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基于牛结节性皮肤病病毒ORF61基因荧光定量检测方法的建立 被引量：2
1
作者 马春玲 任善会 +7 位作者 杨雪 蔺玉刚 李积雲 王相伟 殷相平 孙跃峰 万学瑞 陈豪泰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1800-1809,共10页
基于国内流行的牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)的基因组序列,建立了靶向ORF61基因的MGB探针荧光定量PCR检测方法。本研究基于LSDV基因序列设计出带有MGB探针的特异性荧光定量PCR引物,并进行特异性和灵敏性筛选验... 基于国内流行的牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)的基因组序列,建立了靶向ORF61基因的MGB探针荧光定量PCR检测方法。本研究基于LSDV基因序列设计出带有MGB探针的特异性荧光定量PCR引物,并进行特异性和灵敏性筛选验证。最终,筛选得到靶向于LSDV ORF61基因的一对qPCR引物;利用pCAGGS-ORF61真核表达质粒,获得标准曲线y=-3.287 5x+47.87,线性相关系数R^(2)=0.998 6,扩增效率达101%;荧光定量PCR特异性、重复性和灵敏性试验结果表明,该引物的特异性高、重复性良好和灵敏度高等优点;该引物的最低检测限为6.71拷贝·μL^(-1),各批次内与批次间重复性结果的变异系数均小于2%。以上结果表明,作者建立特异性LSDV的荧光定量PCR检测方法,为LSD预防和控制提供有效的检测手段。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 ORF61 MGB探针 荧光定量PCR
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应用Cre-LoxP系统构建牛结节性皮肤病病毒缺失TK基因毒株 被引量：1
2
作者 张玉哲 任善会 +10 位作者 姚威 龚真莉 张红强 柳民意 尤婷 王相伟 李积雲 殷相平 孙跃峰 陈豪泰 万学瑞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4517-4529,共13页
利用同源重组技术及Cre-LoxP系统平台,构建牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)缺失TK基因毒株,为研制出安全、高效的LSDV基因工程疫苗提供备选毒株。以TK基因为靶基因,利用Cre-LoxP系统平台,红色荧光蛋白(RFP)为筛选标... 利用同源重组技术及Cre-LoxP系统平台,构建牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)缺失TK基因毒株,为研制出安全、高效的LSDV基因工程疫苗提供备选毒株。以TK基因为靶基因,利用Cre-LoxP系统平台,红色荧光蛋白(RFP)为筛选标记,采用重叠PCR方法扩增左、右同源臂以及RFP基因表达框并进行融合,将其克隆至pUC19T载体,构建基因缺失转移载体pUC19T-LSDV-ΔTK-RFP。将转移载体重组质粒转染至Vero细胞,并感染LSDV/CHA/FJ/2021毒株,构建LSDV-ΔTK-RFP重组病毒。采取蚀斑法、有限稀释法纯化LSDV-ΔTK-RFP。然后,利用Cre-LoxP系统,在MDBK-Cre细胞中从病毒基因组中切除RFP标签,采取蚀斑法和有限稀释法筛选并纯化LSDV-ΔTK毒株。利用PCR及测序方法对重组毒株进行鉴定,并测定其一步生长曲线。结果表明成功构建缺失TK基因的重组毒株(LSDV-ΔTK),重组毒株复制力略低于野生毒株。应用Cre-LoxP系统构建的缺失TK基因LSDV毒株,具有良好的遗传稳定性和复制生长特性,为后续LSDV基因工程疫苗的研制提供了候选毒株,同时拓展了Cre-LoxP系统的应用范围。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 TK基因 CRE/LOXP系统 重组毒株
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牛结节性皮肤病病毒ORF123基因缺失重组病毒的构建及增殖能力分析
