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量子点偶联抗体型夹心免疫传感法检测心肌肌钙蛋白I 被引量：11
1
作者 宋健 范佳 +5 位作者 宋大千 毕丽荣 周广宇 张皓 魏景艳 杨柏 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1940-1944,共5页
将纳米量子点（QD）的放大作用与夹心免疫传感技术相结合，首次应用量子点标记抗体和表面等离子体共振生物传感器（SPR）对心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）进行特异性定量检测．利用N-羟基琥珀酰（NHS）和1-乙基-3-（3-二甲氨基丙基）碳二亚胺... 将纳米量子点（QD）的放大作用与夹心免疫传感技术相结合，首次应用量子点标记抗体和表面等离子体共振生物传感器（SPR）对心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）进行特异性定量检测．利用N-羟基琥珀酰（NHS）和1-乙基-3-（3-二甲氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐（EDC）将量子点偶联到cTnⅠ的单克隆抗体2F11上，再利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）验证偶联是否成功，膜印迹法证明标记后的2F11具有良好的生物学和免疫学活性，最后以蛋白A为基底膜、特异性抗心肌肌钙蛋白Ⅰ多克隆抗体为第-抗体（捕捉抗体）、QD标记的抗心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体2F11为第二抗体（检测抗体），用表面等离子体共振生物传感器构建了对心肌肌钙蛋白Ⅰ具有特异性的夹心免疫传感法，并成功用于检测心肌肌钙蛋白Ⅰ．本法的检测范围为0．4～15μg/L，检出限为0．4μg/L，较未标记夹心法和直接法分别提高了约2倍和10倍． 展开更多
关键词 心肌肌钙蛋白I 特异性抗心肌肌钙蛋白i抗体 夹心免疫传感法 量子点 生物传感器
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^(99m)Tc标记抗心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体在实验性急性心肌损伤大鼠体内分布的研究 被引量：2
2
作者 李建华 王德杭 +2 位作者 李殿富 徐兆强 张寄南 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期385-388,F0004,共5页
目的:研究99mTc标记的抗心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体(AcTnIMA)在实验性急性心肌损伤大鼠体内的分布,探讨99mTc-AcTnIMA是否可以作为心脏放射免疫显像剂。方法:实验组:20只急性心肌损伤大鼠注射99mTc-AcTnIMA0.2mci,分别于注射后2、4、6、8... 目的:研究99mTc标记的抗心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体(AcTnIMA)在实验性急性心肌损伤大鼠体内的分布,探讨99mTc-AcTnIMA是否可以作为心脏放射免疫显像剂。方法:实验组:20只急性心肌损伤大鼠注射99mTc-AcTnIMA0.2mci,分别于注射后2、4、6、8h处死(每次5只),取血液、肝、脾、肾、正常肌肉、肺和心脏,以计算每克组织放射性计数占总注入计数的百分比(ID%/g)及心-肺ID%/g比(HLR)。药物对照组:20只急性心肌损伤大鼠注射99mTc标记的非特异性免疫球蛋白(N-IgG)0.2mci,处死方法同实验组。取肺及心脏,计算ID%/g及HLR;空白对照组:20只正常大鼠注射99mTc-AcTnIMA0.2mci,处理方法同药物对照组。结果:急性损伤心肌对99mTc-AcTnIMA为特异性摄取,摄取的高峰时间为4h。结论:99mTc-AcTnIMA有望作为心脏放射免疫显像剂诊断急性心肌损伤。 展开更多
关键词 抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体 急性心肌损伤 放射免疫显像
