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犬博卡病毒结构基因VP2多克隆抗体的制备与应用被引量：2: 1; 作者张茜闫琰 +4 位作者马婧李建宁张薇黄菱孙玉宁《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期253-257,共5页; 目的构建犬博卡病毒(CBV)结构蛋白VP2的兔抗VP2多克隆抗体并进行特异性鉴定。方法应用PCR方法扩增获得CBV结构蛋白VP2 C末端区域300个氨基酸所对应的基因片段。经双酶切和测序分析后,连接到原核表达载体p ET-32a(+),构建重组质粒p ET-32... 展开更多; 关键词犬博卡病毒(cbv) 结构基因VP2 多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

犬博卡病毒非结构基因NP1多克隆抗体的制备与鉴定被引量：2: 2; 作者闫琰张茜 +3 位作者马婧李建宁张薇孙玉宁《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期864-869,I0006,共7页; 目的:制备犬博卡病毒(MVC)的非结构基因NP1的兔多克隆抗体,并进行特异性鉴定。方法:以MVC的感染性克隆pI-MVC为模板,构建NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,转化大肠杆菌BL21后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖(IPTG)诱导下,表达谷胱甘... 展开更多; 关键词犬博卡病毒 NP1基因多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

犬博卡病毒PCR检测方法的建立及其应用被引量：1: 3; 作者陈意伟温肖会 +3 位作者朱学良吕殿红翟少伦魏文康《安徽农业科学》 CAS 2016年第10期148-149,285,共3页; [目的]建立犬博卡病毒(Canine bocavirus,CBo V)的PCR检测方法,了解其流行情况。[方法]根据Gen Bank数据库上CBo V的VP2基因序列合成1对引物,建立PCR检测方法,并运用该方法对临床样品进行检测。[结果]特异性试验中,除CBo V有目的条带出... 展开更多; 关键词犬博卡病毒 PCR检测方法应用; 在线阅读下载PDF 职称材料

2014～2015年黑龙江牡丹江地区犬博卡病毒的分子流行病学调查被引量：2: 4; 作者姚爽王志慧 +5 位作者滕井胜李春秋张思瑶边秀东张立春郭东华《黑龙江八一农垦大学学报》 2016年第5期47-50,共4页; 为了调查黑龙江牡丹江地区犬博卡病毒流行情况,在2014年5月至2015年4月,在黑龙江牡丹江地区采集40份腹泻犬的粪便拭子样品,利用PCR扩增方法进行鉴定和混合感染检测,进一步做进化树进行分析。检测结果显示,在40份样品中,8份样品为CBoV阳... 展开更多; 关键词犬博卡病毒混合感染遗传多样性; 在线阅读下载PDF 职称材料

犬博卡病毒结构蛋白VP1多克隆抗体的制备及特异性鉴定被引量：1: 5; 作者穆乐孙锦涵 +3 位作者张健张淋然丁彦琴孙玉宁《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2021年第6期55-61,共7页; 为深入研究犬博卡病毒(MVC)结构蛋白VP1及其抗体在MVC感染及致病分子机制中的作用,本研究以先期构建的MVC感染性克隆载体pI-MVC为模板,构建VP1结构蛋白(独特区)原核表达载体pET32a(+)-VP1N,转化于大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导... 展开更多; 关键词犬博卡病毒 VP1结构蛋白多克隆抗体特异性; 在线阅读下载PDF 职称材料

