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非洲猪瘟病毒特异性抗体检测研究进展 被引量:9
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作者 祁元明 陈玉梅 王爱萍 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2021年第5期807-814,共8页
非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)会引发猪的急性、烈性、高度传染性疾病,因其病程短、传播迅速、死亡率高,严重影响中国养猪业健康发展。目前市场上仍缺乏有效的疫苗,因此ASFV抗体检测技术也可以作为ASFV诊断的参考方法... 非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)会引发猪的急性、烈性、高度传染性疾病,因其病程短、传播迅速、死亡率高,严重影响中国养猪业健康发展。目前市场上仍缺乏有效的疫苗,因此ASFV抗体检测技术也可以作为ASFV诊断的参考方法。开发快速简便的抗体检测技术,对于大规模的流行病学调查和无症状感染/康复猪的筛查尤为重要。本文系统总结了现有ASFV抗体检测技术和最新研究进展,阐述ASFV特异性抗体检测意义和ASFV特异性抗体检测样本类型,重点考察了ASFV特异性抗体检测常用的靶标以及检测靶标的筛选及其应用,比较了ASFV抗体检测的主要检测方法,明确了ASFV抗体检测的改进方向,并指出即时、即地、精准、快速以及自动化将是未来ASFV抗体检测技术的发展趋势。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 流行病学调查 特异性抗体检测 酶联免疫吸附试验 免疫印迹试验 间接免疫荧光试验 间接免疫过氧化物酶试验
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梅毒特异性抗体分离检测装置的性能验证和初步应用 被引量:4
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作者 卢煌莹 梁广舒 顾志冬 《上海交通大学学报(医学版)》 CSCD 北大核心 2017年第5期646-651,共6页
目的·设计获得梅毒特异性抗体分离检测的免疫亲和层析装置,对其检测性能进行验证,并初步应用于临床。方法·通过亲和层析装置中包被梅毒螺旋体抗原的亲和填料,特异性吸附样品中可能存在的梅毒螺旋体特异性抗体(包括IgG和IgM型)... 目的·设计获得梅毒特异性抗体分离检测的免疫亲和层析装置,对其检测性能进行验证,并初步应用于临床。方法·通过亲和层析装置中包被梅毒螺旋体抗原的亲和填料,特异性吸附样品中可能存在的梅毒螺旋体特异性抗体(包括IgG和IgM型),经洗涤、洗脱、脱盐处理后,由羊抗人IgG、IgM金标层析试纸条检测可能存在的梅毒特异性IgG、IgM型抗体。对20例梅毒总抗体检测阴性标本、230例梅毒抗体阳性的临床标本进行检测,并对其中的40例标本进行免疫印迹检测法对比测定。结果·优化获得亲和层析装置标准化操作程序。该装置能有效实现梅毒特异性IgG、IgM型抗体的分离检测。20例梅毒总抗体检测阴性标本经该装置检测的结果均为阴性。230例梅毒抗体阳性的临床标本中,2例标本检测结果为TP-IgG、IgM型抗体均阴性,210例标本检测结果为TP-IgG型抗体阳性、TP-IgM型抗体阴性,10例标本检测结果为TP-IgG型抗体阴性、TP-IgM型抗体阳性,8例标本检测结果为TP-IgG、IgM型抗体均阳性。40例标本检测结果与免疫印迹检测法结果进行比对,其中2例标本亲和层析装置检测结果为TP-IgG、IgM型抗体均阴性,免疫印迹检测法结果均为TP-IgG型抗体阳性、TP-IgM型抗体阴性,但2种方法检测结果的差异无统计学意义(P>0.05)。结论·设计获得的该亲和装置应用于临床样本中梅毒特异性IgM、IgG抗体的分离检测切实可行,对后续临床运用有重要价值。 展开更多
关键词 亲和层析 梅毒螺旋体 梅毒异性IgG抗体 梅毒异性IgM抗体 异性抗体分型检测
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国际各类品种血小板膜糖蛋白单克隆抗体试剂对血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定检测技术的影响 被引量:3
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作者 唐秋民 申卫东 +2 位作者 钟周琳 周燕 吴国光 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期1074-1077,共4页