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鸭骨骼肌肌钙蛋白I单克隆抗体的制备及其特性 被引量：1
3
作者 刘静静 张静 +3 位作者 孙劲冲 吴萌 杜顺丰 李春生 《肉类研究》 北大核心 2020年第2期60-64,共5页
提取鸭骨骼肌肌钙蛋白I(skeletal muscle troponin I,sTnI)用于制备单克隆抗体,并对抗体性能进行评价。将鸭骨骼肌提取后经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)测... 提取鸭骨骼肌肌钙蛋白I(skeletal muscle troponin I,sTnI)用于制备单克隆抗体,并对抗体性能进行评价。将鸭骨骼肌提取后经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)测定,取凝胶条带免疫小鼠,融合后经筛选获得分泌抗鸭sTnI的杂交瘤细胞株,用酶联免疫吸附测定法检测抗体效价、亚型及特异性等特性。结果表明:鸭骨骼肌提取物经SDS-PAGE后出现2条颜色较深的条带,取分子质量24 kDa条带用于免疫;筛选后获得2株单克隆抗体,其中3E7特异性较好,效价在1∶1.0×10^5以上,为IgG1亚型,亲和常数(Ka)为5.9×10^5 L/mol;免疫印迹结果显示,抗体3E7能与鸭骨骼肌提取物反应,与牛、羊、鸡、鱼骨骼肌提取物无明显反应。 展开更多
关键词 鸭骨骼肌肌钙蛋白I 单克隆抗体 肉类来源 免疫学鉴别 特异性
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抗IgE单克隆抗体联合变应原特异性免疫治疗的应用进展 被引量：2
4
作者 李淑娴 刘金玲 +1 位作者 何静(综述) 陈志敏(审校) 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期264-269,共6页
抗IgE单克隆抗体目前已被批准用于治疗哮喘和慢性荨麻疹,同时抗IgE单克隆抗体联合变应原特异性免疫治疗(AIT)作为过敏性疾病的辅助治疗已引起普遍关注。研究表明,在AIT治疗中或治疗前添加抗IgE单克隆抗体可显著减少AIT不良反应的发生频... 抗IgE单克隆抗体目前已被批准用于治疗哮喘和慢性荨麻疹,同时抗IgE单克隆抗体联合变应原特异性免疫治疗(AIT)作为过敏性疾病的辅助治疗已引起普遍关注。研究表明,在AIT治疗中或治疗前添加抗IgE单克隆抗体可显著减少AIT不良反应的发生频率和严重程度,明显改善症状评分,缩短达到维持剂量所需的时间。目前仍需要更大规模的高质量对照试验更好地识别抗IgE单克隆抗体联合AIT的获益人群,以及治疗最佳剂量和持续时间,并评估长期效益、进行成本-效益分析。本文就抗IgE单克隆抗体在AIT中作为辅助治疗的应用进展进行综述。 展开更多
关键词 抗IgE单克隆抗体 变应原特异性免疫治疗 辅助治疗
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伴心肌特异性肌钙蛋白T升高的皮肌炎
5
作者 韩建文 李东霞 +2 位作者 丁文媛 吕新翔 乌日娜 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期777-779,共3页
报告1例伴心肌特异性肌钙蛋白T(c Tn T)升高的皮肌炎。患者女,38岁。发热、肌肉无力2个月,躯干及四肢红斑1个月。实验室及辅助检查:肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)及c Tn T明显升高,反复心电图、心脏彩超检查未见异常,除外心肌... 报告1例伴心肌特异性肌钙蛋白T(c Tn T)升高的皮肌炎。患者女,38岁。发热、肌肉无力2个月,躯干及四肢红斑1个月。实验室及辅助检查:肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)及c Tn T明显升高,反复心电图、心脏彩超检查未见异常,除外心肌损伤。诊断:皮肌炎。予糖皮质激素联合甲氨蝶呤治疗3个月,皮损消退,肌无力、肌痛症状缓解,c Tn T随CK、CKMB下降而下降。对国内外文献复习,皮肌炎患者可以有c Tn T升高。因此,对于c Tn T升高的结果判断还需要结合临床表现及其他检查综合分析,避免误诊。 展开更多
关键词 皮肌炎 心肌特异性肌钙蛋白T 肌酸激酶 肌酸激酶同工酶MB
