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牛轮状病毒UK株NSP1基因序列分析及原核表达
被引量：
2
1
作者
冉旭华
曹思
+4 位作者
张峣
魏晓曼
闻晓波
倪宏波
朱战波
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015年第5期1104-1109,共6页
轮状病毒是引起多种幼龄动物及5周龄以下儿童腹泻的主要病原体。NSP1非结构蛋白是轮状病毒基因5的产物,为长约55ku的RNA结合蛋白。现已发现NSP1蛋白是一种毒力决定因子,可颉颃宿主先天性免疫应答。参照GenBank收录的牛轮状病毒UK株序列...
轮状病毒是引起多种幼龄动物及5周龄以下儿童腹泻的主要病原体。NSP1非结构蛋白是轮状病毒基因5的产物,为长约55ku的RNA结合蛋白。现已发现NSP1蛋白是一种毒力决定因子,可颉颃宿主先天性免疫应答。参照GenBank收录的牛轮状病毒UK株序列设计并合成1对特异性引物,本试验利用RT-PCR方法扩增牛轮状病毒UK株NSP1基因,克隆入pET-28a(+)表达载体,经双酶切和测序鉴定,并利用分子生物学软件进行同源性比对分析。本试验结果显示获得的NSP1基因全长编码区序列为1 473bp,编码491个氨基酸,与美国WC3株同源性最高。将阳性重组质粒转入E.coli Rosetta(DE3)宿主菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blotting对重组蛋白进行分析,结果表明重组蛋白分子质量约为55ku,以包涵体形式表达,可与鼠抗His-tag抗体反应。本试验成功获得牛轮状病毒UK株NSP1基因,且实现了在原核表达系统中高效表达重组蛋白,本试验结果为研究NSP1蛋白在细胞内定位与其活性之间的相互关系奠定了基础。
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关键词
牛轮状病毒uk株
NSP1
序列分析
原核表达
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题名
牛轮状病毒UK株NSP1基因序列分析及原核表达
被引量：
2
1
作者
冉旭华
曹思
张峣
魏晓曼
闻晓波
倪宏波
朱战波
机构
黑龙江八一农垦大学预防兽医学省重点实验室
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015年第5期1104-1109,共6页
基金
国家自然科学青年基金(31201909)
黑龙江博士后科研启动资助项目(LBH-Q13134)
黑龙江省自然科学青年基金(QC2013C028)
文摘
轮状病毒是引起多种幼龄动物及5周龄以下儿童腹泻的主要病原体。NSP1非结构蛋白是轮状病毒基因5的产物,为长约55ku的RNA结合蛋白。现已发现NSP1蛋白是一种毒力决定因子,可颉颃宿主先天性免疫应答。参照GenBank收录的牛轮状病毒UK株序列设计并合成1对特异性引物,本试验利用RT-PCR方法扩增牛轮状病毒UK株NSP1基因,克隆入pET-28a(+)表达载体,经双酶切和测序鉴定,并利用分子生物学软件进行同源性比对分析。本试验结果显示获得的NSP1基因全长编码区序列为1 473bp,编码491个氨基酸,与美国WC3株同源性最高。将阳性重组质粒转入E.coli Rosetta(DE3)宿主菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blotting对重组蛋白进行分析,结果表明重组蛋白分子质量约为55ku,以包涵体形式表达,可与鼠抗His-tag抗体反应。本试验成功获得牛轮状病毒UK株NSP1基因,且实现了在原核表达系统中高效表达重组蛋白,本试验结果为研究NSP1蛋白在细胞内定位与其活性之间的相互关系奠定了基础。
关键词
牛轮状病毒uk株
NSP1
序列分析
原核表达
Keywords
bovine rotavirus
uk
strain
NSP1
sequence analysis
prokaryotic expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛轮状病毒UK株NSP1基因序列分析及原核表达
冉旭华
曹思
张峣
魏晓曼
闻晓波
倪宏波
朱战波
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015
2
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