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抗鹿源牛病毒性腹泻-粘膜病病毒特异性单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：3
1
作者 杜锐 尹茉莉 +2 位作者 时坤 郑鑫 兰海楠 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期641-643,共3页
为建立鹿源牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)检测方法,本研究制备了抗鹿源BVDV特异性单克隆抗体(MAb)。用纯化的BVDV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经3次有限稀释法克隆和间接ELISA法筛选,获得2株稳定分泌MAb的杂... 为建立鹿源牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)检测方法,本研究制备了抗鹿源BVDV特异性单克隆抗体(MAb)。用纯化的BVDV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经3次有限稀释法克隆和间接ELISA法筛选,获得2株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株2A3和4B12。通过间接ELISA检测,MAb效价为:上清液及腹水分别为1∶512、1∶640和1∶12800、1∶16000;MAb的亚类鉴定结果表明,2株杂交瘤细胞分泌的抗体亚类均为IgGl亚类;经ELISA测定,2A3和4B12与BVDVC24V株、HCV、BDV、PRV均不发生交叉反应,但与BVDVCCSYD株发生交叉反应;IFA试验结果显示,4B12和2A3与接种BVDVN71株病毒液的细胞反应产生较强的特异荧光;抗原识别位点分析结果表明,2A3和4B12两株MAb所识别的抗原位点相同。这两株MAb的获得为鹿BVDV的检测方法的建立奠定良好的基础。 展开更多
关键词 鹿 牛病毒性腹泻-粘膜病病毒 单克隆抗体 间接ELISA
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牛病毒性腹泻-粘膜病病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：12
2
作者 陈其兵 薛霜 +5 位作者 漆世华 朱薇 张萍 谢红玲 温文生 吴玉石 《中国兽药杂志》 2012年第4期4-6,47,共4页
为建立一种牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)的快速检测方法,根据GenBank中登录的BVDV基因序列,针对5’UTR的保守序列,设计合成了一对特异性引物和一条TaqMan荧光探针。通过对反应条件和反应体系进行优化,建立了一种能快速定量检测BVDV的... 为建立一种牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)的快速检测方法,根据GenBank中登录的BVDV基因序列,针对5’UTR的保守序列,设计合成了一对特异性引物和一条TaqMan荧光探针。通过对反应条件和反应体系进行优化,建立了一种能快速定量检测BVDV的荧光定量RT-PCR检测方法。通过对20份胎牛血清样品和猪瘟细胞苗半成品进行检测,对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验。结果显示,建立的方法能检测到BVDV,而对CSFV、PRRSV和MDBK细胞的扩增结果均为阴性,具有高度的特异性。在所检测的20份样品中,BVDV阳性6份(30%)。对所构建的标准品进行检测,在102～108拷贝/μL的范围内可以得到良好的动力学曲线,能检测低至103～104拷贝/mL的病毒量。表明所建立的检测方法具有快速、特异、灵敏、重复性好等特点,可用于临床及科研中对BVDV的快速定量检测和对牛血清及猪瘟兔化弱毒疫苗等生物制品中是否污染BVDV进行监测。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻-粘膜病病毒 荧光定量RT-PCR 检测
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基于RTCPA-CRISPR/Cas12a的牛病毒性腹泻病毒检测方法的建立及应用
3
作者 蒙琦 常亮 +2 位作者 杨明 曹映辉 贺泂杰 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期80-88,共9页
