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我国A群牛轮状病毒感染的血清流行病学调查 被引量:32
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作者 李鑫 常继涛 +1 位作者 刘海军 于力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期664-667,共4页
为调查A群牛轮状病毒(BRV)在我国不同地区牛群中的感染和流行情况,本研究采用间接ELISA检测2005年~2006年期间在我国12个不同地区收集的1760份牛血清中抗A群BRV抗体。结果显示,其强阳性血清225份(12.8%);中等阳性血清1240份(70.4%);弱... 为调查A群牛轮状病毒(BRV)在我国不同地区牛群中的感染和流行情况,本研究采用间接ELISA检测2005年~2006年期间在我国12个不同地区收集的1760份牛血清中抗A群BRV抗体。结果显示,其强阳性血清225份(12.8%);中等阳性血清1240份(70.4%);弱阳性血清279份(15.9%);阴性血清16份(1%)。总抗体阳性率高达99%。不同地区强阳性、中等阳性及弱阳性血清所占比例有所不同。结果表明,A群BRV在我国牛群中的感染和流行不但非常广泛,而且极为严重。本研究对我国BRV感染进行了较大规模的血清流行病学调查,其结果可为我国犊BRV腹泻疾病的防制提供重要的依据。 展开更多
关键词 a群轮状病毒感染 IGG抗体 ELISA 血清流行病学调查
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甘孜州牦牛源A群轮状病毒的分离和鉴定 被引量:1
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作者 张朝辉 泽仁拥忠 汤承 《草学》 2020年第5期61-67,共7页
本实验的目的是分离甘孜州牦牛源A群轮状病毒(Bovine Rotavirus A,BRVA)并调查其基因型。将BRVA阳性牦牛粪便样本接种于MA-104细胞,用间接免疫荧光和RT-PCR进行病毒的鉴定,并扩增分离毒株VP4和VP7基因片段,测序确定其基因型。结果显示:... 本实验的目的是分离甘孜州牦牛源A群轮状病毒(Bovine Rotavirus A,BRVA)并调查其基因型。将BRVA阳性牦牛粪便样本接种于MA-104细胞,用间接免疫荧光和RT-PCR进行病毒的鉴定,并扩增分离毒株VP4和VP7基因片段,测序确定其基因型。结果显示:6份样本盲传至第3代后均出现了细胞病变,连续传至7代后细胞病变稳定,表现为细胞圆缩,细胞大面积脱落;间接免疫荧光和RT-PCR鉴定结果显示成功分离到6株牦牛源BRVA。6株病毒的G型均为G6型,其中3个毒株的P型为P[1]型,另外3株未能确定P型。本研究为甘孜州牦牛BRVA的分子流行病学调查及其防控提供了参考。 展开更多
关键词 牛a群轮状病毒 分离鉴定 基因型
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P[1]型A群牛轮状病毒VP8重组蛋白的表达与免疫原性研究 被引量:3
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作者 姜晓明 汤承 岳华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第5期1970-1976,共7页
【目的】利用原核表达系统表达P[1]型A群牛轮状病毒(BRVA)VP8重组蛋白,并评价其反应原性与免疫原性。【方法】根据国内流行毒株RVA/Cow-tc/CHN/SDA2/2018/G6P[1]VP8基因序列(GenBank登录号:MN937517)进行密码子偏好性优化,构建P[1]型BRV... 【目的】利用原核表达系统表达P[1]型A群牛轮状病毒(BRVA)VP8重组蛋白,并评价其反应原性与免疫原性。【方法】根据国内流行毒株RVA/Cow-tc/CHN/SDA2/2018/G6P[1]VP8基因序列(GenBank登录号:MN937517)进行密码子偏好性优化,构建P[1]型BRVA VP8大肠杆菌原核表达系统,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE分析重组蛋白表达形式。镍琼脂糖亲和层析纯化重组蛋白,Western blotting鉴定重组蛋白与兔抗G6P[1]型BRVA血清特异性结合能力,并将P[1]型BRVA VP8重组蛋白免疫兔,首免后2周加强免疫1次,共免疫2次。分别用间接ELISA方法与中和试验评价其免疫原性。