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胞内信号转导分子LIM矿化蛋白1在人牙髓细胞体外矿化过程中表达的实验研究 被引量:11
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作者 王效英 张旗 +2 位作者 王强 陈卓 陈智 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2006年第3期228-231,共4页
目的:研究胞内信号转导分子LIM矿化蛋白1在人牙髓细胞体外矿化过程中的表达。方法:利用组织块法体外培养人牙髓细胞,实验组培养液中加入矿化诱导剂,对照组不加矿化诱导剂。培养14d后,免疫细胞化学检测牙本质涎蛋白的表达;von kossa染色... 目的:研究胞内信号转导分子LIM矿化蛋白1在人牙髓细胞体外矿化过程中的表达。方法:利用组织块法体外培养人牙髓细胞,实验组培养液中加入矿化诱导剂,对照组不加矿化诱导剂。培养14d后,免疫细胞化学检测牙本质涎蛋白的表达;von kossa染色检测矿化结节的形成。培养期间,采用半定量RT-PCR技术监测LIM矿化蛋白1及碱性磷酸酶的表达,SPSS11.0软件分析结果。结果:培养14d,实验组牙本质涎蛋白免疫细胞化学呈阳性表达,von kossa染色阳性,矿化结节形成;对照组牙本质涎蛋白表达阴性,von kossa染色阴性。RT-PCR结果显示碱性磷酸酶及LIM矿化蛋白1在实验组和对照组各时段均表达。培养期间,实验组LIM矿化蛋白1的表达显著性高于对照组,其中培养第2天及9天时表达分别达到两个高峰,约为对照组的1.8倍及3.0倍。培养期间,碱性磷酸酶的表达显著性增高,其中培养14d时约为对照组的2.0倍。结论:首次发现LIM矿化蛋白1与人牙髓细胞的体外矿化过程相关,提示LIM矿化蛋白1可能在牙髓细胞的分化及矿化中发挥一定作用。 展开更多
关键词 牙髓细胞 分化 矿化 LIM矿化蛋白1
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玻璃离子、复合体、复合树脂对人牙髓细胞的细胞毒性试验研究 被引量:3
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作者 杨健 陈耀忠 +2 位作者 胡国柱 聂荣庆 吴丽娜 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2004年第5期492-494,共3页
目的 :研究玻璃离子、复合体、复合树脂牙色材料对体外培养的人牙髓细胞的细胞毒性作用。方法 :采用MTT法测定上述 3种牙色材料的浸渍液对体外培养的人牙髓细胞的细胞毒性。结果 :与对照组相比 ,7d的牙色材料浸渍培养液对体外培养的人... 目的 :研究玻璃离子、复合体、复合树脂牙色材料对体外培养的人牙髓细胞的细胞毒性作用。方法 :采用MTT法测定上述 3种牙色材料的浸渍液对体外培养的人牙髓细胞的细胞毒性。结果 :与对照组相比 ,7d的牙色材料浸渍培养液对体外培养的人牙髓细胞有抑制作用 ,其中复合树脂的抑制人牙髓细胞的增殖有显著性 (P <0 .0 5 ) ;但 3d的浸渍培养液却呈现出不同的细胞毒性作用 :玻璃离子仍有一定的抑制细胞增殖作用 ,复合体基本无作用 ,而复合树脂却有显著的促进细胞增殖作用 (P <0 .0 5 )。结论 :牙色材料的细胞毒性作用与其牙色材料的种类相关。 展开更多
关键词 玻璃离子 复合体 复合树脂 牙髓细胞/细胞培养 细胞毒性
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人牙髓细胞体外培养的方法学研究 被引量:11
3
作者 彭彬 樊明文 +1 位作者 边专 陈智 《口腔医学纵横》 CSCD 1997年第4期198-200,共3页
作者观察了组织块法和酶消化法以及DMEM和RPMI1640二种常用培养液在人牙髓细胞体外培养中的效果。结果表明,组织块法培养出的牙髓细胞为单一的成纤维细胞样细胞,用DMEM时,其传代成功率明显高于用RPMI1604;胰蛋白酶消化法、胰蛋白酶... 作者观察了组织块法和酶消化法以及DMEM和RPMI1640二种常用培养液在人牙髓细胞体外培养中的效果。结果表明,组织块法培养出的牙髓细胞为单一的成纤维细胞样细胞,用DMEM时,其传代成功率明显高于用RPMI1604;胰蛋白酶消化法、胰蛋白酶和胶原酶联用可培养出成纤维细胞样细胞,少量的校形细胞和内皮样细胞,但细胞数量较少,生长缓慢,达不到传代要求。DMEM在培养板和组织培养瓶中均较适合牙髓细胞的生长,而RPMI1640效果不理想。提示组织块法和DMEM适合于人牙髓细胞的体外培养。 展开更多