本研究旨在建立一种检测牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a方法。选取BVDV的E0蛋白基因序列为基础,设计CPA特异性引物。同时,依据CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了crRNA靶向RT-RAA扩增产物,并优化了RT-CPA-CRISPR/Cas12a反应体系,... 本研究旨在建立一种检测牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a方法。选取BVDV的E0蛋白基因序列为基础,设计CPA特异性引物。同时,依据CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了crRNA靶向RT-RAA扩增产物,并优化了RT-CPA-CRISPR/Cas12a反应体系,此外,借助建立的该方法,开展了临床样品的检测。结果显示:所建立的检测方法对BVDV的最低检出限为8.0 copies/μL,并具有高度特异性,对42份临床样品检测显示,该方法与传统PCR方法的一致性好,符合率能达到92.86%。该研究建立了牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a检测方法,为该病的诊断提供了技术手段。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 交叉引物恒温扩增技术 CRISPR/Cas12a 灵敏度 特异性
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青海海北地区牦牛病毒性腹泻病毒流行病学调查及5′-UTR遗传进化分析
4
作者 林伟山 马豆豆 +6 位作者 雷萌桐 魏斌 李国才 王光华 王戈平 简莹娜 李秀萍 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1241-1249,共9页
【目的】了解青海省海北地区牦牛群中牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的流行情况及遗传学分子特征。【方法】对采集自青海海北地区的148份腹泻牦牛粪便样品提取病毒RNA并反转录合成cDNA,以其为模板扩增BVDV 5′-UT... 【目的】了解青海省海北地区牦牛群中牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的流行情况及遗传学分子特征。【方法】对采集自青海海北地区的148份腹泻牦牛粪便样品提取病毒RNA并反转录合成cDNA,以其为模板扩增BVDV 5′-UTR保守区域,建立特异性检测牦牛BVDV的实时荧光定量PCR方法,并以该方法对青海海北地区牦牛养殖场BVDV感染情况进行检测。选取4份BVDV阳性样品,对BVDV 5′-UTR区域序列进行PCR扩增和测序,与NCBI中不同亚型BVDV以及同属病毒毒株进行相似性比对,并基于BVDV 5′-UTR区域进行遗传进化分析。【结果】本研究基于BVDV 5′-UTR成功建立实时荧光定量PCR检测方法,标准曲线相关系数(R^(2))为0.997,标准品浓度为2.69×10^(2)~2.69×10^(9)拷贝/μL时具有良好的线性关系,最小检出限为2.69×10^(2)拷贝/μL。重复性试验结果显示,变异系数均<1.7%,具有良好的重复性和稳定性。采用建立的实时荧光定量PCR方法对青海省海北地区门源县、祁连县、海晏县和湟源县的腹泻牦牛粪便样品进行检测,结果显示,BVDV阳性率分别为45.00%、36.00%、30.77%和29.00%。BVDV 5′-UTR序列比对结果显示,分离获得的4株牦牛源BVDV与伊朗、美国的BVDV-1a亚型毒株聚集在同一个独立分支,核苷酸序列相似性为76.6%~99.7%。【结论】本研究明确了BVDV-1a型是导致青海省海北地区牦牛腹泻的重要病原之一,为该地区牦牛养殖场及时、有效地采取防控措施提供了科学依据,同时丰富了当地BVDV的分子流行病学调查数据,为该地区牛病毒性腹泻病的防控及疫苗研发提供了理论基础。 展开更多
关键词 牦牛 牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 流行病学 实时荧光定量PCR 遗传进化分析
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牛病毒性腹泻-黏膜病的防控
5
作者 李雨珍 张锟 +3 位作者 常江 梁旭 徐霄妍 李永翰 《河南畜牧兽医》 2025年第8期39-40,共2页