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羊骨骼肌肌钙蛋白T单克隆抗体的制备及其特性
6
作者 刘静静 王振华 +5 位作者 李素红 张静 吴萌 杜顺丰 张岩 李春生 《肉类研究》 北大核心 2020年第1期59-63,共5页
制备抗羊骨骼肌肌钙蛋白T(skeletal muscle troponin T,sTnT)的单克隆抗体,评价单抗的特性。通过煮沸提取、切胶纯化制备sTnT,融合后获得分泌抗羊sTnT的杂交瘤细胞株,用酶联免疫吸附测定法检测单抗效价、亚型、特异性等。结果表明:筛选... 制备抗羊骨骼肌肌钙蛋白T(skeletal muscle troponin T,sTnT)的单克隆抗体,评价单抗的特性。通过煮沸提取、切胶纯化制备sTnT,融合后获得分泌抗羊sTnT的杂交瘤细胞株,用酶联免疫吸附测定法检测单抗效价、亚型、特异性等。结果表明:筛选后获得3株单克隆抗体(2E11、3D3、4C2),其中4C2特异性好,效价达到15.12×10^5以上,为IgG1亚型,亲和常数(K_a)为1.1×10^9 L/mol;免疫印迹结果显示,该单抗能与牛、羊的骨骼肌提取物反应,与鸡、鸭的骨骼肌提取物无明显反应,表明4C2可以用于区分反刍动物和禽类的骨骼肌组织。 展开更多
关键词 羊骨骼肌肌钙蛋白T 单克隆抗体 肉类来源 免疫鉴别 特异性
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IGF-1基因转染促进胚胎干细胞诱导分化的心肌细胞中IGF-1、肌球蛋白、肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白-T的表达
7
作者 杨虹 邓成国 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期243-246,共4页
目的观察胰岛素样生长因子-T(IGF-1)基因转染对胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化的心肌细胞中IGF-1、肌球蛋白(myoglobulin)、肌动蛋白(actin)及心肌特异性肌钙蛋白-T(Troponin-T)表达的影响。方法将含有IGF-1基因的真核质粒转染入大鼠胚胎... 目的观察胰岛素样生长因子-T(IGF-1)基因转染对胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化的心肌细胞中IGF-1、肌球蛋白(myoglobulin)、肌动蛋白(actin)及心肌特异性肌钙蛋白-T(Troponin-T)表达的影响。方法将含有IGF-1基因的真核质粒转染入大鼠胚胎干细胞诱导分化的心肌细胞中,采用免疫组织化学方法对心肌细胞内上述4种蛋白的表达进行检测。利用HPIAS-2000图像分析系统测定4种蛋白在各组中表达的平均吸光度值和平均阳性面积率。结果IGF-1基因转染后的心肌细胞内上述4种蛋白的表达明显高于未转染的对照组(P<0.05)。结论IGF-1基因转染的心肌细胞较未转染的心肌细胞合成IGF-1、肌球蛋白、肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白-T的能力增强,为IGF-1基因治疗心肌梗死提供了实验依据。 展开更多
关键词 基因转染 胚胎干细胞 胰岛素样生长因子-1 肌球蛋白 肌动蛋白 心肌特异性肌钙蛋白-T
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斑点免疫金渗滤法检测抗乳铁蛋白多克隆抗体特异性研究 被引量：4
8
作者 李岩 李宏基 +2 位作者 韩立强 王静 杨国宇 《化学与生物工程》 CAS 2008年第2期32-34,共3页
采用斑点免疫金渗滤法对抗乳铁蛋白多克隆抗体特异性进行检测。结果表明金探针具有很强的选择性,斑点免疫金渗滤法能准确快速地检测出多克隆抗体的特异性。
关键词 斑点免疫金渗滤法 抗乳铁蛋白多克隆抗体 特异性 检测
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吸收放散试验在混合不规则抗体特异性验证中的应用分析 被引量：1
9
作者 李丹 杜娟 +6 位作者 杨世明 富文达 安宁 杨琳 焦琴 陈扬 杨龙飞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期901-908,共8页
