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侵染洋桔梗的烟草曲茎病毒分子鉴定及遗传进化分析: 1; 作者王井园梁小在 +7 位作者谢慧婷陈锦清李祐聪秦碧霞莫翠萍蔡健和朱英芝李战彪《南方农业学报》北大核心 2025年第2期431-440,共10页; 【目的】明确引起广西南宁市洋桔梗呈现叶脉突起、叶片皱缩的病毒病原,并对病毒分离物的遗传进化关系进行分析,为花卉作物病毒病的综合防控提供理论依据。【方法】以1株具有叶脉突起、叶片皱缩等典型双生病毒症状的洋桔梗为研究对象,采... 展开更多; 关键词洋桔梗烟草曲茎病毒遗传进化广西; 在线阅读下载PDF 职称材料

烟草曲茎病毒复制相关蛋白基因原核表达条件优化被引量：20: 2; 作者潘滨吴建祥 +1 位作者李桂新周雪平《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期24-28,共5页; 为了提高烟草曲茎病毒(Tobacco curly shoot virus,TbCSV)复制相关蛋白(replication-associated protein,Rep)基因在大肠杆菌中表达量,研究了大肠杆菌菌株、温度、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对GST-Rep融合蛋白表达量的影响.... 展开更多; 关键词 Q786烟草曲茎病毒复制相关蛋白原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

侵染青蒿的烟草曲茎病毒的分子鉴定及基因组结构特征分析被引量：3: 3; 作者钟静赵丽玲 +1 位作者李婷婷丁铭《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期126-133,共8页; 菜豆金色花叶病毒属病毒是一类在全球热带及亚热带地区造成严重经济损失的植物病毒,田间杂草是这类病毒重要的中间寄主。本研究从云南省玉溪市采集了表现黄脉的青蒿植株,通过PCR扩增、克隆及测序从样品中获得两条菜豆金色花叶病毒属病毒... 展开更多; 关键词青蒿烟草曲茎病毒杂草; 在线阅读下载PDF 职称材料

