检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

大肠杆菌热不稳定肠毒素无毒突变体LTR72基因重组质粒的构建: 1; 作者葛艳尤永进 +2 位作者徐泉兴陈波饶忠《上海农业学报》 CSCD 2003年第4期15-17,共3页; 用PCR方法扩增大肠杆菌LT基因 ,将LT基因重组入pET32a质粒载体 ,对构建的重组质粒pET LT进行酶切、核苷酸序列分析 ,结果表明 ,插入片段LT的核苷酸序列与预期一致 ,且阅读框正确。并在影响LT毒性的关键氨基酸位点 ,用PCR方法引入点突变 ... 展开更多; 关键词大肠杆菌热不稳定肠毒素突变体LTR72 基因重组质粒免疫原性佐剂功能核苷酸序列; 在线阅读下载PDF 职称材料

热不稳定大肠杆菌肠毒素B亚单位免疫调节功能的实验研究被引量：5: 2; 作者王静郑瑾 +4 位作者杨筱凤孔令洪来宝长司履生王一理《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期112-114,共3页; 目的 :探讨大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位 (LTB)的免疫调节功能及其可能的机制。方法 :用SephacrylS 10 0凝胶柱层析纯化LTB蛋白。选用BALB/c小鼠 ,以鸡溶菌酶 (HEL)为抗原 ,经鼻黏膜单独免疫 ,或以不同剂量的LTB为佐剂与HEL共免疫。用... 展开更多; 关键词大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位 LTB 免疫调节黏膜免疫佐剂鸡溶菌酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

大肠杆菌毒素stx2eB-LTB-ST融合基因的构建与表达被引量：2: 3; 作者齐翀刘军 +2 位作者祝令伟郭学军冯书章《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期341-345,共5页; 利用PCR技术,从病原性大肠杆菌中扩增Stx2e及LT毒素B亚基的基因并扩增ST基因,用复式PCR技术获得了这三段基因的两种融合结构,一种是三段基因直接相连,另一种是在这三段基因之间加入适当的Linker序列。在这两种融合基因两端加入适当的酶... 展开更多; 关键词 Stx2e 热不稳定肠毒素热稳定肠毒素融合基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

LT-B转基因烟草植株的建立被引量：4: 4; 作者刘红莉雷霆 +6 位作者张铮郑瑾来宝长孔令洪王喆之王一理司履生《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期425-429,共5页; 目的　构建大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位 (LT B)基因的植物表达载体 ,并建立LT B转基因烟草植株。方法　用PCR从pMMB6 8扩增LT B编码基因 ,将其克隆于 pUCmT和 pBI12 1载体 ,进而构建植物表达双元载体pBI LTB ,LT B基因由CaMV 35S启... 展开更多; 关键词大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位转基因烟草植物疫苗根瘤农杆菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

