小鼠子宫内膜细胞炎症模型的建立 被引量：10

1

作者 杨倩 史万玉 +1 位作者 赵驻军 钟秀会 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期87-90,共4页

用0.25%胰酶-EDTA消化法分离培养小鼠子宫内膜细胞,用细菌脂多糖(LPS)诱导子宫内膜细胞炎症,以培养细胞的形态学和传统炎症指标作为炎症发生和发展的判断标准。以不同浓度的LPS作用于细胞,收集不同时段的细胞,用RT-PCR的方法测定细胞中I... 用0.25%胰酶-EDTA消化法分离培养小鼠子宫内膜细胞,用细菌脂多糖(LPS)诱导子宫内膜细胞炎症,以培养细胞的形态学和传统炎症指标作为炎症发生和发展的判断标准。以不同浓度的LPS作用于细胞,收集不同时段的细胞,用RT-PCR的方法测定细胞中IFN-γmRNA的表达丰度。结果表明,100ng/mL LPS是体外培养的子宫内膜细胞诱导炎症的最适浓度。炎症模型组培养细胞中IFN-γ的丰度表达极显著于空白组(P<0.01),表明炎症模型建立成功。 展开更多

关键词 子宫内膜细胞 LPS 炎症模型

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基于NLRP3/Caspase-1通路探讨薏苡仁多糖对溃疡性结肠炎体外炎症模型的干预作用及机制 被引量：15

2

作者 陈莉娟 李彦龙 +5 位作者 杨维建 李宝瑜 苟玉琴 张早育 李莹 吴航 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1323-1330,共8页

目的:从炎症理论角度出发,探讨薏苡仁多糖(Coixan)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)体外炎症模型的干预作用及其机制。方法:体外培养NCM460细胞,采用不同剂量(0、2.5、5、10、20和40μg/mL)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导NCM... 目的:从炎症理论角度出发,探讨薏苡仁多糖(Coixan)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)体外炎症模型的干预作用及其机制。方法:体外培养NCM460细胞,采用不同剂量(0、2.5、5、10、20和40μg/mL)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导NCM460细胞,筛选出最佳诱导剂量(20μg/mL);用不同浓度(0、5、10、20、40和80μg/mL)的Coixan诱导NCM460,筛选出最佳促增殖浓度(10、20、40μg/mL)。实验随机设为空白组、模型组(LPS诱导)、LPS+Coixan低、中、高剂量(10、20、40μmol/L)组,LPS+柳氮磺吡啶(sulfasalazine,SASP)(200μg/mL)组,除空白组外用LPS(20μg/mL)刺激48 h建立UC体外细胞炎症模型后,分别以薏苡仁多糖及SASP进行48 h干预治疗后,ELISA法检测细胞上清液中炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;免疫荧光检测焦亡相关蛋白Caspase-1荧光的表达量;采用qRT-PCR技术检测各组NCM460中NLRP3/Caspase-1通路中焦亡相关NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β基因表达水平的影响;Western blot技术检测各组焦亡相关NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平的影响。结果:与0μg/mL比较(20μg/mL)LPS诱导48 h对NCM460细胞生长抑制较为适中(P<0.01),同时,干预48 h时,炎症因子IL-1β、TNF-α含量明显升高(P<0.01),因此,选择(20μg/mL)LPS诱导48 h作为造模方式。与0μmol/L的Coixan相比,当Coixan浓度为10、20,40μmol/L时,细胞存活率增高,特别是Coixan浓度为10、20μmol/L(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组中炎症因子IL-1β、TNF-α的含量,NLRP3、Caspase-1β、IL-1β蛋白和NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β基因表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,药物干预组中,中、高剂量组和柳氮磺吡啶组中细胞IL-1β、TNF-α分泌量减少,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,药物干预组中,高剂量组和柳氮磺吡啶组中焦亡相关蛋白Caspase-1表达水平明显下调(P<0.01);与模型组比较,药物干预组中,低、中、高剂量组和柳氮磺吡啶组中NLRP3、Caspase-1蛋白和基因表达明显降低(P<0.05或P<0.01),药物干预组中,高剂量组、柳氮磺吡啶组中GSDMD-N、IL-1β基因表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,药物干预组中,中、高剂量组和柳氮磺吡啶组中焦亡相关蛋白(NLRP3,Caspase-1,IL-1β)表达水平明显下调(P<0.01)。结论:薏苡仁多糖可能通过下调焦亡相关因子NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β的表达水平,从而抑制人结肠上皮细胞的细胞焦亡,发挥人结肠上皮细胞保护作用。 展开更多

关键词 薏苡仁多糖 溃疡性结肠炎 细胞炎症模型 NLRP3/Caspase-1 细胞焦亡

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基于人呼吸道上皮细胞炎症模型的连翘提取物抗炎活性实验研究 被引量：24