目的分析吸收放散试验在患者血清中存在混合不规则抗体特异性验证试验中的应用价值,为建立适合患者血清中存在混合不规则抗体的特异性鉴定方法和临床输血策略提供参考依据。方法采集患者抗凝或不抗凝血标本,离心分离血清和红细胞,取红... 目的分析吸收放散试验在患者血清中存在混合不规则抗体特异性验证试验中的应用价值,为建立适合患者血清中存在混合不规则抗体的特异性鉴定方法和临床输血策略提供参考依据。方法采集患者抗凝或不抗凝血标本,离心分离血清和红细胞,取红细胞用生理盐水洗涤6次,在45~56℃进行热放散或酸试剂放散,用该红细胞在微柱凝胶法(MGT)或盐水试管法(NS)进行ABO、Rh血型鉴定和自身抗体吸收试验。采用MGT或间接抗人球蛋白试验(IAT)对吸收自身抗体后的患者血清进行不规则抗体筛查及特异性鉴定。吸取适量吸收后的患者红细胞进行酸试剂放散,放散液用于抗体特异性验证试验。结果在10例患者中,男性6例,女性4例,年龄39~83岁。A型5例、B型1例、O型2例、AB型2例,ccdEe表型2例;Ccdee表型2例;CCDee,Le^(a-)表型1例;CcDEe,P 2,Fy^(b-)表型1例;CcDEe,Jk^(b-),Fy^(b-)表型1例;ccDEE表型2例;CcDee表型1例。抗体特异性鉴定确认为抗D、抗C混合抗体2例,抗D、抗E混合抗体2例,抗Le^(a)、抗E及抗c混合抗体1例,抗P 1、抗Fy b混合抗体1例,抗Jk b、抗Fy b混合抗体1例,抗C、抗e混合抗体2例,抗E抗体伴高效价冷凝集素1例。IgG型抗体8例,IgM型+IgG型抗体2例。血清抗体凝集强度为弱于1+(1+w)~2+w,抗体效价为1∶2~1∶16,放散液抗体凝集强度强于1+(1+s)^(3+)。直接抗人球蛋白试验(DAT)阴性5例,DAT阳性5例。10例患者中6例有输血史,4例既有输血史又有妊娠史。结论在谱细胞进行抗体鉴定凝集强度<2+、凝集强度存在强弱差异或出现全凝集现象时,采用吸收放散试验在验证血清抗体特异性鉴定结果的同时,反应强度增强,也能够检测到常规方法中漏检的抗体,提高了混合不规则抗体特异性鉴定的准确性,为患者筛查交叉配血相合的血液进行输注,以保证临床输血治疗安全有效。 展开更多
关键词 混合不规则抗体 吸收放散试验 抗体特异性验证 交叉配血 抗球蛋白试验
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血型不规则抗体的筛查和抗体特异性分析 被引量：33
10
作者 张勇萍 安宁 +2 位作者 杨世明 苏小花 杜娟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期980-982,共3页
目的确证微柱凝胶法血型不规则抗体筛检阳性患者的抗体特异性。方法应用微柱凝胶法对患者血浆(血清)进行血型不规则抗体筛查,对抗体筛查阳性患者的血标本再用凝聚胺法及间接抗人球蛋白试验进行抗体特异性鉴定和效价测定。结果在微柱凝... 目的确证微柱凝胶法血型不规则抗体筛检阳性患者的抗体特异性。方法应用微柱凝胶法对患者血浆(血清)进行血型不规则抗体筛查,对抗体筛查阳性患者的血标本再用凝聚胺法及间接抗人球蛋白试验进行抗体特异性鉴定和效价测定。结果在微柱凝胶法血型不规则抗体筛查阳性210例中,由非特异性抗体引起假阳性35例(16.7%),由血型不规则抗体引起阳性175例(83.3%)。在175例血型不规则抗体阳性患者中,Rh血型系统抗体156例(89.1%),MNSs血型系统抗体10例(5.7%),Lewis血型系统抗体5例(2.9%),Kidd血型系统抗体3例(1.7%),其中Rh血型系统合并Kidd血型系统抗体1例。结论对孕妇产前及受血者进行血型不规则抗体筛查、特异性鉴定及其效价测定,早期进行预防及选择不含相应抗原的血液输注,是防治新生儿溶血病和确保输血安全和有效的重要措施。 展开更多
关键词 抗体筛查 特异性鉴定 微柱凝胶法 抗人球蛋白试验
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一种检测血清心肌肌钙蛋白I的生物传感器 被引量：5
11
作者 魏景艳 宋大千 +9 位作者 卜丽莎 朱冬元 牟颖 刘霞 张寒琦 金钦汉 张桂珍 丁家华 王维忠 罗贵民 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期272-275,共4页
