生长停滞特异性蛋白6在牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导内皮细胞黏附因子及趋化因子表达中的作用 被引量：5

1

作者 刘颖君 欧阳翔英 +2 位作者 王宇光 吕培军 安娜 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期20-25,共6页

目的:探讨维生素K依赖的生长停滞特异性蛋白6(growth-arrest-specific protein 6,Gas6,一种维生素K依赖性蛋白,参与细胞增殖、存活、黏附和迁移,也在炎症反应中起重要作用)在牙龈卟琳单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysac... 目的:探讨维生素K依赖的生长停滞特异性蛋白6(growth-arrest-specific protein 6,Gas6,一种维生素K依赖性蛋白,参与细胞增殖、存活、黏附和迁移,也在炎症反应中起重要作用)在牙龈卟琳单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P.g-LPS)诱导血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)表达黏附因子和趋化因子过程中的作用。方法:在血管内皮细胞中过表达和敲低Gas6基因后,用1 mg/L P.g-LPS刺激血管内皮细胞3 h和24 h,利用实时定量荧光聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和E选择素(E-selectin),以及趋化因子白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)和单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)的表达。过表达或敲低Gas6基因后,细胞划痕实验检验内皮细胞迁移的生物学功能表型的变化。结果:P.g-LPS刺激3 h后,敲低Gas6组的黏附因子及趋化因子的表达情况与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),过表达Gas6组的黏附因子及趋化因子与对照组相比显著降低(E-selectin、ICAM-1、IL-8和MCP-1分别下降81%±0%、47%±3%、76%±3%和26%±6%,P<0.01);P.g-LPS刺激24 h后,敲低组的黏附因子及趋化因子表达情况与对照组相比显著升高(E-selectin、ICAM-1、IL-8和MCP-1上调的倍数分别是2.06±0.07、1.99±0.11、3.14±0.15和1.84±0.03),过表达组的黏附因子及趋化因子与对照组相比显著降低(E-selectin、ICAM-1、IL-8和MCP-1分别下降29%±1%、62%±3%、69%±1%和41%±2%),实验组与对照组黏附分子及趋化分子表达差异具有统计学意义(P<0.01)。细胞划痕实验结果显示,敲低Gas6组细胞迁移能力与对照组相比增强,过表达组细胞迁移能力较对照组弱,与realtime PCR检测结果趋势一致。结论:下调Gas6基因后,P.g-LPS促进ICAM-1、E-selectin、IL-8和MCP-1表达作用增强,上调Gas6基因后,P.g-LPS促进ICAM-1、E-selectin、IL-8和MCP-1表达作用减弱,各细胞因子表达量与Gas6表达趋势相反,提示Gas6在内皮细胞炎症状态下的黏附过程中可能发挥抑制作用。 展开更多

关键词 人脐静脉血管内皮细胞 生长停滞特异性蛋白6 牙龈卟琳单胞菌脂多糖 细胞因子

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人牙周膜成纤维细胞胶原吞噬作用的影响 被引量：11

2

作者 方厂云 苏征 +3 位作者 陈蕾 樊明文 翦新春 陈智 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期339-341,共3页

目的研究牙周病致病菌牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)胶原吞噬作用的影响。方法将不同质量浓度的LPS加入体外培养的hPDLF48h后,采用荧光定位术和流式细胞技术检测hPDLF胶原吞噬率的变化。结果LPS导致h... 目的研究牙周病致病菌牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)胶原吞噬作用的影响。方法将不同质量浓度的LPS加入体外培养的hPDLF48h后,采用荧光定位术和流式细胞技术检测hPDLF胶原吞噬率的变化。结果LPS导致hPDLF胶原吞噬率显著增加(P<0.05)。结论牙龈卟啉单胞菌脂多糖具有促进hPDLF吞噬胶原的作用,可能是牙周组织破坏机制之一。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 牙周膜成纤维细胞 胶原 吞噬

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖促进牙龈成纤维细胞的自噬 被引量：9

3

作者 刘瑜 李树锦 +2 位作者 张森林 操小马 张艳梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期315-319,共5页

目的研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)对人牙龈成纤维细胞(HGF)自噬功能的影响。方法以10μg/mL Pg-LPS刺激HGF 12 h或24 h,采用雷帕霉素作为阳性对照,Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的表达,间接免疫荧光技术检测自噬体... 目的研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)对人牙龈成纤维细胞(HGF)自噬功能的影响。方法以10μg/mL Pg-LPS刺激HGF 12 h或24 h,采用雷帕霉素作为阳性对照,Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的表达,间接免疫荧光技术检测自噬体的分布;同时使用MitoSOX Red荧光探针标记线粒体活性氧(mtROS)、间接免疫荧光法检测自噬体,观察Pg-LPS处理后HGF mtROS与线粒体自噬水平;分别以叔丁基-4-羟基茴香醚(BHA)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)以及辅酶Q10(CoQ10)阻断ROS,Western blot法检测Pg-LPS刺激后LC3B的表达量。结果 Pg-LPS处理后LC3BⅡ/LC3BⅠ的比值与自噬体数量均显著升高,并且24 h处理组高于12 h处理组,同时mtROS生成量与线粒体自噬均明显增加。此外CoQ10可有效降低Pg-LPS诱导的HGF自噬。结论 Pg-LPS在HGF中通过触发mtROS活化自噬,并且自噬参与受损线粒体的降解以维持细胞内环境稳态。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 自噬 活性氧