关键词 体外培养 牙髓细胞 方法学
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五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞活性的影响 被引量:4
4
作者 兰雪松 唐荣银 罗君欢 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2007年第4期398-401,共4页
目的:观察不同浓度及不同作用时间的五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞活性的影响。方法:采用组织块法体外培养牙髓细胞,以不同浓度五倍子水提取物(1.25×103、2.5×103、5×103、10×103、20×103μg/L)和1... 目的:观察不同浓度及不同作用时间的五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞活性的影响。方法:采用组织块法体外培养牙髓细胞,以不同浓度五倍子水提取物(1.25×103、2.5×103、5×103、10×103、20×103μg/L)和1×105μg/L内毒素作用于人牙髓细胞,用四唑盐比色试验(MTT法)检测细胞活性,采用单因素方差分析(完全随机设计)对实验数据进行统计学分析。结果:低浓度(1.25×103、2.5×103、5×103μg/L)五倍子水提取物能明显拮抗100μg/mL内毒素对细胞活性的抑制作用(P<0.01),2.5×103μg/L五倍子水提取物拮抗1×105μg/L内毒素对细胞活性的抑制作用第3天开始明显增加,并呈时间依赖性。结论:低浓度五倍子水提取物能够拮抗内毒素对人牙髓细胞活性的抑制作用。 展开更多
关键词 五倍子 内毒素 牙髓细胞 活性
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微小RNA-210-3p在低氧环境中对人牙髓细胞增殖和分化的影响 被引量:2
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作者 袁晓琴 奂忠平 王洪涛 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第10期970-974,共5页
目的:探讨微小RNA(microRNA,miR)-210-3p在低氧环境下对人牙髓细胞增殖和分化的影响。方法:分离提取人牙髓细胞,检测miR-210-3p在常氧环境和低氧环境下人牙髓细胞中的表达情况。转染miR-210-3p inhibitors至人牙髓细胞,细胞计数试剂盒(c... 目的:探讨微小RNA(microRNA,miR)-210-3p在低氧环境下对人牙髓细胞增殖和分化的影响。方法:分离提取人牙髓细胞,检测miR-210-3p在常氧环境和低氧环境下人牙髓细胞中的表达情况。转染miR-210-3p inhibitors至人牙髓细胞,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测miR-210-3p抑制对低氧环境下人牙髓细胞增殖的影响。碱性磷酸酶染色、实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)及茜素红染色检测抑制miR-210-3p表达对低氧环境下人牙髓细胞分化的调控作用。结果:低氧环境培养的人牙髓细胞高表达miR-210-3p,miR-210-3p在低氧环境下可以促进人牙髓细胞的增殖,并且miR-210-3p对低氧环境下的人牙髓细胞的早期分化具有促进作用,而对晚期矿化则起到抑制作用。结论:miR-210-3p参与调控低氧环境下人牙髓细胞的增殖和分化。 展开更多
关键词 微小RNA-210-3p 低氧 牙髓细胞 增殖 分化
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人牙髓细胞体外培养及向成牙本质细胞诱导分化 被引量:3
6
作者 朱李军 冯航 +2 位作者 陈仲伟 王启朋 江穗 《现代医院》 2007年第6期26-28,共3页