3
作者 王芳萍 任善会 +7 位作者 郜晓虹 杨雪 李积雲 王相伟 殷相平 孙跃峰 陈豪泰 万学瑞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4530-4541,共12页
旨在通过缺失牛结节性皮肤病病毒(LSDV)ORF123基因,分析其增殖能力,为LSDV ORF123功能研究奠定基础。本研究利用同源重组,以ORF123基因作为靶标,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为筛选标记,采用融合PCR方法,扩增同源左右臂序列以及EGFP基因表... 旨在通过缺失牛结节性皮肤病病毒(LSDV)ORF123基因,分析其增殖能力,为LSDV ORF123功能研究奠定基础。本研究利用同源重组,以ORF123基因作为靶标,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为筛选标记,采用融合PCR方法,扩增同源左右臂序列以及EGFP基因表达框,克隆至pUC-19T载体,构建基因缺失转移载体pH5-LSDVΔORF123-EGFP质粒。然后将pH5-LSDVΔORF123-EGFP质粒转染至Vero细胞,并感染LSDV/CHA/FJ/2021毒株,利用蚀斑、梯度稀释和挑取绿色荧光单克隆细胞筛选纯化重组毒株,并鉴定其遗传稳定性和增殖能力。结果显示,利用EGFP筛选标记,通过多次挑斑筛选纯化获得ORF123基因缺失的重组病毒株LSDVΔORF123-EGFP。该重组病毒至少在8代细胞传代中能稳定表达绿色荧光蛋白,接种MDBK细胞后绘制一步增殖曲线表明该重组病毒滴度略低于亲本毒株。本研究成功获得ORF123基因缺失的重组病毒株LSDVΔORF123-EGFP,为LSDV ORF123蛋白生物学功能研究以及减毒活疫苗的研制奠定基础。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 ORF123基因 增殖能力 同源重组 重组病毒
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携带eGFP基因的重组牛结节性皮肤病病毒的构建及其生长特性研究
4
作者 莘若兰 周祉玉 +6 位作者 张嘉雯 杜吉革 印春生 王凤雪 陈小云 温永俊 朱真 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期5479-5488,共10页
【目的】筛选可高效率表达重组牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)的不同启动子/细胞组合,据此构建携带增强绿色荧光蛋白(eGFP)基因的重组LSDV,并探究其生长特性,为后续抗病毒药物的开发以及病毒复制和作用机制的研究... 【目的】筛选可高效率表达重组牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)的不同启动子/细胞组合,据此构建携带增强绿色荧光蛋白(eGFP)基因的重组LSDV,并探究其生长特性,为后续抗病毒药物的开发以及病毒复制和作用机制的研究奠定基础。【方法】利用融合PCR方法分别将羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)启动子、LSDV启动子与eGFP基因进行连接,用以替换LSDV 005基因,构建同源重组片段,并将其分别转染至感染LSDV的非洲绿猴肾细胞(Vero)、非洲绿猴肾细胞衍生株(Vero-E6)、牛肾细胞(MDBK)、仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)、羊睾丸细胞(LT)和原代羊睾丸细胞(PLT)6种细胞中,通过荧光显微镜观察转染效果,并使用ImageJ软件统计荧光面积百分比,筛选出最优启动子/细胞组合。以筛选出的最优组合进行重组病毒转染,并检测病毒纯化效果,进一步探究重组病毒的生长特性和稳定性。【结果】在6种细胞中LSDV启动子的转染效果均优于ORFV启动子,且在PLT细胞中,LSDV启动子的荧光面积百分比最高(8.38%),与其他组细胞相比差异显著(P<0.05)。使用LSDV启动子/PLT细胞组合构建重组病毒LSDV-Δ005/eGFP,纯化后在倒置荧光显微镜下观察到所有病变部位均带有绿色荧光,荧光面积百分比约为50.8%。病毒的生长特性和稳定性分析结果显示,重组病毒LSDV-Δ005/eGFP在6种细胞中的病变效应以及病毒滴度随时间变化的趋势与野生毒株LSDV/Heilongjiang/2022相似,且在PLT细胞上连续传代10次eGFP基因稳定表达。【结论】利用LSDV启动子/PLT细胞组合构建重组LSDV时效率最佳,据此构建的重组病毒LSDV-Δ005/eGFP生长特性与LSDV野生毒株一致,经10次传代后遗传稳定性良好。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 细胞转染 重组病毒 生长特性
