山东烟区烟草环斑病毒病(TRSV)发生和病原鉴定 被引量：4

1

作者 王劲波 王凤龙 +3 位作者 钱玉梅 时焦 王从丽 张爱东 《中国烟草科学》 CSCD 1999年第1期34-35,共2页

１９９７年，在对山东烟区各主要产烟县进行烟叶田间标样的烟草病毒病毒原鉴定中发现有烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ）的发生，现简报如下：１材料与方法１．１将采集的烟叶标样用人工摩擦方法，接种到普通烟栽培品种ＮＣ８９（Ｎｉｃｏｔｉ... １９９７年，在对山东烟区各主要产烟县进行烟叶田间标样的烟草病毒病毒原鉴定中发现有烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ）的发生，现简报如下：１材料与方法１．１将采集的烟叶标样用人工摩擦方法，接种到普通烟栽培品种ＮＣ８９（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍｃｖ．ＮＣ８９... 展开更多

关键词 烟草环斑病毒病 trsv 鉴定 病害防治

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陕西渭北地区烟草环斑病毒(TRSV)的研究 Ⅱ、病毒的传播、种苗带毒检测及防治

2

作者 魏宁生 安调过 《中国烟草科学》 CSCD 1990年第4期1-5,共5页

试验表明桃蚜具有传播 TRSV 的能力,但是传毒率仅为4.2%,蚜虫最短获毒时间在2分钟以内,最短接毒时间也是2分钟,最长持毒时间则为125分钟,因而属于非持久性传毒。烟草种子带毒是传播病毒的主要途径,植株感染 TRSV 的早晚是决定种子带毒... 试验表明桃蚜具有传播 TRSV 的能力,但是传毒率仅为4.2%,蚜虫最短获毒时间在2分钟以内,最短接毒时间也是2分钟,最长持毒时间则为125分钟,因而属于非持久性传毒。烟草种子带毒是传播病毒的主要途径,植株感染 TRSV 的早晚是决定种子带毒率高低的主要因素,但其子代幼苗常表现为无症感染。提纯 TRSV 制备的抗血清具有高度的专化性,只与同源的 TRSV 抗原起沉淀反应,而与 CMV、TMV、TNV、TEV 以及 TBRV 之间不存在血清学关系。抗血清的效价为1:516。利用酶联免疫吸附测定技术(ELISA)对 TRSV 检测获得成功。在受侵染后已恢复的植株中,以 ELISA 作为带毒检测手段比琼脂双扩散法更加灵敏和准确,但对单粒、10、25、50及75粒烟种的带毒检测没有获得肯定的结果,可用 ELISA 检测种苗的带毒情况来确定单粒种子的带毒率。经测定生产上种植的3个烟草品种均有不同程度的带毒。在混合感染的条件下,CMV 和 TMV 对 TRSV 有抑制作用,而 TEV 却对 TRSV 表现出协生现象。 展开更多

关键词 渭北地区 trsv 烟草环斑病毒 烟草品种 琼脂双扩散法 单粒 传毒 带毒率 白肋烟 桃蚜

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大豆的烟草环斑病毒(TRSV)生物学性状的鉴定 被引量：1

3

作者 韦石泉 《沈阳农业大学学报》 CAS 1985年第2期38-44,共7页

大豆的烟草环斑病毒(TRSV),系种子带毒传病,它是引起产量严重损失的大豆病毒病害之一。我国是否发生未见报道。本研究系在美国依阿华大学采用该地分离的毒原,对大豆 TRSV 的生物学性状如毒原繁殖、病毒接种指示植物鉴定及寄主范围、病... 大豆的烟草环斑病毒(TRSV),系种子带毒传病,它是引起产量严重损失的大豆病毒病害之一。我国是否发生未见报道。本研究系在美国依阿华大学采用该地分离的毒原,对大豆 TRSV 的生物学性状如毒原繁殖、病毒接种指示植物鉴定及寄主范围、病毒汁液性质的常规测定等进行了试验。所得结果为:大豆的烟草环斑病毒接种于豇豆叶上产生红褐枯斑;接种于黄瓜叶上产生淡黄环斑,系统性;接种于普通烟—白贝菜(White Burley)叶上,初形成同心纹环斑,后转为系统轻花叶症;接种于克利夫兰烟叶上也是先生同心环斑,后转为轻花叶症,在蔓陀萝叶上表现花叶症;在千日红叶上表现褪绿小枯斑等。TRSV 的寄主范围颇广;茄科、藜科、豆科、葫芦科均受侵染,但不侵染禾本科和茄科及豆科里某些品种。其失毒温度为60℃;稀释限点为10^(-6)(但在10^(-3)时侵染率已下降);体外存活11天。 展开更多

