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簇毛麦基因组特异DNA序列标记的建立和应用 被引量:3
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作者 迟世华 杨足君 +3 位作者 冯娟 周建平 刘成 任正隆 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期1-5,共5页
为建立簇毛麦基因组特异DNA序列的分子标记,以普通小麦中国春、绵阳11、川农17和R111以及多年生簇毛麦、硬粒小麦-多年生簇毛麦双二倍体TDB-3为材料,用120条随机引物进行RAPD分析,筛选出一个多年生簇毛麦的特异性RAPD片段,克隆测序表明... 为建立簇毛麦基因组特异DNA序列的分子标记,以普通小麦中国春、绵阳11、川农17和R111以及多年生簇毛麦、硬粒小麦-多年生簇毛麦双二倍体TDB-3为材料,用120条随机引物进行RAPD分析,筛选出一个多年生簇毛麦的特异性RAPD片段,克隆测序表明该片段全长为937 bp(记为OPM2937)。以OPM2937的DNA序列为基础设计了一对特异引物,并用该特异引物对多年生簇毛麦、二倍体簇毛麦以及中国春-二倍体簇毛麦附加系CSDA1V^CSDA7V与小麦-多年生簇毛麦衍生后代进行了扩增,结果表明,凡具有簇毛麦染色体的材料均可扩增出目标DNA片段,而不具簇毛麦染色体的材料均未能得到扩增。将OPM2937在NCBI中进行序列比对,发现它是一个新的序列,说明OPM2937为簇毛麦基因组的一个特异序列,该DNA序列标记可用于快速跟踪检测小麦背景中的簇毛麦染色体。 展开更多
关键词 簇毛麦属 RAPD 基因组异性DNA片段
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基于竞争性杂交方法的猪-肠道微生物特异性互作靶点发掘 被引量:1
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作者 樊丽华 莫虹斐 +2 位作者 张晓峰 帅江冰 陈青 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期163-172,共10页
动物肠道中存在着一些参与猪肠道微生物互作的基因,这些基因具有一定的宿主特异性,利用其设计分子标记能准确识别粪便污染来源。该文共采集6个物种(猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅)的145个粪便样品,提取其DNA后利用竞争性杂交的基因片段富集方... 动物肠道中存在着一些参与猪肠道微生物互作的基因,这些基因具有一定的宿主特异性,利用其设计分子标记能准确识别粪便污染来源。该文共采集6个物种(猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅)的145个粪便样品,提取其DNA后利用竞争性杂交的基因片段富集方法(genome fragment enrichment,GFE),靶向筛选参与猪肠道微生物互作的特异性基因。经BLASTX分析发现,82%的猪特异性非冗余DNA片段存在相似序列,以拟杆菌纲(Bacteroidetes)(43.2%)、梭菌纲(Clostridia)(19.5%)、芽孢杆菌纲(Bacilli)(8.6%)相似序列为主。从蛋白质功能方面分析,61.5%的非冗余序列功能明确,有7.6%的序列与信息贮存及加工有关,12.8%的序列与细胞加工及信息传导有关,22%的序列与代谢有关,其中,碳水化合物和氨基酸的转移代谢相关序列含量最为丰富,均占总特异性序列的6.3%。研究发现,能够编码拟杆菌纲(Bacteroidetes)和梭菌纲(Clostridials)等表面蛋白、膜分泌蛋白及碳水化合物代谢蛋白的相关基因可作为猪特异性分子标记筛选的靶点。 展开更多
关键词 非点源污染 竞争性杂交 特异性基因组片段富集 功能注释 异性分子标记
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东方田鼠特异DNA片段的克隆及核苷酸序列分析 被引量:14
