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热胁迫条件下燕麦热激蛋白基因表达模式分析
1
作者 魏姗姗 贾雯羽 +3 位作者 王忠美 魏紫玥 李莹莹 段佳宸 《农业与技术》 2025年第6期33-36,共4页
选取燕麦品种“花早”为实验材料,设置34℃、38℃和42℃不同温度梯度,对燕麦分别进行24h、64h热胁迫处理,利用实时荧光定量PCR技术对不同热胁迫条件下燕麦热激蛋白基因表达模式进行分析。结果表明:随温度升高,热胁迫时间的增加,燕麦生... 选取燕麦品种“花早”为实验材料,设置34℃、38℃和42℃不同温度梯度,对燕麦分别进行24h、64h热胁迫处理,利用实时荧光定量PCR技术对不同热胁迫条件下燕麦热激蛋白基因表达模式进行分析。结果表明:随温度升高,热胁迫时间的增加,燕麦生长受到的抑制程度越高,表型长势越差;基因表达模式分析结果表明,随着温度升高,热胁迫时间的增加,燕麦HSP70、HSP90家族基因表达量均增大。此外,燕麦基因表达模式与表型数据也具有一致性,燕麦长势越差,生长受到的抑制程度越高,HSP基因表达量越高。本研究初步解释了燕麦对热胁迫的适应和耐受机制,有助于进一步开展燕麦遗传育种。 展开更多
关键词 热胁迫 燕麦 热激蛋白基因
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碱胁迫条件下水稻热激蛋白基因表达模式分析
2
作者 魏姗姗 王玲宝 《农业与技术》 2025年第17期29-32,共4页
本研究以水稻“中花11”为研究对象,利用实时荧光定量PCR技术,对不同浓度碳酸氢钠碱胁迫下对水稻表型和热激蛋白基因的表达结果进行分析。结果表明:在碱胁迫条件下,大部分sHSP和HSP90家族基因的表达变化趋势与表型变化趋势一致,说明低... 本研究以水稻“中花11”为研究对象,利用实时荧光定量PCR技术,对不同浓度碳酸氢钠碱胁迫下对水稻表型和热激蛋白基因的表达结果进行分析。结果表明:在碱胁迫条件下,大部分sHSP和HSP90家族基因的表达变化趋势与表型变化趋势一致,说明低浓度碱胁迫促进基因表达,进而促进水稻生长;高浓度抑制基因表达,进而抑制水稻生长。rHSP90基因的表达量随碳酸氢钠浓度升高而增大,高浓度碱胁迫促进基因表达。本文分析了水稻热激蛋白在碱胁迫下的表达模式,为水稻耐碱性育种提供理论依据,为今后提高水稻产量奠定基础。 展开更多
关键词 水稻 NaHCO 3胁迫 表型 热激蛋白基因
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重金属铅胁迫条件下燕麦热激蛋白基因表达模式分析
3
作者 魏姗姗 段佳宸 +3 位作者 李莹莹 魏紫玥 王忠美 贾雯羽 《耕作与栽培》 2025年第7期6-10,共5页
以禾本科植物燕麦的花早和品五两个品种作为试验材料,用不同浓度的乙酸铅溶液对其幼苗进行胁迫处理,待燕麦植株长至二叶期时观测表型,并利用qRT-PCR技术测定不同胁迫条件下燕麦植株的热激蛋白基因的表达量。结果表明,随着重金属铅浓度... 以禾本科植物燕麦的花早和品五两个品种作为试验材料,用不同浓度的乙酸铅溶液对其幼苗进行胁迫处理,待燕麦植株长至二叶期时观测表型,并利用qRT-PCR技术测定不同胁迫条件下燕麦植株的热激蛋白基因的表达量。结果表明,随着重金属铅浓度的增加,燕麦植株的各项表型数据以及HSP70基因家族和HSP90基因家族的各两名成员的基因表达量均呈先上升后下降的趋势,并在胁迫浓度为80 mmol/L时达到最大值。通过对比花早和品五两个燕麦品种可知,两者在重金属铅胁迫下的耐受性相近,因此,二者均宜在重金属铅胁迫下进行种植。综上,土壤中低浓度的重金属铅可以促进燕麦植株的生长发育,并在一定程度上提高燕麦植株的抗逆能力。 展开更多
关键词 燕麦 重金属铅 热激蛋白
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红松梢斑螟啮小蜂热激蛋白基因的筛选与鉴定
4
作者 郭瑞 刘玉昆 +3 位作者 李婧 翟淑芬 沈垭琢 张凯鹏 《吉林林业科技》 2025年第2期17-22,共6页