犬博卡病毒流行病学调查及基因序列分析: 6; 作者程群韩宏晓 +6 位作者郁达义赵秋华孙安帮马福余陈美松王海根孙清《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第3期200-204,共5页; 犬博卡病毒(CBoV)属于细小病毒科的无囊膜病毒,是一种从犬粪便中检测发现的新发病原,该病毒现已在多个国家和地区犬粪便中检测到,但其在上海地区的流行情况及其致病机制目前还不是很清楚。为了调查犬博卡病毒在上海犬中的流行情况,本研... 展开更多; 关键词犬博卡病毒基因特性进化树分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名犬博卡病毒结构基因VP2多克隆抗体的制备与应用被引量：2: 1; 作者张茜闫琰马婧李建宁张薇黄菱孙玉宁; 机构宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期253-257,共5页; 基金国家自然科学基金(81260247) 宁夏高等学校科学技术研究项目(2002260503); 文摘目的构建犬博卡病毒(CBV)结构蛋白VP2的兔抗VP2多克隆抗体并进行特异性鉴定。方法应用PCR方法扩增获得CBV结构蛋白VP2 C末端区域300个氨基酸所对应的基因片段。经双酶切和测序分析后,连接到原核表达载体p ET-32a(+),构建重组质粒p ET-32a(+)-VP2,转化至E.coli BL21中,异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物SDS-PAGE分析鉴定;纯化融合蛋白后免疫新西兰家兔,制备多克隆抗体,检测抗体效价及特异性。结果通过酶切和测序证实成功构建原核表达载体p ET-32a(+)-VP2,转化后可以成功诱导并纯化出大小与预期一致的蛋白;制备的多克隆抗体经ELISA检测效价达到1∶6 400 000,Western blot法及免疫荧光染色鉴定抗体的特异性。结论成功制备了抗CBV结构蛋白VP2的多克隆抗体。; 关键词犬博卡病毒(cbv) 结构基因VP2 多克隆抗体; Keywords canine bocavirus structural protein VP2 polyclonal antibody; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] R392-33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名犬博卡病毒非结构基因NP1多克隆抗体的制备与鉴定被引量：2: 2; 作者闫琰张茜马婧李建宁张薇孙玉宁; 机构宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期864-869,I0006,共7页; 基金国家自然科学基金资助课题(81060130); 文摘目的:制备犬博卡病毒(MVC)的非结构基因NP1的兔多克隆抗体,并进行特异性鉴定。方法:以MVC的感染性克隆pI-MVC为模板,构建NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,转化大肠杆菌BL21后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖(IPTG)诱导下,表达谷胱甘肽S-转移酶(GST)-NP1蛋白。用亲和层析纯化的融合蛋白免疫大白兔,制备NP1抗血清并用ELISA法测定抗血清效价。采用Western blotting和免疫荧光法检测NP1抗血清的特性。结果:成功构建MVC NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,在大肠杆菌中获得高效表达。表达产物经亲和层析纯化后得到高纯度的NP1融合蛋白,以其免疫大白兔获得NP1多抗血清,ELISA法检测效价达到1∶400 000。Western blotting法及免疫荧光检测,所得抗血清具有较高的效价及特异性。结论:本研究利用原核表达的MVC GST-NP1融合蛋白制备的NP1抗血清效价高、特异性高,为进一步深入研究NP1在MVC感染及致病分子机制中的作用奠定了基础。; 关键词犬博卡病毒 NP1基因多克隆抗体; Keywords minute virus of canine NP1 gene polyclonal antibody; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名犬博卡病毒PCR检测方法的建立及其应用被引量：1: 3; 作者陈意伟温肖会朱学良吕殿红翟少伦魏文康; 机构华中农业大学动物医学院广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室; 出处《安徽农业科学》 CAS 2016年第10期148-149,285,共3页; 基金广东省科技计划项目(2012B090600048 2013B050800022 +3 种基金 2013B040300009 2015A040404034 2015B050501007 2015-08020055); 文摘 [目的]建立犬博卡病毒(Canine bocavirus,CBo V)的PCR检测方法,了解其流行情况。[方法]根据Gen Bank数据库上CBo V的VP2基因序列合成1对引物,建立PCR检测方法,并运用该方法对临床样品进行检测。[结果]特异性试验中,除CBo V有目的条带出现外,犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)、犬传染性肝炎(ICHV)、犬副流感病毒(CPIV)、猫瘟热(FDV)等均无条带出现。敏感性试验表明,此检测方法对CBo V的最低检测量为4.806 2 pg/μL。重复性试验表明,多次重复试验结果一致,表明此方法重复性好。425份样品中仅有1份样品扩增出目的条带,经测序比对鉴定为CBo V。初步的流行病学调查结果表明,CBo V在犬中的流行率与感染率极低。[结论]建立的PCR检测方法具有特异性强、敏感性高、可重复性强等特点。; 关键词犬博卡病毒 PCR检测方法应用; Keywords Canine bocavirus PCR detection assay Application; 分类号 S852.655 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名2014～2015年黑龙江牡丹江地区犬博卡病毒的分子流行病学调查被引量：2: 4; 作者姚爽王志慧滕井胜李春秋张思瑶边秀东张立春郭东华; 机构黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江农业经济职业学院; 出处《黑龙江八一农垦大学学报》 2016年第5期47-50,共4页; 基金黑龙江八一农垦大学研究生创新项目(YJSCX2015-Y28); 文摘为了调查黑龙江牡丹江地区犬博卡病毒流行情况,在2014年5月至2015年4月,在黑龙江牡丹江地区采集40份腹泻犬的粪便拭子样品,利用PCR扩增方法进行鉴定和混合感染检测,进一步做进化树进行分析。