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作者 杨榕 胡维新 +1 位作者 朱敏 彭兴华 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第2期67-72,共6页
目的 获得东方田鼠的特异DNA序列。方法 Aβ基因使用PCR ,基因克隆 ,斑点杂交 ,DNA序列分析 ,生物信息学技术。结果 根据小鼠MHCⅡ外显子 2及其两侧序列 ,合成引物并扩增东方田鼠基因组DNA ,将PCR产物回收、测序后 ,分别设计内引物... 目的 获得东方田鼠的特异DNA序列。方法 Aβ基因使用PCR ,基因克隆 ,斑点杂交 ,DNA序列分析 ,生物信息学技术。结果 根据小鼠MHCⅡ外显子 2及其两侧序列 ,合成引物并扩增东方田鼠基因组DNA ,将PCR产物回收、测序后 ,分别设计内引物扩增东方田鼠基因组DNA ,其中一对引物可得到特异性扩增带 ,将得到的DNA片段插入PGEM Teasy载体 ,进行序列分析。用这对引物扩增人、昆明小鼠、BALB c小鼠及C57BL 6J小鼠基因组DNA ,均无扩增产物。以东方田鼠特异性扩增产物为探针进行斑点杂交 ,除东方田鼠基因组DNA外 ,其他几种动物基因组DNA均为阴性结果。进一步对该DNA片段进行了BLAST同源性搜索和外显子预测 ,在Genbank中没有发现高度同源序列 ,并且找到一个可能的外显子 ,该外显子由 69个氨基酸组成。结论 获得的DNA片段为东方田鼠的特异片段 ,这将为从分子水平深入研究东方田鼠的遗传背景、生物进化规律以及东方田鼠抗日本血吸虫的机理奠定基础。 展开更多
关键词 东方田鼠 扩增 外显子 DNA片段 斑点杂交 引物 异性 基因组DNA 动物基因组 生物进化
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马铃薯品种和组织对基因组测序深度分布模式的影响 被引量:2
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作者 张国栋 刘柏林 +2 位作者 李修宝 司怀军 李修庆 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期43-48,共6页
【目的】探讨品种和组织对马铃薯基因组测序深度分布的影响.【方法】对‘布尔班克’和‘云薯107’2个品种的薯块芽端和茎端进行了深测序,建立了在参照基因组上的测序深度分布图.【结果】发现这些分布在品种间有明显差别(例如在三号染色... 【目的】探讨品种和组织对马铃薯基因组测序深度分布的影响.【方法】对‘布尔班克’和‘云薯107’2个品种的薯块芽端和茎端进行了深测序,建立了在参照基因组上的测序深度分布图.【结果】发现这些分布在品种间有明显差别(例如在三号染色体中部和尾部),在同一品种的DNA样本间很类似,但芽端和茎端在二号染色体有明显差别.这些结果说明测序深度的分布主要受品种基因组本身所影响,也受薯块上部位影响,而且在很大程度上可以重复.【结论】这些结果能帮助设计试验和合适利用测序深度. 展开更多
关键词 马铃薯 DNA测序 小序列片段 参考基因组 覆盖程度 品种差别 组织异性
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两个地区东方田鼠基因组RAPD分析比较研究 被引量:7
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作者 王胜昌 谢建云 +1 位作者 邵伟娟 高诚 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第1期26-32,共7页
目的 从DNA的水平分析比较两个地区东方田鼠的分子遗传特征 ,探讨以RAPD标记鉴别两个地区的东方田鼠。方法 筛选 6条 1 0bp的随机引物对洞庭湖和青铜峡地区的东方田鼠基因组进行了随机扩增多态DNA (RAPD)分析 ,并对这两个地区的东方... 目的 从DNA的水平分析比较两个地区东方田鼠的分子遗传特征 ,探讨以RAPD标记鉴别两个地区的东方田鼠。方法 筛选 6条 1 0bp的随机引物对洞庭湖和青铜峡地区的东方田鼠基因组进行了随机扩增多态DNA (RAPD)分析 ,并对这两个地区的东方田鼠的基因组DNA进行了比较。结果 ①两个地区东方田鼠的所有受试个体中共有的片段数为 2 0条 ,这是两个地区东方田鼠的共性所在 ;②两个地区东方田鼠各有其特异性扩增片段 ;③引物S1 7和S80可作为鉴别两个地区东方田鼠的特异性引物 ;④不同地区的东方田鼠其不同个体之间的共享度较低 ,且存在较大差异 ;两个地区东方田鼠的遗传背景均呈非均一性。 展开更多