热激蛋白(Hsp)在昆虫抵抗外界不良环境(如寒冷、缺氧、种群密度过大等)胁迫中发挥着重要作用。红松梢斑螟啮小蜂的生境冬季寒冷,推测其具有很强的抗寒性。为研究红松梢斑螟啮小蜂的HSPs基因家族,本文基于其全基因组数据,对其Hsps基因进... 热激蛋白(Hsp)在昆虫抵抗外界不良环境(如寒冷、缺氧、种群密度过大等)胁迫中发挥着重要作用。红松梢斑螟啮小蜂的生境冬季寒冷,推测其具有很强的抗寒性。为研究红松梢斑螟啮小蜂的HSPs基因家族,本文基于其全基因组数据,对其Hsps基因进行了筛选与鉴定。结果表明:共鉴定出23个Hsps基因,其中包括11个小热激蛋白(sHsps)、1个Hsp40、1个Hsp60、8个Hsp70s和2个Hsp90s。通过构建Hsps和sHsps系统发育树探讨其与其他昆虫的同源性,并利用红松梢斑螟啮小蜂Hsps在不同组织间的表达量构建热图以讨论其潜在功能。本研究可为后续进一步对红松梢斑螟啮小蜂Hsps基因功能展开研究提供理论基础和数据支撑。 展开更多
关键词 红松梢斑螟啮小蜂 热激蛋白 基因鉴定
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紫锥菊及其复方对热应激蛋鸡抗氧化功能、蛋白酶及HSP70的影响 被引量：2
5
作者 孙汉昌 雷淑珍 +1 位作者 莫桂芬 郭世宁 《中兽医医药杂志》 2024年第1期23-28,F0002,共7页
本试验通过观察紫锥菊及其复方对热应激蛋鸡抗氧化功能、蛋白酶及HSP70的影响,初步探讨紫锥菊及其复方抗热应激的作用机制。试验选用250只60周龄健康的海兰白蛋鸡,随机分成5个组,紫锥菊复方组、紫锥菊组、电解多维组在基础日粮中分别添... 本试验通过观察紫锥菊及其复方对热应激蛋鸡抗氧化功能、蛋白酶及HSP70的影响,初步探讨紫锥菊及其复方抗热应激的作用机制。试验选用250只60周龄健康的海兰白蛋鸡,随机分成5个组,紫锥菊复方组、紫锥菊组、电解多维组在基础日粮中分别添加1.0%紫锥菊复方、1.0%紫锥菊、0.1%电解多维,高温组和常温组仅饲喂基础日粮。紫锥菊复方组、紫锥菊组、电解多维组和高温组的蛋鸡饲养在33℃~35℃的环境中,常温组蛋鸡环境温度为24℃~26℃。在试验14 d、28 d、42 d、56 d,采集各组鸡胃、胰腺和脾脏组织,检测胃蛋白酶及胰蛋白酶活性、抗氧化活性及HSP70含量变化。结果表明,紫锥菊复方、紫锥菊及电解多维均可恢复热应激导致的蛋鸡胃蛋白酶活性降低,同时紫锥菊复方的效果显著优于紫锥菊及电解多维(P<0.05);紫锥菊复方和紫锥菊可显著提高热应激蛋鸡的胰蛋白酶活性(P<0.05);紫锥菊复方能显著提高热应激蛋鸡脾脏中SOD、GSH-Px的活性(P<0.05);紫锥菊复方、电解多维能恢复热应激蛋鸡脾脏组织T-AOC的水平;同时,紫锥菊复方及紫锥菊能改善热应激蛋鸡脾脏中HSP70的表达。结果提示,紫锥菊复方及紫锥菊可以提高热应激蛋鸡的抗氧化活性、蛋白酶水平及HSP70的表达,并且紫锥菊复方的效果更佳。 展开更多
关键词 紫锥菊 热应激 蛋白酶 抗氧化活性 hsp70
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春尺蠖热激蛋白AcinHsp70基因的克隆、分子特性与表达分析 被引量：3
6
作者 陈龙 朱圣杰 +3 位作者 崔阔澍 路慧 王靖 郝雅娴 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期128-136,共9页
【目的】克隆春尺蠖热激蛋白Hsp70基因,分析其理化性质与表达情况,探究该基因在春尺蠖应对外界不利环境中的作用。【方法】基于前期所测转录组数据(春尺蠖幼虫不同低温胁迫),克隆获取Hsp70基因,命名为AcinHsp70(GenBank登录号:OP750249)... 【目的】克隆春尺蠖热激蛋白Hsp70基因,分析其理化性质与表达情况,探究该基因在春尺蠖应对外界不利环境中的作用。【方法】基于前期所测转录组数据(春尺蠖幼虫不同低温胁迫),克隆获取Hsp70基因,命名为AcinHsp70(GenBank登录号:OP750249);利用生物信息分析软件对Hsp70基因的理化性质进行分析;采用qPCR技术检测AcinHsp70基因在不同温度(-10、-5、0、5和25℃)胁迫中回温与不回温及4℃不同时间处理下的表达谱。【结果】春尺蠖AcinHsp70基因完整CDS序列全长1899 bp,编码633个氨基酸,蛋白质预测分子量为69.91 kDa,预测等电点为5.51。在N端均不含信号肽且无跨膜区。磷酸位点检测分别发现丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸磷酸位点24、26和8个;未发现糖基化位点。该蛋白的平均亲水性为-0.507,预测不稳定系数为33.19,故该蛋白属于亲水稳定蛋白,亚细胞定位结果显示,其主要位于细胞质。序列一致性比对与系统进化树分析结果显示,春尺蠖与庆网蛱蝶(Melitaea cinxia)亲缘关系最近,序列一致性达92.91%。基因表达结果显示,不同温度(-10℃除外)胁迫下,AcinHsp70基因表达量均无明显差异,回温后表达量显著上调。AcinHsp70基因表达量总体呈先升后降趋势,在4℃处理1 h后表达量达到最大值。【结论】AcinHsp70基因与春尺蠖应对低温胁迫的响应密切相关,结果有助于揭示该基因在低温胁迫下的分子功能。 展开更多
