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二核苷酸微卫星PCR扩增的影子带及其来源
被引量：
9
1
作者
王吉振
王爱国
+4 位作者
储明星
李宁
傅金恋
易建红
高福才
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期241-246,共6页
2个绵羊二核苷酸微卫星BM143和BMS2508的PCR扩增产物在非变性(中性)聚丙烯酰胺凝胶电泳(nPAGE)中形成滞后于主带的影子带。影子带比主带小2 bp。实际上主带由两部分组成:表明微卫星正确大小的PCR特异扩增的高浓度条带(特异扩增带)和比...
2个绵羊二核苷酸微卫星BM143和BMS2508的PCR扩增产物在非变性(中性)聚丙烯酰胺凝胶电泳(nPAGE)中形成滞后于主带的影子带。影子带比主带小2 bp。实际上主带由两部分组成:表明微卫星正确大小的PCR特异扩增的高浓度条带(特异扩增带)和比特异扩增带小2 bp的PCR非特异扩增的低浓度条带(非特异扩增带)。本试验初步证明影子带是微卫星的一条特异扩增带和一条非特异扩增带错配形成的异源双链。本研究结果表明,影子带的出现并不改变特异扩增带在nPAGE中的正常迁移率。
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关键词
二核苷酸微卫星
聚合酶链式反应
影子
带
非
特异扩增带
特异扩增带
异源双链
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职称材料
应用PCR扩增牛SRY序列进行奶牛胚胎性别的鉴定及移植
被引量：
2
2
作者
曾溢滔
张美兰
+9 位作者
陈美珏
周霞娣
黄英
任兆瑞
黄淑帧
胡明信
吴学清
高建明
张斌
徐慧如
《草食家畜》
1992年第S1期102-106,共5页
本研究是用直接测序技术测定了奶牛SRY的DNA序列,在此基础上设计和合成了牛类SRY特异引物并通过聚合酶链反应(PCR)直接扩增牛胚胎的SRY特异DNA序列,对胚胎进行性别鉴定并移植成功。 研究方法是:由牛静脉血中的白细胞提取DNA,经扩增后直...
本研究是用直接测序技术测定了奶牛SRY的DNA序列,在此基础上设计和合成了牛类SRY特异引物并通过聚合酶链反应(PCR)直接扩增牛胚胎的SRY特异DNA序列,对胚胎进行性别鉴定并移植成功。 研究方法是:由牛静脉血中的白细胞提取DNA,经扩增后直接测定DNA的序列,在此基础上,设计并合成了两对特异于牛SRY序列的PCR扩增引物A、B和C、D。对32头奶牛的白细胞DNA及17枚胚胎(全胚、二分胚、三分胚)的SRY序列进行PCR扩增。实验结果表明,32头奶牛的白细胞DNA 样品,其中有12头公牛样品均显示清晰的特异扩增带,20头母牛样品和空白对照样品均无特异扩增带。17枚奶牛胚胎用引物A、B“一次扩增”结果,有10枚胚胎出现清晰的特异扩增带,另7枚胚胎无特异扩增带,其中2枚三分胚共6个样品,其结果完全一致。用引物C、D进行“二次扩增”的10枚显示特异扩增带的胚胎均显示出另一条清晰的特异扩增带,而另外7枚未显带的样品亦均无特异的扩增带。为验证扩增的SRY序列,特设计了特异于牛SRY的ASO探针(寡核苷酸探针)进行点杂交。结果表明,凡有特异扩增带的均出现阳性杂交结果;相反,无特异扩增带的PCR产物均为阴性杂交结果,证明 扩增的为SRY特异DNA片段。经过性别鉴定的牛二分胚,已有4枚胚胎移植成功。其结果均与胚胎性别鉴定结果相符合。
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关键词
特异扩增带
PCR
扩
增
SRY
性别鉴定
胚胎数
DNA
寡核苷酸探针
聚合酶链反应
直接测序
特异
性
扩
增
带
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职称材料
题名
二核苷酸微卫星PCR扩增的影子带及其来源
被引量：
9
1
作者
王吉振
王爱国
储明星
李宁
傅金恋
易建红
高福才
机构
中国农业大学动物科技学院
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