目的 :建立一种新的血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)定量检测法。方法 :用亲和层析法提纯cTnI,免疫BALB C鼠及新西兰兔 ,并用杂交瘤技术及膜渗滤亲和层析法 ,制备了特异性抗cTnI单克隆抗体和多克隆抗体。以葡萄球菌蛋白A作基底膜 ,特异性多克... 目的 :建立一种新的血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)定量检测法。方法 :用亲和层析法提纯cTnI,免疫BALB C鼠及新西兰兔 ,并用杂交瘤技术及膜渗滤亲和层析法 ,制备了特异性抗cTnI单克隆抗体和多克隆抗体。以葡萄球菌蛋白A作基底膜 ,特异性多克隆抗体作捕捉抗体 ,单抗 9F5作第二抗体 ,制成了表面等离子体共振生物传感器。比较了直接法和夹心免疫法检测血清cTnI的性能。结果 :夹心免疫法的最低检测限 (0 8μg L)是直接法的 5倍 (4 μg L) ,检测范围为 (0 8～ 2 0 ) μg L ,批内及批间精密度分别达 3 8%～ 5 1% ,6 3%～ 8 1%。用该夹心法及国外试剂盒分别检测 4 0名健康献血队员和 2 8例急性心肌梗死患者血清cTnI水平 ,两者符合率分别为 97 5 %和 94 6 %。结论 :所建立的夹心免疫法操作简单 ,特异性强 ,灵敏度高 ,符合临床诊断要求。 展开更多
关键词 心肌肌钙蛋白Ⅰ 抗心肌肌钙蛋白i抗体 夹心免疫法 表面等离子体共振生物传感器 急性心肌梗死
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抗凝剂在改良MAIPA法中对ITP患者血小板特异性自身抗体(GPⅡbⅢa和GPⅠbα)检测的影响 被引量：5
12
作者 阮敏 朱凌燕 +2 位作者 曾庆曙 夏瑞祥 倪合宇 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第7期832-834,共3页
探究二价阳离子络合剂的抗凝剂在改良单克隆抗体俘获血小板抗原(MAIPA)法检测免疫性血小板减少症(ITP)患者血小板特异性自身抗体中的影响。分别留取ED-TA-K2和肝素钠抗凝的162例ITP患者标本,采用改良MAI-PA法检测血小板特异性自身膜糖蛋... 探究二价阳离子络合剂的抗凝剂在改良单克隆抗体俘获血小板抗原(MAIPA)法检测免疫性血小板减少症(ITP)患者血小板特异性自身抗体中的影响。分别留取ED-TA-K2和肝素钠抗凝的162例ITP患者标本,采用改良MAI-PA法检测血小板特异性自身膜糖蛋白IIbIIIa(GPIIbIIIa)和膜糖蛋白Ibα(GPIbα)。抗GPIIbIIIa抗体:单用EDTA-K2抗凝剂检出阳性77例,单用肝素钠抗凝剂检出阳性78例,双重检测阳性102例;抗GPIbα抗体:单用EDTA-K2抗凝剂检出阳性53例,单用肝素钠抗凝剂检出阳性51例,双重检测阳性72例。单一抗凝剂与双重抗凝剂比较差异有统计学意义(P<0.05)。二价阳离子络合剂的抗凝剂在改良MAIPA法检测ITP患者血小板特异性自身抗体中有一定影响,采用两种抗凝剂双重检测可提高自身抗体的检出率。 展开更多
关键词 抗凝剂 MAIPA法 血小板 特异性自身抗体
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特异性抗变形链球菌鸡蛋黄抗体IgY对定菌鼠龋齿发生的影响 被引量：4
13
作者 樊明文 江千舟 +2 位作者 边专 李宇红 刘宁慧 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期339-341,共3页
目的　研究特异性抗变IgY形链球菌鸡蛋黄抗体对定菌鼠龋齿发生、发展的影响。方法　将 35只Wistar大鼠随机分为 5组 ,接种耐链霉素的S .mutansMT 814 8,并给予致龋饲料 ,使用特异性抗变链的鸡蛋黄抗体IgY通过不同方式对实验动物进行被... 目的　研究特异性抗变IgY形链球菌鸡蛋黄抗体对定菌鼠龋齿发生、发展的影响。方法　将 35只Wistar大鼠随机分为 5组 ,接种耐链霉素的S .mutansMT 814 8,并给予致龋饲料 ,使用特异性抗变链的鸡蛋黄抗体IgY通过不同方式对实验动物进行被动免疫。实验结束后 ,根据Keyes评分方法作龋齿计分 ,并采用t检验进行统计分析。结果　在食物中添加特异性IgY冻干粉或经口腔喷雾IgY漱口水均能显著降低大鼠牙釉质及牙本质外层龋齿计分。给予含特异性抗体的鸡蛋黄饮食能减低龋齿的发生 ,但与对照组比较无显著性差异。结论　特异性抗变链的鸡蛋黄抗体IgY能减少定菌鼠龋齿的发生 ,减缓龋齿的发展。 展开更多