牛病毒性腹泻-黏膜病在我国牛群中已普遍流行,主要引起消化道黏膜溃烂、腹泻及免疫抑制等症状,慢性感染易引发其他病原体的继发感染,对养牛业健康稳定发展构成严重威胁。该病毒非致细胞病变型感染孕初期母牛可导致产出持续感染牛,成为... 牛病毒性腹泻-黏膜病在我国牛群中已普遍流行,主要引起消化道黏膜溃烂、腹泻及免疫抑制等症状,慢性感染易引发其他病原体的继发感染,对养牛业健康稳定发展构成严重威胁。该病毒非致细胞病变型感染孕初期母牛可导致产出持续感染牛,成为主要传染源。该病防控需根据牛场情况采取综合防控措施,包括持续感染牛的筛淘、疫苗免疫、实施净化等。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻-黏膜病 筛查 治疗 防控
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牛病毒性腹泻病-黏膜病的流行病学、诊断与防治研究
6
作者 着格吉 《中国动物保健》 2025年第4期31-32,共2页
本文选取2024年1~2月某牛养殖场中感染牛病毒性腹泻病-黏膜病的16头病牛展开研究,基于治疗方式差异分为对照组与联合组,以常规西药方式治疗对照组,中西药联合方式治疗联合组,对比疗效。结果显示联合组病牛治愈率为87.50%显著高于对照组... 本文选取2024年1~2月某牛养殖场中感染牛病毒性腹泻病-黏膜病的16头病牛展开研究,基于治疗方式差异分为对照组与联合组,以常规西药方式治疗对照组,中西药联合方式治疗联合组,对比疗效。结果显示联合组病牛治愈率为87.50%显著高于对照组。在牛养殖过程中,相关人员需掌握牛病毒性腹泻病-黏膜病的流行病学及诊疗方式,以促进牛养殖业的健康发展。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病-黏膜病 流行病学 诊断 防治
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中西医结合治疗牛病毒性腹泻-黏膜病
7
作者 龙丽诗 《畜禽业》 2025年第3期61-63,67,共4页
牛病毒性腹泻-黏膜病是一种严重影响牛群健康的病毒性传染病,对畜牧业造成了较大的经济损失。中西医结合治疗将中医的整体调理与西医的精准治疗相结合,充分发挥了两者的优势,提高了疾病的治愈率,降低了复发率,并减少了药物副作用。通过... 牛病毒性腹泻-黏膜病是一种严重影响牛群健康的病毒性传染病,对畜牧业造成了较大的经济损失。中西医结合治疗将中医的整体调理与西医的精准治疗相结合,充分发挥了两者的优势,提高了疾病的治愈率,降低了复发率,并减少了药物副作用。通过介绍牛病毒性腹泻-黏膜病的病原和流行特点,阐述了患牛的临床特征和诊断措施,同时给出了中西医结合治疗牛病毒性腹泻-黏膜病的理论依据和治疗方案,以期促进牛群的健康生长,为畜牧业的可持续发展贡献力量。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻-黏膜病 临床症状 诊断 中西医治疗 防控措施
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牛病毒性腹泻/黏膜病病原学特征及其检测方法研究进展
8
作者 陈伯祥 王佳 +2 位作者 赵子惠 杨明 唐云娇 《畜牧兽医杂志》 2025年第2期97-102,共6页
近年来,牛病毒性腹泻病/黏膜病(BVD-MD)在国内外流行广泛、对养牛业危害严重,仅通过临床症状和病理变化很难与其它腹泻病作出鉴别诊断。为了确诊和净化BVD-MD,选择一种最佳的检测方法就显得十分重要。本文对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)病原... 近年来,牛病毒性腹泻病/黏膜病(BVD-MD)在国内外流行广泛、对养牛业危害严重,仅通过临床症状和病理变化很难与其它腹泻病作出鉴别诊断。为了确诊和净化BVD-MD,选择一种最佳的检测方法就显得十分重要。本文对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)病原基本信息及流行毒株、检测方法和近年来的研究进行了综述,以期对牛病毒性腹泻/黏膜病的流行病学调查、致病机制、检测及防治提供参考。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 病原学 检测方法
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环介导等温扩增技术在牛病毒性腹泻检测中的应用
9
作者 周娴 陈文钦 +5 位作者 王雯熙 孙智武 张苗苗 郭妮妮 宋先荣 吴修竹 《养殖与饲料》 2025年第5期41-46,共6页
