牛白血病病毒env(gp51)基因的克隆和原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量：7

1

作者 周毅 吴玉石 +4 位作者 段宏安 张睿 周祖涛 毕丁仁 石德时 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期538-543,共6页

从持续感染牛白血病病毒(BLV)的羊胎肾细胞(FLK-BLV)中提取前病毒DNA,用PCR方法扩增编码牛白血病病毒gp51蛋白的env(gp51)基因,序列测定结果表明扩增片段全长828 bp。将扩增基因插入原核表达载体pET-32a构建pET-32a-gp51重组质粒,转化BL... 从持续感染牛白血病病毒(BLV)的羊胎肾细胞(FLK-BLV)中提取前病毒DNA,用PCR方法扩增编码牛白血病病毒gp51蛋白的env(gp51)基因,序列测定结果表明扩增片段全长828 bp。将扩增基因插入原核表达载体pET-32a构建pET-32a-gp51重组质粒,转化BL21(DE3)进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果表明重组融合蛋白大小约为43 000,Western-blot结果表明重组表达蛋白具有免疫反应性。以纯化的重组蛋白gp51作为抗原,建立检测BLV抗体的间接ELISA诊断方法。结果表明,抗原gp51的最佳包被浓度为2.19μg.mL-1,血清的最佳稀释倍数为1∶80,阳性判定标准确定为样品OD450 nm大于0.451。用该方法对12份参考血清进行检测,准确率为91.67%。 展开更多

关键词 牛白血病病毒 gp51蛋白 原核表达 间接ELISA

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛奶是牛白血病病毒在细胞间垂直传播的潜在危险因素 被引量：4

2

作者 唐阳国 何融泽 何宝祥 《广西畜牧兽医》 2020年第3期124-124,共1页

牛白血病病毒(Bovine leukemia virus,BLV)是地方流行性牛白血病(Enzootic bovine leukosis,EBL)的病原,该病是牛最常见的肿瘤疾病。它属于逆转录病毒科的Delta逆转录病毒属,该属成员还包括有人类T细胞白血病病毒Ⅰ型和Ⅱ型。大约70%的... 牛白血病病毒(Bovine leukemia virus,BLV)是地方流行性牛白血病(Enzootic bovine leukosis,EBL)的病原,该病是牛最常见的肿瘤疾病。它属于逆转录病毒科的Delta逆转录病毒属,该属成员还包括有人类T细胞白血病病毒Ⅰ型和Ⅱ型。大约70%的BLV感染牛不出现临床症状,而30%的感染牛出现持久淋巴球增多症,其特点是多克隆表达非肿瘤CD5+B淋巴细胞,其中2%~5%经过长时间的潜伏期形成B细胞性白血病或淋巴瘤。 展开更多

关键词 牛白血病病毒 垂直传播 逆转录病毒科 肿瘤疾病 B淋巴细胞 潜在危险因素 临床症状

在线阅读 下载PDF 职称材料

1株体内低水平复制的牛白血病病毒株的全基因组序列

3

作者 Syamalima Dube 晋大鹏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第12期52-52,共1页

选取持续血清媒介物、低病毒载量牛白血病病毒(BLV)感染的阿根廷荷斯坦奶牛的外周血单核细胞,接种BLV株后,经体内感染获得羔羊淋巴细胞并提取基因组DNA。以包含完整BLV病毒的DNA序列设计一组重叠引物进行PCR扩增。扩增的BLV ARG 41 DNA... 选取持续血清媒介物、低病毒载量牛白血病病毒(BLV)感染的阿根廷荷斯坦奶牛的外周血单核细胞,接种BLV株后,经体内感染获得羔羊淋巴细胞并提取基因组DNA。以包含完整BLV病毒的DNA序列设计一组重叠引物进行PCR扩增。扩增的BLV ARG 41 DNA产物经克隆、测序,所获序列与其他的BLV序列(包括一株从阿根廷相同种群中获得的体内高复制病毒株BLV ARG 38)进行比对。本研究还对BLV ARG 41推导蛋白的特性及与逆转录病毒PTLV/BLV属其他种群间的关系进行了探讨。 展开更多

关键词 牛白血病病毒 克隆 测序 阿根廷

在线阅读 下载PDF 职称材料

实验动物感染牛白血病病毒

4

作者 谢慧胜 赵艳茹 《浙江畜牧兽医》 1989年第1期46-46,共1页

家兔在接种白血病病毒感染牛的淋巴细胞或FLK—BLV细胞林后1—4个月出现了抗牛白血病病毒抗体,持续时间至少6个月。仓鼠和豚鼠接种白血病感染牛的淋巴细胞或通过0.