关键词 春尺蠖 热激蛋白70 分子特性 低温胁迫 表达谱
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应激过程中骨骼肌内热休克蛋白(HSPs)的变化及其调控机制 被引量：3
7
作者 李士泽 徐浙华 +1 位作者 张玉静 王文革 《黑龙江八一农垦大学学报》 2002年第2期70-74,共5页
在应激反应时,细胞可快速产生一系列蛋白质,这些蛋白质即被称为热休克蛋白(HSP)。人们认为HSPs是一种分子伴侣,在保持细胞稳态当中起着十分广泛的作用。骨骼肌中所表达的HSPs包括小分子HSP家族(泛素、alpha B-晶体蛋白、HSP20、HSP27),H... 在应激反应时,细胞可快速产生一系列蛋白质,这些蛋白质即被称为热休克蛋白(HSP)。人们认为HSPs是一种分子伴侣,在保持细胞稳态当中起着十分广泛的作用。骨骼肌中所表达的HSPs包括小分子HSP家族(泛素、alpha B-晶体蛋白、HSP20、HSP27),HSP70、HSP60、HSP90等。骨骼肌是一个非常复杂的系统,其中的收缩蛋白是由各种不同的肌肉纤维类型所组成,每一种肌纤维均具有其各自的生化组成和功能特征。HSPs 的表达与肌纤维的类型有关。在肌病或体育锻炼过程中HSPs有明显的变化,然而HSP的诱导及调控的分子机制以及它在维持肌肉功能方面的作用尚未完全明了。本文主要阐述了骨骼肌中HSP的变化及其调控的分子生物学机制。 展开更多
关键词 应激过程 热休克蛋白 hsps 调控机制 骨骼肌 分子调控 细胞调节机制
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松墨天牛热激蛋白MaltHSP40s基因的克隆及表达特性分析
8
作者 杨华磊 李慧 +3 位作者 赵培渊 许丹雯仪 李长燕 郝德君 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期930-940,共11页
松墨天牛Monochamus alternatus是我国南方林区重要的蛀干害虫,也是我国重大林业外来入侵物种松材线虫Bursaphelenchus xylophilus的主要传播媒介。为探究热激蛋白HSP40在松墨天牛抵御高温胁迫中的功能,基于松墨天牛转录组数据(GenBank... 松墨天牛Monochamus alternatus是我国南方林区重要的蛀干害虫,也是我国重大林业外来入侵物种松材线虫Bursaphelenchus xylophilus的主要传播媒介。为探究热激蛋白HSP40在松墨天牛抵御高温胁迫中的功能,基于松墨天牛转录组数据(GenBank登录号:PRJNA548205),通过RT-PCR技术克隆两条松墨天牛HSP40基因,并对其进行生物信息学分析;使用MEGA 7.0软件构建松墨天牛HSP40系统进化树;利用RT-qPCR技术检测16日龄松墨天牛雌雄成虫各组织HSP40基因在不同温度与时间处理条件(35℃、37℃、40℃、42.5℃和45℃;0 h、1 h、2 h和3 h)下和高温42.5℃处理3 h后的组织表达特性。结果表明:克隆获得松墨天牛两条HSP40基因MaltHSP40-1(GenBank登录号:MW690168)和MaltHSP40-2(GenBank登录号:MW690169),其ORF长度分别为1206 bp和1059 bp,分别编码401个和352个氨基酸,分子质量分别约为45.24 kDa和39.25 kDa,等电点分别为6.73和9.07;两条序列中均存在含有保守的HPD基序以及DNA-J结构域;蛋白三维结构中均由N端的4个α螺旋和C端的底物结合域构成。系统进化树显示:MaltHSP40-1和MaltHSP40-2分别与光肩星天牛Anoplophora glabripennis的AglaHSP40-1和AglaHSP40-2遗传距离最近。RT-qPCR结果显示,高温胁迫可诱导松墨天牛HSP40基因的转录表达,雌雄成虫的MaltHSP40-1和MaltHSP40-2分别在35℃和37.5℃的条件下开始表达上调,在40℃或42.5℃时到达峰值,雄虫HSP40的相对表达量和上调倍数均高于雌虫;MaltHSP40-1及MaltHSP40-2在松墨天牛雌雄成虫的各组织中均有表达,42.5℃处理3 h后,MaltHSP40-1及MaltHSP40-2在各组织中的相对表达量均显著上调,精巢和卵巢中相对表达量最高。本研究表明MaltHSP40-1和MaltHSP40-2作为辅助分子伴侣,参与松墨天牛抵御高温胁迫。研究结果有助于深入探究热激蛋白在松墨天牛应对高温胁迫中的作用,也为揭示气候变暖背景下松墨天牛及松材线虫病的流行成灾机理提供理论依据。 展开更多
