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ZDS基因干扰表达对烟草类胡萝卜素生物合成的影响 被引量:1
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作者 江露 班秋丽 汪善良 《现代农业科技》 2017年第20期231-233,235,共4页
烟草类胡萝卜素对烟叶品质和可用性有重要作用,ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)是调控类胡萝卜素合成积累的关键酶之一。为研究ZDS基因干扰表达对烟草类胡萝卜素生物合成的影响,从贵州省烟草科学研究院福泉试验基地取样品,采用不同株系相同部位... 烟草类胡萝卜素对烟叶品质和可用性有重要作用,ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)是调控类胡萝卜素合成积累的关键酶之一。为研究ZDS基因干扰表达对烟草类胡萝卜素生物合成的影响,从贵州省烟草科学研究院福泉试验基地取样品,采用不同株系相同部位的方式取样,与贵烟1号(GY1)对照,筛选出能够构建RNA干扰(RNAi)载体并成功转化的转基因植株,建立ZDS基因的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR的检测方法,检测新鲜烟叶中ZDS基因表达水平并分析其遗传表型的变化。结果表明,ZDS和其他类胡萝卜素合成关键酶基因的表达均下调,其遗传后代出现异于正常植株的白化与矮化的表型。证明了ZDS基因对产生这种异同发挥了作用,也充分佐证了RNAi技术在基因功能分析中有着重要的作用,但这些样品表现出白化和矮化的表型是否是由于烟草类胡萝卜素的合成受到抑制尚不确定,还需要进一步验证。 展开更多
关键词 烟草类胡萝卜素 ZDS基因 实时荧光定量PCR RNA干扰
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反相高效液相色谱法测定烟草中的类胡萝卜素及其异构体 被引量:4
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作者 刘少民 储大燕 +4 位作者 洪深求 童红武 方力 周桂园 常宇 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 2009年第2期1-9,共9页
采用反相高效液相色谱-二极管阵列检测器(RP-HPLC-DAD)分离和测定烟草中类胡萝卜素及其异构体的组成和含量。烟草样品经过含有0.1%丁基羟基甲苯(BHT)的丙酮溶液萃取,浓缩后,经Zorbax SBC18色谱柱分离。流动相组成:A,乙腈:水(体积比为88:... 采用反相高效液相色谱-二极管阵列检测器(RP-HPLC-DAD)分离和测定烟草中类胡萝卜素及其异构体的组成和含量。烟草样品经过含有0.1%丁基羟基甲苯(BHT)的丙酮溶液萃取,浓缩后,经Zorbax SBC18色谱柱分离。流动相组成:A,乙腈:水(体积比为88:12);B,乙酸乙酯。梯度洗脱程序:0~25min,100%A;25~50min,B由0%线性增加为60%;50~55min,40%A+60%B;55~60min,A由40%线性增加为100%。检测波长:450nm。进样量:10μL。流速:1.0mL/min。该方法简化了样品的前处理,共分离出烟草中11种类胡萝卜素及其异构体。类胡萝卜素物质的加标回收率为87.7%~94.6%,;相对标准偏差为3.01%~4.29%。同时研究了新鲜烟叶和烘烤后烟叶中类胡萝卜素的分布和含量,结果显示:烟叶中类胡萝卜素的组成及含量与烟叶品种、部位以及调制有关。 展开更多
关键词 反相高效液相色谱法 胡萝卜素:烟草
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