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中国三株牛结节性皮肤病病毒的分离鉴定及其GPCR基因分析
5
作者 周祉玉 杜吉革 +5 位作者 莘若兰 张嘉雯 潘晨帆 印春生 陈小云 朱真 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期5620-5630,共11页
为了解我国牛结节性皮肤病(lumpy skin disease,LSD)田间毒株流行情况及遗传进化情况并观察其生物学特征,本研究对临床疑似发生牛结节性皮肤病的牛皮肤结节样本进行PCR检测、病毒分离、免疫荧光鉴定、电镜观察、GPCR基因测序和遗传进化... 为了解我国牛结节性皮肤病(lumpy skin disease,LSD)田间毒株流行情况及遗传进化情况并观察其生物学特征,本研究对临床疑似发生牛结节性皮肤病的牛皮肤结节样本进行PCR检测、病毒分离、免疫荧光鉴定、电镜观察、GPCR基因测序和遗传进化分析。结果表明:利用原代羊睾丸细胞(PLT)分离得到3株牛结节性皮肤病病毒(LSDV),分别命名为LSDV/Heilongjiang/2022株、LSDV/Jiling/2022株和LSDV/Jiangxi/2022株,对三株病毒进行一步生长曲线测定,前96 h病毒增长速度最快,96~120 h时滴度最高,之后病毒生长速度开始减缓,接种96 h后滴度最高,三株病毒分别可达到10^(6.0)TCID_(50)·mL^(-1)、10^(5.3)TCID_(50)·mL^(-1)和105.1 TCID_(50)·mL^(-1)。透射电镜下病毒粒子呈椭圆形,病毒直径为200~300 nm。将三株病毒GPCR基因序列与中国各地区以及近年其他国家流行毒株进行遗传进化分析,三株分离株与中国各地区毒株均处于同一分支上,说明中国各地区牛结节性皮肤病的流行有很强的相关性。本研究成功从黑龙江、吉林及江西三省牛皮肤结节病料中分离出三株LSDV,丰富了我国LSDV的流行病学及病原学数据,并对LSDV的持续监测与新型疫苗研发工作有参考意义。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 分离鉴定 生物学特征 遗传进化分析
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牛结节性皮肤病血清学检测方法研究进展
6
作者 任炜杰 邹艳丽 +4 位作者 刘春菊 刘珊 赵永刚 李金明 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2024年第5期59-63,共5页
目前,牛结节性皮肤病对我国养牛业形成较大威胁。血清学方法是便捷、敏感、经济的牛结节性皮肤病检测方法,对于疫病及时发现与疫苗免疫效果评估至关重要。本文着重介绍了牛结节性皮肤病各类常用血清学检测方法的研究进展,分析了各方法... 目前,牛结节性皮肤病对我国养牛业形成较大威胁。血清学方法是便捷、敏感、经济的牛结节性皮肤病检测方法,对于疫病及时发现与疫苗免疫效果评估至关重要。本文着重介绍了牛结节性皮肤病各类常用血清学检测方法的研究进展,分析了各方法的优缺点及适用场景。病毒中和试验(VNT)作为该病的抗体检测金标准,试验周期长,操作要求严格,在基层实验室无法使用,较适用于可疑病例确诊;酶联免疫吸附试验(ELISA)操作简单,反应时间短,适用于大批量样品检测,但蛋白抗原免疫机制研究不足,方法不够成熟;间接免疫荧光抗体试验(IFAT)敏感性较高,但特异性稍低,难以用于临床检测;免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)可以检测一定规模的样品,但其结果需要单孔镜检,不如ELISA结果一目了然;免疫印迹试验(WB)可以鉴别副痘病毒,但操作繁琐,难以用于大批量检测。目前看,ELISA在牛结节性皮肤病临床血清学检测应用上有着绝对优势。今后需要加强牛结节性皮肤病病毒的基础研究,摸清各蛋白的免疫机制,筛选出有效、敏感的抗原,以建立适于基层大规模抗体检测的方法。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病 山羊痘病毒 绵羊痘病毒 血清学检测