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牙龈卟啉单胞菌—脂多糖对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响 被引量：2

4

作者 郭世杰 王林 吴存瑾 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2013年第8期614-617,共4页

目的:观察牙龈卟啉单胞菌-脂多糖(P.g-LPS)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响。方法:在体外将P.g-LPS与HUVEC共培养,根据P.g-LPS浓度分为空白对照组、50 pg/ml组、100 pg/ml组、1ng/ml组及10 ng/ml组。培养36 h后采用甲基噻唑... 目的:观察牙龈卟啉单胞菌-脂多糖(P.g-LPS)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响。方法:在体外将P.g-LPS与HUVEC共培养,根据P.g-LPS浓度分为空白对照组、50 pg/ml组、100 pg/ml组、1ng/ml组及10 ng/ml组。培养36 h后采用甲基噻唑基四唑(MTT)法及流式细胞仪分别测定细胞增殖活力及凋亡情况,并通过免疫印迹标记法(Western blot)检测caspase-3激活情况。结果:经P.g-LPS处理后,HUVEC增殖活力较空白对照组明显下降(P<0.01),且随着P.g-LPS浓度增加,HUVEC增殖活力也逐渐下降(P<0.01),而细胞发生凋亡及caspase-3激活情况却随之增加。结论:P.g-LPS可抑制内皮细胞增殖活力,caspase-3激活从而诱导内皮细胞产生凋亡。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 人脐静脉内皮细胞 增殖 凋亡 CASPASE-3

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人脐静脉内皮细胞表达小凹蛋白-1的影响 被引量：3

5

作者 左源 李维善 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2020年第1期75-78,共4页

目的:初步研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.gingivalis lipopolysaccharide,P.g-LPS)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)小凹蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)表达的影响,并探讨P.g-LPS与动脉粥样硬化(atheroleros... 目的:初步研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.gingivalis lipopolysaccharide,P.g-LPS)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)小凹蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)表达的影响,并探讨P.g-LPS与动脉粥样硬化(atherolerosis,AS)之间的关系。方法:体外培养HUVECs,选择不同浓度的P.g-LPS(0.5、1.0、5.0、10.0 mg/L)诱导刺激6、18、24、36 h,采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)法检测P.g-LPS对HUVECs增殖的影响,酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测HUVECs表达Cav-1的量,采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测Cav-1 mRNA的表达。结果:P.g-LPS与HUVECs共培养后,增殖活力较对照组下降,并随着P.g-LPS浓度增加,HUVECs增殖活力明显下降(P<0.05)。与对照组比较,P.g-LPS诱导HUVECs Cav-1蛋白表达在18 h可升高,24、36 h持续高表达,36 h表达水平最高(P<0.05);P.g-LPS诱导HUVECs Cav-1 mRNA表达在18 h可升高,24、36 h随着浓度的增加,Cav-1 mRNA表达量增加(P<0.001)。结论:P.g-LPS能够明显抑制HUVECs的增殖活性,上调细胞Cav-1的蛋白以及分子水平表达。提示P.g-LPS感染可能引起内皮细胞功能障碍,从而加速AS的发生与发展。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 人脐静脉内皮细胞 小凹蛋白-1 动脉粥样硬化

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖及荚膜多糖诱导THP-1细胞分泌IL-8的分析 被引量：1