关键词 烟草环斑病毒 trsv 生物学性状 同心纹 环斑 大豆 指示植物 稀释限点 稀释终点 枯斑 花叶 隐症

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烟草环斑病毒的RT-PCR和IC-RT-PCR检测方法研究 被引量：12

4

作者 杨翠云 曹洁 +3 位作者 于翠 高焕利 沈禹飞 代光辉 《上海农业学报》 CSCD 2007年第1期83-87,共5页

根据TRSV CP基因的保守序列设计引物,RT-PCR和IC-RT-PCR能从TRSV的2个分离物中分别扩增到与预期大小相同的DNA条带,序列测定和分析表明所扩增序列为TRSV CP基因的部分序列,在系统关系树上与TRSV的其他分离物形成一簇,表明所建立的RT-PCR... 根据TRSV CP基因的保守序列设计引物,RT-PCR和IC-RT-PCR能从TRSV的2个分离物中分别扩增到与预期大小相同的DNA条带,序列测定和分析表明所扩增序列为TRSV CP基因的部分序列,在系统关系树上与TRSV的其他分离物形成一簇,表明所建立的RT-PCR和IC-RT-PCR检测方法是可靠的。 展开更多

关键词 烟草环斑病毒(trsv) RT-PCR IC-RT-PCR 检测方法

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烟草环斑病毒外壳蛋白基因片段原核表达载体的构建及表达 被引量：5

5

作者 乔艳艳 杨翠云 +3 位作者 于翠 曹洁 马青 张丽莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期345-349,共5页

根据烟草环斑病毒外壳蛋白(TRSV-CP)基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法,获得烟草环斑病毒基因组中编码外壳蛋白部分基因片段,将其插入原核表达载体pET28a中,获得重组表达质粒pET-CP,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,利用IPTG诱导蛋白大量... 根据烟草环斑病毒外壳蛋白(TRSV-CP)基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法,获得烟草环斑病毒基因组中编码外壳蛋白部分基因片段,将其插入原核表达载体pET28a中,获得重组表达质粒pET-CP,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,利用IPTG诱导蛋白大量表达。重组蛋白经过Ni+-NTA纯化后,SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,TRSV-CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达,产生的融合蛋白分子质量约为34 ku,并具有免疫学活性。以纯化的表达蛋白免疫新西兰大白兔,多抗血清效价达1∶409 600,可以与重组蛋白发生抗原抗体反应。 展开更多

关键词 烟草环斑病毒(trsv) RT-PCR 原核表达 融合蛋白

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RT-PCR方法检测烟草环斑病毒的研究 被引量：21

6

作者 孔宝华 蔡红 +3 位作者 陈海如 唐慧 沐咏民 刘进元 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2001年第1期13-15,共3页

根据烟草环斑病毒 (TRSV)外壳蛋白基因非编序列设计的引物P1,P2 ,用感病及健康组织总RNA为模板 ,进行cDNA合成和PCR试验 ,感病组织中扩增出了 6 0 0bp的目的片段 ,而健康组织中无此扩增带。摸索各项实验条件 ,建立了RT -PCR检测烟草环... 根据烟草环斑病毒 (TRSV)外壳蛋白基因非编序列设计的引物P1,P2 ,用感病及健康组织总RNA为模板 ,进行cDNA合成和PCR试验 ,感病组织中扩增出了 6 0 0bp的目的片段 ,而健康组织中无此扩增带。摸索各项实验条件 ,建立了RT -PCR检测烟草环斑病毒 (TRSV)的方法。 展开更多