目的利用组织块酶解法体外培养人牙髓细胞并进行鉴定。方法通过组织块酶解法行人牙髓细胞体外培养,免疫细胞化学法鉴定细胞组织来源,测定体外复层生长的人牙髓细胞碱性磷酸酶活性,并检测其诱导矿化能力。结果牙髓细胞在连续培养后具有... 目的利用组织块酶解法体外培养人牙髓细胞并进行鉴定。方法通过组织块酶解法行人牙髓细胞体外培养,免疫细胞化学法鉴定细胞组织来源,测定体外复层生长的人牙髓细胞碱性磷酸酶活性,并检测其诱导矿化能力。结果牙髓细胞在连续培养后具有复层生长特性,并具有显著的碱性磷酸酶活性,连续培养的牙髓细胞可形成矿化结节。结论建立了成牙本质细胞样细胞体外培养体系,所获得的成牙本质细胞样细胞具有成牙本质细胞的部分形态和生物学功能。 展开更多
关键词 牙髓细胞 体外培养
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脉冲Nd:YAG激光照射对牙髓细胞增殖的影响 被引量:4
7
作者 陈柯 任煜光 +1 位作者 刘桂萍 臧燕 《口腔医学纵横》 CSCD 1998年第3期137-139,共3页
目的了解脉冲Nd:YAG激光照射对牙髓细胞增殖的影响。方法应用体外组织细胞培养技术,MTT比色法测量不同能量参数的Nd:YAG激光照射对牙髓细胞增殖的影响。结果80mj20Hz的能量最有利于细胞生长,频率超过40Hz即对细胞生长无促进作用。... 目的了解脉冲Nd:YAG激光照射对牙髓细胞增殖的影响。方法应用体外组织细胞培养技术,MTT比色法测量不同能量参数的Nd:YAG激光照射对牙髓细胞增殖的影响。结果80mj20Hz的能量最有利于细胞生长,频率超过40Hz即对细胞生长无促进作用。结论合适的能量能够促进细胞生长。能量过大抑制细胞增长。 展开更多
关键词 牙髓细胞增殖 激光照射 ND:YAG激光
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低分子釉原蛋白的纯化及其对人牙髓细胞和牙周膜细胞作用的研究 被引量:1
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作者 张艺文 薛云鹏 +3 位作者 李玉成 朱庆林 刘智广 余擎 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期138-141,共4页
目的:纯化低分子猪釉原蛋白(LMWPA),并观察其对人牙髓细胞(HDPCs)和牙周膜细胞(HPLCs)增殖及碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法:取六月龄猪第二磨牙牙胚牙釉质,用液相色谱法分离纯化LMWPA,分别采用MTT法和酶动力学方法测定LMWPA对HDPCs和... 目的:纯化低分子猪釉原蛋白(LMWPA),并观察其对人牙髓细胞(HDPCs)和牙周膜细胞(HPLCs)增殖及碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法:取六月龄猪第二磨牙牙胚牙釉质,用液相色谱法分离纯化LMWPA,分别采用MTT法和酶动力学方法测定LMWPA对HDPCs和HPLCs的体外作用。结果:得到的LMWPA是分子量约为5.0KDa的单一组分;在50和100μg/mL时,能的显著促进HDPCs和HPLCs的增殖,ALP活性上调(P<0.01);而在≥150μg/mL时,能显著抑制细胞的增殖,ALP活性下调(P<0.01)。结论:LMWPA影响HDPCs和HPLCs的增殖和碱性磷酸酶活性,并存在剂量和时间依赖性。 展开更多
关键词 釉原蛋白 牙髓细胞 牙周膜细胞 增殖 碱性磷酸酶
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双向电泳分析维生素D对牙髓细胞分化的影响 被引量:1
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作者 聂敏 边专 +2 位作者 樊明文 赵心臣 Mikael Wendel 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2005年第4期402-404,共3页
目的:用双向电泳分析牙髓细胞分化过程中产生或分泌的新蛋白质.方法:在体外培养牙髓细胞,给予一定时间的1,25-双羟维生素D3,促使牙髓细胞分化,结合双向电泳技术分析细胞分化前后蛋白质合成、分泌的变化.结果:pH4-8 和相对分子量MW 20~9... 目的:用双向电泳分析牙髓细胞分化过程中产生或分泌的新蛋白质.方法:在体外培养牙髓细胞,给予一定时间的1,25-双羟维生素D3,促使牙髓细胞分化,结合双向电泳技术分析细胞分化前后蛋白质合成、分泌的变化.结果:pH4-8 和相对分子量MW 20~90 kD范围的蛋白斑点分布较多.双向电泳凝胶图像分析软件ImageMaster 2D Platium比较分析,给予维生素D孵育24 h后,检测到77个新的蛋白点,同时有17个蛋白点消失.结论:维生素D促使牙髓细胞分化,并产生或分泌了一些新的蛋白质,维生素D和这些蛋白质对牙齿的发育、矿化的过程起调节作用. 展开更多