6

作者 王依玮 刘大力 束蓉 《上海交通大学学报（医学版）》 CSCD 北大核心 2017年第4期458-461,共4页

目的·分离牙龈卟啉单胞菌(Pg)脂多糖(LPS)及荚膜多糖(CPS),分析两者体外诱导人单核细胞系THP-1细胞分泌IL-8的能力。方法·采用凝胶过滤色谱法分离已获得的Pg ATCC33277及SJD4多糖混合物,并作用于THP-1细胞。采用ELISA法检测TH... 目的·分离牙龈卟啉单胞菌(Pg)脂多糖(LPS)及荚膜多糖(CPS),分析两者体外诱导人单核细胞系THP-1细胞分泌IL-8的能力。方法·采用凝胶过滤色谱法分离已获得的Pg ATCC33277及SJD4多糖混合物,并作用于THP-1细胞。采用ELISA法检测THP-1细胞在不同菌株LPS和CPS的不同浓度及不同作用时间下,其上清液中IL-8的含量。结果·成功分离获得ATCC33277及SJD4的LPS及CPS,其相对分子质量分别为20 000~50 000及150 000~500 000;分离所得LPS及CPS均具有体外诱导THP-1细胞分泌IL-8的能力,且存在时间-剂量效应;在0.1μg/m L浓度下,模式菌株ATCC33277的LPS诱导能力均显著高于其CPS(均P<0.05),而临床菌株SJD4在作用24 h时其CPS的诱导能力显著高于LPS(P<0.05)。结论·CPS作为Pg多糖提取物的组成成分,可单独体外诱导THP-1细胞分泌IL-8,且存在时间-剂量效应。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 荚膜多糖 THP-1细胞 白细胞介素-8

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖引起牙周炎症的机制和特点 被引量：2

7

作者 张迪亚 陈莉丽 《国外医学（口腔医学分册）》 2005年第6期455-457,共3页

革兰阴性厌氧菌牙龈卟啉单胞菌和牙周炎密切相关,脂多糖是革兰阴性菌外膜中的主要结构成分,具有广泛的生物学活性,被认为是革兰阴性菌的主要毒力因子之一。本文就牙龈卟啉单胞菌脂多糖的化学组成和结构,所启动炎症信号通路及其起始受体... 革兰阴性厌氧菌牙龈卟啉单胞菌和牙周炎密切相关,脂多糖是革兰阴性菌外膜中的主要结构成分,具有广泛的生物学活性,被认为是革兰阴性菌的主要毒力因子之一。本文就牙龈卟啉单胞菌脂多糖的化学组成和结构,所启动炎症信号通路及其起始受体,引起牙周炎症的机制和特点作一综述。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 牙周炎症

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖对泡沫细胞中NF-κB信号通路的影响

8

作者 李厚轩 雷浪 闫福华 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期725-730,共6页

目的:研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P.gingivalisLPS)在氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)刺激巨噬细胞形成泡沫细胞过程中和形成泡沫细胞后对NF-κB信号通路的影响... 目的:研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P.gingivalisLPS)在氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)刺激巨噬细胞形成泡沫细胞过程中和形成泡沫细胞后对NF-κB信号通路的影响。方法:用oxLDL诱导THP-1人单核细胞源性巨噬细胞形成泡沫细胞,在巨噬细胞和泡沫细胞中加入P.gingivalisLPS和oxLDL,利用免疫细胞化学技术检测NF-κB p65亚单位核转位情况,Western blot检测细胞质内IκB-α变化。结果:P.gingivalisLPS能促进巨噬细胞和泡沫细胞中p65亚单位核转位,在2h时达到最高水平;也能降低细胞质内IκB-α水平,在2h时达到最低水平;在2h时,10μg/ml比10、100ng/ml、1μg/mlP.gingivalisLPS更能提高p65核转位率。结论:P.gingivalisLPS可以促进泡沫细胞形成过程中和形成后NF-κB信号通路的激活,促进动脉粥样硬化进展。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 核因子 泡沫细胞

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人脐静脉内皮细胞表达趋化因子RANTES和分形素的影响 被引量：4

9

作者 漆晓玲 赵蕾 +2 位作者 陈珊珊 孟姝 吴亚菲 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期194-199,共6页

目的观察牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达调节活化正常T细胞表达和分泌的趋化因子(RANTES)和分形素的影响。方法应用不同质量浓度(200、500、1 000 ng·m L-1)的Pg-LPS分别处理HUVEC 1、6、12、24 h,利... 目的观察牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达调节活化正常T细胞表达和分泌的趋化因子(RANTES)和分形素的影响。方法应用不同质量浓度(200、500、1 000 ng·m L-1)的Pg-LPS分别处理HUVEC 1、6、12、24 h,利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)及酶联免疫吸附(ELISA)法检测RANTES及分形素m RNA及蛋白质的表达变化。结果在Pg-LPS与HUVEC共同培养1、6和12 h时,除培养时间为12 h、Pg-LPS质量浓度为200 ng·m L-1组的RANTES m RNA和1 h、200 ng·m L-1组RANTES蛋白表达与对照组无明显差异外,其余各实验组RANTES蛋白和m RNA表达量及分形素m RNA表达量均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);6 h时,二者m RNA表达量达到峰值,分别为对照组的4.88倍和6.20倍;刺激6 h后,RANTES蛋白和m RNA表达量及分形素的m RNA表达量均降低,24 h时,仅Pg-LPS质量浓度为500 ng·m L-1组与对照组相比有统计学差异(P<0.05);分形素蛋白的表达量则仅在Pg-LPS浓度为1 000 ng·m L-1刺激6、12 h时与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。结论 Pg-LPS感染具有上调HUVEC表达趋化因子RANTES和分形素的作用,可能在牙周炎促进动脉粥样硬化发生、发展的过程中起一定作用。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 牙周炎 趋化因子 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导不同细胞分泌炎性细胞因子的差异性 被引量：6