关键词 松墨天牛 高温胁迫 热激蛋白40 耐热性 辅助分子伴侣
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热应激蛋白(HSPs)研究进展 被引量：1
9
作者 陈琦 华修国 +1 位作者 姜法铭 崔立 《上海畜牧兽医通讯》 2005年第6期5-7,共3页
关键词 热应激蛋白 培养温度 蛋白质 染色体 唾液腺 产物 蓬松 幼虫 hsps
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苹果蠹蛾热激蛋白Hsp90基因的克隆及热胁迫下的表达分析 被引量：25
10
作者 申建茹 李明福 +2 位作者 陈乃中 王进军 万方浩 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1236-1248,共13页
世界检疫性害虫苹果蠹蛾Cydia pomonella是一种温度耐受可塑性很高的物种。本研究针对温度波动可能导致其耐热性增强的科学问题,采用生测法鉴定了苹果蠹蛾实验种群的高温耐受阈值,采用同源克隆、RACE和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)等方法... 世界检疫性害虫苹果蠹蛾Cydia pomonella是一种温度耐受可塑性很高的物种。本研究针对温度波动可能导致其耐热性增强的科学问题,采用生测法鉴定了苹果蠹蛾实验种群的高温耐受阈值,采用同源克隆、RACE和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)等方法研究了苹果蠹蛾热激蛋白Hsp90基因的应激表达对耐热性的重要作用。高温耐受阈值研究结果表明,苹果蠹蛾实验种群的死亡率随温度的升高和时间的延长显著性升高,1-5龄幼虫分别经50℃和52℃高温处理2,5和10min后,3龄幼虫耐热性最差,5龄幼虫最强。50℃和52℃分别处理10min和5min均可导致1-4龄幼虫全部死亡,而5龄幼虫在这两种处理下仍有25.0%和11.1%的存活率。以35℃处理的5龄雌幼虫为材料克隆苹果蠹蛾Hsp90基因全长cDNA,结果显示该基因全长为2470bp,完整开放阅读框为2148bp,共编码716个氨基酸,预测分子量为82.07kDa,命名为Cphsp90(GenBank登录号JN624775)。该基因编码的氨基酸序列与亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis和甘蓝夜蛾Mamestra brassicae等昆虫的Hsp90的氨基酸序列一致性高达96%,表明了Hsp90家族的保守特性。Cphsp90mRNA的相对表达量在32～44℃高温胁迫下随温度的升高而显著增高,证实Cphsp90是诱导型热激基因,且mRNA相对表达量与胁迫程度正相关。Cphsp90基因的表达还具有组织特异性,35℃处理幼虫的表皮中Cphsp90相对表达量显著高于血淋巴、脂肪体和中肠,应激响应最为活跃。与未经温热预处理的昆虫相比,35℃温热预处理3h后的5龄幼虫在40,45和50℃更高的温度胁迫下,Cphsp90mRNA达到最高表达量所需要的胁迫温度有所提升,由未经预热处理的40℃处理10min提高到45℃处理10min,这与温热预处理会增强5龄幼虫耐热性的现象相符,表明Cphsp90基因的响应表达在苹果蠹蛾耐热性及其可塑性过程中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 苹果蠹蛾 耐热性 热激蛋白 系统发育 热激诱导 相对表达模式
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高温胁迫下B型烟粉虱热激蛋白基因hsp70表达量的变化 被引量：25
11
作者 崔旭红 谢明 万方浩 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1087-1091,共5页
