天津稻基因组分析与特异性探针制作 Ⅰ.水稻育种特异性探针制作 被引量：6

1

作者 王松文 施利利 蔡宝立 《天津农业科学》 CAS 1997年第2期1-4,共4页

用ＰｓｔＩ酶切水稻总ＤＮＡ，制作了单拷贝随机探针。用这些探针以及水稻基因组计划提供的不同来源的分子探针进行ＲＦＬＰ分析，获得籼粳特异性以及与某些重要农艺性状密切相关的育种特异性探针。分子标记转变以及相关分析表明。

关键词 水稻 探针 特异性探针 分子标记育种

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ADV特异性糖蛋白GP50基因片段的核酸探针

2

作者 邹莹 《畜牧兽医科技信息》 2001年第9期11-11,共1页

新疆军区后勤部卫生防疫大队生物医学研究室进行了用光敏生物素标记核酸探针检测伪狂犬病的研究,他们利用分子生物学方法,将伪狂犬病毒(ADV)的特异性糖蛋白GP50基因片段制备成光敏生物素探针,经过杂交试验,灵敏度高达46.8Pg水平。该探针... 新疆军区后勤部卫生防疫大队生物医学研究室进行了用光敏生物素标记核酸探针检测伪狂犬病的研究,他们利用分子生物学方法,将伪狂犬病毒(ADV)的特异性糖蛋白GP50基因片段制备成光敏生物素探针,经过杂交试验,灵敏度高达46.8Pg水平。该探针与HSV-Ⅰ、HSV-Ⅱ及CMV杂交阴性,证明特异性强。通过检测感染乳猪及屠宰场随机样品,证明此探针能有效地用于临床检测AD,换言之。用ADV 展开更多

关键词 糖蛋白G 基因片段 特异性 核酸探针 光敏生物素探针 光敏生物素标记 伪狂犬病毒 分子生物学方法 卫生防疫 杂交试验

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地高辛标记探针检测猪胸膜肺炎放线杆菌的研究与应用 被引量：9

3

作者 刁有祥 丁家波 +3 位作者 姜世金 孙淑红 崔治中 陈本龙 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期585-589,共5页

利用PCR反应扩增出胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ基因650 bp的DNA,回收并纯化PCR产物,用地高辛标记,制备出地高辛标记的核酸探针。该探针与不同血清型的胸膜肺炎放线杆菌均能发生特异性杂交,而与大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌... 利用PCR反应扩增出胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ基因650 bp的DNA,回收并纯化PCR产物,用地高辛标记,制备出地高辛标记的核酸探针。该探针与不同血清型的胸膜肺炎放线杆菌均能发生特异性杂交,而与大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、猪肺炎支原体、支气管败血波氏杆菌等细菌的核酸杂交均为阴性。对胸膜肺炎放线杆菌的最低检出限量为10×102 个放线杆菌。对疑似胸膜肺炎放线杆菌感染病变组织检测结果表明,在扁桃体、鼻腔、气管、肺脏均可检测出胸膜肺炎放线杆菌,以扁桃体的检出率最高。为猪胸膜肺炎放线杆菌的诊断和流行病学调查提供了良好的方法。 展开更多

关键词 猪胸膜肺炎放线杆菌 地高辛标记探针 支气管败血波氏杆菌 多杀性巴氏杆菌 应用 猪肺炎支原体 流行病学调查 PCR反应 PCR产物 核酸探针 大肠杆菌 沙门氏菌 葡萄球菌 核酸杂交 检测结果 病变组织 扁桃体 DNA APX 特异性 血清型

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荧光标记寡核苷酸探针检测变形链球菌 被引量：2

4

作者 陈罕 凌均棨 刘建伟 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B06期16-17,共2页

[目的]建立应用荧光标记寡核苷酸探针BC73快速检测变形链球菌的方法。[方法]应用流式细胞仪检测荧光标 记寡核苷酸探针EUB338和BC73与模式菌株和牙菌斑样品荧光原位杂交后的荧光强度和荧光计数。[结果]荧光标记寡核苷 酸探针BC73与变形... [目的]建立应用荧光标记寡核苷酸探针BC73快速检测变形链球菌的方法。[方法]应用流式细胞仪检测荧光标 记寡核苷酸探针EUB338和BC73与模式菌株和牙菌斑样品荧光原位杂交后的荧光强度和荧光计数。[结果]荧光标记寡核苷 酸探针BC73与变形链球菌S. mutans 10449杂交的荧光强度7倍于S.mitis 15914和E. coli K12。变形链球菌占牙菌斑中细 菌总数的1.7％。[结论]荧光标记寡核苷酸探针BC73能特异性检测牙菌斑中的变形链球菌数。 展开更多