10

作者 陈云芳 严杰 +1 位作者 张迪亚 陈莉丽 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第6期622-628,633,共8页

目的:探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)脂多糖(LPS),诱导人口腔上皮细胞KB和人牙龈成纤维细胞HGF-1及人单核-巨噬样细胞THP-1,分泌炎性细胞因子的能力及其差异。方法:采用酚水法提取PgATCC33277株的脂多糖(Pg-LPS)。采... 目的:探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)脂多糖(LPS),诱导人口腔上皮细胞KB和人牙龈成纤维细胞HGF-1及人单核-巨噬样细胞THP-1,分泌炎性细胞因子的能力及其差异。方法:采用酚水法提取PgATCC33277株的脂多糖(Pg-LPS)。采用鲎试验和红外光谱对提取的Pg-LPS进行鉴定。采用ELISA试剂盒,定量检测不同浓度和时间Pg-LPS作用的上述3种细胞培养物上清中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8变化水平。实验中采用商品化大肠杆菌O111:B4脂多糖(E-LPS)为对照。结果:Pg-LPS和E-LPS凝固鲎试剂所需最低浓度均为15ng/ml,其红外光谱也极为相似。在Pg-LPS或E-LPS作用下,HGF-1细胞分泌的TNF-α和IL-1β水平呈单峰形增高(P<0.01),但THP-1细胞为持续性升高(P<0.01)。Pg-LPS或E-LPS具有促HGF-1和THP-1细胞持续性增强IL-6分泌的作用(P<0.01)。Pg-LPS和E-LPS均可诱导THP-1细胞增强IL-8的分泌(P<0.01),但对HGF-1细胞仅Pg-LPS有促IL-8分泌的效应(P<0.01)。Pg-LPS和E-LPS均不能诱导KB细胞分泌上述细胞因子。结论:Pg-LPS有很强的促靶细胞分泌多种炎性细胞因子的生物学活性,从而引发初始的局部炎症反应。Pg-LPS致炎作用与E-LPS相似,但诱导不同炎性细胞因子的模式颇有差异。KB细胞不能作为LPS致炎作用的效应靶细胞。 展开更多

关键词 脂多糖类/药理学 牙龈卟啉单胞菌 致炎作用 细胞因子

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重组人β防御素3对牙龈卟啉单胞菌脂多糖致炎作用的影响 被引量：4

11

作者 吕晶露 卞添颖 +4 位作者 李丽丽 崔迪 张婷 雷浪 闫福华 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1179-1183,共5页

目的:以牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)诱发载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠和RAW264.7小鼠单核巨噬细胞的急性炎症反应,并应用重组人β防御素3(rhBD3),观察其对炎症的干预效果。方法:20周龄雄性ApoE-/-小鼠随机均分为PBS对照组、P.g-LP... 目的:以牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)诱发载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠和RAW264.7小鼠单核巨噬细胞的急性炎症反应,并应用重组人β防御素3(rhBD3),观察其对炎症的干预效果。方法:20周龄雄性ApoE-/-小鼠随机均分为PBS对照组、P.g-LPS组和P.g-LPS+rhBD3组,分别经腹腔注射给药2h后,检测血清中不同炎症指标(MCP-1、TNF-α、IL-6、IL-1β和NO)的水平。同时,以rhBD3干预P.g-LPS对RAW264.7细胞的致炎作用,分别检测培养上清和细胞中炎症指标的水平及其mRNA的相对表达量。结果:经P.g-LPS刺激后,ApoE-/-小鼠血清MCP-1、TNF-α、IL-6和NO的水平较对照组显著上调;而同时应用rhBD3能明显降低MCP-1、TNF-α和NO表达量。P.g-LPS能显著上调RAW264.7细胞培养上清中TNF-α和NO的水平以及细胞中TNF-α和IL-6的mRNA相对表达量,rhBD3对此具有抑制作用。结论:rhBD3对P.g-LPS在体内、外诱导的急性炎症具有一定的抑制效应,可能在牙周炎与高脂血症的相互作用中发挥免疫调节作用。 展开更多

关键词 重组人β防御素3(rhBD3) 牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS) 抗炎

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖对巨噬细胞中铁死亡相关因子表达水平的影响 被引量：5

12

作者 杜雪纯 李保胜 +3 位作者 乔树伟 欧燕珍 李珍 孟维艳 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1148-1155,共8页