关键词 牛白血病病毒 动物感染 病毒抗体 细胞培养液 持续时间 微孔过滤 血液学异常

在线阅读 下载PDF 职称材料

精心护理新生犊牛控制牛白血病病毒感染

5

作者 M.C.Thurmond 顾有方 《国外畜牧科技》 1992年第6期47-48,共2页

牛白血病病毒(BLV)是一种致瘤性的反转录病毒,能引起牛持续性的淋巴细胞增多症和淋巴肉瘤。控制BLV的重要方法是对犊牛进行适当处理以预防感染,主要是将病毒的传播降至最小范围。

关键词 犊牛 牛白血病病毒 感染

在线阅读 下载PDF 职称材料

两种方法检测牛地方流行性白血病的比较 被引量：3

6

作者 王作佳 赵祥平 +4 位作者 王乃福 张永年 王玉玲 刘亚峰 董志珍 《中国动物检疫》 CAS 2013年第10期74-76,共3页

目的分析ELISA方法和AGID方法检测奶牛地方流行性白血病的一致性。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和琼脂凝胶免疫扩散试验(AGID)两种方法,平行检测来自乌拉圭的3998份奶牛血清中的牛白血病病毒抗体。结果 ELISA和AGID对牛地方流行性... 目的分析ELISA方法和AGID方法检测奶牛地方流行性白血病的一致性。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和琼脂凝胶免疫扩散试验(AGID)两种方法,平行检测来自乌拉圭的3998份奶牛血清中的牛白血病病毒抗体。结果 ELISA和AGID对牛地方流行性白血病病毒抗体的阳性符合率、阴性符合率及总符合率分别达到100%(18/18)、99.42%(3975/3998)、99.87%(3993/3998),表明两种方法的符合率较高,均可用于奶牛地方流行性白血病的诊断和血清学筛查,其中ELISA方法阳性检出率高于AGID方法。 展开更多

关键词 酶联免疫吸附试验(ELISA) 琼脂凝胶免疫扩散试验(AGID) 牛白血病病毒(BLV)

在线阅读 下载PDF 职称材料

奶牛白血病的诊断与防控 被引量：3

7

作者 桑学波 师庆伟 +1 位作者 刁彩霞 王金涛 《现代化农业》 2014年第4期42-43,共2页

牛白血病是由牛白血病病毒引起的牛、绵羊等动物的慢性肿瘤性疾病，其特征是淋巴样细胞恶性增生、进行性恶病质和高死亡率。该病又称地方流行性牛白血病。大约30％的感染动物形成持续性淋巴细胞增生；约10％感染动物会形成淋巴肉瘤，感... 牛白血病是由牛白血病病毒引起的牛、绵羊等动物的慢性肿瘤性疾病，其特征是淋巴样细胞恶性增生、进行性恶病质和高死亡率。该病又称地方流行性牛白血病。大约30％的感染动物形成持续性淋巴细胞增生；约10％感染动物会形成淋巴肉瘤，感染牛只有60％无临床症状，但对奶牛影响更为突出。该病早在19世纪末被发现，直到1969年才由美国的M iller从病牛外周血液淋巴细胞中分离到病毒。我国于1974年首次发现该病，以后在许多省市区相继发生。给养牛业的发展造成严重威胁。 展开更多