关键词 特异性抗变形链球菌 鸡蛋黄 抗体 IGY 定菌鼠 龋齿 疫苗
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心肌肌钙蛋白Ⅰ与肌酸激酶同工酶在儿童心肌损害诊断中的比较 被引量：7
14
作者 姜剑斌 秦双梅 郑孝清 《实用医学杂志》 CAS 2007年第7期976-978,共3页
目的:了解各病理状况对心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)的影响,并比较其诊断价值。方法:对4组儿童进行血清cTnI、CK-MB测定。A组为健康儿童54例;B组为一般状况可的非心血管疾病患儿53例;C组为病情稳定的先天性心脏病患儿12... 目的:了解各病理状况对心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)的影响,并比较其诊断价值。方法:对4组儿童进行血清cTnI、CK-MB测定。A组为健康儿童54例;B组为一般状况可的非心血管疾病患儿53例;C组为病情稳定的先天性心脏病患儿12例;D组为急性心肌炎患儿14例。结果:A组cTnI值均<0.25"g/mL,各年龄组之间差异无显著性,CK-MB升高1例(1.9%)。A、B、C组cTnI值之间差异无显著性。B组cTnI升高1例(1.9%),CK-MB升高9例(16.9%);C组cTnI均不升高,CK-MB升高1例(8.3%);D组cTnI升高11例(78.6%),平均值较A组显著增高(P<0.01)。结论:cTnI可用来诊断儿童心肌损害,无心血管系统受累的患儿cTnI值不升高,心血管系统以外的疾病可影响CK-MB值。 展开更多
关键词 心肌疾病 肌钙蛋白I 肌酸激酶 特异性
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肾移植受者血清抗血管内皮细胞特异性抗体的提取和纯化 被引量：2
15
作者 刘丹 胡娟 +5 位作者 刘萍 罗伟光 李婷婷 郭靖 明英姿 邹义洲 《器官移植》 CAS CSCD 2015年第3期146-151,共6页
目的探讨肾移植术后出现排斥反应的受者血清中抗血管内皮细胞特异性抗体的提取和纯化方法。方法首先分离培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)。收集肾移植术后肾功能不良受者的血清样本,应用流式细胞术进行抗血管内皮细胞特异性抗体的筛选;... 目的探讨肾移植术后出现排斥反应的受者血清中抗血管内皮细胞特异性抗体的提取和纯化方法。方法首先分离培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)。收集肾移植术后肾功能不良受者的血清样本,应用流式细胞术进行抗血管内皮细胞特异性抗体的筛选;用Luminex抗体检测平台检测血清中抗人类白细胞抗原(HLA)和主要组织相容性复合体Ⅰ类相关链A(MICA)的抗体。在确定血清标本中存在有抗血管内皮细胞特异性抗体后,用HUVEC将其吸附。洗涤细胞后再将吸附的抗体从细胞膜上洗脱下来,再用Protein-A/G磁珠再次纯化和浓缩洗脱液中的抗体Ig G。采用流式细胞术检测洗脱液中抗体活性,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)凝胶和免疫印迹法鉴定纯化的抗血管内皮细胞特异性抗体(Ig G)。结果在386例肾移植受者的血清中,选取血清肌酐(Scr)>400μmo I/L、抗HLA抗体阴性、抗MICA抗体阴性和荧光反应强度(MFI)>16的5例受者的血清样本,纯化后的抗血管内皮细胞特异性抗体Ig G在SDS-PAGE凝胶显示免疫球蛋白重链(纯度>95%)。流式细胞术结果显示纯化的抗体具有重新结合血管内皮细胞表面抗原的特性。结论采用人脐静脉血管内皮细胞吸附肾移植受者血清中抗血管内皮细胞特异性抗体的提纯方法可取得较好效果。 展开更多
关键词 肾移植 免疫排斥反应 抗血管内皮细胞特异性抗体 抗体吸附 人血管内皮细胞
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抗人白细胞单克隆抗体的特异性及其特性鉴定 被引量：1
16