目的:探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)对巨噬细胞中铁死亡相关因子表达水平的影响,阐明铁死亡相关因子在牙周炎发病机制中的作用。方法:培养小鼠单核/巨噬细胞系RAW264.7细胞,分为实验组和对照组,实验组加入10 mg·L^(-1) P.g-LP... 目的:探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)对巨噬细胞中铁死亡相关因子表达水平的影响,阐明铁死亡相关因子在牙周炎发病机制中的作用。方法:培养小鼠单核/巨噬细胞系RAW264.7细胞,分为实验组和对照组,实验组加入10 mg·L^(-1) P.g-LPS分别处理6、12和24 h,对照组不做任何处理。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组RAW264.7细胞中长链酯酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和转铁蛋白受体1(TfR1)mRNA表达水平,2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法检测2组RAW264.7细胞中活性氧(ROS)水平,硫代巴比妥酸(TBA)法检测2组RAW264.7细胞中丙二醛(MDA)水平,亚铁离子荧光探针(FeRhonox-1)法检测2组RAW264.7细胞中亚铁离子(Fe^(2+))水平,Westernblotting法检测2组RAW264.7细胞中ACSL4、GPX4和TfR1蛋白表达水平。结果:与对照组比较,处理6、12和24 h后,实验组RAW264.7细胞中GPX4 mRNA表达水平降低(P<0.05),处理12和24 h后ACSL4和TfR1 mRNA表达水平升高(P<0.05);处理12和24 h后,实验组RAW264.7细胞中ACSL4和TfR1蛋白表达水平升高(P<0.05),GPX4蛋白表达水平降低(P<0.05)。与对照组比较,实验组RAW264.7细胞中ROS、MDA和Fe^(2+)水平升高(P<0.05),且随时间增加呈上升趋势。结论:P.g-LPS诱导下RAW264.7细胞中铁死亡相关因子ACSL4和TfR1表达水平升高,而GPX4表达水平降低,并且呈时间依赖性,提示上述铁死亡相关因子的变化可能与牙周炎发病机制有关。 展开更多

关键词 巨噬细胞 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 铁死亡 活性氧

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖刺激巨噬细胞表达髓样细胞触发受体-1的研究 被引量：5

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作者 杨芸 陈珊珊 +2 位作者 许春梅 吴亚菲 赵蕾 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期475-481,共7页

目的探索牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)刺激的巨噬细胞中髓样细胞触发受体-1(TREM-1)、可溶性TREM-1(sTREM-1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,探讨TREM-1与牙周炎发病机制的可能关联。方法使用豆蔻酰佛波醇乙酯诱导人单核细胞系细胞TH... 目的探索牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)刺激的巨噬细胞中髓样细胞触发受体-1(TREM-1)、可溶性TREM-1(sTREM-1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,探讨TREM-1与牙周炎发病机制的可能关联。方法使用豆蔻酰佛波醇乙酯诱导人单核细胞系细胞THP-1分化为巨噬细胞,分别予以0(空白对照)、0.5、1.0μg·mL^(-1)的Pg-LPS刺激,并根据不同时间分组:孵育4、6、12、24 h组。实时定量聚合酶链反应检测巨噬细胞中TREM-1 mRNA的表达,Western blot分析TREM-1蛋白表达的差异,细胞免疫荧光染色检测TREM-1在巨噬细胞中的表达部位,并通过酶联免疫吸附试验对细胞培养液中的sTREM-1及TNF-α进行检测。结果与空白对照组相比,Pg-LPS刺激巨噬细胞后TREM-1 mRNA、TREM-1蛋白及细胞培养上清液中的s TREM-1表达均显著增强(P<0.05);1.0μg·mL^(-1) Pg-LPS组TREM-1 mRNA、TREM-1蛋白及细胞培养上清液中的sTREM-1表达量高于0.5μg·mL^(-1)组,且分别从6、4、4 h时间点开始差异具有统计学意义(P<0.05);细胞免疫荧光染色结果显示,Pg-LPS(1.0μg·mL^(-1))刺激巨噬细胞24 h后,可见TREM-1蛋白呈阳性染色,且TREM-1的染色部位主要位于巨噬细胞的细胞膜区域;Pg-LPS刺激巨噬细胞后TNF-α的分泌水平升高(P<0.05),其中1.0μg·mL^(-1) Pg-LPS组表达量高于0.5μg·mL^(-1)组,且从12 h开始差异具有统计学意义(P<0.05);0.5μg·mL^(-1) Pg-LPS刺激巨噬细胞后TREM-1 mRNA、TREM-1蛋白、sTREM-1间表达呈正相关(r=1,P<0.05),但与TNF-α表达不存在相关性;在1.0μg·mL^(-1) Pg-LPS刺激巨噬细胞后检测到了具有统计学意义的sTREM-1与TNF-α表达的正相关性(r=1,P<0.05)。结论巨噬细胞受到Pg-LPS刺激后可出现Pg-LPS浓度依赖性的TREM-1 mRNA、TREM-1蛋白及细胞培养上清液中的sTREM-1表达上调,且能观测到三者之间表达的正相关性;同时细胞培养上清液中的TNF-α也出现Pg-LPS浓度依赖性的表达上调,在高浓度Pg-LPS(1.0μg·mL^(-1))刺激下与sTREM-1表达量呈正相关。该结果提示,TREM-1作为促炎受体蛋白,可能通过调节巨噬细胞TNF-α的表达来实现牙周炎发展的促进作用。 展开更多

