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检测牛边缘无浆体抗体的竞争抑制ELISA方法的建立
1
作者
倪宏波
王冰
+4 位作者
姜海芳
周玉龙
王春仁
宫大庆
钱爱东
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期289-292,共4页
为建立检测牛边缘无浆体(Anaplasma marginale)抗体的方法,本研究以牛A.marginale膜表面重组MSP5蛋白作为包被抗原,抗MSP5单克隆抗体(MAb)作为竞争抗体,建立一种用于检测牛A.marginale抗体的重组MSP5蛋白竞争抑制ELISA(CI-ELISA)方法。...
为建立检测牛边缘无浆体(Anaplasma marginale)抗体的方法,本研究以牛A.marginale膜表面重组MSP5蛋白作为包被抗原,抗MSP5单克隆抗体(MAb)作为竞争抗体,建立一种用于检测牛A.marginale抗体的重组MSP5蛋白竞争抑制ELISA(CI-ELISA)方法。经优化确定CI-ELISA的最佳反应条件为:抗原包被浓度为2μg/孔,封闭液为2%脱脂乳,MAb的稀释度为1∶400,酶标二抗的稀释度为1∶1000,阴性和阳性血清临界值分别为33%和40%;该方法具有良好的特异性和重复性;2348份临床血清样品的检测结果表明,217份为阳性,阳性率为9.2%,与IDEXX A.marginale抗体检测试剂盒的阳性符合率为95.3%,阴性符合率为100%。本实验建立的ELISA方法具有较高的特异性和重复性,可用于流行病学调查研究。
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关键词
牛边缘无浆体
竞争抑制ELISA
重组MSP5蛋白
流行病学调查
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职称材料
实时荧光PCR检测牛边缘无浆体方法的建立及应用
被引量：
5
2
作者
王贵强
李树清
+5 位作者
张子群
陈志飞
由轩
王巧全
杜凯
姚宝安
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第8期634-636,654,共4页
根据牛边缘无浆体表面蛋白4的保守基因序列设计特异引物AMOC9/AMOC5、AMOC10/AMOC12和特异性探针MP,首次建立了牛边缘无浆体的实时荧光PCR检测方法,检测DNA的最低限度为200 fg。对中央无浆体、绵羊无浆体、牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、...
根据牛边缘无浆体表面蛋白4的保守基因序列设计特异引物AMOC9/AMOC5、AMOC10/AMOC12和特异性探针MP,首次建立了牛边缘无浆体的实时荧光PCR检测方法,检测DNA的最低限度为200 fg。对中央无浆体、绵羊无浆体、牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、羊莫氏巴贝斯虫、山羊泰勒虫、温氏附红细胞体、东方巴贝斯虫、刚地弓形虫和伊氏锥虫进行检测,无荧光检测信号。本研究用所建立的方法检测采自江苏和哈尔滨的180份抗凝血(奶牛和肉牛),其阳性率为8.9%。结果表明,建立的实时荧光PCR检测牛边缘无浆体的方法具有较高的特异性和敏感性,可用于牛边缘无浆体病的流行病学调查、检疫和监测。
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关键词
牛边缘无浆体
实时荧光PCR
TAQMAN-MGB探针
检测
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职称材料
题名
检测牛边缘无浆体抗体的竞争抑制ELISA方法的建立
1
作者
倪宏波
王冰
姜海芳
周玉龙
王春仁
宫大庆
钱爱东
机构
吉林农业大学动物科技学院
黑龙江八一农垦大学动物科技学院
黑龙江农垦职业学院食品工程系
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期289-292,共4页
基金
吉林省科技发展计划项目(20100220)
黑龙江省科技厅实验动物青年基金项目(PC07S09)
文摘
为建立检测牛边缘无浆体(Anaplasma marginale)抗体的方法,本研究以牛A.marginale膜表面重组MSP5蛋白作为包被抗原,抗MSP5单克隆抗体(MAb)作为竞争抗体,建立一种用于检测牛A.marginale抗体的重组MSP5蛋白竞争抑制ELISA(CI-ELISA)方法。经优化确定CI-ELISA的最佳反应条件为:抗原包被浓度为2μg/孔,封闭液为2%脱脂乳,MAb的稀释度为1∶400,酶标二抗的稀释度为1∶1000,阴性和阳性血清临界值分别为33%和40%;该方法具有良好的特异性和重复性;2348份临床血清样品的检测结果表明,217份为阳性,阳性率为9.2%,与IDEXX A.marginale抗体检测试剂盒的阳性符合率为95.3%,阴性符合率为100%。本实验建立的ELISA方法具有较高的特异性和重复性,可用于流行病学调查研究。
关键词
牛边缘无浆体
竞争抑制ELISA
重组MSP5蛋白
流行病学调查
Keywords
bovine Anaplasma marginale
competitive inhibition ELISA
recombinant MSP5 protein
epidemiological survey
分类号
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
实时荧光PCR检测牛边缘无浆体方法的建立及应用
被引量：
5
2
作者
王贵强
李树清
张子群
陈志飞
由轩
王巧全
杜凯
姚宝安
机构
华中农业大学
上海出入境检验检疫局
黑龙江省出入境检验检疫局
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第8期634-636,654,共4页
基金
国家标准专项上海地方实施项目(04DZ05017)
国家质检总局课题(2005IK179)
文摘
根据牛边缘无浆体表面蛋白4的保守基因序列设计特异引物AMOC9/AMOC5、AMOC10/AMOC12和特异性探针MP,首次建立了牛边缘无浆体的实时荧光PCR检测方法,检测DNA的最低限度为200 fg。对中央无浆体、绵羊无浆体、牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、羊莫氏巴贝斯虫、山羊泰勒虫、温氏附红细胞体、东方巴贝斯虫、刚地弓形虫和伊氏锥虫进行检测,无荧光检测信号。本研究用所建立的方法检测采自江苏和哈尔滨的180份抗凝血(奶牛和肉牛),其阳性率为8.9%。结果表明,建立的实时荧光PCR检测牛边缘无浆体的方法具有较高的特异性和敏感性,可用于牛边缘无浆体病的流行病学调查、检疫和监测。
关键词
牛边缘无浆体
实时荧光PCR
TAQMAN-MGB探针
检测
Keywords
Anaplasma marginale
real-time PCR
TaqMan-MGB
detection
分类号
S852.7 [农业科学—基础兽医学]
S854.44 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
检测牛边缘无浆体抗体的竞争抑制ELISA方法的建立
倪宏波
王冰
姜海芳
周玉龙
王春仁
宫大庆
钱爱东
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
实时荧光PCR检测牛边缘无浆体方法的建立及应用
王贵强
李树清
张子群
陈志飞
由轩
王巧全
杜凯
姚宝安
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
5
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职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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