为了探讨热激蛋白在B型烟粉虱Bemisiatabaci B-biotype抵抗高温中的作用,以含有B型烟粉虱热激蛋白基因hsp70片段的质粒为模板,用TaqMan-MGB探针和特异性引物构建了B型烟粉虱hsp70实时荧光定量RT-PCR检测体系,并检测了37℃-45℃高温胁迫... 为了探讨热激蛋白在B型烟粉虱Bemisiatabaci B-biotype抵抗高温中的作用,以含有B型烟粉虱热激蛋白基因hsp70片段的质粒为模板,用TaqMan-MGB探针和特异性引物构建了B型烟粉虱hsp70实时荧光定量RT-PCR检测体系,并检测了37℃-45℃高温胁迫及气温变化时B型烟粉虱成虫体内hsp70表达的情况。结果表明：缓和的高温对B型烟粉虱成虫hsp70表达具有诱导作用,在37℃-41℃范围内,hsp70的表达量随着温度的升高从8.78×10^5±6.41×10^4拷贝数上升到1.99×10^7±1.45×10^5拷贝数,在41℃时达到最高峰;而当温度升高到43℃和45℃,hsp70表达量迅速降低。B型烟粉虱成虫hsp70的表达与昼夜气温变化有关,当上午气温从34℃上升到41℃时,hsp70的表达量从1.16×10^5±1.48×10^4拷贝数上升到6.29×10^6±1.80×10^5拷贝数;当傍晚气温下降到33℃时,hsp70表达量也下降到2.32×10^5±7.69×10^3拷贝数。因此推测,hsp70在B型烟粉虱抵抗高温胁迫方面可能具有重要作用。 展开更多
关键词 B型烟粉虱 高温胁迫 热激蛋白基因hsp70 表达量 实时荧光定量RT-PCR TAQMAN-MGB探针
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朱砂叶螨热激蛋白HSP70基因TCHSP70-4的克隆与表达 被引量：6
12
作者 李明 卢文才 +3 位作者 冯宏祖 袁亮 王进军 何林 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1235-1243,共9页
为了研究朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus(Boisduval)热激蛋白HSP70的表达与其适应高温和低温胁迫的关系,我们利用物种的同源性及RACE技术,获得朱砂叶螨热激蛋白HSP70基因1个,命名为TCHSP70-4(GenBank登录号为EU977182)。该基因全长21... 为了研究朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus(Boisduval)热激蛋白HSP70的表达与其适应高温和低温胁迫的关系,我们利用物种的同源性及RACE技术,获得朱砂叶螨热激蛋白HSP70基因1个,命名为TCHSP70-4(GenBank登录号为EU977182)。该基因全长2182bp,包含1959bp的开放阅读框,编码653个氨基酸,理论分子量为70.9kDa,等电点为5.4,含有HSP70家族高度保守的基序。运用real-time PCR分析冷激(4℃)和热激(40℃)1h后TCHSP70-4在朱砂叶螨体内的表达量。结果显示冷激后TCHSP70-4表达量明显下降,而热激后TCHSP70-4表达量却明显上升。这些结果一方面表明该基因属于诱导型HSP70基因,另一方面揭示了朱砂叶螨分别受到冷和热胁迫后体内TCHSP70-4的表达及所起的保护作用是不同的。 展开更多
关键词 朱砂叶螨 热激蛋白 hsp70基因 克隆 表达 温度胁迫 实时定量PCR
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温度刺激下栉孔扇贝不同组织热休克蛋白HSP70的表达研究 被引量：18
13
作者 曲凌云 相建海 +2 位作者 孙修勤 洪旭光 张进兴 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期96-100,共5页
采用免疫印迹(Western blot)和流式细胞术(flow cytometry,FCM)方法,研究了热激栉孔扇贝不同组织内热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)的表达变化.免疫印迹结果显示,HSP70的诱导表达有组织特异性,即热休克可以使扇贝鳃组织中HSP7... 采用免疫印迹(Western blot)和流式细胞术(flow cytometry,FCM)方法,研究了热激栉孔扇贝不同组织内热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)的表达变化.免疫印迹结果显示,HSP70的诱导表达有组织特异性,即热休克可以使扇贝鳃组织中HSP70的表达明显升高,但在肌柱、外套膜和性腺组织中,未检测到HSP70 的表达.流式细胞术结果表明:在不同的季节,相同的热刺激对扇贝血淋巴中HSP70的诱导表达存在差异.高温刺激后,栉孔扇贝血淋巴细胞中HSP70的表达量逐渐升高,在诱导7h时达到最高. 展开更多