关键词 髓样细胞触发受体-1 牙周炎 牙龈卟啉单胞菌 巨噬细胞 脂多糖 肿瘤坏死因子-α

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谷氧还蛋白在牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导脐静脉内皮细胞氧化应激中的作用 被引量：1

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作者 申道南 成伟 +2 位作者 贾岳 赵蕾 吴亚菲 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期613-616,共4页

目的从基因和蛋白水平研究谷氧还蛋白(Grx)在牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)诱导脐静脉内皮细胞(EA-hy926细胞)时的表达变化及其对Akt通路的调控作用。方法采用牙龈卟啉单胞菌的LPS(1 000 ng·m L-1)对EA-hy926细胞进行不同时间段(4、12... 目的从基因和蛋白水平研究谷氧还蛋白(Grx)在牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)诱导脐静脉内皮细胞(EA-hy926细胞)时的表达变化及其对Akt通路的调控作用。方法采用牙龈卟啉单胞菌的LPS(1 000 ng·m L-1)对EA-hy926细胞进行不同时间段(4、12、18、24 h)的刺激诱导,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测细胞grx1基因的表达变化;然后加入Grx特异性抑制剂氯化亚硝脲(BCNU),使用Western blot法检测对照组、LPS组(1 000 ng·m L^(-1)LPS刺激12 h)和BCNU组(25μmol·m L-1BCNU预处理30 min+1 000 ng·m L^(-1)LPS刺激12 h)的Grx、Akt、磷酸化Akt蛋白的表达情况。结果 LPS诱导下,EA-hy926细胞的grx1基因表达量在各个时间段均上调,12 h时grx1表达量最高。LPS诱导12 h时,LPS组的Grx蛋白表达量较对照组明显升高(P<0.05),而BCNU可有效抑制Grx蛋白的表达(P<0.05);Akt蛋白表达量在各组间无明显差异(P>0.05),而LPS组的磷酸化Akt活性升高,显著高于对照组和BCNU组(P<0.05),与Grx蛋白的表达趋势一致。结论 LPS可以从基因和蛋白水平诱导Grx的表达;Grx是Akt的潜在调节因子,可能对LPS刺激下Akt的调控具有重要意义。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 谷氧还蛋白 AKT 氧化应激

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖对髓系细胞触发受体的激活作用 被引量：3

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作者 洪菲菲 雷浪 +2 位作者 潘盛波 李厚轩 闫福华 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期213-216,共4页

目的:研究牙龈卟啉单胞菌(Pg)脂多糖(LPS)对巨噬细胞中髓系细胞触发受体-1(TREM-1)和-2的激活作用。方法:分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,并以1mg/L的Pg-LPS刺激。采用实时荧光定量PCR技术检测TLR-2、TLR-4、TREM-1和TREM-2转录水平的变化,... 目的:研究牙龈卟啉单胞菌(Pg)脂多糖(LPS)对巨噬细胞中髓系细胞触发受体-1(TREM-1)和-2的激活作用。方法:分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,并以1mg/L的Pg-LPS刺激。采用实时荧光定量PCR技术检测TLR-2、TLR-4、TREM-1和TREM-2转录水平的变化,流式细胞术检测蛋白水平的变化,酶联免疫反应检测培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和巨噬细胞炎症蛋白-lα(MIP-lα)水平的变化。结果:Pg-LPS刺激巨噬细胞2h后,巨噬细胞内TLR-2和TREM-1的转录水平均表达上调;流式细胞检测显示24h后,细胞内TREM-1和TLR-2水平显著上调;TLR-4和TREM-2在实验中未见显著变化;Pg-LPS刺激巨噬细胞24h后,TNF-α和MIP-1α水平显著上升组;TREM-1的抑制物LP-17多肽显著抑制了Pg-LPS的炎症刺激作用。结论:TLR-2和TREM-1参与了巨噬细胞应答Pg-LPS的先天免疫过程。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 髓系细胞触发受体

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖刺激人牙髓干细胞炎症相关蛋白质组学研究 被引量：1

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作者 谢元栋 李泽华 +3 位作者 刘晓莉 胡玲 詹骆宁 李毅 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期736-741,共6页