关键词 变形链球菌 寡核苷酸探针 牙菌斑 荧光标记 特异性检测 流式细胞仪检测 荧光原位杂交 荧光强度 E.COLI 菌株

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PCR制备地高辛配基标记的探针检测登革病毒核酸 被引量：1

5

作者 庄坚 郭辉玉 陈火胜 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 1993年第1期21-25,共5页

用聚合酶链反应(PCR)技术,以重组质粒PDEⅡ305 DNA为模板,在底物中补充标记的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸(DIG-dUTP),经扩增反应制备了地高辛配基标记的登革病毒2型(DEN_2)cDNA探针。DNA-RNA斑点杂交表明该探针有DEN_2型特异性,可检出0.1Pg DE... 用聚合酶链反应(PCR)技术,以重组质粒PDEⅡ305 DNA为模板,在底物中补充标记的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸(DIG-dUTP),经扩增反应制备了地高辛配基标记的登革病毒2型(DEN_2)cDNA探针。DNA-RNA斑点杂交表明该探针有DEN_2型特异性,可检出0.1Pg DEN_2-RNA。PCR扩增标记只用10 ng模板DNA,数小时内可制备约Iug标记的cDNA探针,而用六聚核苷酸随机引物(RHP)标记,从质粒DNA酶切、片段回收到标记获得探针,至少需数10 h。可见PCR技术直接制备地高辛配基标记的cDNA探针较方便,快速、标记率高、特异性强,具有一定的应用前景。 展开更多

关键词 地高辛 DEN 标记 配基 登革病毒 CDNA探针 特异性 核酸 RNA斑点杂交 质粒DNA

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用量子点标记的抗体作为免疫荧光探针检测药物中的大肠杆菌 被引量：2

6

作者 Wu S M 谢冰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第1期116-116,共1页

本研究利用量子点卓越的光学性能,建立了一种可快速、特异地检测药物中大肠杆菌的方法。兔抗山羊抗体通过交联反应与水溶性的ZnS/CdSe量子点共价结合,将形成的结合物命名为IgG-QDs,并采用琼脂糖凝胶电泳对其进行验证。利用山羊抗大肠杆... 本研究利用量子点卓越的光学性能,建立了一种可快速、特异地检测药物中大肠杆菌的方法。兔抗山羊抗体通过交联反应与水溶性的ZnS/CdSe量子点共价结合,将形成的结合物命名为IgG-QDs,并采用琼脂糖凝胶电泳对其进行验证。利用山羊抗大肠杆菌抗体和兔抗山羊抗体的特异性结合力,成功地对大肠杆菌进行了量子点标记,进一步建立了特异性检测大肠杆菌的方法。结果表明,抗体的生物学活性和生物识别能力未受标记反应的影响,IgG-QDs可特异性识别大肠杆菌。大肠杆菌细胞在盐酸氯米帕明中的回收率分别为82.90%和73.64%,整个检测过程所用时间不到4h。该方法已被证明是快速和特异性的,也可用来检测压力和损伤的细胞等。 展开更多

关键词 CDSE量子点 特异性检测 大肠杆菌 抗体 荧光探针 药物 标记 琼脂糖凝胶电泳

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光生物素标记探针检测乙型肝炎病毒DNA

7

作者 陆珍凤 周晓军 周金宝 《医学研究生学报》 CAS 1991年第3期243-244,共2页

近年来,生物素的应用越来越广泛,它不但用于病理技术,而且在临床检验和生物学领域内的用途也日益广泛。目前,进行的斑点杂交法,大多用同位素标记探针,由于同位素对人体有损伤,故生物素的利用日趋兴旺,而光生物素标记探针,既简便、省时,... 近年来,生物素的应用越来越广泛,它不但用于病理技术,而且在临床检验和生物学领域内的用途也日益广泛。目前,进行的斑点杂交法,大多用同位素标记探针,由于同位素对人体有损伤,故生物素的利用日趋兴旺,而光生物素标记探针,既简便、省时,又快速、安全,是检验系统检测液状物质内核酸的最佳选择。有关这方面的文献,国内报道甚少。本文应用光生物素标记探针检测血清中的乙型肝炎病毒(HBV)DNA,获得了满意的结果。现介绍如下:(一)材料1.HBV DNA:带有 HBV:DNA 展开更多

