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牛结核杆菌MPB70-ESAT-6融合蛋白的原核表达及抗原反应性分析
被引量：
1
1
作者
姜秀云
董阳
+5 位作者
包艳红
张建宁
方诗文
金海玲
王宁
马红霞
《中国兽药杂志》
2019年第3期7-12,共6页
为增强单个蛋白的抗原性,利用(Gly4Ser)3柔性连接肽将牛结核杆菌MPB70和ESAT-6融合。采用重叠延伸PCR技术将牛结核杆菌mpb70与esat-6基因连接,获得融合基因mpb70-esat-6,连接至T-Vector pMD19中,获得克隆质粒pMD-70-esat-6。经Bam HⅠ、...
为增强单个蛋白的抗原性,利用(Gly4Ser)3柔性连接肽将牛结核杆菌MPB70和ESAT-6融合。采用重叠延伸PCR技术将牛结核杆菌mpb70与esat-6基因连接,获得融合基因mpb70-esat-6,连接至T-Vector pMD19中,获得克隆质粒pMD-70-esat-6。经Bam HⅠ、EcoRⅠ酶切、纯化,并与p ET28a(+)载体连接,构建了pET-70-esat-6重组表达质粒。SDS-PAGE发现,在27.2 ku处表达了融合蛋白MPB70-ESAT-6,Western blotting证实,MPB70-ESAT-6与牛结核阳性血清反应性良好。MPB70-ESAT-6融合蛋白的研究为牛结核病诊断抗原及相关疫苗研究奠定了基础。
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关键词
牛结核杆菌
mpb70基因
esat-6基因
融合蛋白
原核表达
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职称材料
牛结核杆菌mpb-83基因的扩增和表达
2
作者
李树春
斯肯达尔
+5 位作者
杨宏军
何洪斌
王长法
杨少华
高运东
仲跻峰
《山东农业科学》
2010年第6期10-12,共3页
采用PCR方法扩增牛结核杆菌mpb-83基因,并将其连接到T3克隆载体,然后克隆到原核表达载体PET-32 a中,构建重组质粒PET-32 a-mpb-83。以重组质粒转化大肠杆菌BL21,用NI柱纯化,最后纯化产物在SDS-PAGE中检测。结果得到约664 bp的目的片段,...
采用PCR方法扩增牛结核杆菌mpb-83基因,并将其连接到T3克隆载体,然后克隆到原核表达载体PET-32 a中,构建重组质粒PET-32 a-mpb-83。以重组质粒转化大肠杆菌BL21,用NI柱纯化,最后纯化产物在SDS-PAGE中检测。结果得到约664 bp的目的片段,且MPB-83可在大肠杆菌BL21中高效表达。
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关键词
牛结核杆菌
mpb-83基因
克隆
原核表达
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职称材料
题名
牛结核杆菌MPB70-ESAT-6融合蛋白的原核表达及抗原反应性分析
被引量：
1
1
作者
姜秀云
董阳
包艳红
张建宁
方诗文
金海玲
王宁
马红霞
机构
吉林农业大学生命科学学院
长春科技学院生物食品学院
吉林农业大学动物科技学院
出处
《中国兽药杂志》
2019年第3期7-12,共6页
基金
国家自然科学基金项目(No.31572555)
吉林省科技发展计划项目(No.20170101025JC)
+1 种基金
吉林省教育厅科学技术研究项目(No.201441
No.JJKH20170315KJ)
文摘
为增强单个蛋白的抗原性,利用(Gly4Ser)3柔性连接肽将牛结核杆菌MPB70和ESAT-6融合。采用重叠延伸PCR技术将牛结核杆菌mpb70与esat-6基因连接,获得融合基因mpb70-esat-6,连接至T-Vector pMD19中,获得克隆质粒pMD-70-esat-6。经Bam HⅠ、EcoRⅠ酶切、纯化,并与p ET28a(+)载体连接,构建了pET-70-esat-6重组表达质粒。SDS-PAGE发现,在27.2 ku处表达了融合蛋白MPB70-ESAT-6,Western blotting证实,MPB70-ESAT-6与牛结核阳性血清反应性良好。MPB70-ESAT-6融合蛋白的研究为牛结核病诊断抗原及相关疫苗研究奠定了基础。
关键词
牛结核杆菌
mpb70基因
esat-6基因
融合蛋白
原核表达
Keywords
Mycobacterium bovis
mpb70 gene
esat-6 gene
fusion protein
prokaryotic expression
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
牛结核杆菌mpb-83基因的扩增和表达
2
作者
李树春
斯肯达尔
杨宏军
何洪斌
王长法
杨少华
高运东
仲跻峰
机构
新疆农业大学
山东省农业科学院奶牛研究中心
出处
《山东农业科学》
2010年第6期10-12,共3页
基金
山东省中青年科学家基金(BS2009NY002)
山东省农业重大应用技术创新课题(2009)
现代农业产业技术体系(nycytx-0107)资助
文摘
采用PCR方法扩增牛结核杆菌mpb-83基因,并将其连接到T3克隆载体,然后克隆到原核表达载体PET-32 a中,构建重组质粒PET-32 a-mpb-83。以重组质粒转化大肠杆菌BL21,用NI柱纯化,最后纯化产物在SDS-PAGE中检测。结果得到约664 bp的目的片段,且MPB-83可在大肠杆菌BL21中高效表达。
关键词
牛结核杆菌
mpb-83基因
克隆
原核表达
Keywords
Mycobacterium bovis
mbp - 83 gene
Cloning
Prokaryotic expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛结核杆菌MPB70-ESAT-6融合蛋白的原核表达及抗原反应性分析
姜秀云
董阳
包艳红
张建宁
方诗文
金海玲
王宁
马红霞
《中国兽药杂志》
2019
1
在线阅读
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职称材料
2
牛结核杆菌mpb-83基因的扩增和表达
李树春
斯肯达尔
杨宏军
何洪斌
王长法
杨少华
高运东
仲跻峰
《山东农业科学》
2010
0
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职称材料
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