目的:采用蛋白质组学的方法探究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.gingivalis LPS)诱导人牙髓干细胞(DPSCs)炎症相关差异蛋白的表达。方法:体外分离培养并鉴定人DPSCs,利用10μg/mL P.gingivalis LPS刺激DPSCs建立炎症模型,实时荧光定量聚合酶链... 目的:采用蛋白质组学的方法探究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.gingivalis LPS)诱导人牙髓干细胞(DPSCs)炎症相关差异蛋白的表达。方法:体外分离培养并鉴定人DPSCs,利用10μg/mL P.gingivalis LPS刺激DPSCs建立炎症模型,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子白细胞介素(IL)-6和IL-8的表达量。利用蛋白质组学的方法筛选P.gingivalis LPS诱导DPSCs炎症相关的差异表达蛋白,通过KEGG、GO和PPI进行功能富集分析。结果:P.gingivalis LPS刺激DPSCs导致炎症因子IL-6和IL-8的表达显著升高。与对照组相比,DPSCs中有277种差异表达蛋白在炎症微环境下发生了显著变化,功能富集分析结果显示差异表达蛋白参与调控多条炎症或损伤修复相关的信号通路如中性粒细胞介导的免疫过程、肿瘤坏死因子介导信号通路、凋亡信号通路、Wnt通路、TGF-β信号通路、磷酸戊糖途径、HIF-1信号通路等生物过程。结论:P.gingivalis LPS可诱导DPSCs发生炎症反应,此过程涉及多蛋白、多信号通路的相互联系,为探索牙髓炎的发病机制及临床诊断标记物的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 牙髓干细胞 蛋白质组学 生物信息学

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖对HUVECs中COX-2表达及信号通路的研究 被引量：1

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作者 高源 李佳 李维善 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期436-441,共6页

目的:研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.gingivalis lipopolysaccharide,P.g-LPS)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的影响,以及p38MAPK和PI3K/Akt信号通路是否参与... 目的:研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.gingivalis lipopolysaccharide,P.g-LPS)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的影响,以及p38MAPK和PI3K/Akt信号通路是否参与P.g-LPS对HUVECs中COX-2表达的调控。方法:体外培养HUVECs,选择不同浓度的P.g-LPS(0.5、1.0、5.0、10.0μg/mL)刺激6、18、24、36 h,采用细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)检测P.g-LPS对HUVECs的细胞增殖影响。通过Western blot、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测COX-2蛋白和基因的表达。体外培养HUVECs,不同浓度的P.g-LPS(0.5、1.0、5.0、10.0μg/mL)刺激36 h后,添加p38MAPK和PI3K/Akt通路抑制剂SB203580和LY294002。采用Western blot法和RT-qPCR法检测各组COX-2蛋白和基因的变化情况。结果:P.g-LPS处理HUVECs后,与对照组比较,随着P.g-LPS浓度增加HUVECs增殖活力显著下降(P<0.05)。与对照组比较,P.g-LPS促进HUVECs中COX-2的表达,且具有浓度依赖性(P<0.05)。同时,P.g-LPS激活了p38MAPK及PI3K/Akt信号通路,添加SB203580和LY294002抑制剂可以抑制P.g-LPS对COX-2的表达(P<0.05)。结论:P.g-LPS可明显抑制HUVECs的增殖,并且P.g-LPS可以通过激活p38MAPK及PI3K/Akt通路促进COX-2蛋白及基因的表达。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌脂多糖 人脐静脉内皮细胞 环氧合酶-2 牙周炎 动脉粥样硬化

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牙髓卟啉单胞菌脂多糖诱导小鼠成骨细胞表达白细胞介素-2 被引量：2

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作者 曲柳 于雅琼 +2 位作者 仇丽鸿 马楠 钟鸣 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期453-456,共4页

目的:探讨牙髓卟啉单胞菌(P.e)脂多糖(LPS)对小鼠成骨细胞IL-23mRNA和蛋白表达的影响,以及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)信号通路是否参与了该过程。方法:采用real-time PCR和Western blot法检测P.e LPS诱导MC3T3-E1细胞表达IL-23mRNA和蛋白... 目的:探讨牙髓卟啉单胞菌(P.e)脂多糖(LPS)对小鼠成骨细胞IL-23mRNA和蛋白表达的影响,以及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)信号通路是否参与了该过程。方法:采用real-time PCR和Western blot法检测P.e LPS诱导MC3T3-E1细胞表达IL-23mRNA和蛋白的情况,以及用PI3K信号通路抑制剂LY294002预处理细胞后,IL-23mRNA和蛋白表达的变化。结果:P.e LPS刺激MC3T3-E1细胞后,IL-23mRNA的表达增加具有浓度依赖性和时间依赖性(P<0.05),IL-23蛋白的表达增加具有时间依赖性(P<0.05);LY294002预处理细胞后,P.e LPS诱导的IL-23mRNA和蛋白的表达均显著降低(P<0.05)。结论:P.e LPS能诱导小鼠成骨细胞表达IL-23mRNA和蛋白,PI3K信号通路可能参与了此过程。 展开更多