检测结果显示,在40份样品中,8份样品为CBoV阳性（20%,8/40）;在8份CBoV阳性样品中,与CPV-2、CCoV、CaKV混合感染率分别为37.3%（3/8）、25%（2/8）、25%（2/8）。序列分析表明,8个CBoV毒株的NS1片段在核苷酸水平的同源性为94.2%～100%,在氨基酸水平的同源性为91.7%~100%。进化树分析显示,与韩国、美国、德国和中国香港的CBoV毒株相比,8个中国CBoV毒株表现出遗传多样性。研究揭示了黑龙江牡丹江地区流行的CBoV毒株显示出遗传多样性以及与其他肠道病毒的混合感染情况。; 关键词犬博卡病毒混合感染遗传多样性; Keywords canine bocaviruses co-infection genetic diversity; 分类号 S852.655 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名犬博卡病毒结构蛋白VP1多克隆抗体的制备及特异性鉴定被引量：1: 5; 作者穆乐孙锦涵张健张淋然丁彦琴孙玉宁; 机构宁夏医科大学基础医学院海南医学院临床医学院; 出处《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2021年第6期55-61,共7页; 基金国家自然科学基金(31760041) 国家级大学生创新实验项目(201610752009)。; 文摘为深入研究犬博卡病毒(MVC)结构蛋白VP1及其抗体在MVC感染及致病分子机制中的作用,本研究以先期构建的MVC感染性克隆载体pI-MVC为模板,构建VP1结构蛋白(独特区)原核表达载体pET32a(+)-VP1N,转化于大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达后进行蛋白可溶性分析;用镍柱亲和层析法纯化诱导表达产物,以纯化的VP1N融合蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔,获得特异性抗VP1N多克隆抗体;通过ELISA的方法测定VP1N多克隆抗体效价,并采用Western blot和免疫荧光鉴定VP1N抗体的特异性。结果表明:重组蛋白VP1N可高效可溶性表达,分子量约为34 kDa;VP1N融合蛋白免疫兔后,ELISA法测定VP1N多抗效价达1∶1600 000;Western blot结果显示,VP1N多克隆抗体能够与MVC感染靶细胞后的天然VP1蛋白反应;细胞免疫荧光结果显示,该抗体也可与MVC感染WRD细胞中的天然VP1蛋白反应,且发现VP1大量分布于WRD细胞的胞核中。本研究所制备的VP1N抗体具有很好的反应性和特异性,为进一步深入研究VP1蛋白在博卡病毒致病性及感染机制中的研究提供实验基础。; 关键词犬博卡病毒 VP1结构蛋白多克隆抗体特异性; Keywords Minute virus of canine VP1 protein polyclonal antibody specificity; 分类号 S852.659.2 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名犬博卡病毒流行病学调查及基因序列分析: 6; 作者程群韩宏晓郁达义赵秋华孙安帮马福余陈美松王海根孙清; 机构上海市闵行区动物疫病预防控制中心; 出处《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第3期200-204,共5页; 基金闵行区自然科学研究课题(2019MHZ031)。; 文摘犬博卡病毒(CBoV)属于细小病毒科的无囊膜病毒,是一种从犬粪便中检测发现的新发病原,该病毒现已在多个国家和地区犬粪便中检测到,但其在上海地区的流行情况及其致病机制目前还不是很清楚。为了调查犬博卡病毒在上海犬中的流行情况,本研究于2019年6月至2019年12月,从上海市采集犬新鲜粪便206份,通过PCR扩增方法进行鉴定并进一步通过进化树对其基因组进行分析。结果显示在所搜集的206份样品中有3份为CBoV阳性(1.5%),为了对检测出的CBoV基因组特性进行分析,我们扩增出CBoV的全基因组,发现其基因组共含有5246个核苷酸,其中包含大小为249 bp的5'UTR、4853 bp的开放阅读框和144 bp的3'UTR。从系统进化树中可以看出该病毒与其他亚洲分离株亲缘关系较近,处于同一个分支,同属于CBoV2。本研究通过对CBoV的流行情况进行调查,揭示了CBoV在上海犬中的感染情况,为进一步研究CBoV的致病性及潜在的CBoV传染病的预警和防控提供科学依据和理论参考。; 关键词犬博卡病毒基因特性进化树分析; Keywords Canine bocavirus genetic characterization Phylogenetic analysis; 分类号 S858.292 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	犬博卡病毒结构基因VP2多克隆抗体的制备与应用	张茜闫琰马婧李建宁张薇黄菱孙玉宁	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	犬博卡病毒非结构基因NP1多克隆抗体的制备与鉴定	闫琰张茜马婧李建宁张薇孙玉宁	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2015	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	犬博卡病毒PCR检测方法的建立及其应用	陈意伟温肖会朱学良吕殿红翟少伦魏文康	《安徽农业科学》 CAS	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	2014～2015年黑龙江牡丹江地区犬博卡病毒的分子流行病学调查	姚爽王志慧滕井胜李春秋张思瑶边秀东张立春郭东华	《黑龙江八一农垦大学学报》	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	犬博卡病毒结构蛋白VP1多克隆抗体的制备及特异性鉴定	穆乐孙锦涵张健张淋然丁彦琴孙玉宁	《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	犬博卡病毒流行病学调查及基因序列分析	程群韩宏晓郁达义赵秋华孙安帮马福余陈美松王海根孙清	《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料