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特异腐质霉角质酶在大肠杆菌中的表达和发酵优化
被引量：
1
1
作者
孙益荣
吴敬
宿玲恰
《食品与机械》
CSCD
北大核心
2018年第4期1-5,共5页
应用大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)BL21(DE3)表达系统实现特异腐质霉(Humicola insolens,H.insolens)来源角质酶的重组表达。对重组角质酶进行酶学性质研究,发现其最适pH为8.5、最适温度为80℃,并有良好的pH稳定性和温度稳定性。...
应用大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)BL21(DE3)表达系统实现特异腐质霉(Humicola insolens,H.insolens)来源角质酶的重组表达。对重组角质酶进行酶学性质研究,发现其最适pH为8.5、最适温度为80℃,并有良好的pH稳定性和温度稳定性。经3L发酵罐中扩大培养并进行发酵条件优化,其最佳发酵条件:发酵前期控制菌体生长pH 7.0、温度37℃,培养时间12~14h;菌体浓度OD600达到50时进入诱导期,调节温度降至30℃,恒速流加0.2g/(L·h)的乳糖溶液进行诱导,总发酵周期为36h,最高酶活2 233U/mL,是摇瓶水平酶活的13倍。
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关键词
特异腐质霉
角
质
酶
重组大肠杆菌
发酵优化
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职称材料
中性纤维素酶外切葡聚糖酶CBHⅡ的异源表达
被引量：
2
2
作者
林国滟
蔡少丽
+6 位作者
黄平
郑海英
柯崇榕
杨章萍
蔡水淋
林艺平
黄建忠
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2011年第6期88-91,共4页
利用聚合酶链式反应(PCR)技术,从本实验室保存的1株特异腐质霉EIM-50上克隆到中性纤维素酶外切葡聚糖酶基因(CBHⅡ)全长序列,大小约为1 586 bp。将其克隆到pPIC9K上,成功构建重组质粒pPIC9K-CBHⅡ,并经电转化引入毕赤酵母(Pichia pastor...
利用聚合酶链式反应(PCR)技术,从本实验室保存的1株特异腐质霉EIM-50上克隆到中性纤维素酶外切葡聚糖酶基因(CBHⅡ)全长序列,大小约为1 586 bp。将其克隆到pPIC9K上,成功构建重组质粒pPIC9K-CBHⅡ,并经电转化引入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,进行异源表达。SDS-PAGE银染结果表明,该重组质粒在毕赤酵母中获得了异源表达。gel pro Analyser软件分析其表达蛋白的表观分子量约为62.548ku。用BandScan软件分析其蛋白表达量为2.3%,即0.738μg/mL(mg/L)。
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关键词
特异腐质霉
中性外切葡聚糖酶
毕赤酵母
异源表达
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职称材料
题名
特异腐质霉角质酶在大肠杆菌中的表达和发酵优化
被引量：
1
1
作者
孙益荣
吴敬
宿玲恰
机构
江南大学食品科学与技术国家重点实验室
江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室
江南大学教育部食品安全国际合作联合实验室
出处
《食品与机械》
CSCD
北大核心
2018年第4期1-5,共5页
基金
国家杰出青年基金(编号:31425020)
文摘
应用大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)BL21(DE3)表达系统实现特异腐质霉(Humicola insolens,H.insolens)来源角质酶的重组表达。对重组角质酶进行酶学性质研究,发现其最适pH为8.5、最适温度为80℃,并有良好的pH稳定性和温度稳定性。经3L发酵罐中扩大培养并进行发酵条件优化,其最佳发酵条件:发酵前期控制菌体生长pH 7.0、温度37℃,培养时间12~14h;菌体浓度OD600达到50时进入诱导期,调节温度降至30℃,恒速流加0.2g/(L·h)的乳糖溶液进行诱导,总发酵周期为36h,最高酶活2 233U/mL,是摇瓶水平酶活的13倍。
关键词
特异腐质霉
角
质
酶
重组大肠杆菌
发酵优化
Keywords
Humicola insolens
Cutinase
Recombinant E.coli
Fermentation Optimization
分类号
TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
中性纤维素酶外切葡聚糖酶CBHⅡ的异源表达
被引量：
2
2
作者
林国滟
蔡少丽
黄平
郑海英
柯崇榕
杨章萍
蔡水淋
林艺平
黄建忠
机构
福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心生命科学学院福建省现代发酵技术工程研究中心
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2011年第6期88-91,共4页
基金
福建省发改委产业化关键技术项目(闽发改投资[2009]958号)
文摘
利用聚合酶链式反应(PCR)技术,从本实验室保存的1株特异腐质霉EIM-50上克隆到中性纤维素酶外切葡聚糖酶基因(CBHⅡ)全长序列,大小约为1 586 bp。将其克隆到pPIC9K上,成功构建重组质粒pPIC9K-CBHⅡ,并经电转化引入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,进行异源表达。SDS-PAGE银染结果表明,该重组质粒在毕赤酵母中获得了异源表达。gel pro Analyser软件分析其表达蛋白的表观分子量约为62.548ku。用BandScan软件分析其蛋白表达量为2.3%,即0.738μg/mL(mg/L)。
关键词
特异腐质霉
中性外切葡聚糖酶
毕赤酵母
异源表达
Keywords
Humicola insolens
neutral cellobiohydrolase
Pichia pastoris
exogenous expression
分类号
Q939.97 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
特异腐质霉角质酶在大肠杆菌中的表达和发酵优化
孙益荣
吴敬
宿玲恰
《食品与机械》
CSCD
北大核心
2018
1
在线阅读
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职称材料
2
中性纤维素酶外切葡聚糖酶CBHⅡ的异源表达
林国滟
蔡少丽
黄平
郑海英
柯崇榕
杨章萍
蔡水淋
林艺平
黄建忠
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2011
2
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职称材料
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