关键词 生物素标记探针 乙型肝炎病毒 DNA 斑点杂交 病理技术 同位素标记 阴性对照 预杂交 特异性 甲酞胺

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动物蓝舌病病毒非放射性基因探针研究——全核酸生物素化学标记光生物素标记初报

8

作者 彭克高 李志华 李根 《云南畜牧兽医》 1989年第4期37-38,共2页

基因探针是一种重要的分子生物学技术,目前已应用于病毒基因的检测,由于具有高度特异性及敏感性,用于检测感染材料中的微量病毒更为合适,但因传统的基因探针是用放射性同位素标记,需要复杂的仪器设备及技术,加之对人体危害,受半衰期限制... 基因探针是一种重要的分子生物学技术,目前已应用于病毒基因的检测,由于具有高度特异性及敏感性,用于检测感染材料中的微量病毒更为合适,但因传统的基因探针是用放射性同位素标记,需要复杂的仪器设备及技术,加之对人体危害,受半衰期限制,难于推广。生物素标记探针的问世。 展开更多

关键词 基因探针 化学标记 病毒基因 生物素标记 蓝舌病病毒 高度特异性 杂交反应 人体危害 碱性磷酸酶 型特异性

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山羊卵母细胞体外成熟过程中线粒体的动态分布 被引量：3

9

作者 汤连升 张磊 +2 位作者 高立坤 葛仕豪 王树迎 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2007年第4期304-307,F0003,共5页

目的研究山羊卵母细胞减数分裂过程中线粒体的动态分布。方法收集山羊卵母细胞,在M199中分别培养4、8、12、16、20和24 h,用特异性线粒体标记探针进行标记,用激光扫描共聚焦显微镜观察线粒体的分布情况。结果生发泡期线粒体多分散在卵... 目的研究山羊卵母细胞减数分裂过程中线粒体的动态分布。方法收集山羊卵母细胞,在M199中分别培养4、8、12、16、20和24 h,用特异性线粒体标记探针进行标记,用激光扫描共聚焦显微镜观察线粒体的分布情况。结果生发泡期线粒体多分散在卵母细胞的胞质内,并且距生发泡有一定的距离;生发泡破裂期线粒体逐渐移向染色质;第一次减数分裂中期与第二次减数分裂中期线粒体成簇密布在染色体周围。排出的第一极体中也含有大量的线粒体。结论同其他哺乳动物卵母细胞体外成熟过程中线粒体分布情况相比,线粒体在山羊卵母细胞中的分布具有明显的相似性。线粒体密布在成熟卵母细胞染色体周围可能与极体的排出和受精后染色体的迁移有关。 展开更多

关键词 山羊 卵母细胞 体外成熟 线粒体 特异性线粒体标记探针

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分子生物学鉴定植物寄生线虫研究综述 被引量：3

10

作者 许萍萍 沈培垠 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第5期126-128,共3页

简述运用限制性染色体片段长度多型性(RFLPS)、特异性DNA探针、线粒体DNA、合成低聚核苷酸等分子生物学方法来区分、鉴定植物病原线虫的方法。

关键词 限制性染色体 特异性DNA探针 线粒体DNA 低聚核苷酸 线虫鉴定

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Rubisco及其活化酶定位于豌豆和蚕豆叶绿体中 被引量：3

11

作者 王卫兵 洪健 +1 位作者 胡东维 蒋德安 《电子显微学报》 CAS CSCD 2005年第2期146-150,共5页

运用免疫金标记电镜技术研究了豆科C3植物豌豆(PisumsativumL.)和蚕豆(ViciafabaL.)叶片中Rubisco及其活化酶(RCA)的细胞定位,结果表明:两种植物叶片解剖结构及叶绿体超微结构相似,叶肉细胞叶绿体具有发达的基粒片层,Rubisco和RCA免疫... 运用免疫金标记电镜技术研究了豆科C3植物豌豆(PisumsativumL.)和蚕豆(ViciafabaL.)叶片中Rubisco及其活化酶(RCA)的细胞定位,结果表明:两种植物叶片解剖结构及叶绿体超微结构相似,叶肉细胞叶绿体具有发达的基粒片层,Rubisco和RCA免疫金标记颗粒主要分布于叶绿体的间质中,在基粒片层上很少,在表皮的气孔保卫细胞叶绿体内也有免疫金颗粒标记,在细胞质、液泡、线粒体等细胞器中无特异性标记。两种植物光合作用关键酶在叶绿体中定位的相似性,体现了C3植物在光合器结构与功能上具有共性。 展开更多

