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贵州羔羊致病性大肠杆菌血清型和热稳定性肠毒素的研究
被引量：
2
1
作者
谭诗文
艾玉萍
+2 位作者
冉懋韬
肖耀南
范泽明
《贵州畜牧兽医》
2002年第6期4-5,共2页
从腹泻羔羊中分离到大肠杆菌80株,对80株菌株做血清型鉴定,55株为埃希氏大肠杆菌。分属为O119、O34、O8、O78O101、O96种血清型,其中O119、O24为主要“O”类型。每个血清型筛选出的CH9612、SC9938、CH986、CH9817、LL9934、GL988株菌6...
从腹泻羔羊中分离到大肠杆菌80株,对80株菌株做血清型鉴定,55株为埃希氏大肠杆菌。分属为O119、O34、O8、O78O101、O96种血清型,其中O119、O24为主要“O”类型。每个血清型筛选出的CH9612、SC9938、CH986、CH9817、LL9934、GL988株菌6株。用乳鼠胃内投服试验,测定出6株菌具有产生热稳定性肠毒素的特性(ST)。
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关键词
贵州
羔羊
致病性大肠杆菌
血清型
热稳定性肠毒素
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职称材料
利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联技术构建产肠毒素大肠杆菌LT敲除菌株
被引量：
3
2
作者
檀克勤
马现永
+2 位作者
崔艺燕
田志梅
邓盾
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2020年第3期666-675,共10页
本研究旨在利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联的技术对产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K88的热不稳定性肠毒素(heat-labile toxin,LT)基因进行无痕敲除并获得K88 LT-缺陷菌株。通过序列比对获取LT两端同源序列,并...
本研究旨在利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联的技术对产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K88的热不稳定性肠毒素(heat-labile toxin,LT)基因进行无痕敲除并获得K88 LT-缺陷菌株。通过序列比对获取LT两端同源序列,并构建包含LT边界、氯霉素筛选标记、sgRNA和LT同源臂的供体片段;将供体片段转化至ETEC K88,同时分别利用λ-Red同源重组系统和CRISPR/Cas9基因编辑系统,对LT基因进行敲除;通过PCR验证获得了K88 LT-缺陷菌株,并通过试验测定了敲除菌株的溶血能力和生长曲线。结果显示,λ-Red同源重组系统可成功地将LT基因替换为相应的供体片段,CRISPR/Cas9基因编辑系统可高效地对筛选标记进行删除,最终通过λ-Red和CRISPR/Cas9结合的基因编辑系统可成功对ETEC K88的LT基因进行无痕敲除。体外试验结果表明,K88 LT-缺陷菌株的溶血能力丧失,并且生长速度比野生型菌株减缓,LT可能和ETEC K88的致病能力和生长性能有关。表明λ-Red和CRISPR/Cas9级联的基因敲除方法可用于LT毒素基因及其他一些大肠杆菌基因的敲除。K88 LT-缺陷菌株的构建为下一步研究LT毒素的致病机制奠定基础。
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关键词
产
肠毒素
大肠杆菌(ETEC)
CRISPR/Cas9
λ-Red同源重组系统
热
不
稳定性
肠毒素
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职称材料
题名
贵州羔羊致病性大肠杆菌血清型和热稳定性肠毒素的研究
被引量：
2
1
作者
谭诗文
艾玉萍
冉懋韬
肖耀南
范泽明
机构
贵州省畜牧兽医科学研究所
贵州省农业厅畜牧局
贵州省册亨县畜牧局
出处
《贵州畜牧兽医》
2002年第6期4-5,共2页
文摘
从腹泻羔羊中分离到大肠杆菌80株,对80株菌株做血清型鉴定,55株为埃希氏大肠杆菌。分属为O119、O34、O8、O78O101、O96种血清型,其中O119、O24为主要“O”类型。每个血清型筛选出的CH9612、SC9938、CH986、CH9817、LL9934、GL988株菌6株。用乳鼠胃内投服试验,测定出6株菌具有产生热稳定性肠毒素的特性(ST)。
关键词
贵州
羔羊
致病性大肠杆菌
血清型
热稳定性肠毒素
Keywords
Escherichia Colibacillus.Serum type. Cause disease factor
分类号
S858.265.1 [农业科学—临床兽医学]
S [农业科学]
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职称材料
题名
利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联技术构建产肠毒素大肠杆菌LT敲除菌株
被引量：
3
2
作者
檀克勤
马现永
崔艺燕
田志梅
邓盾
机构
广东省农业科学院动物科学研究所
广东省动物育种与营养公共实验室
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2020年第3期666-675,共10页
基金
广东省农业科学院院长基金(201807)
广东省畜禽育种与营养研究重点实验室开放运行项目(2017B030314044)
广东省现代农业产业技术体系创新团队项目(2018LM1080)。
文摘
本研究旨在利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联的技术对产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K88的热不稳定性肠毒素(heat-labile toxin,LT)基因进行无痕敲除并获得K88 LT-缺陷菌株。通过序列比对获取LT两端同源序列,并构建包含LT边界、氯霉素筛选标记、sgRNA和LT同源臂的供体片段;将供体片段转化至ETEC K88,同时分别利用λ-Red同源重组系统和CRISPR/Cas9基因编辑系统,对LT基因进行敲除;通过PCR验证获得了K88 LT-缺陷菌株,并通过试验测定了敲除菌株的溶血能力和生长曲线。结果显示,λ-Red同源重组系统可成功地将LT基因替换为相应的供体片段,CRISPR/Cas9基因编辑系统可高效地对筛选标记进行删除,最终通过λ-Red和CRISPR/Cas9结合的基因编辑系统可成功对ETEC K88的LT基因进行无痕敲除。体外试验结果表明,K88 LT-缺陷菌株的溶血能力丧失,并且生长速度比野生型菌株减缓,LT可能和ETEC K88的致病能力和生长性能有关。表明λ-Red和CRISPR/Cas9级联的基因敲除方法可用于LT毒素基因及其他一些大肠杆菌基因的敲除。K88 LT-缺陷菌株的构建为下一步研究LT毒素的致病机制奠定基础。
关键词
产
肠毒素
大肠杆菌(ETEC)
CRISPR/Cas9
λ-Red同源重组系统
热
不
稳定性
肠毒素
Keywords
enterotoxigenic Escherichia coli(ETEC)
CRISPR/Cas9
λ-Red recombination system
heat-labile enterotoxin
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
贵州羔羊致病性大肠杆菌血清型和热稳定性肠毒素的研究
谭诗文
艾玉萍
冉懋韬
肖耀南
范泽明
《贵州畜牧兽医》
2002
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联技术构建产肠毒素大肠杆菌LT敲除菌株
檀克勤
马现永
崔艺燕
田志梅
邓盾
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2020
3
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职称材料
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