关键词 烟草 环斑病毒 RT-PCR 检测方法 外壳蛋白基因非编序列设计

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烟草环斑病毒DB-RT-Realtime PCR检测方法研究 被引量：11

7

作者 郑耘 杨伟东 +4 位作者 陈枝楠 李明福 章桂明 余道坚 张永江 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期117-120,共4页

本研究首次应用直接结合反转录实时荧光PCR技术(direct binding reverse transcription realtime PCR,DB-RT-Re-altime PCR)检测烟草环斑病毒,由于综合运用了PCR管吸附病毒外壳蛋白、病毒核酸分子杂交、高灵敏度实时荧光PCR技术的优点,... 本研究首次应用直接结合反转录实时荧光PCR技术(direct binding reverse transcription realtime PCR,DB-RT-Re-altime PCR)检测烟草环斑病毒,由于综合运用了PCR管吸附病毒外壳蛋白、病毒核酸分子杂交、高灵敏度实时荧光PCR技术的优点,从而使病毒检测在特异性、灵敏度、稳定性等技术指标上比传统的DAS-ELISA方法都有所提高,解决了烟草环斑病毒检测工作中由于隐症、干扰物质存在而影响检测结果的问题,为病毒检测提供了一个快速、简便有效的检测方法。 展开更多

关键词 烟草环斑病毒 反转录PCR 检测

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应用复合RT-PCR同时检测烟草环斑病毒和番茄环斑病毒 被引量：5

8

作者 吴兴海 陈长法 +2 位作者 张云霞 邵秀铃 姜玉兰 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2006年第4期398-400,共3页

将烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus)和番茄环斑病毒(Tom ato ringspot virus)的CP基因及RNA2基因序列引物,合成特异性RT-PCR检测引物,对烟草环斑病毒和番茄环斑病毒的感病植物组织进行了PCR扩增反应,结果显示,感染了烟草环斑病毒... 将烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus)和番茄环斑病毒(Tom ato ringspot virus)的CP基因及RNA2基因序列引物,合成特异性RT-PCR检测引物,对烟草环斑病毒和番茄环斑病毒的感病植物组织进行了PCR扩增反应,结果显示,感染了烟草环斑病毒和番茄环斑病毒的植物组织的PCR产物均出现600 bp和470 bp特异性扩增条带,而其他病毒均未出现扩增条带,证明这两对引物具有烟草环斑病毒和番茄环斑病毒的鉴定特异性。将提取的烟草环斑病毒和番茄环斑病毒总RNA做梯度稀释,测定该检测体系的敏感度,结果显示,此体系最低可检出烟草环斑病毒和番茄环斑病毒提取的RNA模板浓度为234 pg/μl和264 pg/μl。表明,复合RT-PCR是一种可同时检测烟草环斑病毒和番茄环斑病毒的快速检测方法。 展开更多

关键词 复合RT-PCR 烟草环斑病毒 番茄环斑病毒 快速检测

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一步法RT-PCR检测烟草环斑病毒试剂盒的研制与应用 被引量：5

9

作者 张永江 李明福 +1 位作者 黄冲 相宁 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第10期2072-2073,共2页

根据烟草环斑病毒基因组序列设计特异性引物,利用RT-PCR技术研制成一步法检测该病毒的试剂盒,并建立了操作程序。对试剂盒扩增到的预期产物进行测序验证,产物序列与目的序列间的同源性为97.8%,表明该试剂盒的准确性较高。试验结果还表明... 根据烟草环斑病毒基因组序列设计特异性引物,利用RT-PCR技术研制成一步法检测该病毒的试剂盒,并建立了操作程序。对试剂盒扩增到的预期产物进行测序验证,产物序列与目的序列间的同源性为97.8%,表明该试剂盒的准确性较高。试验结果还表明,该试剂盒在常温、4℃和-20℃下可分别保存2d、7d和60d;灵敏度是DAS-ELISA的100倍;质量控制试验结果一致,具有较高的重复性。 展开更多

