械》
北大核心
2019年第4期48-53,59,共7页
将叠氮溴化丙啶(PMA)与实时荧光定量(qPCR)相结合定量检测陕西猕猴桃溃疡菌优势病原菌(Psa)活菌的数量。通过优化PMA最佳浓度、暗孵育时间、曝光时间,确定PMA-qPCR区别溃疡菌活、死菌的最佳条件。结果表明,Psa经98.3℃沸水浴处理13min...
将叠氮溴化丙啶(PMA)与实时荧光定量(qPCR)相结合定量检测陕西猕猴桃溃疡菌优势病原菌(Psa)活菌的数量。通过优化PMA最佳浓度、暗孵育时间、曝光时间,确定PMA-qPCR区别溃疡菌活、死菌的最佳条件。结果表明,Psa经98.3℃沸水浴处理13min可完全致死,Psa死菌浓度为1×10^7 CFU/mL时PMA与死菌共价交联的最佳浓度为105μg/mL,最佳暗育时间为8min,最佳曝光时间为20min,在此条件下死菌DNA无扩增,而对活菌DNA扩增无影响;Psa质粒标准品建立的线性回归方程为Y=-3.220 4x+37.73,R2=0.9955,最低可检出6.39×10^2拷贝/μL的溃疡菌;建立的PMA-qPCR方法最低可检出2.38×10^2拷贝/μL的溃疡菌;采用人工染菌枝条样品的最低检出限为6.30×10^4 CFU/mL,与菌落计数检测结果相符。
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关键词
PMA
qPCR
猕猴桃溃疡菌
活
菌
检测
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职称材料
题名
PMA-qPCR方法检测陕西猕猴桃溃疡菌优势病原菌活菌的研究
被引量：
7
1
作者
肖妍
刘芸宏
高贵田
曹凡
马燕萍
赵武奇
雷玉山
机构
陕西师范大学食品工程与营养科学学院
陕西省猕猴桃工程技术研究中心
陕西省农村科技开发中心
出处
《食品与机械》
北大核心
2019年第4期48-53,59,共7页
基金
陕西省科技厅特色产业链项目(编号:2018TSCXLNY-01-05)
西安市农业科技创新计划项目[编号:2017050NC/NY009(3)]
文摘
将叠氮溴化丙啶(PMA)与实时荧光定量(qPCR)相结合定量检测陕西猕猴桃溃疡菌优势病原菌(Psa)活菌的数量。通过优化PMA最佳浓度、暗孵育时间、曝光时间,确定PMA-qPCR区别溃疡菌活、死菌的最佳条件。结果表明,Psa经98.3℃沸水浴处理13min可完全致死,Psa死菌浓度为1×10^7 CFU/mL时PMA与死菌共价交联的最佳浓度为105μg/mL,最佳暗育时间为8min,最佳曝光时间为20min,在此条件下死菌DNA无扩增,而对活菌DNA扩增无影响;Psa质粒标准品建立的线性回归方程为Y=-3.220 4x+37.73,R2=0.9955,最低可检出6.39×10^2拷贝/μL的溃疡菌;建立的PMA-qPCR方法最低可检出2.38×10^2拷贝/μL的溃疡菌;采用人工染菌枝条样品的最低检出限为6.30×10^4 CFU/mL,与菌落计数检测结果相符。
关键词
PMA
qPCR
猕猴桃溃疡菌
活
菌
检测
Keywords
PMA
qPCR
kiwifruit cancer
live bacteria detection
分类号
O657 [理学—分析化学]
TS255.7 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
PMA-qPCR方法检测陕西猕猴桃溃疡菌优势病原菌活菌的研究
肖妍
刘芸宏
高贵田
曹凡
马燕萍
赵武奇
雷玉山
《食品与机械》
北大核心
2019
7
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