3

作者 刘建洲 张立伟 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1248-1253,1265,共7页

通过复制LPS诱导的BEAS-2B炎症模型，探讨连翘提取物对炎症反应中炎性因子分泌的作用。采用MTT法检测BEAS-2B细胞活力，筛选连翘乙醇提取物（FSEE）、60%连翘酯苷A（60% FTA）、90%连翘酯苷A（90% FTA）最佳给药浓度；采用倒置显微镜观... 通过复制LPS诱导的BEAS-2B炎症模型，探讨连翘提取物对炎症反应中炎性因子分泌的作用。采用MTT法检测BEAS-2B细胞活力，筛选连翘乙醇提取物（FSEE）、60%连翘酯苷A（60% FTA）、90%连翘酯苷A（90% FTA）最佳给药浓度；采用倒置显微镜观察连翘提取物对细胞作用后的细胞形态；采用Griess Reagent法检测细胞培养上清NO含量；流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）的水平。毒性试验结果表明，连翘提取物浓度小于128 μg/mL时，对BEAS-2B细胞没有产生毒性；浓度在128-256 μg/mL时，60% FTA与90% FTA均表现出对细胞的毒性。抗炎结果表明，在给药浓度设置为25、50、100 μg/mL时，三种提取物均表现出减少NO分泌的效果（P〈0.01），90% FTA组存在剂量依赖关系；三种提取物可显著降低LPS诱导的BEAS-2B细胞胞内活性氧的水平（P〈0.05），且呈量效关系。另外，FSEE、60% FTA、90% FTA组间的治疗效果也逐渐增强。由此得出，90% FTA为连翘提取物抗炎作用的主要活性部位，其抗炎活性成分可能为连翘酯苷A，这将为连翘抗炎活性的进一步研究提供基础。 展开更多

关键词 连翘提取物 连翘酯苷A 呼吸道上皮细胞 炎症模型 LPS

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浊点萃取结合LC-MS/MS法测定野鸢尾黄素对气道炎症模型豚鼠体内花生四烯酸的影响 被引量：8

4

作者 邸子真 杨瑞 +1 位作者 吴怡 陶弘武 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2017年第9期1932-1935,共4页

目的:建立气道炎症模型豚鼠血浆中花生四烯酸(AA)的测定方法,考察野鸢尾黄素降低气道炎性反应的作用。方法:以烟熏配合合胞病毒滴鼻制造气道炎症豚鼠模型,以AA-d8为内标,采用Triton-14对血浆样品进行浊点萃取,并采用LC-MS/MS法MRM监测... 目的:建立气道炎症模型豚鼠血浆中花生四烯酸(AA)的测定方法,考察野鸢尾黄素降低气道炎性反应的作用。方法:以烟熏配合合胞病毒滴鼻制造气道炎症豚鼠模型,以AA-d8为内标,采用Triton-14对血浆样品进行浊点萃取,并采用LC-MS/MS法MRM监测模式测定豚鼠血浆中AA的浓度。结果:血浆中AA在0.1~100μg·m L-1范围内线性关系良好,日内精密度为2.53%~7.82%,日间精密度为10.51%~13.41%,提取回收率81.20%~90.77%。结论:该方法环保、准确、稳定,可用于豚鼠血浆中AA的测定。 展开更多

关键词 花生四烯酸 气道炎症模型豚鼠 野鸢尾黄素

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基于LPS诱导RAW 264.7巨噬细胞炎症模型的榴莲壳多酚抗炎作用及其分子机制 被引量：9

5

作者 刘文强 张懿玲 +2 位作者 熊华 朱雪梅 孙永 《食品与机械》 北大核心 2020年第4期15-20,50,共7页

采用80%甲醇溶剂提取榴莲壳中多酚组分,并测定其总酚和总黄酮含量,基于体外化学方法和LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症模型,探究榴莲壳的抗氧化和抗炎活性及其分子机制。结果表明,榴莲壳提取物富含多酚类化合物,具有较强的体外抗氧化活... 采用80%甲醇溶剂提取榴莲壳中多酚组分,并测定其总酚和总黄酮含量,基于体外化学方法和LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症模型,探究榴莲壳的抗氧化和抗炎活性及其分子机制。结果表明,榴莲壳提取物富含多酚类化合物,具有较强的体外抗氧化活性,且在LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症模型中能降低一氧化氮合酶(iNOS)和环氧合酶-2(COX-2)的表达,减少NO和ROS的产生,并降低炎症细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)在基因和蛋白水平上的表达,从而展现较强的抗炎活性。其内在的分子机制可能是通过抑制IκB-α和p65蛋白磷酸化,降低NF-κB信号通路的表达,减少机体的炎症损伤。 展开更多