中国农业大学农业生物技术国家重点实验室
河北省任丘市畜牧水产局
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期241-246,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(30300248
30140004和39770541)
文摘
2个绵羊二核苷酸微卫星BM143和BMS2508的PCR扩增产物在非变性(中性)聚丙烯酰胺凝胶电泳(nPAGE)中形成滞后于主带的影子带。影子带比主带小2 bp。实际上主带由两部分组成:表明微卫星正确大小的PCR特异扩增的高浓度条带(特异扩增带)和比特异扩增带小2 bp的PCR非特异扩增的低浓度条带(非特异扩增带)。本试验初步证明影子带是微卫星的一条特异扩增带和一条非特异扩增带错配形成的异源双链。本研究结果表明,影子带的出现并不改变特异扩增带在nPAGE中的正常迁移率。
关键词
二核苷酸微卫星
聚合酶链式反应
影子
带
非
特异扩增带
特异扩增带
异源双链
Keywords
dinucleotide microsatellite
polymerase chain reaction
shadow band
nonspecific band
specific band
heteroduplex
分类号
Q75 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
应用PCR扩增牛SRY序列进行奶牛胚胎性别的鉴定及移植
被引量：
2
2
作者
曾溢滔
张美兰
陈美珏
周霞娣
黄英
任兆瑞
黄淑帧
胡明信
吴学清
高建明
张斌
徐慧如
机构
上海市儿童医院
北京农学院畜牧兽医系
北京市奶牛研究所
出处
《草食家畜》
1992年第S1期102-106,共5页
基金
国家自然科学基金资助
文摘
本研究是用直接测序技术测定了奶牛SRY的DNA序列,在此基础上设计和合成了牛类SRY特异引物并通过聚合酶链反应(PCR)直接扩增牛胚胎的SRY特异DNA序列,对胚胎进行性别鉴定并移植成功。 研究方法是:由牛静脉血中的白细胞提取DNA,经扩增后直接测定DNA的序列,在此基础上,设计并合成了两对特异于牛SRY序列的PCR扩增引物A、B和C、D。对32头奶牛的白细胞DNA及17枚胚胎(全胚、二分胚、三分胚)的SRY序列进行PCR扩增。实验结果表明,32头奶牛的白细胞DNA 样品,其中有12头公牛样品均显示清晰的特异扩增带,20头母牛样品和空白对照样品均无特异扩增带。17枚奶牛胚胎用引物A、B“一次扩增”结果,有10枚胚胎出现清晰的特异扩增带,另7枚胚胎无特异扩增带,其中2枚三分胚共6个样品,其结果完全一致。用引物C、D进行“二次扩增”的10枚显示特异扩增带的胚胎均显示出另一条清晰的特异扩增带,而另外7枚未显带的样品亦均无特异的扩增带。为验证扩增的SRY序列,特设计了特异于牛SRY的ASO探针(寡核苷酸探针)进行点杂交。结果表明,凡有特异扩增带的均出现阳性杂交结果;相反,无特异扩增带的PCR产物均为阴性杂交结果,证明 扩增的为SRY特异DNA片段。经过性别鉴定的牛二分胚,已有4枚胚胎移植成功。其结果均与胚胎性别鉴定结果相符合。
关键词
特异扩增带
PCR
扩
增
SRY
性别鉴定
胚胎数
DNA
寡核苷酸探针
聚合酶链反应
直接测序
特异
性
扩
增
带
分类号
S8 [农业科学—畜牧兽医]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
二核苷酸微卫星PCR扩增的影子带及其来源
王吉振
王爱国
储明星
李宁
傅金恋
易建红
高福才
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
9
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
应用PCR扩增牛SRY序列进行奶牛胚胎性别的鉴定及移植
曾溢滔
张美兰
陈美珏
周霞娣
黄英
任兆瑞
黄淑帧
胡明信
吴学清
高建明
张斌
徐慧如
《草食家畜》
1992
2
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