关键词 一步法RT—PCR 烟草环斑病毒 检测 试剂盒

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进境大豆种子中烟草环斑病毒的快速检测 被引量：5

10

作者 闻伟刚 崔俊霞 盛蕾 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期748-751,共4页

烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)是进境大豆种子必须检疫的项目,属于我国禁止入境的二类检疫性有害生物,本文建立了大豆种子中TRSV的快速检测方法。采用Trizol试剂直接提取大豆种子总RNA,通过RT-PCR扩增得到359 bp特异性产... 烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)是进境大豆种子必须检疫的项目,属于我国禁止入境的二类检疫性有害生物,本文建立了大豆种子中TRSV的快速检测方法。采用Trizol试剂直接提取大豆种子总RNA,通过RT-PCR扩增得到359 bp特异性产物。该产物经半巢式PCR进一步验证得到206 bp特异性片段,经测序及同源性比较表明,片段序列与GenBank中登录的TRSV外壳蛋白基因部分序列存在92%～96%的同源性,而未见与其它基因序列存在同源性。同时,大豆种子样品经DAS-ELISA复核检测结果显示TRSV阳性反应。因此,判定该批进境大豆种子携带TRSV。 展开更多

关键词 大豆 烟草环斑病毒 快速检测 RT—PCR 半巢式PCR

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应用逆转录环介导等温扩增技术检测大豆种子中烟草环斑病毒 被引量：3

11

作者 郭立新 陈先锋 +3 位作者 徐亚飞 邱志君 朱迪琦 段维军 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期980-983,987,共5页

根据烟草环斑病毒(TRSV)外壳蛋白基因序列设计并合成了1组RT-LAMP引物,利用实时浊度仪监测反应过程,初步建立了烟草环斑病毒的RT-LAMP检测方法,并进行了特异性与灵敏度检测。结果显示,RT-LAMP灵敏度与普通RT-PCR法相当,但检测时间明显缩... 根据烟草环斑病毒(TRSV)外壳蛋白基因序列设计并合成了1组RT-LAMP引物,利用实时浊度仪监测反应过程,初步建立了烟草环斑病毒的RT-LAMP检测方法,并进行了特异性与灵敏度检测。结果显示,RT-LAMP灵敏度与普通RT-PCR法相当,但检测时间明显缩短,1 h即可完成反应。此外,体系中加入钙黄绿素,反应结束后,可通过裸眼观察荧光的有无来判断是否有扩增。对大豆种子中携带的烟草环斑病毒进行了RT-LAMP检测,裸眼判定与仪器监测结果一致。结果证明所建立的TRSV RT-LAMP方法具有快速、特异、灵敏,操作简单的特点,不需复杂仪器设备,适合于TRSV的现场快速检测。 展开更多

关键词 烟草环斑病毒 逆转录环介导等温扩增 检测

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烟草脆裂病毒甜椒环斑花叶分离物（TRV－PRSM）的鉴定 被引量：4

12

作者 田文会 张书萍 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期32-35,T001,共5页

从邯郸市甜椒田间采集呈环斑花叶或黄斑花叶症状材料编号为８２—６—３５（２）．经生物学、血清、电镜下的形态观察证实８２—６—３５（２）为烟草脆裂病毒（Ｔｏｂａｃｃｏｒａｔｔｌｅｖｉｒｕｓ）的一个分离物，称之为ＴＲＶ—Ｐ... 从邯郸市甜椒田间采集呈环斑花叶或黄斑花叶症状材料编号为８２—６—３５（２）．经生物学、血清、电镜下的形态观察证实８２—６—３５（２）为烟草脆裂病毒（Ｔｏｂａｃｃｏｒａｔｔｌｅｖｉｒｕｓ）的一个分离物，称之为ＴＲＶ—ＰＲＳＭ．该病毒以汁液接种传染，感染５科２２种植物，引起局部坏死斑、褪绿斑、花叶、系统坏死、黄脉、黄化等。病毒粒体呈直杆状，有２种粒体，长粒体１９０～２１０ｎｍ×２５ｕｍ．短粒体４０～８０ｎｍ×２０～２５ｎｍ．长短粒体比１：２、ＴＲＶ－ＰＲＳＭ分离物同ＴＲＶ标准抗血清形成特异的沉淀线。 展开更多