关键词 双向电泳 维生素D 牙髓细胞 发育
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iRoot BP对人乳牙牙髓细胞增殖、矿化的影响 被引量:2
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作者 战园 刘鹤 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第28期85-87,共3页
目的探讨iRoot BP对人乳牙牙髓细胞增殖、矿化的影响,为其用于乳牙活髓保存治疗提供依据。方法将iRoot BP和三氧化矿物凝聚体(MTA)分别制成高度2 mm、直径8 mm的圆柱体,置于DMEM细胞培养基中,收集浸提液。原代培养人乳牙牙髓细胞并鉴定... 目的探讨iRoot BP对人乳牙牙髓细胞增殖、矿化的影响,为其用于乳牙活髓保存治疗提供依据。方法将iRoot BP和三氧化矿物凝聚体(MTA)分别制成高度2 mm、直径8 mm的圆柱体,置于DMEM细胞培养基中,收集浸提液。原代培养人乳牙牙髓细胞并鉴定。随机将人乳牙牙髓细胞分为iRoot BP组、MTA组、对照组。iRoot BP组和MTA组分别加入适量iRoot BP、MTA浸提液,使其终浓度分别为10%、20%、50%、100%,对照组不予处理。采用CCK-8法检测三组培养24、72 h时细胞增殖指数,采用实时荧光定量PCR法检测三组培养48、96 h时碱性磷酸酶(ALP)mRNA表达(iRoot BP、MTA浸提液浓度均为10%)。结果与对照组同时间点比较,含50%、100%浸提液的iRoot BP组、MTA组细胞增殖指数均降低(P均<0.05),而含10%、20%浸提液的iRoot BP组、MTA组细胞增殖指数无明显变化(P均>0.05)。与对照组同时间点比较,iRoot BP组、MTA组ALP mRNA相对表达量均升高(P均<0.05)。iRoot BP组与MTA组作用48、96 h ALP mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 10%iRoot BP浸提液对人乳牙牙髓细胞增殖无明显影响,但可明显促进细胞矿化。 展开更多
关键词 乳牙 牙髓保存 人乳牙牙髓细胞 直接盖髓材料 三氧化矿物凝聚体 细胞增殖 细胞分化
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高迁移率族蛋白B1在人牙髓细胞成牙本质分化中的表达 被引量:2
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作者 崔春 祁胜财 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1100-1103,1107,共5页
目的:检测人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)诱导矿化过程中高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1)的表达变化,探讨HMGB1在人牙髓细胞损伤修复中的可能作用。方法:组织块法分离培养hDPCs,收集矿化诱导0、3、7、11... 目的:检测人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)诱导矿化过程中高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1)的表达变化,探讨HMGB1在人牙髓细胞损伤修复中的可能作用。方法:组织块法分离培养hDPCs,收集矿化诱导0、3、7、11、14d后hDPCs的mRNA、蛋白质及细胞爬片,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(western blot)分别检测HMGB1、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的mRNA及蛋白表达水平;并检测ALP活性,免疫荧光检测HMGB1在hDPCs矿化过程中的表达。