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矮牵牛PhDFR基因和抗除草剂Bar基因植物表达载体的构建及对烟草的遗传转化研究
1
作者
曾闻
肖向文
+4 位作者
刘海峰
王俊铎
罗城
李晓波
郑巨云
《安徽农业科学》
CAS
2014年第17期5380-5384,共5页
[目的]构建矮牵牛PhDFR基因的植物表达载体,并对烟草进行遗传转化。[方法]从不同花色的矮牵牛中克隆了2个PhDFR基因,通过目的基因序列克隆、多步载体酶切、连接、转化等技术手段,将其连入通用植物表达载体pCAMBIA2300及pCAMBIA3301。利...
[目的]构建矮牵牛PhDFR基因的植物表达载体,并对烟草进行遗传转化。[方法]从不同花色的矮牵牛中克隆了2个PhDFR基因,通过目的基因序列克隆、多步载体酶切、连接、转化等技术手段,将其连入通用植物表达载体pCAMBIA2300及pCAMBIA3301。利用冻融法将重组质粒导入农杆菌GV3101继而转化烟草。[结果]构建了含卡那霉素抗性筛选标记基因NPTII和除草剂抗性筛选标记基因Bar的GFP融合蛋白植物表达载体pCAMBIA2300-PhDFR-GFP和pCAMBIA3301-PhDFR-GFP。转基因植株的GUS染色结果进一步验证了所构建表达载体的正确性和实用性。[结论]所构建的表达载体为进一步研究PhDFR基因在植物花色调控效应的功能及开展植物花色改良基因工程研究奠定了基础,为植物基因工程科研工作提供了优良的备选植物表达载体。
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关键词
DFR基因
植物表达载体
烟草遗传转化
BAR
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职称材料
白三叶CHS基因的过表达提高烟草类黄酮的含量
被引量：
4
2
作者
吴榕
田再民
+3 位作者
郑国华
吴华圃
吴艳玲
牛艳芳
《草业科学》
CAS
CSCD
2020年第2期305-313,共9页
为探索白三叶(Trifolium repens)查尔酮合成酶基因对类黄酮含量的影响,根据NCBI上提供的TrCHS基因(Genbank:2247906)序列,采用RT-PCR方法克隆获得白三叶查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因全长cDNA片段,命名为TrCHS;成功构建含有T...
为探索白三叶(Trifolium repens)查尔酮合成酶基因对类黄酮含量的影响,根据NCBI上提供的TrCHS基因(Genbank:2247906)序列,采用RT-PCR方法克隆获得白三叶查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因全长cDNA片段,命名为TrCHS;成功构建含有TrCHS的植物表达载体,在烟草(Nicotiana)中进行遗传转化,经抗性筛选与分子检测,获得了转基因烟草株系,并对其类黄酮含量进行了测定。结果表明,与野生型相比,转基因烟草植株TrCHS表达量和类黄酮含量均显著提高(P<0.05),表明过表达TrCHS可提高烟草类黄酮的含量,这为后续解析TrCHS功能以及白三叶新品种选育提供了可靠的理论依据。
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关键词
白三叶
查尔酮合成酶
烟草遗传转化
类黄酮
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职称材料
题名
矮牵牛PhDFR基因和抗除草剂Bar基因植物表达载体的构建及对烟草的遗传转化研究
1
作者
曾闻
肖向文
刘海峰
王俊铎
罗城
李晓波
郑巨云
机构
中国科学院新疆理化技术研究所
中国科学院大学
中国彩棉(集团)股份有限公司
新疆农业科学院经济作物研究所
出处
《安徽农业科学》
CAS
2014年第17期5380-5384,共5页
基金
高品质彩色棉花种质资源创制(2013AB003)
中国博士后科学基金项目(2012M521827)
+1 种基金
兵团博士资金项目(2013BB005)
转基因彩色棉花新品种选育(2013ZX08005-005)
文摘
[目的]构建矮牵牛PhDFR基因的植物表达载体,并对烟草进行遗传转化。[方法]从不同花色的矮牵牛中克隆了2个PhDFR基因,通过目的基因序列克隆、多步载体酶切、连接、转化等技术手段,将其连入通用植物表达载体pCAMBIA2300及pCAMBIA3301。利用冻融法将重组质粒导入农杆菌GV3101继而转化烟草。[结果]构建了含卡那霉素抗性筛选标记基因NPTII和除草剂抗性筛选标记基因Bar的GFP融合蛋白植物表达载体pCAMBIA2300-PhDFR-GFP和pCAMBIA3301-PhDFR-GFP。转基因植株的GUS染色结果进一步验证了所构建表达载体的正确性和实用性。[结论]所构建的表达载体为进一步研究PhDFR基因在植物花色调控效应的功能及开展植物花色改良基因工程研究奠定了基础,为植物基因工程科研工作提供了优良的备选植物表达载体。
关键词
DFR基因
植物表达载体
烟草遗传转化
BAR
Keywords
DFR gene
Plant expression vector
Tobacco genetic transformation
Bar
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
白三叶CHS基因的过表达提高烟草类黄酮的含量
被引量：
4
2
作者
吴榕
田再民
郑国华
吴华圃
吴艳玲
牛艳芳
机构
内蒙古师范大学生命科学与技术学院
河北北方学院农林科技学院
内蒙古呼和浩特蔬菜推广站
呼和浩特市赛罕区农牧业局
出处
《草业科学》
CAS
CSCD
2020年第2期305-313,共9页
基金
内蒙古自然科学基金(2017MS0365)
国家自然科学基金(31660157)
内蒙古自治区高等学校研究项目(NJZY17044)
文摘
为探索白三叶(Trifolium repens)查尔酮合成酶基因对类黄酮含量的影响,根据NCBI上提供的TrCHS基因(Genbank:2247906)序列,采用RT-PCR方法克隆获得白三叶查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因全长cDNA片段,命名为TrCHS;成功构建含有TrCHS的植物表达载体,在烟草(Nicotiana)中进行遗传转化,经抗性筛选与分子检测,获得了转基因烟草株系,并对其类黄酮含量进行了测定。结果表明,与野生型相比,转基因烟草植株TrCHS表达量和类黄酮含量均显著提高(P<0.05),表明过表达TrCHS可提高烟草类黄酮的含量,这为后续解析TrCHS功能以及白三叶新品种选育提供了可靠的理论依据。
关键词
白三叶
查尔酮合成酶
烟草遗传转化
类黄酮
Keywords
Trifolium repens
chalcone synthase
transgenetic tobacco
flavonoids
分类号
S54 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
矮牵牛PhDFR基因和抗除草剂Bar基因植物表达载体的构建及对烟草的遗传转化研究
曾闻
肖向文
刘海峰
王俊铎
罗城
李晓波
郑巨云
《安徽农业科学》
CAS
2014
0
在线阅读
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职称材料
2
白三叶CHS基因的过表达提高烟草类黄酮的含量
吴榕
田再民
郑国华
吴华圃
吴艳玲
牛艳芳
《草业科学》
CAS
CSCD
2020
4
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