关键词 牛白血病病毒 奶牛 感染动物 防控 诊断 细胞增生 淋巴肉瘤 肿瘤性疾病

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛白血病的危害及防控策略 被引量：8

8

作者 郭永丽 张君 +2 位作者 张俊峰 孙刚 高明春 《中国动物检疫》 CAS 2020年第7期80-86,共7页

牛白血病是牛白血病病毒(bovine leukemia virus,BLV)感染引起的牛最常见的肿瘤性疾病之一,对养牛业和人类健康的潜在威胁较大。本文分别从病原学、流行现状、危害及潜在风险、诊断和防控策略等方面概述了BLV及其引发疾病的研究进展。BL... 牛白血病是牛白血病病毒(bovine leukemia virus,BLV)感染引起的牛最常见的肿瘤性疾病之一,对养牛业和人类健康的潜在威胁较大。本文分别从病原学、流行现状、危害及潜在风险、诊断和防控策略等方面概述了BLV及其引发疾病的研究进展。BLV自首次发现以来,已广泛流行于世界各国,并很容易跨物种传播,且所有感染动物都会终身带毒,引起广泛的免疫功能异常,从而导致产奶量降低、产肉量下降和动物流产。此外,有实验已证实了在人类乳腺癌、肺癌组织和部分人类血液中有BLV的存在。目前尚无有效治疗和预防BLV感染的药物和疫苗,因此准确诊断和清除BLV感染牛是控制牛白血病最有效的措施之一。目前常用的诊断方法包括血清学抗体检测和前病毒DNA检测,主要的防控策略包括净化、通用的牧场管理与生物安全防护以及阻断向人类传播的途径。综上所述,应严格落实上述防控策略,加强诊断方法研究和监测,做到早发现早处理。 展开更多

关键词 牛白血病病毒 流行现状 诊断 防控策略 乳腺癌

在线阅读 下载PDF 职称材料

BLV-miR-B1-5p靶向牛MUC1基因的靶位点预测及验证

9

作者 李宵 廖献茂 +2 位作者 刘伟琦 连帅 王建发 《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第5期40-46,111,共8页

牛白血病病毒(bovine leukemia virus,BLV)可经血液和淋巴系统下行持续感染奶牛乳腺上皮细胞,可导致细胞抗菌能力下降,而BLV编码的mi RNAs(BLV-mi RNAs)是BLV复制和致病所必需的功能元件。为探究BLV编码的BLV-mi R-B1-5p是否通过靶向牛... 牛白血病病毒(bovine leukemia virus,BLV)可经血液和淋巴系统下行持续感染奶牛乳腺上皮细胞,可导致细胞抗菌能力下降,而BLV编码的mi RNAs(BLV-mi RNAs)是BLV复制和致病所必需的功能元件。为探究BLV编码的BLV-mi R-B1-5p是否通过靶向牛黏蛋白1(MUC1)基因参与抑制乳腺上皮细胞的抗菌防御屏障,在研究中首先通过STar Mir软件进行靶位点预测,再通过细胞转染、双荧光素酶报告试验、qRT-PCR和Western Blot进行验证。靶位点预测结果显示,BLV-mi R-B1-5p与MUC13′UTR有完全结合位点,结合的自由度为-35.6 kcal·mol^(-1);双荧光素酶报告试验结果显示:BLV-mi R-B1-5p可显著下调MUC1-3UTR-WT的荧光值(P<0.001);且通过mi RNA细胞转染、qRT-PCR和Western Blot体外验证结果显示,BLV-mi R-B1-5p可抑制奶牛乳腺上皮细胞MUC1 m RNA和蛋白的表达。综合以上结果表明,BLV-mi R-B1-5p可靶向并抑制牛MUC1,从而参与抑制乳腺上皮细胞的抗菌防御屏障。研究为BLV影响乳腺上皮细胞的防御能力提供了数据参考。 展开更多

关键词 牛白血病病毒 黏蛋白1 奶牛乳腺上皮细胞 miRNA

在线阅读 下载PDF 职称材料

BLV-ΔmiRNAs和BLV感染奶牛乳腺上皮细胞的基因转录组学分析

10

作者 刘伟琦 李宵 +2 位作者 吕观新 连帅 王建发 《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第4期46-55,共10页