关键词 甜椒 环斑花叶 黄斑花叶 烟草脆裂病毒

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基于抗原表位烟草环斑病毒单克隆抗体的制备 被引量：1

13

作者 秦绍钊 何月秋 +3 位作者 李旻 雷屈文 王光勇 丁元明 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期598-603,共6页

基于多种生物信息学软件综合预测烟草环斑病毒(TRSV)外壳蛋白抗原表位所在的结构域,明确了该外壳蛋白抗原表位可能位于C端319～328、384～388、420～430、480～487、495～511位氨基酸残基附近。通过RT-PCR扩增出了目的片段,构建了TRSV... 基于多种生物信息学软件综合预测烟草环斑病毒(TRSV)外壳蛋白抗原表位所在的结构域,明确了该外壳蛋白抗原表位可能位于C端319～328、384～388、420～430、480～487、495～511位氨基酸残基附近。通过RT-PCR扩增出了目的片段,构建了TRSV外壳蛋白原核表达载体,表达的TRSV外壳蛋白外源融合蛋白具免疫活性。采用杂交瘤细胞技术,利用外源融合蛋白制备了单克隆抗体,制备的抗血清可与TRSV外壳蛋白基因原核表达产物发生免疫反应。检验结果表明,制备的抗血清具较好的特异性,可应用于TRSV的检疫检验。 展开更多

关键词 烟草环斑病毒 抗原表位 原核表达 融合蛋白 单克隆抗体

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应用分子生物学方法快速检测烟草环斑病毒 被引量：1

14

作者 吴兴海 陈长法 +2 位作者 张云霞 邵秀铃 刘爱华 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2007年第3期66-68,共3页

根据烟草环斑病毒(tobacco ringspot virus)CP基因序列,设计并合成了特异性RT-PCR扩增引物,对烟草环斑病毒和非烟草环斑病毒的感病植物组织样本进行了PCR扩增反应。结果,烟草环斑病毒的感病植物组织样本的PCR产物均出现1 760 bp的特异... 根据烟草环斑病毒(tobacco ringspot virus)CP基因序列,设计并合成了特异性RT-PCR扩增引物,对烟草环斑病毒和非烟草环斑病毒的感病植物组织样本进行了PCR扩增反应。结果,烟草环斑病毒的感病植物组织样本的PCR产物均出现1 760 bp的特异性扩增条带,而非感病植株组织样本均未出现扩增条带,证明该合成引物具有烟草环斑病毒鉴定特异性。将提取的烟草环斑病毒总RNA做梯度稀释,测定该检测体系的敏感度,结果可检出烟草环斑病毒RNA模板最低浓度为234 pg/μl。研究表明,分子生物学测定具有特异性强、灵敏度高、快速准确的特点,可应用于烟草环斑病毒检疫的快速检测。 展开更多

关键词 分子生物学 RT—PCR烟草环斑病毒 检疫检测

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烟草环斑病毒RT-PCR检测体系的优化 被引量：3

15

作者 郇晓雪 刘晓宇 +5 位作者 房乐 杜传印 李广强 耿超 李向东 田延平 《山东农业科学》 北大核心 2021年第6期98-102,共5页

烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)是豇豆花叶病毒科(Comoviridae)线虫传多面体病毒属(Nepovirus)的代表种,是我国公布的二类进境检疫有害生物。建立特异性强、灵敏性高的检测体系是有效控制TRSV传播的技术保障。本研究在分析... 烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)是豇豆花叶病毒科(Comoviridae)线虫传多面体病毒属(Nepovirus)的代表种,是我国公布的二类进境检疫有害生物。建立特异性强、灵敏性高的检测体系是有效控制TRSV传播的技术保障。本研究在分析引物的特异性、优化退火温度及dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶浓度的基础上,建立了完善的TRSV RT-PCR检测体系。筛选出的TRSV特异性引物对为1-1F/1-1R,在退火温度为53℃、dNTPs终浓度为0.075 mmol/L、引物终浓度为0.30μmol/L、Taq DNA聚合酶终浓度为0.035 U/μL条件下检测效率最高,可从发病植物总RNA量为0.090 ng中检测到目的片段。研究结果对准确灵敏地检测TRSV具有重要意义。 展开更多

