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爱媛类芽孢杆菌抗菌肽对白色念珠菌生物膜的抑制作用机制
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作者 王志新 黄玉清 +3 位作者 刘亚慧 刘丹丹 宁亚维 贾英民 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第21期176-184,共9页
研究爱媛类芽孢杆菌抗菌肽对白色念珠菌生物膜的抑制作用,采用微量二倍稀释法和时间-杀菌曲线测定抑制效果,显微镜观察对白色念珠菌芽管和菌丝形成的影响,2,3-二(2-甲氧基-4-硝基-5-磺酸基苯基)-2H-四唑-5-甲酰苯胺法研究对生物膜、预... 研究爱媛类芽孢杆菌抗菌肽对白色念珠菌生物膜的抑制作用,采用微量二倍稀释法和时间-杀菌曲线测定抑制效果,显微镜观察对白色念珠菌芽管和菌丝形成的影响,2,3-二(2-甲氧基-4-硝基-5-磺酸基苯基)-2H-四唑-5-甲酰苯胺法研究对生物膜、预成型生物膜形成和成熟生物膜清除率的影响,荧光探针观察对生物膜结构和膜内菌体状态的影响,平板涂布法和实时聚合酶链式反应测定生物膜内活菌数量和相关基因表达水平。结果表明,抗菌肽对白色念珠菌的最小抑菌浓度为8.28 AU/mL。抗菌肽能降低白色念珠菌的芽管形成率,阻止菌丝的生成,使其以酵母形式存在。抗菌肽对生物膜的形成和清除产生影响,能在较短时间内破坏生物膜的结构完整性,导致菌体受损和死亡,减少膜内菌落数量。在基因水平上,抗菌肽可降低多个生物膜形成相关的基因(如ALS1、ALS3、HWP1、EFG1、ECE1和UME6)的表达水平,从而抑制生物膜的形成。研究证明抗菌肽能够有效抑制白色念珠菌生物膜形成、成熟膜清除、成膜基因表达等,结果可为白色念珠菌新型抑菌物质的开发奠定理论基础,为食品病原微生物污染防治和食品质量安全保障提供依据。 展开更多
关键词 爱媛类芽孢杆菌 抗菌肽 白色念珠菌 生物膜 抑菌机制
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爱媛类芽孢杆菌抗菌肽对扩展青霉孢子的抑制作用机制 被引量:1
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作者 王志新 刘丹丹 +3 位作者 贾紫伟 黄玉清 宁亚维 贾英民 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第15期19-27,共9页
扩展青霉(Penicillium expansum)会导致水果腐烂变质,危害消费者身体健康,是采后水果常见的腐败菌,研究爱媛类芽孢杆菌(Paenibacillus ehimensis)抗菌肽对扩展青霉孢子的抑制作用机制具有重要意义。本实验采用微量二倍稀释法和时间-杀... 扩展青霉(Penicillium expansum)会导致水果腐烂变质,危害消费者身体健康,是采后水果常见的腐败菌,研究爱媛类芽孢杆菌(Paenibacillus ehimensis)抗菌肽对扩展青霉孢子的抑制作用机制具有重要意义。本实验采用微量二倍稀释法和时间-杀菌曲线测定抗菌肽对扩展青霉孢子的抑菌活性,采用扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察抗菌肽对扩展青霉孢子超微结构的影响,采用荧光探针分析抗菌肽对扩展青霉细胞膜和活性氧累积的影响,以探究爱媛类芽孢杆菌抗菌肽对扩展青霉孢子的抑制作用机制。结果显示,抗菌肽对扩展青霉孢子的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)为3.5 AU/mL。经0.5、1 MIC和2 MIC抗菌肽处理的扩展青霉孢子萌发率降低显著(P<0.05),与空白对照组相比,分别降低了28.30%、84.57%和100%。抗菌肽作用后,导致扩展青霉孢子凹陷严重、内容物泄漏、形态和结构发生改变,且抗菌肽使扩展青霉的细胞壁受到损伤,导致碱性磷酸酶外泄。抗菌肽作用扩展青霉后,消散了细胞膜电势,且消散程度呈浓度依赖性;增加了细胞膜渗透性,导致K+外泄;增加了细胞膜的流动性,使DPH荧光强度显著降低(P<0.05);破坏了细胞膜完整性,使SYTOX-Green荧光强度和PI沾染率升高。同时,经1、2 MIC抗菌肽处理的扩展青霉孢子DCFH-DA荧光强度显著增大(P<0.05),细胞内出现活性氧累积,影响了扩展青霉孢子正常的生理代谢。综上,抗菌肽对扩展青霉孢子抑制作用的靶位点主要为细胞膜和活性氧代谢。 展开更多
关键词 爱媛类芽孢杆菌 抗菌肽 扩展青霉 孢子 抑菌机制
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