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miR-203靶向调节PEG3/NF-κB信号通路对糖尿病肾病大鼠肾纤维化的影响
被引量：
3
1
作者
赵力敏
李雅婧
+1 位作者
张勇刚
张颖玮
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期2275-2281,共7页
目的:探究微小RNA-203(miR-203)对父本表达基因3(PEG3)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的靶向调控作用及其对糖尿病肾病(DN)大鼠肾纤维化的影响。方法:建立大鼠DN模型,高糖培养大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)模拟体外DN模型,qRT-PCR检测m...
目的:探究微小RNA-203(miR-203)对父本表达基因3(PEG3)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的靶向调控作用及其对糖尿病肾病(DN)大鼠肾纤维化的影响。方法:建立大鼠DN模型,高糖培养大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)模拟体外DN模型,qRT-PCR检测miR-203表达水平,Western blot检测PEG3、NF-κB蛋白表达。双荧光素酶报告基因技术检测miR-203与PEG3的靶向关系。构建miR-203模拟物(miR-203 mimic)及阴性对照(mimic NC),PEG3高表达重组载体(pcDNAPEG3)及阴性对照(pcDNA-NC),分别注射及转染至DN大鼠及DN模型细胞中,设置为:对照组、模型组、miR-203 mimic组、mimic NC组、miR-203 mimic+pcDNA-PEG3组、miR-203 mimic+pcDNA-NC组。检测大鼠24 h尿蛋白、血糖、血清肌酸酐(SCr)和尿素氮(BUN),电镜及Masson染色检测肾组织病变及纤维化变化;ELISA检测细胞中IL-6、IL-1β、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、TGF-β1含量;Western blot检测肾组织中IL-6、IL-1β、CollagenⅠ、α-SMA、TGF-β1蛋白表达。结果:miR-203在DN大鼠肾组织及肾小管上皮细胞中表达降低(P<0.05),PEG3/NF-κB在DN大鼠肾组织及肾小管上皮细胞中表达升高(P<0.05)。miR-203与PEG3之间有靶向结合位点。上调miR-203表达,可抑制DN大鼠及细胞模型PEG3/NF-κB激活,降低炎症-纤维化相关因子表达,缓解大鼠肾组织结构损伤、肾功能下降等DN病理症状(P<0.05)。pcDNA-PEG3可部分逆转miR-203的上述作用(P<0.05)。结论:miR-203可靶向负调控PEG3/NF-κB通路,上调miR-203表达,可靶向抑制PEG3/NF-κB通路活化,发挥抗DN肾脏炎症-纤维化病变。
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关键词
微小RNA-20
3
糖尿病肾病
父本表达基因3
核转录因子-ΚB
纤维化
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职称材料
题名
miR-203靶向调节PEG3/NF-κB信号通路对糖尿病肾病大鼠肾纤维化的影响
被引量：
3
1
作者
赵力敏
李雅婧
张勇刚
张颖玮
机构
深圳市龙华区中心医院老年医学科
深圳市龙华区中心医院肾病内科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期2275-2281,共7页
基金
广东省基础与应用基础研究基金项目(2023A1515011727)
深圳市科技计划基础研究项目(JCYJ20180306172459580)资助。
文摘
目的:探究微小RNA-203(miR-203)对父本表达基因3(PEG3)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的靶向调控作用及其对糖尿病肾病(DN)大鼠肾纤维化的影响。方法:建立大鼠DN模型,高糖培养大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)模拟体外DN模型,qRT-PCR检测miR-203表达水平,Western blot检测PEG3、NF-κB蛋白表达。双荧光素酶报告基因技术检测miR-203与PEG3的靶向关系。构建miR-203模拟物(miR-203 mimic)及阴性对照(mimic NC),PEG3高表达重组载体(pcDNAPEG3)及阴性对照(pcDNA-NC),分别注射及转染至DN大鼠及DN模型细胞中,设置为:对照组、模型组、miR-203 mimic组、mimic NC组、miR-203 mimic+pcDNA-PEG3组、miR-203 mimic+pcDNA-NC组。检测大鼠24 h尿蛋白、血糖、血清肌酸酐(SCr)和尿素氮(BUN),电镜及Masson染色检测肾组织病变及纤维化变化;ELISA检测细胞中IL-6、IL-1β、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、TGF-β1含量;Western blot检测肾组织中IL-6、IL-1β、CollagenⅠ、α-SMA、TGF-β1蛋白表达。结果:miR-203在DN大鼠肾组织及肾小管上皮细胞中表达降低(P<0.05),PEG3/NF-κB在DN大鼠肾组织及肾小管上皮细胞中表达升高(P<0.05)。miR-203与PEG3之间有靶向结合位点。上调miR-203表达,可抑制DN大鼠及细胞模型PEG3/NF-κB激活,降低炎症-纤维化相关因子表达,缓解大鼠肾组织结构损伤、肾功能下降等DN病理症状(P<0.05)。pcDNA-PEG3可部分逆转miR-203的上述作用(P<0.05)。结论:miR-203可靶向负调控PEG3/NF-κB通路,上调miR-203表达,可靶向抑制PEG3/NF-κB通路活化,发挥抗DN肾脏炎症-纤维化病变。
关键词
微小RNA-20
3
糖尿病肾病
父本表达基因3
核转录因子-ΚB
纤维化
Keywords
microRNA-20
3
Diabetic nephropathy
Paternally expressed gene
3
Nuclear transcription factor-κB
Fibrosis
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR-203靶向调节PEG3/NF-κB信号通路对糖尿病肾病大鼠肾纤维化的影响
赵力敏
李雅婧
张勇刚
张颖玮
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
3
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