关键词 烟草环斑病毒 检测体系 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 优化

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双重DPO-RT-PCR检测南方菜豆花叶病毒及烟草环斑病毒 被引量：2

16

作者 魏霜 袁俊杰 +5 位作者 杨卓瑜 马新华 卢乃会 陈文 渭婷玉 龙阳 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期265-269,共5页

南方菜豆花叶病毒及烟草环斑病毒是中国进境植物检疫性有害生物,属于大豆种传病害,为提高在进口大豆中两种病毒的检出率,本研究针对SBMV及TRSV基因组中的保守序列,分别设计特异性DPO引物,建立了一种快速检测这两种植物病毒的双重DPO-RT-... 南方菜豆花叶病毒及烟草环斑病毒是中国进境植物检疫性有害生物,属于大豆种传病害,为提高在进口大豆中两种病毒的检出率,本研究针对SBMV及TRSV基因组中的保守序列,分别设计特异性DPO引物,建立了一种快速检测这两种植物病毒的双重DPO-RT-PCR方法,并对该方法的特异性、灵敏度及退火温度敏感性等性能进行评价。结果表明:该方法能准确地从10种植物病毒中鉴定出SBMV及TRSV,表现出良好的特异性,且检测灵敏度可达0.02 ng·μL^(-1),退火温度为在45~65℃时该方法检测结果无明显差异,表现出对退火温度不敏感的特性。研究结果为进出境植物病毒的高通量检测提供了新的思路。 展开更多

关键词 南方菜豆花叶病毒 烟草环斑病毒 进口大豆 种传病毒 检测 DPO-RT-PCR

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联苯胺-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫分析体系测定植物病毒TMV和TRSV 被引量：5

17

作者 牛淑妍 焦奎 +3 位作者 张成良 张作芳 刘靖宇 魏澎 《分析科学学报》 CAS CSCD 1999年第3期195-198,共4页

提出了联苯胺－Ｈ２Ｏ２－辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）伏安酶联免疫分析体系测定植物病毒烟草花叶病毒（ＴＭＶ）和烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ）的新方法。ＨＲＰ标记的羊抗兔酶标记抗体ＩｇＧ－ＨＲＰ可以催化Ｈ２Ｏ２氧化联苯胺的反应，其... 提出了联苯胺－Ｈ２Ｏ２－辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）伏安酶联免疫分析体系测定植物病毒烟草花叶病毒（ＴＭＶ）和烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ）的新方法。ＨＲＰ标记的羊抗兔酶标记抗体ＩｇＧ－ＨＲＰ可以催化Ｈ２Ｏ２氧化联苯胺的反应，其氧化产物在Ｂｒｉｔｏｎ－Ｒｏｂｉｎｓｏｎ（ＢＲ）缓冲溶液中在－０．６２Ｖ（ＳＣＥ）左右产生灵敏的线性扫描二阶导数伏安峰，可以测定ＩｇＧ－ＨＲＰ。根据ＩｇＧ－ＨＲＰ与植物病毒及其抗血清的免疫反应，可以间接测定植物病毒。本法测定ＴＭＶ的检出限为０．２５ｎｇ／ｍＬ，线性范围为０．２５～５０００ｎｇ／ｍＬ；测定ＴＲＳＶ的检出限为１．５ｎｇ／ｍＬ，线性范围为１．５～３０００ｎｇ／ｍＬ；测定ＴＭＶ烟草病叶澄清液的最高稀释比为１∶１００００。检测灵敏度高于酶联免疫吸附显色光度法（ＥＬＩＳＡ） 展开更多