[目的]基于环介导等温扩增(loop mediated isothermal amplification,LAMP)技术,研究1种快速、灵敏检测牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)检测方法,为牛病毒性腹泻的快速诊治提供参考。[方法]参考GenBank上BVDV序列,... [目的]基于环介导等温扩增(loop mediated isothermal amplification,LAMP)技术,研究1种快速、灵敏检测牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)检测方法,为牛病毒性腹泻的快速诊治提供参考。[方法]参考GenBank上BVDV序列,依据BVDV的结构蛋白5'-UTR保守序列设计出多组引物探针,从中优选出1组扩增效果最佳的引物探针,经过优化反应体系和退火温度,建立BVDV的环介导等温扩增技术(LAMP)检测方法。随后对该方法的敏感性、特异性进行了评估,并应用该检测方法进行临床样品检测。[结果]所建立的LAMP方法展现出高度特异性,仅对BVDV产生扩增信号,与牛常见病原(如口蹄疫、沙门氏菌等)无交叉反应;通过梯度稀释重组质粒验证,其检测灵敏度为102 copies/μL,较常规PCR提升10倍;临床样本检测结果与PCR法完全一致(符合率100%)。[结论]本研究建立的BVDV LAMP检测方法敏感性高、特异性强,适用于牛病毒性腹泻病的临床诊治。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 环介导等温扩增技术 快速检测 临床诊治 应用
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牛病毒性腹泻病毒1型SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立与应用
10
作者 刘飞飞 杨澳飞 +7 位作者 贾东鹭 韩新雨 陈慧敏 陈建 魏颖 丁轲 张春杰 陈松彪 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第4期363-369,共7页
为建立牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV-1)荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测方法,本研究参考GenBank中的不同BVDV-1序列,设计并合成Npro基因保守区域特异性引物,以重组质粒标准品作为模板对反应体系进行优化,初步建立一种BVDV-1特异性SYBR GreenⅠ... 为建立牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV-1)荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测方法,本研究参考GenBank中的不同BVDV-1序列,设计并合成Npro基因保守区域特异性引物,以重组质粒标准品作为模板对反应体系进行优化,初步建立一种BVDV-1特异性SYBR GreenⅠRT-qPCR方法,结果显示,RT-qPCR方法的最适退火温度为55℃,最佳引物终浓度为0.4μmol/L;质粒标准品浓度在5.46×10^(1)拷贝/μL~5.46×10^(7)拷贝/μL之间与各自的Ct值具有良好的线性关系,线性方程为:y=-3.2011x+33.6,R^(2)=0.9975,熔解曲线为单一峰值;以BVDV-1、牛病毒性腹泻病毒2型、牛病毒性腹泻病毒3型、边界病毒、猪瘟病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒等的RNA反转录所得cDNA以及大肠杆菌和鼠伤寒沙门菌总DNA为模板,采用本研究建立的RT-qPCR方法检测,评估该方法的特异性;分别以10倍倍比稀释(10^(1)~10^(9))的pMD19-T-Npro重组质粒标准品作为模板,利用本研究建立的方法与普通RT-PCR方法检测,比较所建方法的敏感性;以5个不同浓度的重组质粒标准品pMD19-T-Npro作为模板,利用RT-qPCR方法分别于同一时间和不同时间分别进行批内和批间重复性试验,评估该方法的重复性。特异性试验结果显示,该方法仅对BVDV-1有特异性扩增曲线,牛病毒性腹泻病毒2型、牛病毒性腹泻病毒3型、边界病毒、猪瘟病毒、牛轮状病毒、牛冠状病毒、大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌均为阴性;敏感性试验结果显示,该方法对质粒标准品的检测限为5.46×10^(1)拷贝/μL,敏感性高;对重组质粒标准品的批内和批间重复性试验的变异系数均小于2%,具有良好的重复性和稳定性。采用本研究建立的RT-qPCR方法和文献中的BVDV-1 RT-qPCR方法分别对50份腹泻牛粪便样品检测,结果显示,两种方法的阳性检出率均为16%(8/50),总符合率达100%。本研究建立的RT-qPCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的优点,为BVDV临床快速检测、流行病学调查及疫病防控工作提供了新的技术支撑和思路。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒1型 Npro基因 荧光定量RT-PCR 应用