地方流行性牛白血病(enzootic bovine leukosis,EBL)是由牛白血病病毒(bovine leukemia virus,BLV)感染所引起的一种肿瘤增生性疾病,在我国奶牛群中广泛流行,制约着我国奶牛养殖行业的发展。BLV一般通过子宫内感染及摄入受感染的牛奶和... 地方流行性牛白血病(enzootic bovine leukosis,EBL)是由牛白血病病毒(bovine leukemia virus,BLV)感染所引起的一种肿瘤增生性疾病,在我国奶牛群中广泛流行,制约着我国奶牛养殖行业的发展。BLV一般通过子宫内感染及摄入受感染的牛奶和初乳发生感染,感染后的奶牛乳腺上皮细胞对金黄色葡萄球菌更易感。作为BLV高效复制所必需的功能元件,BLV-miRNAs在肿瘤形成的过程中起着关键的作用,但BLV-miRNAs对奶牛乳腺组织的影响缺乏报道。研究使用BLV和BLV-ΔmiRNAs 2种病毒分别感染奶牛乳腺上皮细胞,进行UMI绝对定量转录组测序。结果显示:BLV和BLV-ΔmiRNAs 2种病毒感染奶牛乳腺上皮细胞后,基因转录水平发生变化,差异基因主要富集在生物进程中,包括基因转录(HMGA1、C1QBP、PTMA等)、细胞衰老(HMGA1、SERP1等)、细胞增殖迁移(PTPRJ、EPPK1等)、病毒感染复制(HMGA1、C1QBP等)、蛋白质代谢(SERP1、USE1等)、免疫功能(PTMA、PTPRJ等),KEGG分析结果显示BLV-miRNAs可以激活代谢通路、miRNA与癌症、病毒感染、病毒致癌、IL-17信号通路、粘附连接等信号通路。因此,BLV-miRNAs在BLV感染奶牛乳腺组织时可能通过影响乳腺上皮细胞免疫功能,改变细胞状态,从而加快病毒感染进程,促进病原菌的侵染,加快奶牛乳腺疾病的发生发展。试验结果为进一步研究BLVmiRNAs的功能研究奠定了基础。 展开更多

关键词 牛白血病病毒 奶牛乳腺上皮细胞 转录组学 免疫

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛精液中的病毒

11

作者 A. Afspar M. D. Eaglesome 邓沛霖 《广西畜牧兽医》 1991年第4期39-44,共6页

牛精液中的病毒,现已发现的主要为牛疮疹病毒1型、牛白血病病毒、蓝舌病病毒、牛病毒性下痢病毒与口蹄疫病毒等。精液中病毒来源:1) 外源的,如肠病毒在采集时粪便的污染。2) 内源的,由于全身或局部感染的病毒,病毒从睾丸、副睾或包皮排... 牛精液中的病毒,现已发现的主要为牛疮疹病毒1型、牛白血病病毒、蓝舌病病毒、牛病毒性下痢病毒与口蹄疫病毒等。精液中病毒来源:1) 外源的,如肠病毒在采集时粪便的污染。2) 内源的,由于全身或局部感染的病毒,病毒从睾丸、副睾或包皮排泄。现介绍其传播方式、致病机理、实验室诊断、以及人工授精工作中防止传播的方法等。 展开更多

关键词 病毒群 精液质量 牛白血病病毒 蓝舌病病毒 口蹄疫病毒 实验室诊断 下痢 细胞培养物 疮疹 疫苗毒株

在线阅读 下载PDF 职称材料

抗原肽免疫磁珠检测BLV抗体的研究 被引量：1

12

作者 赵卫东 付俊淑 +4 位作者 黄金海 郑文杰 陈磊 刘伟 王玉玲 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2014年第20期104-108,共5页

建立抗原肽偶联磁珠进行BLV抗体的检测技术,探讨肽偶联磁珠的条件及效力。对牛白血病病毒gp51和p24蛋白的抗原表位进行预测分析,合成3条抗原肽,把合成肽与表面带-COOH功能团的磁珠进行偶联,形成固定化,反应原性良好的免疫磁珠,用于BLV... 建立抗原肽偶联磁珠进行BLV抗体的检测技术,探讨肽偶联磁珠的条件及效力。对牛白血病病毒gp51和p24蛋白的抗原表位进行预测分析,合成3条抗原肽,把合成肽与表面带-COOH功能团的磁珠进行偶联,形成固定化,反应原性良好的免疫磁珠,用于BLV抗体的检测。确定了肽与磁珠最佳偶联条件,3种免疫磁珠均有反应原性,gp51蛋白上的253-266:SSFNTTQGWHHPSQ线性序列具有最佳的检测结果。利用免疫微球对191份样品进行检测,结果与国外牛白血病检测试剂盒进行对比,检测符合率为92.6%。gp51蛋白上存在BLV的优势B细胞线性表位;抗原肽免疫磁珠可以用于检测BLV抗体,这为进一步研制液体磁流芯片了奠定基础。 展开更多

关键词 牛白血病病毒 抗原表位 合成肽 免疫磁珠

在线阅读 下载PDF 职称材料