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基于甲基化核酸内切酶的甲基转移酶活性的电化学检测研究
被引量：
1
1
作者
白雪娇
鲁理平
康天放
《化学研究与应用》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期1079-1085,共7页
由DNA甲基转移酶(DNMT1)催化的DNA甲基化在许多生物过程中起重要作用,包括基因转录,基因组印记和细胞分化[1]。本文利用特异性酶切法成功开发了一种有效的测定DNMT1的电化学方法。首先,将硫醇修饰的双链DNA(dsDNA)自组装固定在金电极上...
由DNA甲基转移酶(DNMT1)催化的DNA甲基化在许多生物过程中起重要作用,包括基因转录,基因组印记和细胞分化[1]。本文利用特异性酶切法成功开发了一种有效的测定DNMT1的电化学方法。首先,将硫醇修饰的双链DNA(dsDNA)自组装固定在金电极上,随后DNMT1识别dsDNA半甲基化序列并实现完全甲基化,最后通过甲基化特异性限制酶(BSSHⅡ)剪切,未发生完全甲基化的碱基序列将被剪切并移除电极表面。利用差分脉冲伏安法(DPV)分别测定剪切前后的亚甲基蓝(MB)还原电流。在最佳优化条件下,该方法线性范围为0.5 nM^50 nM,检测限为0.5 nM。这种方法可以简单有效地检测DNA甲基化和DNMT1活性,在DNA甲基化快速检测和基因毒理分析方面具有一定的实际意义。
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关键词
DNA甲基化
甲基转移
酶
活性
特异性酶切法
亚甲基蓝
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职称材料
题名
基于甲基化核酸内切酶的甲基转移酶活性的电化学检测研究
被引量：
1
1
作者
白雪娇
鲁理平
康天放
机构
北京工业大学环境与能源工程学院
出处
《化学研究与应用》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期1079-1085,共7页
基金
国家自然科学基金项目(21876005)资助
文摘
由DNA甲基转移酶(DNMT1)催化的DNA甲基化在许多生物过程中起重要作用,包括基因转录,基因组印记和细胞分化[1]。本文利用特异性酶切法成功开发了一种有效的测定DNMT1的电化学方法。首先,将硫醇修饰的双链DNA(dsDNA)自组装固定在金电极上,随后DNMT1识别dsDNA半甲基化序列并实现完全甲基化,最后通过甲基化特异性限制酶(BSSHⅡ)剪切,未发生完全甲基化的碱基序列将被剪切并移除电极表面。利用差分脉冲伏安法(DPV)分别测定剪切前后的亚甲基蓝(MB)还原电流。在最佳优化条件下,该方法线性范围为0.5 nM^50 nM,检测限为0.5 nM。这种方法可以简单有效地检测DNA甲基化和DNMT1活性,在DNA甲基化快速检测和基因毒理分析方面具有一定的实际意义。
关键词
DNA甲基化
甲基转移
酶
活性
特异性酶切法
亚甲基蓝
Keywords
DNA methylation
methyltransferase activity
restriction endonuclease method
methylene blue
分类号
O657.1 [理学—分析化学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于甲基化核酸内切酶的甲基转移酶活性的电化学检测研究
白雪娇
鲁理平
康天放
《化学研究与应用》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
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