关键词 栉孔扇贝 热休克蛋白 hsp70 免疫印迹 流式细胞术 组织特异性 血淋巴细胞 温度刺激
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水稻热激蛋白基因HSP90转化大豆的研究 被引量：7
14
作者 于志晶 尚丽霞 +2 位作者 蔡勤安 孟凡钢 马瑞 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期222-227,共6页
由于干旱和盐碱化的严重影响,我国大豆生产受到很大限制。为了提高大豆的抗旱性,培育抗旱转基因大豆新品种,利用农杆菌介导的子叶节遗传转化技术体系,首次将水稻热激蛋白基因HSP90导入大豆受体材料Bert中,通过HSP90在大豆中过表达,获得... 由于干旱和盐碱化的严重影响,我国大豆生产受到很大限制。为了提高大豆的抗旱性,培育抗旱转基因大豆新品种,利用农杆菌介导的子叶节遗传转化技术体系,首次将水稻热激蛋白基因HSP90导入大豆受体材料Bert中,通过HSP90在大豆中过表达,获得了耐旱转基因大豆新材料。本试验中4 000个子叶节外植体用于遗传转化,再生转化苗经PCR和Southern杂交鉴定结合PPT抗性筛选(bar为筛选标记),共获得128棵阳性转基因植株,转化率为3.2%。经初步筛选,获得15份耐旱性较好的材料,其耐旱性显著优于对照。研究结果为进一步筛选耐旱转基因大豆新材料奠定了较好的基础。 展开更多
关键词 大豆 耐旱 热激蛋白 遗传转化
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灰飞虱热激蛋白Hsp90基因的克隆、序列分析与表达模式 被引量：19
15
作者 张青 陆明星 祝树德 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期777-786,共10页
【目的】灰飞虱Laodelphax striatellus(Fallén)是水稻上的重要害虫,它严重影响了水稻的产量和品质,特别由其传播的水稻条纹叶枯病毒对水稻的危害甚至更为严重。灰飞虱分布广,对环境有很强的适应性。本研究旨在探讨灰飞虱对温度胁... 【目的】灰飞虱Laodelphax striatellus(Fallén)是水稻上的重要害虫,它严重影响了水稻的产量和品质,特别由其传播的水稻条纹叶枯病毒对水稻的危害甚至更为严重。灰飞虱分布广,对环境有很强的适应性。本研究旨在探讨灰飞虱对温度胁迫适应的分子机制进行了初步的探讨。【方法】本研究采用RT-PCR与RACE技术克隆了热激蛋白Hsp90基因的全长,利用各种生物信息方法分析了该热激蛋白的特征,实时荧光定量PCR技术用于研究Hsp90基因在不同生长发育阶段和不同温度条件下表达变化规律。【结果】我们获得一条Hsp90基因的cDNA全长序列,命名为LsHsp90(GenBank登录号为KF660250)。LsHsp90全长为2 740 bp,编码729个氨基酸,等电点为5.0,分子量为83.7 kDa。氨基酸序列中含有Hsp90蛋白家族的5个签名序列及胞质特征序列MEEVD。结构预测表明LsHsp90具有Hsp90蛋白家族典型的结构特征。系统进化关系分析表明它与多种昆虫的Hsp90序列有较高的同源性。不同发育阶段的灰飞虱体内LsHsp90表达水平处于动态的变化过程中,并在4龄若虫期达到最大值,最低表达量在其雌成虫阶段。不同性别的灰飞虱成虫体内LsHsp90表达量有显著差异(P=0.008)。高温和低温胁迫都可以诱导灰飞虱体内LsHsp90的表达,最大的表达量分别在40℃和-9℃。在40℃下处理不同时间后发现,LsHsp90的表达水平在处理后0.5 h时最高,但随着时间的延长,LsHsp90的表达水平逐渐降低。而在-4℃下,LsHsp90的表达水平在处理后1 h时达到最大值。【结论】灰飞虱体内的LsHsp90可以响应温度的诱导,它可能在灰飞虱温度胁迫适应过程中起到重要的作用。 展开更多
关键词 灰飞虱 热激蛋白90 基因克隆 发育 温度 实时定量PCR
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剑尾鱼热应激蛋白HSP70 cDNA片段的克隆与序列分析 被引量：5
16
作者 万文菊 王纪亭 +2 位作者 石存斌 吴淑勤 柴同杰 《大连水产学院学报》 CSCD 北大核心 2007年第1期1-5,共5页