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2018-2022年全球牛结节性皮肤病流行状况 被引量：1
7
作者 薛银 吴贇竑 +4 位作者 裘丞军 孙冰冰 陈洁 赵灵燕 张传亮 《中国动物检疫》 CAS 2024年第5期1-5,34,共6页
牛结节性皮肤病(LSD)是由牛结节性皮肤病病毒(LSDV)感染引起的一种急性、亚急性传染病,2019年传入我国。为了解全球LSD疫情流行形势,根据世界动物卫生(WOAH)全球动物卫生信息系统(WAHIS)及有关文献资料,分析了近5年全球LSD流行状况。201... 牛结节性皮肤病(LSD)是由牛结节性皮肤病病毒(LSDV)感染引起的一种急性、亚急性传染病,2019年传入我国。为了解全球LSD疫情流行形势,根据世界动物卫生(WOAH)全球动物卫生信息系统(WAHIS)及有关文献资料,分析了近5年全球LSD流行状况。2018—2022年全球共有64个国家/地区累计报告发生75555起LSD疫情,其中亚洲占45.31%(29/64),非洲占53.12%(34/64),共有3552637头动物被感染;亚洲报告发生LSD疫情的国家/地区数量整体呈上升态势,疫情流行强度呈加剧之势,尤其是我国周边国家;非洲LSD疫情趋于稳定,每年的疫情报告数量较为均衡,整体呈下降趋势;欧洲疫情得到有效控制,仅俄罗斯报告发生零星散发疫情。鉴于周边国家疫情严重,以及LSD的传播与畜产品贸易流通、动物迁徙、媒介生物、免疫屏障等因素息息相关,我国应从监测预警、虫媒消杀、流通控制和疫苗免疫等方面进一步加强LSD防控,防止该病对我国养牛业造成重大损害。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病 流行状况 全球
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牛结节性皮肤病的诊断防控研究 被引量：1
8
作者 胡小慧 邓瑞雪 +3 位作者 潘玉平 贾怀杰 安芳兰 刘学荣 《中国畜禽种业》 2024年第1期135-140,共6页
2019年8月10日,第一例牛结节性皮肤病在我国新疆伊犁哈萨克自治州确诊,此后疫情迅速蔓延至国内其他多个省份,牛群感染后严重影响皮张质量和产奶量,给养殖户造成重大经济损失。该文梳理了现有牛结节性皮肤病应用较为广泛的诊断方法及防... 2019年8月10日,第一例牛结节性皮肤病在我国新疆伊犁哈萨克自治州确诊,此后疫情迅速蔓延至国内其他多个省份,牛群感染后严重影响皮张质量和产奶量,给养殖户造成重大经济损失。该文梳理了现有牛结节性皮肤病应用较为广泛的诊断方法及防控措施的研究进展,主要从临床综合诊断、实验室诊断、防控难点和防控建议等方面进行阐述。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 诊断 血清学 分子生物学
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牛结节性皮肤病免疫抗体监测的Meta分析
9
作者 沈鹏 王艺 +3 位作者 任炜杰 杨永春 宋厚辉 王志亮 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3649-3658,共10页
疫苗接种是预防牛结节性皮肤病(lumpy skin disease, LSD)的重要措施,但是疫苗接种后诱导的体液免疫应答水平参差不齐,目前尚缺乏评价疫苗免疫效果的有效手段。本文使用R软件利用Meta分析对已发表的LSD免疫抗体监测结果进行统计,并进行... 疫苗接种是预防牛结节性皮肤病(lumpy skin disease, LSD)的重要措施,但是疫苗接种后诱导的体液免疫应答水平参差不齐,目前尚缺乏评价疫苗免疫效果的有效手段。本文使用R软件利用Meta分析对已发表的LSD免疫抗体监测结果进行统计,并进行亚组分析,综合评价免疫抗体监测的意义。