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宁夏地区部分规模化牛场牛病毒性腹泻病毒分离鉴定
11
作者 王雅诗 张祥胤 +5 位作者 张冯禧 舒金琪 王向阳 高娟 赵晓民 常玲玲 《动物医学进展》 北大核心 2025年第8期127-132,共6页
牛病毒性腹泻(Bovine viral diarrhea,BVD)是由牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)引起的一种传染病。为了解宁夏地区规模化牛场BVD的流行情况,2023年采集了宁夏地区53个牛场的血液及肛拭子样品共计963份,进行RT-PCR检... 牛病毒性腹泻(Bovine viral diarrhea,BVD)是由牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)引起的一种传染病。为了解宁夏地区规模化牛场BVD的流行情况,2023年采集了宁夏地区53个牛场的血液及肛拭子样品共计963份,进行RT-PCR检测,然后利用MDBK细胞对阳性样品分离纯化病毒。结果显示,宁夏地区BVDV的核酸阳性率为2.81%(27/963),牛场感染率为11.32%(6/53);5′UTR遗传进化分析结果显示主要有BVDV-1a、BVDV-1h、BVDV-1r和BVDV-1l共4种基因亚型。RT-PCR阳性样品经MDBK细胞盲传8代未出现细胞病变,荧光定量PCR测定病毒液Ct值,代入制定的BVDV标准曲线测得拷贝数为1.136×10^(6)copies/mL,间接免疫荧光呈BVDV E2蛋白抗原阳性。研究明确了宁夏地区牛场BVDV流行的主要基因亚型,并获得1株纯化的非细胞病变型BVDV-1a野毒株,为后续深入BVDV致病机制研究提供基础资料。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 分离 鉴定 规模化牛场
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牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的制备及捕获ELISA检测方法的建立
12
作者 宋京格 周佳莹 +5 位作者 夏欣悦 王孟孟 李园 宋厚辉 徐义刚 王静 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第5期473-479,共7页
为建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的检测方法,本研究采用纯化的BVDV作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术筛选获得一株稳定分泌单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株5C7,采用抗体分型试剂盒鉴定其亚类为IgG2α,经IFA鉴定显示MAb 5C7能够特异性... 为建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的检测方法,本研究采用纯化的BVDV作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术筛选获得一株稳定分泌单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株5C7,采用抗体分型试剂盒鉴定其亚类为IgG2α,经IFA鉴定显示MAb 5C7能够特异性识别BVDV,利用间接ELISA测定其抗体效价为1:10^(6)。利用该BVDV特异性MAb作为检测抗体,兔源BVDV E2蛋白多克隆抗体(PAb)作为捕获抗体,经各反应条件的优化,建立了检测BVDV的抗原捕获ELISA(AC-ELISA)方法。采用该方法分别检测BVDV、牛传染性鼻气管炎病毒、牛细小病毒、牛轮状病毒、牛呼吸道合胞体病毒和牛副流感病毒3型等病毒,分析该方法的特异性;将10^(6.7)TCID_(50)的BVDV 10倍倍比稀释(10^(0)~10^(6)倍)稀释后,采用建立的AC-ELISA检测,评估该方法的敏感性;利用同一批次和不同批次E2蛋白PAb包被的酶标板,采用建立的AC-ELISA方法检测BVDV阳性及阴性样品,评估该方法的重复性。