结果:hDPCs矿化诱导后,DMP1、DSPP、ALP及HMGB1的mRNA表达显著性上调,DMP1、DSPP和ALP的mRNA以及碱性磷酸酶活性在诱导7d、11d和14d后与对照组间差异有统计学意义(P<0.05),HMGB1mRNA在矿化诱导11d和14d后与对照组的差异具有统计学意义(P<0.05)。蛋白印迹法检测示细胞内各矿化标记的蛋白表达均较对照组上调,而细胞内HMGB1的蛋白表达较对照组下调。免疫荧光结果显示hDPCs矿化过程中,HMGB1逐渐从胞核转移至胞浆。结论:在hDPCs诱导成牙本质细胞分化过程中,HMGB1在mRNA水平上与DMP1、DSPP和ALP的表达变化趋势相似,而细胞内HMGB1蛋白水平表达下调,且HMGB1在hDPCs细胞内出现转位,提示HMGB1与hDPCs的成牙本质分化有关,可能在牙髓细胞损伤修复中发挥作用。 展开更多
关键词 牙髓细胞 高迁移率族蛋白B1 成牙本质分化
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不同培养条件下人牙髓细胞α-SMA表达的变化 被引量:1
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作者 杨雪超 樊明文 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2003年第3期187-189,共3页
目的 :检测α -平滑肌肌动蛋白 (α-SMA)在正常及诱导分化的人牙髓细胞中的表达变化 ,探讨α -SMA与人牙髓细胞分化之间的关系。方法 :体外连续人牙髓细胞 ,传代后分二组 ,一组常规培养 ,一组用条件培养液诱导其分化 ,采用免疫组化和EL... 目的 :检测α -平滑肌肌动蛋白 (α-SMA)在正常及诱导分化的人牙髓细胞中的表达变化 ,探讨α -SMA与人牙髓细胞分化之间的关系。方法 :体外连续人牙髓细胞 ,传代后分二组 ,一组常规培养 ,一组用条件培养液诱导其分化 ,采用免疫组化和ELISA方法检测两组细胞α -SMA的表达 ,分析其差异。结果 :随体外常规连续培养 ,人牙髓细胞α -SMA表达逐渐增多 ;较之常规培养组 ,诱导分化组的细胞α -SMA表达减少。结论 :人牙髓细胞在朝成牙本质细胞方向分化时 ,α -SMA表达逐渐减少 ;人牙髓细胞体外常规连续培养 。 展开更多
关键词 牙髓细胞 Α-平滑肌肌动蛋白 细胞分化 蛋白表达
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Lin28过表达对人牙髓细胞增殖、分化及矿化能力的影响
13
作者 董宁 张田田 +1 位作者 郭青玉 阮建平 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第9期1293-1298,共6页
目的 研究Lin28过表达对人牙髓细胞(HDPCs)增殖、分化及矿化能力的影响。方法 通过慢病毒载体构建Lin28稳定过表达牙髓细胞株,实验分组为:正常HDPC组(正常组)、转染空载体的HDPCs组(空载体组)及Lin28过表达组。经矿化诱导培养后,分别用C... 目的 研究Lin28过表达对人牙髓细胞(HDPCs)增殖、分化及矿化能力的影响。方法 通过慢病毒载体构建Lin28稳定过表达牙髓细胞株,实验分组为:正常HDPC组(正常组)、转染空载体的HDPCs组(空载体组)及Lin28过表达组。经矿化诱导培养后,分别用CCK-8法、ATP活性测定、碱性磷酸酶(ALP)活性测定和茜素红钙染色法检测Lin28过表达对人牙髓细胞增殖、能量、分化和矿化能力的影响;qRT-PCR检测成牙本质相关基因(DMP-1、DSPP、OCN、OPN、ALP)的mRNA相对表达水平。结果 CCK-8法检测增殖活性结果显示Lin28过表达组的OD值明显高于正常组和空载体组,差异具有统计学意义( P <0.05);Lin28过表达牙髓细胞ATP及ALP活性较空载体组和正常组明显升高( P <0.05);Lin28过表达组的钙化结节形成数量显著超过正常组,同时Lin28过表达组的牙本质形成相关基因DMP-1、DSPP、OCN、OPN、ALP的mRNA相对表达水平较空载体组和正常组上调( P <0.05)。而空载体组和正常组间的差异没有明显的统计学意义( P <0.05)。结论 Lin28过表达可增强人牙髓细胞的增殖、分化及矿化能力,以及牙本质形成相关基因mRNA的相对表达水平。 展开更多
关键词 Lin28 牙髓细胞 ATP 增殖 分化
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两种不同盖髓剂对人牙髓细胞毒性的体外研究