自释放型细胞内运输载体LCA2结构域的制备与性质研究: 5; 作者刘地武晓英 +4 位作者王姝慧乔宏萍李娜柴美灵马兴元《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1366-1376,共11页; 蛋白质药物因其独特的优势,在疾病的预防和治疗中发挥了极其重要的作用,但大分子的特性阻碍了其对细胞内靶标的作用。现有的递送策略中,由于穿膜肽更适用于临床研究和治疗,逐渐成为了递送蛋白质药物最主要的工具。因此,开发安全有效的... 展开更多; 关键词自释放型载体细胞穿膜肽内质网靶向热不稳定肠毒素 A2结构域; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌热不稳定肠毒素无毒突变体LTR72基因重组质粒的构建: 1; 作者葛艳尤永进徐泉兴陈波饶忠; 机构上海市农业科学院畜牧兽医研究所; 出处《上海农业学报》 CSCD 2003年第4期15-17,共3页; 基金上海市农业科学院青年科技基金资助项目; 文摘用PCR方法扩增大肠杆菌LT基因 ,将LT基因重组入pET32a质粒载体 ,对构建的重组质粒pET LT进行酶切、核苷酸序列分析 ,结果表明 ,插入片段LT的核苷酸序列与预期一致 ,且阅读框正确。并在影响LT毒性的关键氨基酸位点 ,用PCR方法引入点突变 (丙氨酸→精氨酸 ) ,成功构建了含有LTR72突变体基因的重组质粒pET LTR72。; 关键词大肠杆菌热不稳定肠毒素突变体LTR72 基因重组质粒免疫原性佐剂功能核苷酸序列; Keywords Escherichia coli Heat labile enterotoxin Mutant LTR72; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] Q784 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名热不稳定大肠杆菌肠毒素B亚单位免疫调节功能的实验研究被引量：5: 2; 作者王静郑瑾杨筱凤孔令洪来宝长司履生王一理; 机构西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期112-114,共3页; 基金国家高技术研究发展计划(863)资助项目 (No.2 0 0 1AA2 1 52 2 1 ) 国家自然科学基金资助项目 (No .30 0 70 848); 文摘目的 :探讨大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位 (LTB)的免疫调节功能及其可能的机制。方法 :用SephacrylS 10 0凝胶柱层析纯化LTB蛋白。选用BALB/c小鼠 ,以鸡溶菌酶 (HEL)为抗原 ,经鼻黏膜单独免疫 ,或以不同剂量的LTB为佐剂与HEL共免疫。用ELISA法检测血清和肠分泌液中HEL特异性抗体的水平。用3 H TdR掺入法 ,体外测定LTB蛋白对刀豆蛋白A(ConA)及同种异体抗原介导的淋巴细胞增殖反应的影响。结果 :HEL单独免疫组血清中仅有弱的抗HELIgG ,未检测到抗HELIgA ,且其肠分泌液中亦未见HEL特异性IgA抗体。但加用LTB佐剂的 3个组 ,其血清中抗HELIgG、IgA的水平及肠分泌液中抗HELIgA的水平均显著高于HEL单独免疫组 (P <0 .0 0 1)。体外实验显示 ,LTB可明显抑制ConA及同种异体抗原介导的淋巴细胞增殖反应。结论 :我们制备的LTB蛋白对免疫系统具有双向的调节功能 ,既可作为有效的黏膜佐剂 ,辅佐外来抗原刺激机体产生黏膜免疫应答 ,又具免疫抑制效应 ,有效地抑制淋巴细胞活化。LTB免疫调节功能的发挥。; 关键词大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位 LTB 免疫调节黏膜免疫佐剂鸡溶菌酶; Keywords LTB immunoregulation immunoajuvant; 分类号 R979.5 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌毒素stx2eB-LTB-ST融合基因的构建与表达被引量：2: 3; 作者齐翀刘军祝令伟郭学军冯书章; 机构军事医学科学院军事兽医研究所; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期341-345,共5页; 基金国家自然科学基金(30170705); 文摘利用PCR技术,从病原性大肠杆菌中扩增Stx2e及LT毒素B亚基的基因并扩增ST基因,用复式PCR技术获得了这三段基因的两种融合结构,一种是三段基因直接相连,另一种是在这三段基因之间加入适当的Linker序列。在这两种融合基因两端加入适当的酶切位点并分别与pMD18-T载体相连,酶切后以正确的阅读框插入pET28a载体的多克隆位点中,转入受体菌BL21(DE3)进行表达,得到两种约28 Ku的蛋白,表达的融合蛋白均以包涵体的方式存在,约占全菌蛋白表达量的30%,将包涵体初步提纯,为下游工作奠定了基础。; 关键词 Stx2e 热不稳定肠毒素热稳定肠毒素融合基因; Keywords Stx2e LT ST fusion gene; 分类号 S852.612 [农业科学—基础兽医学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名LT-B转基因烟草植株的建立被引量：4: 4; 作者刘红莉雷霆张铮郑瑾来宝长孔令洪王喆之王一理司履生; 机构西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所陕西师范大学生命科学院; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期425-429,共5页; 基金国家自然科学基金资助 (No .30 0 70 848); 文摘目的　构建大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位 (LT B)基因的植物表达载体 ,并建立LT B转基因烟草植株。