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柱前衍生HPLC法分析烟叶水溶性多糖的单糖组成
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作者 赵妍 黄延俊 +7 位作者 刘秀彩 黄华发 刘江生 叶仲力 张廷贵 刘泽春 谢卫 李耀群 《中国烟草科学》 北大核心 2025年第2期52-59,共8页
建立了1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生-高效液相色谱法测定烟叶水溶性多糖单糖组成及含量的方法,采用完全酸水解法水解烟叶水溶性多糖,水解产物经PMP衍生化反应,采用反相高效液相色谱法测定烟叶水溶性多糖经酸解后的单糖衍生物... 建立了1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生-高效液相色谱法测定烟叶水溶性多糖单糖组成及含量的方法,采用完全酸水解法水解烟叶水溶性多糖,水解产物经PMP衍生化反应,采用反相高效液相色谱法测定烟叶水溶性多糖经酸解后的单糖衍生物信号,并将其方法用于探究不同产地及类型烟叶水溶性多糖的单糖组成及含量。经优化后的检测条件如下:色谱柱为安捷伦Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);0.05 mol/L磷酸盐(KH_(2)PO_4-NaOH,pH 7.0)缓冲液为A流动相,乙腈为B流动相,洗脱条件为84∶16等度洗脱;紫外检测波长为250 nm。结果表明,9种单糖在20.0~800μg/mL范围内线性关系良好,相关系数R~2>0.992 7,检出限(LOD)为0.07~0.17μg/mL,定量限(LOQ)为0.22~0.56μg/mL,平均回收率为82.3%~104.0%,经柱前衍生HPLC法测定烟叶水溶性多糖由甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、半乳糖(Gal)、阿拉伯糖(Ara)、葡萄糖(Glc)、葡萄糖醛酸(GlcUA)、半乳糖醛酸(GalUA)等组成,其中Glc和GalUA占较高比例,不同产地和类型烟叶水溶性多糖的单糖组成比例存在显著差异。该方法快速简单、灵敏度高、重复性好,可用于烟叶多糖的单糖组成分析,同时为进一步研究烟叶多糖的结构提供基础。 展开更多
关键词 烟叶水溶性多糖 柱前衍生化 液相色谱 单糖组成
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