结果显示,该方法仅能检测到BVDV,与其余病毒均无交叉反应;对病毒BVDV的检测限为10~2TCID_(50);批内、批间重复性试验的变异系数均小于5%。利用该方法对618份牛血清和352份腹泻犊牛粪便样品检测,结果显示两种样品的阳性检出率分别为25.7%(159/618)和38.9%(137/352),与RT-PCR方法检测结果的符合率均达100%。此外,RT-PCR分析显示,阳性样品中BVDV-1的检出率为29.6%,为主要流行基因型,BVDV-2的检出率为0.9%。本研究建立的AC-ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可有效用于BVDV的检测,为BVDV的流行病学调查提供了技术支撑。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 抗原捕获ELISA E2蛋白 单克隆抗体
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牛病毒性腹泻病毒研究进展
13
作者 高进东 匡磊 +6 位作者 刘诗汝 张恬钰 高翎珈 尹金花 张梦迪 吴兴 胡长敏 《现代畜牧科技》 2025年第7期118-121,共4页
牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是对牛养殖业危害严重的病毒之一。该文从病毒学特征、流行病学、发病机制、诊断方法、治疗与防控以及最新研究成果等多方面对BVDV进行全面综述,旨在深入阐述该病毒的研究现状,为相关领域的科研人员、兽医从业者... 牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是对牛养殖业危害严重的病毒之一。该文从病毒学特征、流行病学、发病机制、诊断方法、治疗与防控以及最新研究成果等多方面对BVDV进行全面综述,旨在深入阐述该病毒的研究现状,为相关领域的科研人员、兽医从业者以及养殖者提供系统的知识参考,以促进对牛病毒性腹泻的深入研究、有效诊断、科学防控以及新型治疗措施的开发。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 诊断 治疗 防控
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牛病毒性腹泻病毒E^(rns)-ELISA抗体检测试剂盒的制备 被引量：2
14
作者 王静 陈柯源 +5 位作者 王胜华 丁成志 杨光辉 刘一 尹金花 王九峰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期65-70,共6页
为建立快速检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的血清学方法,本试验以BVDV NADL毒株结构蛋白E^(rns)作为包被抗原,优化反应条件并组装BVDV酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测试剂盒,通过重复性试验、灵敏性试验、符合率试验和保存期试验验证该试... 为建立快速检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的血清学方法,本试验以BVDV NADL毒株结构蛋白E^(rns)作为包被抗原,优化反应条件并组装BVDV酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测试剂盒,通过重复性试验、灵敏性试验、符合率试验和保存期试验验证该试剂盒的准确性、灵敏性和稳定性。结果显示,抗原包被浓度为4μg/mL,1%酪蛋白溶液37℃封闭45 min,被检血清以1∶400稀释孵育30 min,兔抗牛HRP标记二抗以1∶20000稀释孵育30 min,TMB底物反应5 min时,ELISA的反应背景下降,区分度最好。优化后方法的批内重复性试验和批间重复性试验的变异系数均在10%以内,表明该试剂盒具有较好的稳定性;灵敏性试验结果显示,当阳性血清稀释度达到1∶6400时仍可以检测为阳性,说明该试剂盒灵敏度较高;该试剂盒与美国爱德士生物科技公司(IDEXX)BVDV总抗体检测试剂盒共同检测466份临床血清样品,两者总符合率为89.1%;保存期试验结果显示,第4个月时该试剂盒仍能检测到阳性血清,说明稳定性较好。综上表明,本试验利用E^(rns)蛋白建立的BVDV间接ELISA抗体检测试剂盒灵敏度高且重复性好,可为BVDV抗体检测和流行性调查提供新的方法。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 E^(rns)蛋白 抗体 间接ELISA