通过计算机分别检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普中文科技期刊数据库、PubMed、Web of science等中英文数据库,检索时限截止至2023年7月,收集LSD免疫抗体监测的相关文献,根据制定的文献纳入与排除标准,共纳入符合筛选条件的文献24篇,涉及羊痘疫苗的文献共有13篇,涉及LSD疫苗的文献共有13篇,其中2篇文献同时涉及羊痘疫苗和LSD疫苗,包含8 638例样本,其中阳性样本2 782份,结局指标为免疫抗体阳性率。Meta分析结果显示,羊痘疫苗的免疫抗体水平为41%(95%CI:27%~55%),LSD疫苗的免疫抗体水平为73%(95%CI:64%~86%),各文献间的同质性较低,两种疫苗之间无显著性差异(P=0.59),与羊痘疫苗接种(P=0.12)和LSD疫苗接种(P=0.077)相关的文献均提示未存在明显发表偏移;按养殖环境和检测方法分类进行亚组分析,不同养殖环境(P=0.84)和检测方法(P=0.40)均无显著性差异,两亚组均非异质性的主要来源。本文结果提示,使用免疫抗体监测方法评价免疫效果存在较大的不确定性,在实际工作中需要综合分析研判。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病 羊痘 疫苗 免疫 抗体监测 META分析
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牛结节性皮肤病病毒检测及蠓、蚊携带病毒调查 被引量：5
10
作者 李楠 孟锦昕 +4 位作者 王建聂 何于雯 杨绍昌 吕顺燕 王静林 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期4179-4187,共9页
【目的】了解牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)在自然感染状况下病牛的带毒状况及其潜在的传播媒介种类,为牛结节性皮肤病防控提供参考依据。【方法】于2021年7月在云南省文山市采集疑似发病牛不同组织类型标本,2020... 【目的】了解牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)在自然感染状况下病牛的带毒状况及其潜在的传播媒介种类,为牛结节性皮肤病防控提供参考依据。【方法】于2021年7月在云南省文山市采集疑似发病牛不同组织类型标本,2020年8月和2021年7月~2021年8月分别在云南省昆明市、文山市和双江县采集疑似LSDV感染的牛圈舍蠓、蚊标本,并进行形态学鉴定。采用实时荧光定量PCR方法检测发病牛不同组织及库蠓、库蚊标本中LSDV核酸;采用LSDV127基因特异引物对皮肤结节标本进行PCR扩增及测序;利用DNAStar和Mega 6.0等软件进行核苷酸序列相似性比对和系统进化分析。【结果】3头发病牛全血、血清、鼻拭子和皮肤结节标本中均检测到LSDV核酸,且皮肤结节标本中LSDV核酸扩增曲线信号最强;LSDV127基因序列分析结果显示,3份皮肤结节标本(17、18和19)的病毒核苷酸序列相似性为100%,与俄罗斯、泰国、越南和南非等LSDV分离株聚为一支,亲缘关系较近,核苷酸序列相似性在99.7%~100%之间。共采集鉴定条带库蠓、连斑库蠓和尖喙库蠓3种,库蠓标本4822只,库蚊标本150只。所有采集自发病牛圈舍的库蠓和库蚊标本LSDV核酸检测结果均为阴性。【结论】在自然感染LSDV的牛中,血液、鼻分泌物和皮肤结节等不同部位都可能为节肢动物媒介获得并传播LSDV提供很好的感染源;蠓、蚊等节肢动物媒介是否参与了当地LSDV的传播有必要进一步调查。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒(lsdv) 蠓 蚊 序列分析
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牛结节性皮肤病的临床特征及防控措施 被引量：2
11
作者 杨明波 《中国动物保健》 2024年第5期32-33,共2页
牛结节性皮肤病,是近年来新流行起来的牛传染性疾病。牛感染之后,可导致奶牛产奶量下降、怀孕期母牛流产、公牛不育、肉牛生产性能下降,病牛体表皮毛失去经济价值,严重影响牛养殖业的经济效益。为有效防控牛结节性皮肤病的发生和流行,... 牛结节性皮肤病,是近年来新流行起来的牛传染性疾病。牛感染之后,可导致奶牛产奶量下降、怀孕期母牛流产、公牛不育、肉牛生产性能下降,病牛体表皮毛失去经济价值,严重影响牛养殖业的经济效益。为有效防控牛结节性皮肤病的发生和流行,笔者结合工作实践,基于牛结节性皮肤病的临床特征、病理变化,并根据流行特点,总结探索其综合防控措施。以期望能为牛结节性皮肤病的防治工作提供参考。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病 临床特征 流行病学特点 防控措施