为了进一步开展剑尾鱼Xiphophorus helleri——标准化实验动物在抗逆方面的相关研究,以及热应激蛋白(HSP70)在抗逆方面的作用,作者用RT-PCR方法首次克隆得到了剑尾鱼的HSP70的cDNA片段,该片段包含HSP70的特征性序列(GAT CTC GGT GGT GGC... 为了进一步开展剑尾鱼Xiphophorus helleri——标准化实验动物在抗逆方面的相关研究,以及热应激蛋白(HSP70)在抗逆方面的作用,作者用RT-PCR方法首次克隆得到了剑尾鱼的HSP70的cDNA片段,该片段包含HSP70的特征性序列(GAT CTC GGT GGT GGC ACT TTT GAT)。通过将克隆片段与已发表的其它鱼类HSP70的核苷酸序列和其编码的氨基酸序列进行同源性比较,发现剑尾鱼核苷酸序列同源性较高,与牙鲆Paralichthys olivaceus HSP70核苷酸序列同源性最高为89%,与川鲽Platichthys flesus、虹鳟Oncorhyn-chus mykiss和黄锡鲷Rhabdosargus sarba的同源性皆在85%以上;与国外学者发表的HSP70的规律类似,所克隆的片段与其它鱼类HSP70基因编码的氨基酸序列同源性较相应核苷酸序列同源性更高,与牙鲆和川鲽的HSP70氨基酸序列同源性最高达到99%,与斑马鱼Danio rerio、虹鳟和黄锡鲷的氨基酸序列同源性均高于97%。不同鱼的HSP70 cDNA核苷酸序列存在一定差异,但氨基酸序列并未受到影响,经对照,这种不同相当一部分存在于密码子的第3个碱基,因为密码子的简并性,编码氨基酸没有发生改变。 展开更多
关键词 热应激蛋白hsp70 CDNA 剑尾鱼 克隆 序列
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瓜实蝇热激蛋白基因hsp70的克隆及序列分析 被引量：6
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作者 姜建军 王凤英 +3 位作者 黄立飞 陈红松 李磊 杨朗 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期800-805,共6页
【目的】克隆分析瓜实蝇热激蛋白hsp70基因序列特征,为进一步研究瓜实蝇的热适应性机制及制定综合防治策略奠定基础。【方法】根据NCBI数据库中已报道的昆虫hsp70基因保守序列,设计合成扩增瓜实蝇hsp70基因部分片段的简并引物,并利用RAC... 【目的】克隆分析瓜实蝇热激蛋白hsp70基因序列特征,为进一步研究瓜实蝇的热适应性机制及制定综合防治策略奠定基础。【方法】根据NCBI数据库中已报道的昆虫hsp70基因保守序列,设计合成扩增瓜实蝇hsp70基因部分片段的简并引物,并利用RACE-PCR扩增其全长序列。【结果】克隆获得瓜实蝇hsp70基因c DNA全长序列(获取号:KM112021)2271 bp,含1911 bp的开放阅读框,编码636个氨基酸,具有真核生物hsp70基因家族的3个明显基序标签,同时在C-末端具有EEVD基序,推测其属于胞质型热激蛋白。BLAST分析结果表明该序列与双翅目实蝇科昆虫hsp70基因高度相似,最高相似度达91%。氨基酸序列系统发育分析结果显示,瓜实蝇与双翅目实蝇科昆虫聚类为一个分支,证实hsp70基因的高度保守。【结论】瓜实蝇hsp70基因具有真核生物hsp70基因家族的特征,序列表现为高度的保守性,可作为今后研究瓜实蝇抗逆性机制的一个参数指标。 展开更多
关键词 瓜实蝇 热激蛋白70基因 RACE-PCR 序列分析
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花生热激蛋白AhHSP70与热激因子AhHSF基因的克隆及表达分析 被引量：14
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作者 李翠 侯蕾 +3 位作者 任丽 张烨 郑奕雄 王兴军 《山东农业科学》 2015年第4期1-7,共7页
热激蛋白(heat shock proteins,HSPs)和热激转录因子(heat shock factors,HSFs)在植物热胁迫信号转导和耐热性的产生过程中发挥了重要作用。本研究从花生转录组文库中筛选到HSP70、HSF的c DNA片段,通过序列比对在花生全基因组序列中获... 热激蛋白(heat shock proteins,HSPs)和热激转录因子(heat shock factors,HSFs)在植物热胁迫信号转导和耐热性的产生过程中发挥了重要作用。本研究从花生转录组文库中筛选到HSP70、HSF的c DNA片段,通过序列比对在花生全基因组序列中获得这两个基因的基因组序列,根据序列信息设计引物,以花生叶片c DNA为模板扩增全长ORF并进行生物信息学分析。