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作者 古丽努尔·阿吾提 古丽波斯坦·吐尔逊 +1 位作者 阿尔孜古丽·吐尔逊 居来提·吐尔逊 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2012年第5期485-487,490,共4页
目的:研究丁香酚及Dycal对人牙髓细胞的毒性。方法:体外组织块法培养人牙髓细胞,采用噻唑蓝比色法(MTT法)及台盼蓝染色活细胞计数法来评价不同浓度及不同时间段丁香酚及Dycal对牙髓细胞细胞毒性,比色法测定丁香酚干预组细胞内总谷胱甘... 目的:研究丁香酚及Dycal对人牙髓细胞的毒性。方法:体外组织块法培养人牙髓细胞,采用噻唑蓝比色法(MTT法)及台盼蓝染色活细胞计数法来评价不同浓度及不同时间段丁香酚及Dycal对牙髓细胞细胞毒性,比色法测定丁香酚干预组细胞内总谷胱甘肽含量。结果:0.1mmol/L浓度的丁香酚及0.1%浓度的Dycal对人牙髓细胞毒性明显,其对细胞毒性反应成浓度及时间依赖性改变。各丁香酚组细胞内谷胱甘肽含量低于对照组,第3天丁香酚最低浓度组细胞内谷胱甘肽含量高于高浓度组。结论:高浓度丁香酚及Dycal对牙髓细胞毒性明显,细胞毒性与浓度及作用时间有关。低浓度丁香酚可能通过谷胱甘肽的参与抵抗氧化应激,从而起到对细胞的保护作用。Dycal可能更加适合用于间接盖髓。 展开更多
关键词 牙髓细胞 丁香酚 DYCAL MTT 谷胱甘肽
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双向电泳分析重组人白细胞介素-1β对人牙髓细胞的影响
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作者 郭世梁 张颖丽 +1 位作者 张影杰 柏祥娥 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1029-1031,1035,共4页
目的:观察rhIL-1β对培养的HDPCs产生蛋白质的影响,揭示rhIL-1β与牙髓炎的关系。方法:在HD-PCs的培养液中加入rhIL-1β,用2-DE分离HDPCs全蛋白,获得对照组和诱导组HDPCs蛋白质图谱,ImageMaster2DElit 5.0软件分析确认差异表达蛋白。结... 目的:观察rhIL-1β对培养的HDPCs产生蛋白质的影响,揭示rhIL-1β与牙髓炎的关系。方法:在HD-PCs的培养液中加入rhIL-1β,用2-DE分离HDPCs全蛋白,获得对照组和诱导组HDPCs蛋白质图谱,ImageMaster2DElit 5.0软件分析确认差异表达蛋白。结果:比较对照组和诱导组蛋白质图谱,发现了39个蛋白质点差异明显。其中15个蛋白质点在诱导组高表达,新增13个蛋白质点,7个蛋白质点低表达,4个蛋白质点仅在对照组中表达。结论:HDPCs对rhIL-1β的应答反应是一个非常复杂的过程,多种蛋白质分子涉及其中。 展开更多
关键词 重组人白细胞介素-1β(rhIL-1β) 双向电泳(2-DE) 蛋白质组 牙髓细胞(HDPCs)
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IL-1ra对FnLPS诱导人牙髓细胞合成IL-1β的拮抗作用
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作者 陆怀秀 肖明振 牛忠英 《口腔医学纵横》 CSCD 2000年第3期177-179,共3页
目的 :观察人重组白细胞介素 1受体拮抗剂 (IL - 1ra)对内毒素脂多糖 (LPS)刺激的人牙髓细胞分泌IL - 1β的拮抗作用。方法 :用ELISA夹心法检测IL - 1β含量。结果 :人牙髓细胞经LPS刺激后 ,IL - 1β含量明显增加。当加入高浓度的IL - ... 目的 :观察人重组白细胞介素 1受体拮抗剂 (IL - 1ra)对内毒素脂多糖 (LPS)刺激的人牙髓细胞分泌IL - 1β的拮抗作用。方法 :用ELISA夹心法检测IL - 1β含量。结果 :人牙髓细胞经LPS刺激后 ,IL - 1β含量明显增加。当加入高浓度的IL - 1ra后 ,IL - 1β含量与对照组相比有显著性降低 ,在LPS刺激牙髓细胞 6 0分钟以前加入一定浓度的IL - 1ra ,牙髓细胞培养上清液中IL - 1β的含量显著降低 ,但在 90分钟以后再加入IL - 1ra ,则IL - 1β的含量无明显变化。结论 :高剂量的IL - 1ra能够抑制LPS刺激的牙髓细胞分泌IL - 1β ,从而拮抗IL - 1的生物学活性。 展开更多