作者 杨斌 何杨 +3 位作者 赵益明 沈文红 李佩霞 阮长耿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期158-160,共3页
目的制备抗人白细胞单克隆抗体（ｍＡｂ），并对其识别抗原及组织的特异性进行鉴定。方法采用分离的人全白细胞悬液免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取脾细胞与Ｓｐ２／０细胞常规融合，用间接ＥＬＩＳＡ筛选ｍＡｂ，流式细胞仪及免疫组化染色Ｓ... 目的制备抗人白细胞单克隆抗体（ｍＡｂ），并对其识别抗原及组织的特异性进行鉴定。方法采用分离的人全白细胞悬液免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取脾细胞与Ｓｐ２／０细胞常规融合，用间接ＥＬＩＳＡ筛选ｍＡｂ，流式细胞仪及免疫组化染色ＳＰ法鉴定其组织特异性。　结果成功地制备１株抗人白细胞　ｍＡｂ，命名为ＳＺ－１０５。ＥＬＩＳＡ法测定其腹水效价为１×１０－５。琼脂糖双扩散鉴定为ＩｇＧ１类。流式细胞仪间接免疫荧光技术及免疫组化ＳＰ法测定表明，ｍＡｂ　ＳＺ－１０５可选择性地与外周血液的粒细胞、单核细胞和淋巴细胞呈强阳性反应，而与红细胞及血小板不出现反应。该ｍＡｂ还可与正常人骨髓的白细胞前体起反应。另外，在肝、肺、脾、胸腺及淋巴结正常组织中的巨噬细胞表面，也有ＳＺ－１０５抗原表达。ＳＺ－１０５抗原经亲和层析纯化，再经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ　和Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ证实，ｍＡｂ　ＳＺ－１０５识别的抗原是相对分子质量（Ｍｒ）为７５　０００左右的单链蛋白多肽。结论　获得１株具有高度免疫学活性和组织特异性的抗人白细胞ｍＡｂ　ＳＺ－１０５，其对研究白细胞的分化、免疫功能，以及隐匿性急、慢性炎症疾病的放免显像诊断都具有一定的临床意义。 展开更多
关键词 抗人白细胞单克隆抗体 特异性 特性鉴定 免疫组织化学
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冠心病患者血清中Hp特异性抗体、抗Hp-CagA抗体与冠脉病变的相关性 被引量：3
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作者 于伟 赵娜 《海南医学院学报》 CAS 2018年第17期1543-1546,共4页
目的:探讨冠心病患者血清中Hp特异性抗体、抗Hp-CagA抗体与冠脉病变的相关性。方法:冠心病患者119例作为冠心病组、健康体检者100例作为正常对照组。对比两组血清中Hp-IgG、抗Hp-CagA-IgG含量及脂质代谢指标、血小板功能指标、炎症介质... 目的:探讨冠心病患者血清中Hp特异性抗体、抗Hp-CagA抗体与冠脉病变的相关性。方法:冠心病患者119例作为冠心病组、健康体检者100例作为正常对照组。对比两组血清中Hp-IgG、抗Hp-CagA-IgG含量及脂质代谢指标、血小板功能指标、炎症介质含量的差异,经相关性分析冠心病患者血清中Hp-IgG、抗Hp-CagA-IgG含量与冠脉病变的内在联系。结果:冠心病组血清中Hp-IgG、抗HpCagA-IgG的含量高于正常对照组;外周血中脂质代谢指标TC的含量高于正常对照组,HDL-C、apoA1的含量低于正常对照组;血清中血小板功能指标P-selectin、PAF、PDGF的含量高于正常对照组;血清中炎症介质hs-CRP、IL-8、IL-17、TNF-α的含量高于正常对照组。Pearson相关性分析发现,冠心病患者血清中Hp-IgG、抗Hp-CagA-IgG的含量与冠脉病变程度密切相关。结论:冠心病患者血清中HpIgG、抗Hp-CagA-IgG的含量异常增高,且具体含量与冠脉病变存在密切相关。 展开更多
关键词 冠心病 Hp特异性抗体 抗Hp-CagA抗体 血小板功能 炎症反应
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整合素连接激酶相关磷酸酶(ILKAP)抗体的制备及其特异性分析
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作者 张应玖 亓晓艳 +2 位作者 周旺 郑宇 韩树海 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期356-360,共5页