结果显示,Ah HSP70基因的ORF全长为1 962 bp,编码653个氨基酸,分子质量为71.45 k D,理论等电点p I为4.93;Ah HSF基因的ORF全长为1 212 bp,编码403个氨基酸,分子质量为46.03 k D,理论等电点p I为4.85。Ah HSP70与Ah HSF均不具有信号肽,为可溶性蛋白,二级结构中有大量无规则卷曲。利用这两个基因的氨基酸序列分别与来源于其他物种HSP70、HSF的氨基酸序列进行同源比对,并构建进化树进行亲缘关系分析,结果表明,Ah HSP70与大豆Gm HSP70亲缘关系较近,与番茄Sl HSP70亲缘关系比较远;Ah HSF与菜豆Pa HSF亲缘关系较近,而与蒺藜苜蓿Mt HSF的亲缘关系较远。利用实时荧光定量PCR对Ah HSP70和Ah HSF在热胁迫情况下的表达进行分析,结果表明这两个基因在42℃高温条件下表达量显著升高,Ah HSP70在高温胁迫3 h后表达明显升高,热处理24 h和48 h后,表达量为对照的50倍和135倍;转录因子Ah HSF在高温胁迫3 h后表达明显升高,高温处理6 h后达到最高,随后下降。本研究初步验证了花生热激蛋白和热激因子基因在花生响应高温胁迫中的作用。 展开更多
关键词 花生 热激蛋白 热激因子 基因克隆 序列分析 基因表达
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蜡梅热激蛋白基因CpHSP1的克隆与表达分析 被引量：4
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作者 胡雨晴 孙文婷 +3 位作者 马婧 曹鑫 李名扬 眭顺照 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第5期162-167,共6页
热激蛋白（heat shock proteins,HSPs）是生物体受高温刺激而合成的一类应激蛋白,根据分子量的大小可分为HSP100s,HSP90s,HSP70s,HSP60s,smHSPs（small HSPs）5大类（Waters et al.,1996）。
关键词 热激蛋白 蜡梅 克隆 基因表达
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茶树小分子量热激蛋白基因CsHSP17.2的克隆与表达分析 被引量：11
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作者 王明乐 朱旭君 +3 位作者 王伟东 王炫清 林明露 黎星辉 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期389-394,共6页
[目的]进一步了解茶树小分子量热激蛋白基因Cs HSP17.2在逆境胁迫条件下的分子生物学功能。[方法]利用RT-PCR技术从茶树‘迎霜’中克隆得到Cs HSP17.2基因,运用生物信息学软件分析其核苷酸和编码蛋白,通过Real-time PCR分析其表达模式。... [目的]进一步了解茶树小分子量热激蛋白基因Cs HSP17.2在逆境胁迫条件下的分子生物学功能。[方法]利用RT-PCR技术从茶树‘迎霜’中克隆得到Cs HSP17.2基因,运用生物信息学软件分析其核苷酸和编码蛋白,通过Real-time PCR分析其表达模式。[结果]该基因开放阅读框长度为453 bp,编码150个氨基酸,蛋白质相对分子质量为17.2×103,理论等电点5.56;无信号肽位点,属于非分泌型蛋白;被定位于细胞质中。系统发育树分析表明,茶树Cs HSP17.2与水稻(Gen Bank登录号:P27777)和花生(ABC41131)的进化关系较近,属于小分子量热激蛋白基因家族第Ⅰ亚族。qRT-PCR分析发现,茶树Cs HSP17.2属于组成型基因;高温(38℃)处理1 h能显著提高Cs HSP17.2 mRNA的相对表达量(P<0.05);干旱(100 g·L-1PEG 6000)、高盐(200 mmol·L-1Na Cl)和外源脱落酸(200 mg·L-1ABA)处理条件下,该基因的转录水平均出现不同程度的上调。[结论]克隆得到茶树‘迎霜’小分子量热激蛋白基因Cs HSP17.2,其在花中表达量最高,且响应高温、干旱、高盐和外源脱落酸胁迫。 展开更多
关键词 茶 小分子量热激蛋白 Cshsp17.2 克隆 差异表达 实时荧光定量PCR
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