关键词 内毒素脂多糖 牙髓细胞 IL-1Β IL-1RA IL-1
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热休克蛋白70对大鼠牙髓细胞高温损伤的影响 被引量:3
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作者 裴页石 刘英群 +2 位作者 吕晶 金星爱 王锐 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2012年第10期980-982,986,共4页
目的:研究预热处理诱导的热休克蛋白70(HSP70)对受高温损伤的大鼠牙髓细胞的影响。方法:将体外培养的大鼠牙髓细胞随机分为4组,分别为正常对照组(C组):37℃常规培养18h;预热处理组(pH组):37℃常规培养9h后42℃培养1h,再复温培养8h;高温... 目的:研究预热处理诱导的热休克蛋白70(HSP70)对受高温损伤的大鼠牙髓细胞的影响。方法:将体外培养的大鼠牙髓细胞随机分为4组,分别为正常对照组(C组):37℃常规培养18h;预热处理组(pH组):37℃常规培养9h后42℃培养1h,再复温培养8h;高温损伤组(SH组):37℃常规培养9h后46℃培养1h,再复温培养8h;预热处理+高温损伤组(pH+SH组):42℃培养1h后恢复常规培养8h,再置于46℃培养1h后恢复常规培养8h。以Western Blot检测细胞内HSP70的表达变化;以四唑盐(MTT)比色法、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染法、细胞形态学观察评价细胞存活能力。结果:Western Blot显示,与C组相比较PH组HSP70表达上调;MTT比色法、AO/EB双染法、细胞形态学观察均显示pH+SH组较SH组的细胞存活能力强。结论:预热处理可诱导大鼠牙髓细胞中的HSP70表达上调,减轻高温对牙髓细胞的损伤。 展开更多
关键词 热休克蛋白70 大鼠牙髓细胞 预热
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脂多糖诱导牙髓细胞DNA双链断裂的研究 被引量:4
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作者 黄叶全 孟柳燕 +1 位作者 乔玮玮 边专 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第3期235-239,共5页
目的:探讨低剂量条件下脂多糖诱导牙髓细胞DNA损伤方法,为研究脂多糖诱导牙髓细胞DNA双链断裂及DNA修复提供实验模型。方法:10μg/L脂多糖连续刺激牙髓细胞1、3、6次后,采取MTT及TUNEL分别检测其对牙髓细胞增殖及凋亡的作用;采用q-PCR... 目的:探讨低剂量条件下脂多糖诱导牙髓细胞DNA损伤方法,为研究脂多糖诱导牙髓细胞DNA双链断裂及DNA修复提供实验模型。方法:10μg/L脂多糖连续刺激牙髓细胞1、3、6次后,采取MTT及TUNEL分别检测其对牙髓细胞增殖及凋亡的作用;采用q-PCR及免疫印迹检测γ-H2A.X的mRNA及蛋白水平的表达;使用免疫荧光及免疫组化法观测γ-H2A.X在体内、外牙髓细胞的表达。结果:与对照组相比,10μg/L脂多糖连续刺激对牙髓细胞增殖及凋亡均无显著性差异;脂多糖连续刺激6次后细胞免疫荧光显示在细胞核检测到γ-H2A.X的阳性表达,且蛋白及mRNA水平的表达较对照组有显著性增加(P<0.05);免疫组化结果表明在脂多糖诱导4、6、8d后,γ-H2A.X在大鼠牙髓组织较对照组表达水平显著升高(P<0.05)。结论:低剂量脂多糖连续刺激可诱导牙髓细胞产生DNA双链断裂。 展开更多
关键词 脂多糖 牙髓细胞 DNA双链断裂 γ-H2A.X
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IGF-1通过PI3K/AKT信号通路促进牙髓细胞增殖及碱性磷酸酶活性的研究 被引量:13
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作者 杜小颖 丁威薇 +1 位作者 陈悦 迟丹丹 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第5期538-541,共4页