与烟草曲茎病毒相伴随的DNAβ的βC1基因原核表达及蛋白的单抗制备被引量：5: 4; 作者姜磊吴建祥周雪平《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期132-136,共5页; 将PCR扩增的烟草曲茎病毒（Tobacco curly shoot virus，TbCSV）Y35分离物βC1基因克隆到pET-32a原核表达载体，构建原核表达重组载体pET32a-Y35βC1．重组载体导入大肠杆菌BL21（DE3），经过IPTG诱导、Ni^2＋ NTA亲和柱纯化获得与硫氧... 展开更多; 关键词烟草曲茎病毒原核表达单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名侵染洋桔梗的烟草曲茎病毒分子鉴定及遗传进化分析: 1; 作者王井园梁小在谢慧婷陈锦清李祐聪秦碧霞莫翠萍蔡健和朱英芝李战彪; 机构广西民族大学海洋与生物技术学院/广西民族大学海洋生物资源开发与利用国际合作重点实验室广西农业科学院植物保护研究所/农业农村部华南果蔬绿色防控重点实验室/广西作物病虫害生物学重点实验室广西大学农学院; 出处《南方农业学报》北大核心 2025年第2期431-440,共10页; 基金广西重点研发计划项目(桂科AB23026068) 广西自然科学基金青年基金项目(2024GXNSFBA010326) 广西农业科学院基本科研业务专项(桂农科2021YT071,桂农科2024ZX08)。; 文摘【目的】明确引起广西南宁市洋桔梗呈现叶脉突起、叶片皱缩的病毒病原,并对病毒分离物的遗传进化关系进行分析,为花卉作物病毒病的综合防控提供理论依据。【方法】以1株具有叶脉突起、叶片皱缩等典型双生病毒症状的洋桔梗为研究对象,采用双生病毒通用简并引物(PA/PB)对洋桔梗叶片总DNA进行PCR检测,通过设计背靠背引物(TbCSV-F/TbCSV-R)、基因克隆获得相关病毒病原的全基因组序列,使用BLASTn对拼接序列进行比对分析,应用生物学软件SnapGene、SDT和MEGA 7.0对相关病毒病原的全基因组序列及遗传进化进行分析。【结果】利用PA/PB引物能从样品中扩增出1条约500 bp的特异目的条带,BLASTn分析发现,所得序列与GenBank上已登录的烟草曲茎病毒(Tobacco curly shoot virus,TbCSV)各分离物的核苷酸序列相似性均在91%以上,证实所采集的洋桔梗植株受到菜豆金色黄花叶病毒属病毒侵染。利用β卫星通用引物(β01/β02)未能扩增出条带,证实染病的洋桔梗叶片中不存在β卫星分子。利用TbCSV-F/TbCSV-R对感病样品总DNA进行PCR扩增,所得产物经纯化、克隆测序及序列拼接后获得1条长度为2743 bp的病毒全基因组序列,所得序列经核苷酸序列相似性分析表明病毒分离物为TbCSV的1个分离物,命名为TbCSV-GX-YJG。氨基酸同源性分析发现,病毒正链编码的AV1和AV2基因与TbCSV-SHJ01(GenBank登录号:MW779539.1)的核苷酸序列和氨基酸序列相似性均最高,为100%。进化树分析发现,TbCSV-GX-YJG与来自于广西(TbCSV-SHJ01)和四川(TbCSV-SC740,GenBank登录号:MH165181.1)的分离物聚在同一个小分支,说明亲缘关系较近;而与来自于云南(TbCSV-CN,GenBank登录号:KM383752.1)、孟加拉国(TbCSV-YT8,GenBank登录号:HG003650.1)、印度(TbCSV-WSF1和TbCSV-TC240,GenBank登录号分别为HQ407395.1和KF551584.1)的分离物处于不同的分支,说明TbCSV分离物具有一定的进化多样性。【结论】侵染广西洋桔梗表现叶脉突起、叶片皱缩的病毒病原为菜豆金色黄花叶病毒属的TbCSV。; 关键词洋桔梗烟草曲茎病毒遗传进化广西; Keywords Eustoma grandiflorum(Raf.)Shinners tobacco curly shoot virus genetic and evolutionary Guangxi; 分类号 S436.81 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名烟草曲茎病毒复制相关蛋白基因原核表达条件优化被引量：20: 2; 作者潘滨吴建祥李桂新周雪平; 机构浙江大学生物技术研究所; 出处《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期24-28,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(30370058).; 文摘为了提高烟草曲茎病毒(Tobacco curly shoot virus,TbCSV)复制相关蛋白(replication-associated protein,Rep)基因在大肠杆菌中表达量,研究了大肠杆菌菌株、温度、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对GST-Rep融合蛋白表达量的影响.结果表明,大肠杆菌菌株Rosetta在37℃培养3h后,使用终浓度为0.5mmol·L-1的IPTG在28℃诱导培养4h时,GST-Rep融合蛋白表达量最高,表达的GST-Rep融合蛋白可占细菌总蛋白的42%以上.用GST-Sepharose 4B亲和层析柱对GST-Rep融合蛋白进行纯化,SDS-PAGE表明GST-Rep融合蛋白大小约为66kD,与预计的分子量大小一致,Western blot分析表明其能与GST多克隆抗体起特异性反应.Rep基因的优化表达为研究该基因的作用机理打下了基础.; 关键词 Q786烟草曲茎病毒复制相关蛋白原核表达; Keywords Tobacco curly shoot virus replication-associated protein prokaryotic expression; 分类号 S432.4 [农业科学—植物病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名侵染青蒿的烟草曲茎病毒的分子鉴定及基因组结构特征分析被引量：3: 3; 作者钟静赵丽玲李婷婷丁铭; 机构云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所; 出处《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期126-133,共8页; 基金国家自然科学基金(31960529) 云南省农业基础研究联合专项(2018FG001-009) 云南省基础研究计划项目(201801CC00115)。; 文摘菜豆金色花叶病毒属病毒是一类在全球热带及亚热带地区造成严重经济损失的植物病毒,田间杂草是这类病毒重要的中间寄主。本研究从云南省玉溪市采集了表现黄脉的青蒿植株,通过PCR扩增、克隆及测序从样品中获得两条菜豆金色花叶病毒属病毒DNA-A全基因组序列,分别为YN6393-23和YN6393-27,其全长均为2739 bp,相似性为100%。序列分析发现,YN6393-23和YN6393-27的核苷酸序列与烟草曲茎病毒Tobacco curly shoot virus(TbCSV)的分离物YN4584的核苷酸序列相似性最高,为99.45%。根据国际病毒分类委员会对菜豆金色花叶病毒属病毒种的分类标准,全基因组序列相似性大于91%则为同种病毒,表明此病毒分离物为烟草曲茎病毒的一个分离物。这是菜豆金色花叶病毒属病毒侵染青蒿植株的首次报道。; 关键词青蒿烟草曲茎病毒杂草; Keywords Artemisia caruifolia Tobacco curly shoot virus weed; 分类号 S432.1 [农业科学—植物病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名与烟草曲茎病毒相伴随的DNAβ的βC1基因原核表达及蛋白的单抗制备被引量：5: 4; 作者姜磊吴建祥周雪平; 机构浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所; 出处《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期132-136,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(30670087) 国家自然科学基金重点资助项目(30530520); 文摘将PCR扩增的烟草曲茎病毒（Tobacco curly shoot virus，TbCSV）Y35分离物βC1基因克隆到pET-32a原核表达载体，构建原核表达重组载体pET32a-Y35βC1．重组载体导入大肠杆菌BL21（DE3），经过IPTG诱导、Ni^2＋ NTA亲和柱纯化获得与硫氧还蛋白融合的重组蛋白Y35βC1．以Y35βC1重组蛋白为抗原免疫BALB／c小鼠，用杂交瘤细胞技术制备了9株能够稳定传代并分泌抗Y35βC1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别制备它们的单抗腹水．9株单抗腹水的间接ELISA效价在10^-5～10^-6之间.Y35βC1单克隆抗体的研制为该蛋白的亚细胞定位及功能研究，明确Y35βC1基因在致病过程中的作用机理奠定了基础．; 关键词烟草曲茎病毒原核表达单克隆抗体; Keywords Tobacco curly shoot virus prokaryotic expression monoclonal antibody; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] S432.4 [农业科学—植物病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	侵染洋桔梗的烟草曲茎病毒分子鉴定及遗传进化分析	王井园梁小在谢慧婷陈锦清李祐聪秦碧霞莫翠萍蔡健和朱英芝李战彪	《南方农业学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	烟草曲茎病毒复制相关蛋白基因原核表达条件优化	潘滨吴建祥李桂新周雪平	《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2007	20	在线阅读下载PDF 职称材料
3	侵染青蒿的烟草曲茎病毒的分子鉴定及基因组结构特征分析	钟静赵丽玲李婷婷丁铭	《植物保护》 CAS CSCD 北大核心	2021	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	与烟草曲茎病毒相伴随的DNAβ的βC1基因原核表达及蛋白的单抗制备	姜磊吴建祥周雪平	《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2008	5	在线阅读下载PDF 职称材料