以整合素连接激酶相关磷酸酶(ILKAP)全蛋白为抗原,采用腿部肌肉注射和耳缘静脉注射相结合的方法对新西兰大白兔进行免疫,共免疫6次,最终获得ILKAP抗血清.采用Protein A agrose柱纯化抗体,获得ILKAP的多克隆抗体.免疫印迹分析表明,所获得... 以整合素连接激酶相关磷酸酶(ILKAP)全蛋白为抗原,采用腿部肌肉注射和耳缘静脉注射相结合的方法对新西兰大白兔进行免疫,共免疫6次,最终获得ILKAP抗血清.采用Protein A agrose柱纯化抗体,获得ILKAP的多克隆抗体.免疫印迹分析表明,所获得的ILKAP多克隆抗体具有较高的特异性,间接ELISA方法测定ILKAP多克隆抗体的滴度为1∶1 600.免疫荧光分析表明,所获得的ILKAP多克隆抗体在细胞水平应用效果较好. 展开更多
关键词 整合素连接激酶相关磷酸酶(ILKAP) 抗血清 抗体 滴度 特异性
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分泌抗急性非淋巴细胞白血病M_2型单克隆抗体细胞株的建立及其特异性
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作者 张权一 潘荆华 +5 位作者 李秀芝 王丽叶 艾元洪 郝秀智 张贻林 易永林 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第1期49-54,共6页
应用细胞杂交瘤技术建立了分泌抗急性非淋巴细胞白血病M_2型单克隆抗体1D_1、1C_2和1D_6细胞株,连续传代11个月,稳定地分泌单克隆抗体。用间接免疫荧光方法检测,这三株细胞分泌的单克隆抗体与急性非淋巴细胞白血病M_2型病人的白血病细... 应用细胞杂交瘤技术建立了分泌抗急性非淋巴细胞白血病M_2型单克隆抗体1D_1、1C_2和1D_6细胞株,连续传代11个月,稳定地分泌单克隆抗体。用间接免疫荧光方法检测,这三株细胞分泌的单克隆抗体与急性非淋巴细胞白血病M_2型病人的白血病细胞呈阳性反应;与急性非淋巴细胞白血病M_1、M_3、M_4、M_5型病人白血病细胞呈阴性反应;与慢性粒细胞白血病、慢粒急变,急性淋巴细胞白血病病人白血病细胞呈阴性反应;与正常人白细胞也呈阴性反应,说明建立的细胞株分泌的单克隆抗体具有型的特异性。 展开更多
关键词 抗急性非淋巴细胞白血病单克隆抗体 M2型单克隆抗体细胞株 特异性 免疫分型诊断 免疫治疗
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含特异性抗变形链球菌IgY抗体喷雾剂对口腔菌斑中变形链球菌作用的临床研究
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作者 江汉 台保军 +1 位作者 樊明文 张旗 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2006年第6期656-658,共3页
目的：评价含特异性抗变形链球菌IgY抗体喷雾剂对口腔菌斑中变形链球菌的抑制作用。方法：本试验遵照随机、双盲、对照的原则。将40名年龄在20～24岁的受试者随机分成试验组（使用含特异性抗变形链球菌IgY抗体喷雾剂）和安慰剂对照组（... 目的：评价含特异性抗变形链球菌IgY抗体喷雾剂对口腔菌斑中变形链球菌的抑制作用。方法：本试验遵照随机、双盲、对照的原则。将40名年龄在20～24岁的受试者随机分成试验组（使用含特异性抗变形链球菌IgY抗体喷雾剂）和安慰剂对照组（使用不含特异性抗变形链球菌IgY抗体喷雾剂），每天用喷雾剂喷牙面2次，连续使用3周。分别在试验前、试验后1周、3周、停止使用喷雾剂1周后取右下第1恒磨牙菌斑进行微生物学分析。结果：试验组使用特异性抗变形链球菌IgY抗体喷雾剂3周后变形链球菌计数和变形链球菌占总厌氧菌百分率与基线相比明显下降（P〈0．001）。对照组所有数据在统计学上无显著差异（P〉0．05）。结论：本研究提示含特异性抗变形链球菌IgY抗体喷雾剂对人群口腔菌斑中变形链球菌有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 特异性抗变形链球菌IgY抗体 变形链球菌 随机临床试验
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