关键词 RUBISCO 蚕豆 豌豆 酶定位 叶绿体超微结构 免疫金标记 气孔保卫细胞 植物光合作用 C3植物 结构与功能 电镜技术 细胞定位 解剖结构 植物叶片 叶肉细胞 活化酶 RCA 细胞质 特异性 细胞器 线粒体 相似性 关键酶 光合器 片层

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几种动物肉源性成分膜芯片检测方法的建立 被引量：1

12

作者 徐轶飞 王泽祥 +5 位作者 赵禹 马永华 李羽翡 李涛善 曲志强 孙晓林 《动物医学进展》 北大核心 2023年第3期73-76,共4页

用斑点杂交技术构建对牛、羊、鸭肉源性成分快速检测的膜芯片方法。在3种动物的线粒体细胞色素b基因上设计特异性引物,对3种动物基因组进行PCR扩增,扩增产物用地高辛进行标记,作为标记探针。将3种动物PCR扩增产物固定到尼龙膜上,再选取... 用斑点杂交技术构建对牛、羊、鸭肉源性成分快速检测的膜芯片方法。在3种动物的线粒体细胞色素b基因上设计特异性引物,对3种动物基因组进行PCR扩增,扩增产物用地高辛进行标记,作为标记探针。将3种动物PCR扩增产物固定到尼龙膜上,再选取3种常见动物作为参照,将其扩增产物一并固定到尼龙膜上。将制作好的膜芯片与标记探针进行斑点杂交试验,来检验标记探针的标记效率和特异性。试验结果表明,标记探针在1 pg/μL浓度下显点清晰可见;3种标记探针分别与6种动物源性扩增产物杂交,结果标记探针只与其对应扩增源性产物发生显点。证明研究设计的膜芯片标记探针具有灵敏度高、特异性强的特点,符合膜芯片检测要求,从而成功构建了一种快速检测牛、羊、鸭3种动物肉源性的膜芯片方法,同时也为动物源性成分检测提供新的依据。 展开更多

关键词 细胞色素B基因 斑点杂交 标记探针 灵敏性 特异性 膜芯片

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西安汉族HLA-DQB基因遗传多态性研究

13

作者 李琳 邓建强 +1 位作者 赖江华 赖淑苹 《法医学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期127-127,共1页

关键词 DQB 多态性研究 基因遗传 汉族 西安 人类白细胞抗原(HLA) 序列特异性寡核苷酸 等位基因多态性 探针杂交技术 聚合酶链反应 群体遗传学 遗传系统 个体识别 遗传标记 亲权鉴定 调查资料 基因座 法医学 人类学

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基于磁性纳米颗粒和金纳米粒子构建DNA电化学生物传感技术 被引量：3

14

作者 王小兰 郑静 +3 位作者 陈琛 汤亚泥 张帆 何品刚 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期477-480,共4页

本文构建了一种基于纳米粒子、茎环DNA和丝网印刷电极(SPCE)的电化学生物传感技术用于乳腺癌基因的快速、灵敏检测。该传感技术中,探针DNA的两端分别标记了巯基和生物素,巯基用于与金纳米粒子(AuNPs)作用,生物素用于与磁性纳米颗粒(MNPs... 本文构建了一种基于纳米粒子、茎环DNA和丝网印刷电极(SPCE)的电化学生物传感技术用于乳腺癌基因的快速、灵敏检测。该传感技术中,探针DNA的两端分别标记了巯基和生物素,巯基用于与金纳米粒子(AuNPs)作用,生物素用于与磁性纳米颗粒(MNPs)表面修饰的链酶亲和素作用以达到富集的目的,之后利用SPCE进行电化学检测。无目标DNA存在时,双标记DNA保持茎环结构,使得生物素分子很难和MNPs上的亲和素接触。一旦加入目标DNA,茎环结构打开,生物素得以与MNPs上的链霉亲和素发生特异性结合,形成的复合物(MNPs-DNA-AuNPs)通过磁性富集到SPCE表面,从而获得AuNPs的电化学信号。该DNA电化学生物传感对单碱基错配有良好的分辨能力,完全互补DNA的检出限为8.0×10-13 mol/L。 展开更多