关键词 榴莲壳 多酚 巨噬细胞炎症模型 抗氧化活性 抗炎活性 信号通路

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五味消毒饮对炎症模型的作用研究 被引量：9

6

作者 谷静娟 赵璐 +4 位作者 厉世伟 郭晓 迟姗姗 吴忠洋 况玲 《中兽医医药杂志》 2014年第3期13-17,共5页

目的:探讨五味消毒饮水煎液对乳腺上皮细胞炎症模型的作用及对大肠杆菌感染小鼠的保护作用机制。方法:将96孔板细胞分为对照组、模型组、治疗组和中药组。将五味消毒饮水煎液按终浓度0.2 g/mL、0.4 g/mL和0.8 g/mL添加到乳腺上皮细胞炎... 目的:探讨五味消毒饮水煎液对乳腺上皮细胞炎症模型的作用及对大肠杆菌感染小鼠的保护作用机制。方法:将96孔板细胞分为对照组、模型组、治疗组和中药组。将五味消毒饮水煎液按终浓度0.2 g/mL、0.4 g/mL和0.8 g/mL添加到乳腺上皮细胞炎症模型中,观察细胞形态,用MTT法检测各组细胞OD值;将24只小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组8只,将1 g/mL的五味消毒饮水煎液腹腔注射于炎症模型小鼠,观察小鼠临床症状,以ELISA法检测血清白细胞介素-10(IL-10)的表达水平。结果:五味消毒饮水煎液0.8 g/mL使乳腺上皮细胞固缩、脱壁;0.2 g/mL对细胞炎症模型有显著的保护作用,细胞形态与对照组相同。五味消毒饮水煎液(1 g/mL)对小鼠大肠杆菌感染有保护作用,72 h内,对照组饮水、摄食均衡,精神状态良好,零死亡;模型组饮水、摄食减少,精神萎靡不振,死亡7只,治疗组死亡1只。与对照组比较,模型组小鼠血清IL-10显著升高(P<0.05);治疗组IL-10浓度较模型组低,与对照组比较无显著差异,五味消毒饮有降低炎症小鼠血清IL-10浓度的趋势。结论:五味消毒饮水煎液0.2 g/mL对细胞炎症模型有显著的保护作用,1 g/mL对小鼠大肠杆菌感染有保护作用,且能降低炎症小鼠血清IL-10浓度,促进小鼠免疫机能发挥作用。 展开更多

关键词 五味消毒饮 乳腺上皮细胞 细胞模型 炎症模型 IL-10

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彝药包其络赛对不同大鼠关节炎症模型的作用研究 被引量：1

7

作者 童妍 罗伦才 +2 位作者 季小平 李列平 王利平 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第8期1840-1842,共3页

目的:比较研究彝药包其络赛对不同大鼠关节炎症模型的作用。方法:采用蛋清、甲醛、角叉菜胶等不同致炎物质所致的大鼠足关节肿胀模型,大鼠佐剂性关节炎模型,观察彝药包其络赛对不同致炎物质所致大鼠足肿胀的影响。结果:与模型组比较,彝... 目的:比较研究彝药包其络赛对不同大鼠关节炎症模型的作用。方法:采用蛋清、甲醛、角叉菜胶等不同致炎物质所致的大鼠足关节肿胀模型,大鼠佐剂性关节炎模型,观察彝药包其络赛对不同致炎物质所致大鼠足肿胀的影响。结果:与模型组比较,彝药包其络赛可抑制蛋清、甲醛、角叉菜胶等不同致炎物质所致的大鼠足肿胀,抑制AA大鼠的原发与继发性足肿胀。结论:彝药包其络赛(7 g/kg)对多种常见的大鼠关节炎症模型均有明显的抗炎作用。 展开更多

关键词 彝药 醇提物 炎症模型

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人胆囊上皮细胞优化培养及其炎症模型建立

8

作者 潘光栋 程南生 +4 位作者 熊先泽 刘江文 李胜富 张国福 严律南 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第15期1619-1620,共2页

关键词 人胆囊上皮细胞 培养 炎症模型

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黄芩苷黄芩素小檗碱对LLC-PK1细胞炎症模型中TNF-α IL-1β及IL-6表达的影响 被引量：7

9

作者 任浩文 丛霞 +4 位作者 李华涛 姜忠玲 王新 曹荣峰 田文儒 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第4期55-58,共4页