方法　用PCR从pMMB6 8扩增LT B编码基因 ,将其克隆于 pUCmT和 pBI12 1载体 ,进而构建植物表达双元载体pBI LTB ,LT B基因由CaMV 35S启动子控制表达 ;将pBI LTB用电穿孔法导入根瘤农杆菌LBA4 4 0 4 ;采用叶盘共培育法经根瘤农杆菌介导转化烟草 ,获得转基因烟草植株 ;用PCR、Southern、Westernblot和ELISA检测转基因植株。结果　经PCR及Southern杂交分析 ,共发现 12株烟草的基因组中有LT B基因整合 ;Westernblot和ELISA分析表明有 9株转基因烟草能有效表达LT B蛋白 ,其表达量为烟草叶片总可溶蛋白的 3.36～ 10 .5 6 μg·g-1TSP。结论　建立的LT B转基因烟草植株可成功表达LT B ,并具有五聚体结构 ,为进一步生产预防婴幼儿大肠杆菌腹泻可食用疫苗及黏膜免疫佐剂奠定了基础。; 关键词大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位转基因烟草植物疫苗根瘤农杆菌; Keywords E.Coli heat-labile enterotoxin B subunit t ransgenic tobacco plant vaccine Agrobacterium tumefaciens; 分类号 R378.2 [医药卫生—病原生物学] R394.33 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名自释放型细胞内运输载体LCA2结构域的制备与性质研究: 5; 作者刘地武晓英王姝慧乔宏萍李娜柴美灵马兴元; 机构太原师范学院生物系天然生物活性成分创制兽药工程中心山西农业大学动物科技学院动物生产系华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1366-1376,共11页; 基金国家重点研发计划"合成生物学"专项(No.2018YFA0902804) 山西省高等学校科技创新项目(No.2019L0821) 上海市科技创新行动计划项目(No.17431904600)资助。; 文摘蛋白质药物因其独特的优势,在疾病的预防和治疗中发挥了极其重要的作用,但大分子的特性阻碍了其对细胞内靶标的作用。现有的递送策略中,由于穿膜肽更适用于临床研究和治疗,逐渐成为了递送蛋白质药物最主要的工具。因此,开发安全有效的穿膜肽类递送载体对于生物医药的基础研究及临床应用具有重要意义。文中设计了一种基于肠毒素A2结构域的自释放型细胞内运输载体LCA2,该载体由连接子Linker、自释放酶敏感位点Cs与穿膜结构域LTA2三部分组成,并以荧光蛋白质mCherry为模式蛋白质来检测该载体的性质。电泳结果显示,从含有pET24a(+)-ma2重组质粒的工程菌中获得了高纯度的mCherry-LCA2融合蛋白,且低浓度的胰蛋白酶就可将mCherry从LCA2上有效地分离;荧光显微镜下观察到LCA2能将与之连接的mCherry运输到不同类型的细胞中,流式细胞仪检测到LCA2的运输能力具有一定的细胞差异性。共聚焦显微镜的荧光分析和Western印迹结果显示,LCA2载体将mCherry蛋白运送到内质网,Cs酶敏感位点被切开,模式蛋白质mCherry与LCA2分离并释放到细胞内。CCK-8结果表明,在给药剂量5~40μg/mL范围内,细胞增殖活力未见显著变化。上述结果证明,LCA2是一种安全有效的自释放型递送载体,能够将活性蛋白质或蛋白质药物运输到细胞内质网并释放。; 关键词自释放型载体细胞穿膜肽内质网靶向热不稳定肠毒素 A2结构域; Keywords self-releasing carrier cell-penetrating peptides(CPPs) endoplasmic reticulum targeting heat-labile enterotoxin(LT) A2 domain; 分类号 Q81 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	大肠杆菌热不稳定肠毒素无毒突变体LTR72基因重组质粒的构建	葛艳尤永进徐泉兴陈波饶忠	《上海农业学报》 CSCD	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	热不稳定大肠杆菌肠毒素B亚单位免疫调节功能的实验研究	王静郑瑾杨筱凤孔令洪来宝长司履生王一理	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2003	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	大肠杆菌毒素stx2eB-LTB-ST融合基因的构建与表达	齐翀刘军祝令伟郭学军冯书章	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	LT-B转基因烟草植株的建立	刘红莉雷霆张铮郑瑾来宝长孔令洪王喆之王一理司履生	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2004	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	自释放型细胞内运输载体LCA2结构域的制备与性质研究	刘地武晓英王姝慧乔宏萍李娜柴美灵马兴元	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料