关键词 东方田鼠 鉴别 地区 基因多态性 基因组 异性引物 DNA RAPD分析 扩增片段 RAPD标记
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DNA指纹的个体特异性和细胞稳定性研究 被引量:1
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作者 蓝翎 张小为 +1 位作者 段秉章 霍振义 《法医学杂志》 CAS CSCD 1990年第2期8-11,共4页
人类基因组的许多高度可变区域能够与小卫星探针杂交,而同时被检测出来,小卫星探针由串联重复的“核心”顺序构成。采用Southern印迹杂交获得的DNA指纹图包含多条高度可变的DNA片段杂交带,这些带在体细胞和生殖细胞中都表现出稳定性... 人类基因组的许多高度可变区域能够与小卫星探针杂交,而同时被检测出来,小卫星探针由串联重复的“核心”顺序构成。采用Southern印迹杂交获得的DNA指纹图包含多条高度可变的DNA片段杂交带,这些带在体细胞和生殖细胞中都表现出稳定性,而且安全具有个体特异性。本文用小卫星探针33.15,调查了北京地区的60名无关个体。 展开更多
关键词 异性 稳定性研究 个体 Southern印迹杂交 小卫星探针 DNA指纹图 人类基因组 DNA片段 探针杂交 生殖细胞 北京地区 可变区 体细胞 高度
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新方法突破复杂基因组装配瓶颈
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作者 朱云芬 《中国家禽》 北大核心 2013年第23期1-1,共1页
尽管DNA测序技术取得了巨大进步,但复杂基因组的装配仍然面临巨大挑战,特别是在使用短片段测序的情况下,会产大量的短DNA片段。美国麻省大学医学院(UMMS)的研究人员利用DNA相互作用的频率数据,开发了更快更准确的基因组装配方法,并成功... 尽管DNA测序技术取得了巨大进步,但复杂基因组的装配仍然面临巨大挑战,特别是在使用短片段测序的情况下,会产大量的短DNA片段。美国麻省大学医学院(UMMS)的研究人员利用DNA相互作用的频率数据,开发了更快更准确的基因组装配方法,并成功将其应用于复杂基因组。研究者利用这一技术给人类基因组的未完成区域补上了65个DNA片段。相关研究成果2013年11月发表于《Nature Biotechnology》。 展开更多
关键词 基因组序列 装配过程 DNA序列 染色体测序 相互作用 物种异性 DNA片段 测序技术
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云南黑山羊性别决定基因体外扩增研究
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作者 兰蓉 杨红远 洪琼花 《云南畜牧兽医》 2004年第4期1-2,共2页
对云南黑山羊 (10♂ ,2♀ )的基因组DNA性别决定基因 (SRY)进行了体外PCR扩增的研究 ,结果表明适当引物可特异性扩增出雄性个体的性别决定基因片段 (大小约为 185bp) ,而对雌性个体则不能扩增出任何片段 ;研究还利用已筛选出的性别决定... 对云南黑山羊 (10♂ ,2♀ )的基因组DNA性别决定基因 (SRY)进行了体外PCR扩增的研究 ,结果表明适当引物可特异性扩增出雄性个体的性别决定基因片段 (大小约为 185bp) ,而对雌性个体则不能扩增出任何片段 ;研究还利用已筛选出的性别决定基因特异性引物对少量的胚胎细胞进行了特异性扩增 ,检测了 2 0枚云南黑山羊的胚胎 ,其中有 5枚胚胎可扩增出约为 185bp的特异性片段。以上结果为山羊胚胎早期性别鉴定奠定了技术基础。 展开更多
关键词 黑山羊 性别决定基因 胚胎 异性引物 性别鉴定 异性片段 基因组DNA 体外扩增 早期 研究
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