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牛病毒性腹泻病毒NS5A结构域与核糖体内部进入位点的相互作用
15
作者 高明阳 杨宣叶 +3 位作者 胡欣妍 王进千 吴玉湖 周建华 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第8期137-145,共9页
【目的】探究牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea viru,BVDV)NS5A的3个结构域与核糖体内部进入位点(internal ribosome entry site,IRES)的相互作用。【方法】采用PCR法扩增Ⅰ型BVDV病毒NS5A基因的3个结构域DomainⅠ、DoaminⅡ和Do... 【目的】探究牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea viru,BVDV)NS5A的3个结构域与核糖体内部进入位点(internal ribosome entry site,IRES)的相互作用。【方法】采用PCR法扩增Ⅰ型BVDV病毒NS5A基因的3个结构域DomainⅠ、DoaminⅡ和DomainⅢ片段,分别连接到pET-28a(+)载体上,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白,对表达产物进行Western Blot鉴定,并用镍柱法进行纯化。PCR扩增IRES DNA,转录获得IRES RNA。使用生物层干涉法(BLI)生物传感器(Gator Bio.)分子互作分析仪器对NS5A 3个结构域与IRES RNA的相互作用进行分析。【结果】成功表达并纯化了DomainⅠ、DoaminⅡ和DomainⅢ结构域重组蛋白,其质量浓度依次为76.2,96.8和57.7μg/mL。体外转录获得了IRES RNA,其质量浓度为2056.2μg/mL。互作分析结果表明,NS5A的3个功能结构域中,只有DomainⅡ与IRES具有明显的相互作用,且这种互作存在快结合快解离的现象,其与IRES的亲和力为7.93×10-6μmol/L。【结论】BVDV NS5A蛋白是调控IRES起始翻译的重要蛋白,其主要作用部位为DomainⅡ。 展开更多
关键词 NS5A蛋白 牛 核糖体内部进入位点 牛病毒性腹泻病毒复制
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四川苍溪牛病毒性腹泻性黏膜病防控措施
16
作者 康伦元 《农业工程技术》 2025年第3期103-104,共2页
病毒性腹泻-黏膜病,是牛养殖时常见的一类传染病,临床上患病牛主要表现为持续腹泻、黏膜发炎和糜烂等症状,严重影响牛的健康生长发育,若救治不及时后期病牛极易因脱水衰竭死亡,进而造成惨重损失,阻碍养牛业健康发展。该文介绍了牛病毒... 病毒性腹泻-黏膜病,是牛养殖时常见的一类传染病,临床上患病牛主要表现为持续腹泻、黏膜发炎和糜烂等症状,严重影响牛的健康生长发育,若救治不及时后期病牛极易因脱水衰竭死亡,进而造成惨重损失,阻碍养牛业健康发展。该文介绍了牛病毒性腹泻黏膜病的流行病学、症状表现、病理变化、诊断要点以及综合防控措施,旨在为相关从业人员提供参考。 展开更多
关键词 牛 病毒性腹泻-黏膜病 症状 病变 综合防控
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一例牛病毒性腹泻病毒和牛星状病毒混合感染的诊治
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作者 欧阳海杰 邓晓霞 +5 位作者 陶立 李常挺 彭昊 吴翠兰 兰美益 李军 《广西畜牧兽医》 2025年第3期124-126,共3页
牛病毒性腹泻病毒又名黏膜病病毒,由该病毒引发的疾病称为牛病毒性腹泻-黏膜病,以腹泻和整个消化道黏膜坏死、糜烂或溃疡为特征[1]。星状病毒是一种近年来新发报道、无囊膜的单股正链RNA病毒,与多种动物的腹泻症状相关。牛星状病毒由英... 牛病毒性腹泻病毒又名黏膜病病毒,由该病毒引发的疾病称为牛病毒性腹泻-黏膜病,以腹泻和整个消化道黏膜坏死、糜烂或溃疡为特征[1]。星状病毒是一种近年来新发报道、无囊膜的单股正链RNA病毒,与多种动物的腹泻症状相关。牛星状病毒由英国于1978年首次发现,该病毒可引起牛的腹泻、脑炎和脑膜炎以及神经症状[2]。2022年12月,广西某牛场的犊牛发生腹泻并导致死亡,发病数量多,严重影响了牛群的健康生长。经过临床症状观察、死牛剖检和实验室病原检测,发现是由牛病毒性腹泻病毒和牛星状病毒混合感染引起。现将病例报告如下。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 混合感染 牛星状病毒