本研究按国际输血学会第14届国际血小板免疫学研讨会和合作研究项目的要求,分析比较国际常用血小板膜糖蛋白单克隆抗体(McAb)各类品种对血小板抗原McAb特异性免疫固定检测技术(MAIPA)检测血小板抗体结果的影响。向参加该研究的30个实验... 本研究按国际输血学会第14届国际血小板免疫学研讨会和合作研究项目的要求,分析比较国际常用血小板膜糖蛋白单克隆抗体(McAb)各类品种对血小板抗原McAb特异性免疫固定检测技术(MAIPA)检测血小板抗体结果的影响。向参加该研究的30个实验室发放10份含已知血小板抗体特异性的血清和1份阴性对照血清样本,以及9份不同类别(GPⅡb/Ⅲa、GPⅠa/Ⅱa、GPⅠb/Ⅸ及GPⅣ)及克隆编号的血小板膜糖蛋白McAb和统一的实验研究技术方案,各参加实验室按方案进行检测并反馈结果数据,比较同一糖蛋白种类不同的McAb对MAIPA检测结果的影响。结果表明:GPⅡb/Ⅲa中AP2,Gi-5,PL2-73等几种McAb的平均S/CO值较高;GPⅠa/Ⅱa的McAb中MBC202.2和143.1的平均S/CO值较高;GPⅠb/Ⅸ的McAb中142.11和CLB-MB45(CD42b)的平均S/CO值较高;GPⅣ的McAb中131.4的平均S/CO值较高。结论不同的McAb品种对样本的检测结果存在差异,McAb对MAIPA的灵敏度有重要影响。用MAIPA法检测血小板抗体时应同时使用相同糖蛋白种类而不同克隆号的McAb,以防止血小板抗体的漏检。 展开更多
关键词 血小板免疫学 血小板抗原单克隆抗体异性免疫固定检测技术 血小板膜糖蛋白单克隆抗体
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基于间接ELISA的鲤血清CyHV-3 pORF65抗体检测方法的建立 被引量:2
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作者 马艳平 郝乐 +5 位作者 梁志凌 马江耀 李盈 柯浩 刘振兴 曹俊明 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期113-119,共7页
鲤疱疹病毒3型(cyprinid herpesvirus 3,Cy HV-3)囊膜蛋白ORF65基因全长1 785 bp,编码594个氨基酸。该研究在稀有密码子分析及信号肽与跨膜结构预测的基础上,将p ORF65中的N端信号肽与C端跨膜区段删除后进行密码子优化与基因合成,将合... 鲤疱疹病毒3型(cyprinid herpesvirus 3,Cy HV-3)囊膜蛋白ORF65基因全长1 785 bp,编码594个氨基酸。该研究在稀有密码子分析及信号肽与跨膜结构预测的基础上,将p ORF65中的N端信号肽与C端跨膜区段删除后进行密码子优化与基因合成,将合成的截短ORF65(truncated ORF65)插入p ET32a(+)载体,构建了p ET32a-trun ORF65;进一步采用DNAstar、ABCpred、Bepi Pred 1.0软件预测了p ORF65的5个B细胞表位优势区段,以合成的截短ORF65为模板,通过SOE-PCR将5个B细胞表位优势区段编码序列融合后插入p ET32a(+)载体,构建了p ET32a-mod ORF65。重组质粒分别转入BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导,SDS-PAGE和Western-blot分析,p ET32a-mod ORF65获得高效表达,表达的融合蛋白分子量为56.4 k D。此外,利用r Protein G亲和层析纯化了锦鲤(Cyprinus carpio haematopterus)血清Ig M,免疫小鼠,制备了鼠抗锦鲤Ig M多克隆抗体。在上述研究的基础上,将纯化的p ORF65作为包被抗原,鼠抗锦鲤Ig M多克隆抗体作为检测抗体,建立了间接ELISA方法,该方法可以检测p EGFP-ORF65 DNA疫苗免疫锦鲤后产生的特异性抗体。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒3型 ORF65 B细胞表位融合表达 rProtein G亲和层析 ELISA 抗体异性检测
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中南和东北地区原料奶中金黄色葡萄球菌的调查 被引量:1
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作者 赵越 庞广昌 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第18期285-287,共3页
利用金黄色葡萄球菌金标特异性单克隆抗体检测试板对中南和东北地区个体养牛户的240个原料奶样品进行快速检测。结果表明:湖南、湖北和河南省原料奶样品中均未检出金黄色葡萄球菌;而辽宁、吉林和黑龙江省原料奶样品金黄色葡萄球菌阳性... 利用金黄色葡萄球菌金标特异性单克隆抗体检测试板对中南和东北地区个体养牛户的240个原料奶样品进行快速检测。结果表明:湖南、湖北和河南省原料奶样品中均未检出金黄色葡萄球菌;而辽宁、吉林和黑龙江省原料奶样品金黄色葡萄球菌阳性率分别为10%、30%和100%,原料奶的微生物污染状况不容乐观。本研究结果说明金黄色葡萄球菌金标特异性单克隆抗体快速检测试板是一种快速、简便、准确的金黄色葡萄球菌检测产品,值得在原料奶市场推广。 展开更多
关键词 原料奶 金黄色葡萄球菌 金标异性单克隆抗体检测试板
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