关键词 本文构建了一种基于纳米粒子、茎环DNA和丝网印刷电极(SPCE)的电化学生物传感技术用于乳腺癌基因的快速、灵敏检测.该传感技术中 探针DNA的两端分别标记了巯基和生物素 巯基用于与金纳米粒子(AuNPs)作用 生物素用于与磁性纳米颗粒(MNPs)表面修饰的链酶亲和素作用以达到富集的目的 之后利用SPCE进行电化学检测.无目标DNA存在时 双标记DNA保持茎环结构 使得生物素分子很难和MNPs上的亲和素接触.一旦加入目标DNA 茎环结构打开 生物素得以与MNPs上的链霉亲和素发生特异性结合 形成的复合物(MNPs-DNA-AuNPs)通过磁性富集到SPCE表面 从而获得AuNPs的电化学信号.该DNA电化学生物传感对单碱基错配有良好的分辨能力 完全互补DNA的检出限为8 0×10-13 mol L.本文构建了一种基于纳米粒子、茎环DNA和丝网印刷电极(SPCE)的电化学生物传感技术用于乳腺癌基因的快速、灵敏检测.该传感技术中 探针DNA的两端分别标记了巯基和生物素 巯基用于与金纳米粒子(AuNPs)作用 生物素用于与磁性纳米颗粒(MNPs)表面修饰的链酶亲和素作用以达到富集的目的 之后利用SPCE进行电化学检测.无目标DNA存在时 双标记DNA保持茎环结构 使得生物素分子很难和MNPs上的亲和素接触.一旦加入目标DNA 茎环结构打开 生物素得以与MNPs上的链霉亲和素发生特异性结合 形成的复合物(MNPs-DNA-AuNPs)通过磁性富集到SPCE表面 从而获得AuNPs的电化学信号.该DNA电化学生物传感对单碱基错配有良好的分辨能力 完全互补DNA的检出限为8 0×10-13 mol L.磁性纳米颗粒 金纳米粒子 DNA 丝网印刷电极

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DNA分析与扩增

15

《生物技术通报》 CAS CSCD 1993年第3期25-28,共4页

关键词 DNA分析 寡核苷酸探针 杆状病毒 定序 RNA 加尾 人线粒体 同聚物 位点特异性 粘性末端

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外周血细胞中溶菌酶的免疫电镜检测技术

16

作者 喻毅强 周晓军 张太和 《医学研究生学报》 CAS 1989年第3期79-80,共2页

我们选择特异性抗溶菌酶抗体,应用胶体金免疫电镜检测技术,对人外周血细胞进行溶菌酶的超微结构定位。旨在探讨胶体金免疫电镜检测技术在患者外周血细胞中的应用。材料与方法 (一)组织标本抽取静脉血3～4ml,1000γ/分钟离心10分钟。然... 我们选择特异性抗溶菌酶抗体,应用胶体金免疫电镜检测技术,对人外周血细胞进行溶菌酶的超微结构定位。旨在探讨胶体金免疫电镜检测技术在患者外周血细胞中的应用。材料与方法 (一)组织标本抽取静脉血3～4ml,1000γ/分钟离心10分钟。然后吸去表面血浆,用2.5％戊二醛,1％锇酸双重固定。按常规电镜技术进行脱水、浸透、环氧树脂Epon 812包埋或采用存档数年的聚合块。 展开更多

关键词 电镜检测技术 常规电镜 免疫细胞化学 超微结构 胶体金探针 特异性 锇酸 标记定位 抗原成分 腹腔巨噬细胞

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分子和细胞遗传

17

《麦类文摘》 1995年第5期59-59,共1页

W953692 操纵大麦几丁酶基因糊粉-特异性表达的强化子/沉默基因顺序的识别〔刊,英〕/Leah, R.…//Plant Journal. -1994. 6(4). -579～589〔WBTA.1995. 12(1). 683〕W953693 一种与Dnak类似的植物线粒体热激蛋白HSP68〔刊,英〕/Neumann,... W953692 操纵大麦几丁酶基因糊粉-特异性表达的强化子/沉默基因顺序的识别〔刊,英〕/Leah, R.…//Plant Journal. -1994. 6(4). -579～589〔WBTA.1995. 12(1). 683〕W953693 一种与Dnak类似的植物线粒体热激蛋白HSP68〔刊,英〕/Neumann, D. …//Planta. -1993. 展开更多

关键词 大麦发育 几丁酶基因 热激蛋白 植物线粒体 特异性表达 基因顺序 细胞遗传 标记基因 识别 糊粉

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