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牛病毒性腹泻的流行现状及防控策略
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作者 李磊 《中国畜牧业》 2025年第10期91-92,共2页
肉牛养殖是农业领域的重要组成部分。近年来,我国肉牛养殖发展迅速,但在快速发展的过程中,疫病种类日益增多,不仅危害养殖户的经济效益,同时也威胁人类身体健康。牛病毒性腹泻(bovine viral diarrheamucosal disease,BVD-MD),俗称黏膜病... 肉牛养殖是农业领域的重要组成部分。近年来,我国肉牛养殖发展迅速,但在快速发展的过程中,疫病种类日益增多,不仅危害养殖户的经济效益,同时也威胁人类身体健康。牛病毒性腹泻(bovine viral diarrheamucosal disease,BVD-MD),俗称黏膜病,主要由牛病毒性腹泻病毒感染引起,是一种高度接触性传染病。患牛常表现为黏膜发炎、糜烂、坏死和腹泻,临床表现多样,各年龄段牛只均易感。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻 BVD-MD 病毒感染
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牛病毒性腹泻的诊断与治疗
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作者 巴桑 《今日畜牧兽医》 2025年第4期95-97,共3页
牛病毒性腹泻是由牛病毒性腹泻病毒引起的一种对家畜健康和生产性能产生严重影响的传染病。该病毒具有极强的传染性,并且流行病学特征复杂多变,其病因涉及多种因素。牛病毒性腹泻病毒对宿主的免疫系统具有抑制作用,感染该病毒的牛表现... 牛病毒性腹泻是由牛病毒性腹泻病毒引起的一种对家畜健康和生产性能产生严重影响的传染病。该病毒具有极强的传染性,并且流行病学特征复杂多变,其病因涉及多种因素。牛病毒性腹泻病毒对宿主的免疫系统具有抑制作用,感染该病毒的牛表现为腹泻、发热等症状,严重时甚至导致死亡。本文详细阐述了牛病毒性腹泻的病因学、流行病学特征、病理生理机制、诊断方法以及有效的治疗措施,旨在为有效遏制该病的传播、提升牛群健康水平提供科学依据。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 诊断方法 防治措施
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不同生物型牛病毒性腹泻病毒NS4B蛋白的生物信息学分析
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作者 吴树康 梁滋旺 +3 位作者 姜伟 金彩虹 陈岩 郭明佳 《中国动物检疫》 2025年第2期108-113,共6页
牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是一种引起牛病毒性腹泻的高度致死性病原,根据生物型不同可分为致细胞病变型(CP)及非致细胞病变型(NCP)2种。本研究通过多种生物信息学方法,对这2种生物型BVDV毒株NS4B蛋白的差异及相似性进行了比较。结果显示:... 牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是一种引起牛病毒性腹泻的高度致死性病原,根据生物型不同可分为致细胞病变型(CP)及非致细胞病变型(NCP)2种。本研究通过多种生物信息学方法,对这2种生物型BVDV毒株NS4B蛋白的差异及相似性进行了比较。结果显示:2种生物型BVDV的NS4B蛋白均属于不含信号肽和跨膜区的不稳定性疏水蛋白,其N端具有较高变异性;亚细胞定位预测发现,NS4B蛋白不含有线粒体导肽(mTP)或分泌通道信号肽(SP),且定位在内质网和线粒体中的概率最高;高级结构预测发现,2种生物型NS4B蛋白的二级与三级结构相似,均以α-螺旋为主;B细胞抗原表位分析发现,NCP型BVDV含有8个B细胞抗原表位肽段,CP型含有9个;蛋白翻译后修饰预测发现,NCP型BVDV具有1个特异性N-糖基化修饰位点,NCP型BVDV具有36个潜在的磷酸化修饰位点,而CP型具有35个。结果表明:2种生物型BVDV NS4B蛋白的基本理化性质及蛋白质结构相似性较高,但亚细胞定位情况和蛋白翻译后修饰有所不同,推测N端氨基酸序列的高突变性及蛋白翻译后修饰的不同可能会影响不同生物型BVDV与发病动物临床症状之间的关系。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 NS4B蛋白 生物信息学 遗传变异
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