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牛结节性皮肤病中西医结合诊疗措施 被引量：2
12
作者 李喜平 任晶晶 +1 位作者 冯欣欣 柴中文 《现代农村科技》 2024年第7期85-86,共2页
本文以牛结节性皮肤病实际诊疗案例为研究对象,根据实际工作经验确诊病症,以中西医结合用药技术进行对症治疗,并总结出了一套相对完善的牛结节性皮肤病中西医结合诊疗措施,以期为广大养殖者提供参考。
关键词 牛结节性皮肤病 疫病防控 疫病诊疗 中西医结合
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牛结节性皮肤病防治
13
作者 汪雅琴 汤泽桃 陈雅俊 《现代畜牧科技》 2024年第5期107-109,共3页
牛结节性皮肤病是一种由牛结节性皮肤病病毒引起的近年从中亚传入我国的非人畜共患病。其特征性临床症状主要表现为皮肤、黏膜、器官等表面出现硬实、圆形隆起、界限清楚的结节,其中黏液性分泌物也易引发角膜炎、鼻炎、结膜炎,继而形成... 牛结节性皮肤病是一种由牛结节性皮肤病病毒引起的近年从中亚传入我国的非人畜共患病。其特征性临床症状主要表现为皮肤、黏膜、器官等表面出现硬实、圆形隆起、界限清楚的结节,其中黏液性分泌物也易引发角膜炎、鼻炎、结膜炎,继而形成溃疡,导致出现流涎症状,并伴有皮肤水肿、淋巴结肿大。病理变化主要表现为表皮增生及上皮样细胞浸润,真皮和皮下组织的淋巴管或血管形成栓塞,从而形成淋巴管炎或血管炎。一旦发生将严重制约畜牧业的发展,造成经济损失。为充分认识和做好该病的防控工作,现将该病的流行特点、传播特征及防治措施进行概括介绍,为有效控制和减少该病提供指导。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病 临床症状 防治
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牛结节性皮肤病的预防措施
14
作者 任娟 李琴 +5 位作者 苏晓慧 居马别克 秦菊 美热木古丽 吾那尔汗 李舵 《北方牧业》 2024年第5期43-43,共1页
牛结节性皮肤病是由牛结节性皮肤病毒引起,该病在我国各地养牛场有不同程度的发生。本文结合新疆地区的实际情况,采取开展疫苗规模免疫、加强母源抗体传递、隔离防护易感牛群以及选择联合应用其他疫苗等进行预防取得一定效果,现介绍如下。
关键词 母源抗体 牛群 牛结节性皮肤病 隔离防护 养牛场 预防措施 新疆地区 疫苗
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牛结节性皮肤病的防控措施
15
作者 张胜标 《北方牧业》 2024年第22期33-33,共1页
牛结节性皮肤病是一类特殊病毒所诱发的传染病,主要症状包括皮肤上出现结节和体温升高等。此疾病在牛中易造成较高的发病率与死亡率,若未及早采取措施,将严重威胁牛的生命健康,同时还会影响养殖户的收入。鉴于此,养殖场(户)必须深刻了... 牛结节性皮肤病是一类特殊病毒所诱发的传染病,主要症状包括皮肤上出现结节和体温升高等。此疾病在牛中易造成较高的发病率与死亡率,若未及早采取措施,将严重威胁牛的生命健康,同时还会影响养殖户的收入。鉴于此,养殖场(户)必须深刻了解牛结节性皮肤病的致病原因与危害,并采取科学的预防措施和治疗策略,保障牛的健康生长。1危害及流行病学由牛结节性皮肤病毒所引起的牛结节性皮肤病是一种急性、高度传染的疾病,传播迅速。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病 高度传染 流行病学 防控措施 预防措施 体温升高 治疗策略 健康生长
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鉴别牛结节性皮肤病病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量：3
16