目的:研究IGF-1对牙髓细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)活性及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:采用酶消化法分离培养原代人牙髓细胞。Western blot检测牙髓组织中IGF-1蛋白表达,不同浓度的IGF-1处理牙髓细胞7d,CCK8法检测细胞增殖。用IGF-1(100... 目的:研究IGF-1对牙髓细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)活性及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:采用酶消化法分离培养原代人牙髓细胞。Western blot检测牙髓组织中IGF-1蛋白表达,不同浓度的IGF-1处理牙髓细胞7d,CCK8法检测细胞增殖。用IGF-1(100μg/L)及LY294002(10μmol/L)分别单独或同时处理牙髓细胞,培养7d后MTT实验检测细胞增殖;在培养第3、5、7、14天时检测细胞ALP活性;在培养第7天时用Western blot检测AKT和p-AKT蛋白表达情况。结果:IGF-1在牙髓炎组织中低表达,IGF-1在20~100μg/L浓度范围内从作用第3天开始能够显著促进牙髓细胞增殖(P<0.05或P<0.01),且具有剂量和时间依赖效应。LY294002能够抑制牙髓细胞的增殖和碱性磷酸酶活性,具有时间依赖性。IGF-1能促进p-AKT蛋白表达,而LY294002能减低IGF-1对p-AKT蛋白表达的促进作用。结论:IGF-1可以促进牙髓细胞增殖和碱性磷酸酶活性,且具有浓度和时间依赖性,作用机制可能与PI3K/AKT信号通路相关。 展开更多
关键词 牙髓细胞 细胞增殖 碱性磷酸酶
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自噬通过GATA4调控人牙髓细胞衰老反应 被引量:4
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作者 黄佩 乔玮玮 孟柳燕 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2020年第12期1142-1147,共6页
目的:探究脂多糖(lipopolyasccharide,LPS)诱导的炎症微环境下,自噬对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)衰老反应的调控作用。方法:体外分离培养hDPCs,10μg/L LPS连续刺激hDPCs 6 d,并分别利用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methy... 目的:探究脂多糖(lipopolyasccharide,LPS)诱导的炎症微环境下,自噬对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)衰老反应的调控作用。方法:体外分离培养hDPCs,10μg/L LPS连续刺激hDPCs 6 d,并分别利用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)与GATA结合蛋白4(GATA binding protein 4,GATA4)小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)进一步处理hDPCs。Western blot检测不同处理条件下hDPCs内GATA4、微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)、衰老相关蛋白p53及p16的表达变化。细胞免疫荧光染色检测不同处理条件下LC3的表达,并对衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-Gal)进行染色。结果:LPS连续刺激hDPCs后,LC3、GATA4、p53、p16的表达及SA-β-Gal阳性细胞数增加;3-MA抑制hDPCs自噬后,GATA4、p53及p16的表达及SA-β-Gal阳性细胞数进一步增加;敲低GATA4后,LC3表达无变化,而p53、p16的表达及SA-β-Gal阳性细胞数明显降低。结论:在LPS诱导的炎症微环境下,自噬通过GATA4负性调节hDPCs的衰老反应。 展开更多
关键词 牙髓细胞 炎症 自噬 GATA结合蛋白4 衰老
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