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Epstein-Barr病毒DNA多聚酶基因扩增和表达载体构建
1
作者
谢民强
杨解军
+1 位作者
杨林
张革化
《中山医科大学学报》
CSCD
2000年第6期445-447,共3页
【目的】扩增Epstein Barr病毒 (EBV)DNA多聚酶基因 ,构建高效表达载体。【方法】根据EBV全基因序列 ,在EBVDNA多聚酶基因的 3′、5′端设计一对附加EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的特异性引物 ,以B95 8细胞DNA为模板 ,采用改良PCR方法扩增出E...
【目的】扩增Epstein Barr病毒 (EBV)DNA多聚酶基因 ,构建高效表达载体。【方法】根据EBV全基因序列 ,在EBVDNA多聚酶基因的 3′、5′端设计一对附加EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的特异性引物 ,以B95 8细胞DNA为模板 ,采用改良PCR方法扩增出EBVDNA多聚酶基因 (3 0 44bp)。用EcoRⅠ和HindⅢ酶切该基因片断并克隆至表达载体 pMAL p2 ,采用蓝白斑试验筛选阳性菌落。EcoRⅠ和HindⅢ酶切分析、鉴定重组体 pEBP。【结果】通过电泳鉴定 ,PCR产物为 3 0 44bp ,与EBVDNA多聚酶基因大小一致。经蓝白斑试验及限制性DNA内切酶分析 ,成功地筛选到EBVDNA多聚酶基因重组表达质粒 pEBP。【结论】本实验成功地扩增出完整EBVDNA多聚酶基因 ,并构建了高效表达重组体 ,为进一步在体外表达、制备EBVDNA多聚酶蛋白奠定了基础。
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关键词
爱泼期坦-巴尔病毒
RCR
DNA
载体
鼻咽癌
诊断
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职称材料
题名
Epstein-Barr病毒DNA多聚酶基因扩增和表达载体构建
1
作者
谢民强
杨解军
杨林
张革化
机构
中山医科大学附属第三医院耳鼻咽喉科
中山医科大学附属第三医院传染病科
出处
《中山医科大学学报》
CSCD
2000年第6期445-447,共3页
基金
广东省自然科学基金!(A19970 0 78)
广东省医学科学技术研究基金!(A199716 9)
文摘
【目的】扩增Epstein Barr病毒 (EBV)DNA多聚酶基因 ,构建高效表达载体。【方法】根据EBV全基因序列 ,在EBVDNA多聚酶基因的 3′、5′端设计一对附加EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的特异性引物 ,以B95 8细胞DNA为模板 ,采用改良PCR方法扩增出EBVDNA多聚酶基因 (3 0 44bp)。用EcoRⅠ和HindⅢ酶切该基因片断并克隆至表达载体 pMAL p2 ,采用蓝白斑试验筛选阳性菌落。EcoRⅠ和HindⅢ酶切分析、鉴定重组体 pEBP。【结果】通过电泳鉴定 ,PCR产物为 3 0 44bp ,与EBVDNA多聚酶基因大小一致。经蓝白斑试验及限制性DNA内切酶分析 ,成功地筛选到EBVDNA多聚酶基因重组表达质粒 pEBP。【结论】本实验成功地扩增出完整EBVDNA多聚酶基因 ,并构建了高效表达重组体 ,为进一步在体外表达、制备EBVDNA多聚酶蛋白奠定了基础。
关键词
爱泼期坦-巴尔病毒
RCR
DNA
载体
鼻咽癌
诊断
Keywords
Epstein
-
Barr virus
clone, molecular
polymerase chain reaction
DNA,viral
分类号
R373.9 [医药卫生—病原生物学]
R739.630.4 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Epstein-Barr病毒DNA多聚酶基因扩增和表达载体构建
谢民强
杨解军
杨林
张革化
《中山医科大学学报》
CSCD
2000
0
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