【结果】本研究成功构建P[1]型BRVA VP8重组蛋白的原核表达系统;SDS-PAGE结果显示,高效表达大小为20 ku的P[1]型BRVA VP8重组蛋白,以可溶形式存在;Western blotting结果显示,P[1]型BRVA VP8重组蛋白能与兔抗G6P[1]型BRVA血清特异性结合;间接ELISA结果显示,P[1]型BRVA VP8重组蛋白亚单位疫苗能诱导兔产生抗体,兔首免1周后抗体开始出现并迅速上升,于第3周达到高峰,至第5周仍维持在较高水平;中和试验结果显示,第2次免疫后抗体最高的兔血清对G6P[1]型和G8P[1]型BRVA的中和效价分别为1∶17783和1∶64。【结论】本研究成功构建原核表达系统表达P[1]型BRVA VP8重组蛋白,并证实其具有良好的反应原性及免疫原性,为研制BRVA亚单位疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 a群轮状病毒(BRVA) P1型 VP8蛋白 原核表达 免疫原性
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A群牛轮状病毒胶体金免疫层析快速诊断方法的建立与初步应用 被引量:2
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作者 曹雷 崔晓辰 +1 位作者 于志海 胡士林 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期36-40,共5页
为建立A群牛轮状病毒(BRV)快速诊断方法,采用不连续蔗糖密度梯度离心法纯化的A群牛轮状病毒为抗原,利用淋巴细胞杂交瘤技术,制备了能够稳定分泌抗BRV抗体的5株杂交瘤细胞系,将其分别命名为1D5,1B5,1G9,1C7和3C10。用直径20 nm的胶体金... 为建立A群牛轮状病毒(BRV)快速诊断方法,采用不连续蔗糖密度梯度离心法纯化的A群牛轮状病毒为抗原,利用淋巴细胞杂交瘤技术,制备了能够稳定分泌抗BRV抗体的5株杂交瘤细胞系,将其分别命名为1D5,1B5,1G9,1C7和3C10。用直径20 nm的胶体金颗粒标记提纯的BRV单克隆抗体1G9并制备金标垫,同时将BRV高免阳性血清与羊抗鼠IgG结合于硝酸纤维素膜上,组装BRV诊断试纸条;试验结果表明,该试纸条只能检测出BRV,且检测下限可达5.3μg/mL,其他对照病毒检测结果均为阴性;表明本试验建立的A群牛轮状病毒胶体金免疫层析技术(GICA)快速诊断方法特异性强,临床应用效果好。 展开更多
关键词 a群轮状病毒 胶体金 GICA 单克隆抗体
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检测牛5种腹泻病毒的多重RT-PCR方法的建立及应用 被引量:19
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作者 孙吉 岳华 汤承 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期209-218,共10页
牛A群轮状病毒(BRVA)、牛冠状病毒(BCoV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛诺瓦病毒(BNoV)和牛纽布病毒(BNeV)是引起犊牛腹泻的常见病毒,且临床上多存在混合感染的情况。本试验的目的是建立可以同时检测上述5种病毒的多重PCR方法。通过设计... 牛A群轮状病毒(BRVA)、牛冠状病毒(BCoV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛诺瓦病毒(BNoV)和牛纽布病毒(BNeV)是引起犊牛腹泻的常见病毒,且临床上多存在混合感染的情况。本试验的目的是建立可以同时检测上述5种病毒的多重PCR方法。通过设计引物,优化反应体系和条件,成功建立了可同时检测BRVA、BCoV、BVDV、BNoV和BNeV的多重PCR方法。该方法只特异性检出目标病毒,而对牛星状病毒、牛嵴病毒、牛细小病毒、产肠毒素大肠杆菌、沙门菌和空肠弯曲杆菌等腹泻病原均无扩增,具有良好的特异性和稳定性。对BRVA、BCoV、BVDV、BNoV、BNeV的最低检测下限分别为1.63×10^(5)、2.0×10^(6)、1.9×10^(5)、1.96×10^(5)和2.0×10^(5)copies·μL^(-1)。比较试验表明,该多重RT-PCR方法与检测单一病毒的RT-PCR方法的符合率为100%。利用该方法对2019—2020年采集自川西北草原的220份牦牛腹泻样本的检测结果表明,BRV的检出率为40.5%、BNoV的检出率为5.9%、BNeV的检出率为4.5%,而BVDV和BCoV无检出。本研究建立的多重RT-PCR方法可同时检测犊牛腹泻粪便样品中的5种常见腹泻病毒,为牛腹泻的快速诊断提供了技术支持。 展开更多
关键词 牛a群轮状病毒 冠状病毒 病毒性腹泻病毒 诺瓦病毒 纽布病毒 多重RT-PCR
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