作者 赵钟毅 闭璟珊 +11 位作者 尹德玮 吕荞 吴健皓 韦正吉 邹联斌 苏姣秀 汪伟 辛佳亮 彭久青 李文静 郑敏 胡传活 《中国动物检疫》 CAS 2023年第2期117-124,共8页
为实现牛结节性皮肤病病毒(LSDV)和羊痘病毒属(CaPV)其他成员的鉴别诊断,针对LSDV 010基因保守区域设计特异性引物及TaqMan探针,与文献报道的CaPV 068基因的通用引物及探针组合,通过优化反应体系和条件,建立了一种可同时鉴别检测LSDV和C... 为实现牛结节性皮肤病病毒(LSDV)和羊痘病毒属(CaPV)其他成员的鉴别诊断,针对LSDV 010基因保守区域设计特异性引物及TaqMan探针,与文献报道的CaPV 068基因的通用引物及探针组合,通过优化反应体系和条件,建立了一种可同时鉴别检测LSDV和CaPV其他成员的双重荧光定量PCR检测方法。结果显示:本方法可以特异性扩增LSDV和CaPV其他成员,并且与其他牛、羊病毒无交叉反应,特异性好;对pLSDV-010和pCaPV-068质粒标准品的最低检测限均为15 copies/μL,具有较高的灵敏性;组内和组间变异系数均小于1.75%,重复性良好。应用本试验建立的方法与荧光定量PCR方法同时检测542份临床样品,发现CaPV的样品符合率为98.52%,LSDV为99.63%。本试验建立的方法为CaPV鉴别筛查、LSDV精准防控及流行病学调查提供了快捷有效的技术手段。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 羊痘病毒属 双重荧光定量PCR TAQMAN探针 鉴别检测
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牛结节性皮肤病病毒研究进展 被引量：4
17
作者 周祉玉 沈湛凝 +4 位作者 朱真 杜吉革 张嘉雯 莘若兰 陈小云 《中国兽药杂志》 2023年第8期88-94,共7页
牛结节性皮肤病(LSD)在全世界范围内均有流行和记载,对我国养牛业构成了严重的威胁。接种疫苗是目前防控LSDV最有效的方法,其中减毒活疫苗在许多国家均有使用。近年研究表明,LSDV活疫苗的使用会造成疫苗重组病毒的流行,接种后会引起动... 牛结节性皮肤病(LSD)在全世界范围内均有流行和记载,对我国养牛业构成了严重的威胁。接种疫苗是目前防控LSDV最有效的方法,其中减毒活疫苗在许多国家均有使用。近年研究表明,LSDV活疫苗的使用会造成疫苗重组病毒的流行,接种后会引起动物不同程度的不良反应。对LSDV的病原学特征、分离鉴定方法、流行病学的情况、检测方法以及LSDV疫苗的研究进展进行了阐述,以期为牛结节性皮肤病的免疫预防以及鉴别诊断提供研究思路。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 检测方法 疫苗
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牛结节性皮肤病病毒基因组学研究进展 被引量：5
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作者 翟颀 黄敏霞 +4 位作者 吕殿红 贾春玲 周秀蓉 温肖会 罗胜军 《广东农业科学》 CAS 2022年第7期97-104,共8页
牛结节性皮肤病(Lumpy Skin Disease,LSD)是一种由牛结节性皮肤病病毒(Lumpy Skin Disease Virus,LSDV)引起牛产生结节特征性病变的动物传染病,在东亚、南亚和东南亚等国家广泛流行,对当地养牛业造成严重的经济损失。目前我国将LSD作为... 牛结节性皮肤病(Lumpy Skin Disease,LSD)是一种由牛结节性皮肤病病毒(Lumpy Skin Disease Virus,LSDV)引起牛产生结节特征性病变的动物传染病,在东亚、南亚和东南亚等国家广泛流行,对当地养牛业造成严重的经济损失。目前我国将LSD作为二类动物疫病管理,自2019年以来,国内已有10多个省份报告过LSD疫情,疫情形势十分严峻。当前分离增殖LSDV较优的细胞为牛肾细胞。LSDV为痘病毒科山羊痘病毒属,其病毒粒子大小约为290 nm×270 nm,具有两种存在形态,病毒基因组复杂庞大,约为151 kb,包含150多个基因。目前GenBank数据库中仅保存有40多条LSDV病毒株的全基因组序列信息,流行毒株除了田间野毒株,近年来在亚洲部分地区还出现了田间野毒株和疫苗毒株的重组毒株,并且流行的重组毒株具有致病性,给未来LSD的疫苗研制和防控策略制定提出了新挑战。综述了LSD的病原学,以及非洲、欧洲和亚洲不同地区LSDV毒株全基因组学的研究进展,以期为LSD的防控和深入研究提供参考。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒(lsdv) 病原学 基因组学 测序 重组毒株