关键词 酶联免疫分析 烟草花叶病毒 烟草环斑病毒 测定

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侵染兰花的齿兰环斑病毒的分离、鉴定及检测研究 被引量：8

18

作者 刘志昕 潘俊松 郑学勤 《热带作物学报》 CSCD 1994年第S1期41-48,共8页

从叶片表现褪绿、褐色坏死斑的卡特兰病株中获得一个病毒分离物，利用番杏进行多次单斑分离纯化，并用其做繁殖寄主，来用ＰＥＧ沉淀和差速离心等方法获得提纯病毒。该病毒分离物提纯液具有典型的核蛋白紫外吸收特征，电镇观察病毒粒体... 从叶片表现褪绿、褐色坏死斑的卡特兰病株中获得一个病毒分离物，利用番杏进行多次单斑分离纯化，并用其做繁殖寄主，来用ＰＥＧ沉淀和差速离心等方法获得提纯病毒。该病毒分离物提纯液具有典型的核蛋白紫外吸收特征，电镇观察病毒粒体呈直杆状，可被齿兰环斑病毒抗血清特异装饰，琼脂免疫双扩散和ＥＬＩＳＡ实验表明，读分离物和ＯＲＳＶ血清学关系密切，和ＴＭＶ有部分同源关系，ＳＤＳ—ＰＡＧＥ表明病毒外壳蛋白由一种分子量为１７．３ＫＤ亚基构成，琼脂糖电泳显示单—ＲＮＡ组份。根据鉴别寄主症状、位体形态组成等理化特征，以及血清学特性，鉴定该分离物属于烟草花叶病毒组，和齿兰环斑病毒已报导的一些分离物比较接近。用纯化病毒免疫家兔，成功地制备出特异性抗血清，并用ＳＰＡ—ＥＬＩＳＡ方法对一些兰花病株进行了检测研究。 展开更多

关键词 兰花 齿兰环斑病毒 烟草花叶病毒 血清学检测

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单管多重RT-PCR同时检测大豆种子中三种检疫性植物病毒 被引量：4

19

作者 易汪雪 宋绍祎 +3 位作者 吴东妮 代欢欢 杨翠云 于翠 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期113-117,共5页

我国大豆年进口量持续增长,快速、准确地检测进境大豆种子中可能携带的病原物是防止检疫性有害生物入境传播和扩散的有效手段。菜豆荚斑驳病毒(BPMV)、烟草环斑病毒(TRSV)和番茄环斑病毒(ToRSV)均是被大豆种子携带的检疫性有害生物。本... 我国大豆年进口量持续增长,快速、准确地检测进境大豆种子中可能携带的病原物是防止检疫性有害生物入境传播和扩散的有效手段。菜豆荚斑驳病毒(BPMV)、烟草环斑病毒(TRSV)和番茄环斑病毒(ToRSV)均是被大豆种子携带的检疫性有害生物。本研究建立了在单一PCR管中同时检测这3种检疫性植物病毒及大豆内源基因Bd-30K的多重RT-PCR方法。研究结果表明,所建立的多重RT-PCR方法具有较好的特异性和灵敏度,检测含BPMV、TRSV和ToRSV RNA的最低浓度分别为0.45、0.0093和0.004ng/μL,从大豆种子中同时检测3种病毒的最低RNA浓度为0.58ng/μL。 展开更多

关键词 菜豆荚斑驳病毒 烟草环斑病毒 番茄环斑病毒 多重RT-PCR 同时检测

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西葫芦病毒病发生原因及防治方法 被引量：2

20

作者 王朝忠 《西北园艺（蔬菜）》 2007年第4期29-29,共1页

1病原 主要是黄瓜花叶病毒和甜瓜花叶病毒。另外，南瓜花叶病毒、西瓜花叶病毒、烟草环斑病毒等也可侵染西葫芦。

关键词 西葫芦病毒病 防治方法 黄瓜花叶病毒 原因 南瓜花叶病毒 西瓜花叶病毒 烟草环斑病毒 病原

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