关键词 牙髓卟啉单胞菌(P.e) 脂多糖(LPS) 成骨细胞 白细胞介素-23 磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)信号通路

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口腔干预措施对牙周炎大鼠颈动脉牙龈卟啉单胞菌检出量及C-反应蛋白表达的影响 被引量：13

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作者 任秀云 王冲 +5 位作者 刘欣 李豪 马千惠 林牧 石学雪 高晋华 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期192-197,共6页

目的建立慢性牙周炎(CP)合并高脂血症(HL)的SD大鼠模型并对其进行口腔干预,检测大鼠颈动脉局部C-反应蛋白(CRP)的表达情况及牙龈卟啉单胞菌的检出量,探讨牙周炎与动脉粥样硬化的相关性。方法 SD大鼠随机分为3组,A组为对照组,B组为HL组,... 目的建立慢性牙周炎(CP)合并高脂血症(HL)的SD大鼠模型并对其进行口腔干预,检测大鼠颈动脉局部C-反应蛋白(CRP)的表达情况及牙龈卟啉单胞菌的检出量,探讨牙周炎与动脉粥样硬化的相关性。方法 SD大鼠随机分为3组,A组为对照组,B组为HL组,C组为CP+HL组。C组分为C1组(不治疗组),C2组(基础治疗组),C3组(拔牙组);C2组又分为C2-1组(单纯牙周基础治疗组),C2-2组(牙周基础治疗+米诺环素+抗生素组);C3组又分为C3-1组(拔除患牙组),C3-2组(拔除患牙+抗生素组)。建模开始15周后随机处死B组大鼠1只,取颈动脉分叉血管组织进行油红O染色,观察到泡沫细胞形成则HL建模成功。建模成功后进行2次口腔干预,干预结束后5周处死所有大鼠,取双侧颈动脉血管分叉处组织,分别采用免疫组织化学法检测CRP相对含量,16s RNA半定量法检测样本中的牙龈卟啉单胞菌的相对含量。结果免疫组织化学结果显示,B、C组CRP阳性表达明显高于A组(P<0.05),与C1组相比,C组各干预组的CRP表达均降低(P<0.05),其中辅助抗生素组较不加抗生素组阳性表达更低(P<0.05),C2-2组在各干预组中阳性表达最低。牙龈卟啉单胞菌检测结果显示,C1组检出量最高,明显高于A、B组(P<0.05);C组各干预组的检出量均较C1组低(P<0.05),C3-2组最低(P<0.05)。结论伴HL的牙周炎大鼠不加干预任其发展,颈动脉血管中CRP的表达及牙龈卟啉单胞菌检出量都明显增加,血管病变逐渐加重。牙周基础治疗和拔牙均可有效降低颈动脉血管中CRP的表达及致病菌含量,其中牙周基础治疗对CRP表达的降低作用更明显,拔牙对降低牙周致病菌的作用更有效;基础治疗或拔牙时若辅以局部及全身抗炎药物,均可以有效提高CRP和牙周致病菌的降低作用。 展开更多

关键词 高脂血症 牙周炎 牙龈卟啉单胞菌 C-反应蛋白 牙周基础治疗

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牙龈卟啉单胞菌PG0717基因与慢性牙周炎的相关性研究 被引量：7

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作者 刘静波 林莉 +2 位作者 李琛 俞宁 潘亚萍 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期648-651,共4页

目的检测慢性牙周炎患者和牙周健康者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)PG0717基因,探讨PG0717基因与牙周临床指数之间的关系。方法选取慢性牙周炎(CP)患者90例和牙周健康者90例,共采集龈下菌斑标本540个;记录临床牙周指数(牙周... 目的检测慢性牙周炎患者和牙周健康者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)PG0717基因,探讨PG0717基因与牙周临床指数之间的关系。方法选取慢性牙周炎(CP)患者90例和牙周健康者90例,共采集龈下菌斑标本540个;记录临床牙周指数(牙周探诊深度、临床附着丧失和探诊出血);设计特异性引物检测P.gingivalis阳性龈下菌斑标本的PG0717基因。结果在P.gingivalis阳性龈下菌斑中,CP组PG0717基因检出率显著高于对照组,分别为56.22%和41.27%(χ2=4.50,P<0.05);随着牙周探诊深度、临床附着丧失加重和探诊出血趋势的增加,CP组该基因检出率呈现增高趋势。结论PG0717基因与P.gingivalis的致病性有关。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌 PG0717基因 脂蛋白 慢性牙周炎

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