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牛结节性皮肤病病毒在BHK-21细胞中的生长特性分析
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作者 马春玲 蔺玉刚 +9 位作者 杨雪 龚真莉 岳亚辉 任善会 王相伟 杨增岐 殷相平 孙跃峰 陈豪泰 万学瑞 《动物医学进展》 北大核心 2022年第9期7-12,共6页
为探究国内流行的牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)野毒株在鼠源BHK-21细胞中的复制生长特性,用间接免疫荧光、蛋白免疫印迹和透射电镜方法,确定了在BHK-21细胞系中能够感染中国流行的LSDV/FJ/CHA/2021毒株。蛋白免... 为探究国内流行的牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)野毒株在鼠源BHK-21细胞中的复制生长特性,用间接免疫荧光、蛋白免疫印迹和透射电镜方法,确定了在BHK-21细胞系中能够感染中国流行的LSDV/FJ/CHA/2021毒株。蛋白免疫印迹和病毒生长曲线结果均表明,LSDV野毒株呈现时间依赖性的方式在BHK-21细胞中进行有效复制。电镜结果证明LSDV病毒工厂位于BHK-21细胞质内而非细胞核内。结果表明,LSDV国内流行毒株能够在BHK-21细胞中进行高效复制,为探究LSDV感染的致病机制、动物模型建立及弱毒疫苗的研制奠定重要理论基础。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 BHK-21细胞 病毒增殖 生长特性
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牛结节性皮肤病病毒感染MDBK细胞后转录组差异表达分析 被引量：4
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作者 曹政 居马别克·夏拉巴依 +1 位作者 李春燕 马力克·艾则孜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期460-468,共9页
旨在探索牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)与宿主细胞的相互作用,采集了具有典型临床症状的牛皮肤病变组织,接种MDBK细胞进行病毒分离,采用透射电镜观察病变组织及病毒感染后的MDBK细胞,同时对感染后24 h的MDBK细胞... 旨在探索牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)与宿主细胞的相互作用,采集了具有典型临床症状的牛皮肤病变组织,接种MDBK细胞进行病毒分离,采用透射电镜观察病变组织及病毒感染后的MDBK细胞,同时对感染后24 h的MDBK细胞进行转录组学分析,筛选差异表达基因并将其按功能分类,分析它们参与的细胞信号通路。结果显示,LSDV在电镜下呈椭圆形,病毒粒子大小约320 nm×260 nm。转录组分析发现,与未处理组相比,显著差异表达的基因共499个,其中,112个基因上调表达,387个基因下调表达。通过GO和KEGG分析得知,差异表达基因主要富集在从细胞表面传导信号至细胞核内部的MAPK信号通路,其中,参与天然免疫且涉及细胞凋亡的MAP3K1基因表达呈现显著下调,提示病毒感染会影响宿主细胞的迁移与凋亡等过程。显著变化基因包括HIF1A、RORA、LRRK2、AP3B1和ANO6等,分别涉及到调节血管内皮生长因子、炎症反应、细胞增殖分化以及信号转导等功能,除此之外,不饱和脂肪酸及胆汁分泌两个信号通路也发生了显著变化。本研究为进一步深入探究LSDV的致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 MDBK细胞 高通量测序 转录组
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