研究中药黄芩苷、黄芩素、小檗碱对细菌脂多糖(LPS)诱导的猪肾小管上皮细胞(LLC-PK1)中肿瘤坏死因子-α(TNG-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。用噻唑蓝比色法(MTT法)筛选LPS、黄芩苷、黄芩素和小檗碱对细... 研究中药黄芩苷、黄芩素、小檗碱对细菌脂多糖(LPS)诱导的猪肾小管上皮细胞(LLC-PK1)中肿瘤坏死因子-α(TNG-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。用噻唑蓝比色法(MTT法)筛选LPS、黄芩苷、黄芩素和小檗碱对细胞作用的最佳浓度,用RT-PCR检测TNF-α、IL-1βmRNA表达,以确定细胞炎症模型是否建立成功;炎症模型建立后,用最佳浓度的黄芩苷、黄芩素和小檗碱分别作用细胞24h,用qPCR检测TNF-α、IL-1β及IL-6mRNA的表达量。结果LPS刺激组细胞TNF-α、IL-1βmRNA表达量极显著高于正常对照组(P<0.01),黄芩苷、黄芩素和小檗碱作用组细胞TNF-α、IL-1β及IL-6mRNA表达量比LPS刺激组显著降低(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05)。上述结果表明,黄芩苷、黄芩素和小檗碱通过抑制炎症细胞TNF-α、IL-1β及IL-6 mRNA的表达,从而发挥抗炎作用。 展开更多

关键词 细胞炎症模型 TNF-Α IL-1Β 黄芩苷 黄芩素 小檗碱

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PRRSV诱导猪体内肺泡巨噬细胞炎症模型的建立 被引量：8

10

作者 罗文涓 杨剑 +6 位作者 敖妙 刘妍璨 覃一峰 文露婷 黎江 韦英益 胡庭俊 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期155-163,共9页

【目的】建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)诱导体内猪肺泡巨噬细胞(PAM)炎症模型,评价PRRSV感染对仔猪免疫系统的影响,为猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的临床诊断及科学防控提供参考依据。【方法】以PRRSVGXNN1396株人工感染30日龄健康断... 【目的】建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)诱导体内猪肺泡巨噬细胞(PAM)炎症模型,评价PRRSV感染对仔猪免疫系统的影响,为猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的临床诊断及科学防控提供参考依据。【方法】以PRRSVGXNN1396株人工感染30日龄健康断奶仔猪,复制出PRRS病症,剖杀后采集病料,通过组织病理学和RT-PCR检测观察各免疫器官组织的病理变化及其病毒分布情况,并检测PAM细胞内的COX-1、COX-2等酶活性变化及IL-6、IL-8、IL-10、IL-1β、IFN-γ、MCP-1和TNF-α等炎性细胞因子水平变化。【结果】断奶仔猪接种PRRSV-GXNN1396株后第3 d开始表现出典型的PRRS病症,PRRSV主要集中在肺脏、颌下淋巴结、血液和扁桃体等样品组织中,攻毒仔猪各主要器官的实质细胞及有关淋巴细胞均出现不同程度坏死和炎症细胞浸入现象,尤其以肺脏、肾脏、脾脏等器官受损严重,出现巨噬细胞和淋巴细胞浸润。PRRSV感染早期(第3 d)仔猪PAM细胞中的ROS水平及COX-2、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α等因子水平均呈升高趋势,且COX-2、IL-6、IL-8和TNF-α因子水平极显著升高(P<0.01);随着感染天数的增加,PAM细胞内的COX-2、IL-6和IL-8因子水平呈下降趋势,TNF-α因子水平呈上升趋势。【结论】成功建立了PRRSV诱导仔猪体内PAM细胞炎症模型,进一步佐证PRRSV主要侵害猪的免疫器官组织,以达到免疫抑制的效果,并推断感染第3 d是病猪炎症反应的高峰期。 展开更多

关键词 猪 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 肺泡巨噬细胞(PAM) 炎症模型 炎性细胞因子

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LPS致奶牛蹄真皮细胞炎症模型的建立 被引量：4

11

作者 田梦悦 刘宝京 +3 位作者 代飞 侯海婷 秦建华 马玉忠 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期90-94,共5页

为建立LPS致奶牛蹄真皮细胞炎症模型,通过分离、培养奶牛蹄真皮细胞,用不同浓度的LPS处理蹄真皮细胞,倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法检测细胞活力,RT-PCR法检测CYP3A4、CYP1A1mRNA的表达,Western blot法检测CYP450蛋白的表达,并通过EL... 为建立LPS致奶牛蹄真皮细胞炎症模型,通过分离、培养奶牛蹄真皮细胞,用不同浓度的LPS处理蹄真皮细胞,倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法检测细胞活力,RT-PCR法检测CYP3A4、CYP1A1mRNA的表达,Western blot法检测CYP450蛋白的表达,并通过ELISA法检测细胞上清液中TNF-ɑ、IL-1β的含量,来确定LPS是否对细胞造成损伤。结果表明,随着LPS浓度的升高,对蹄真皮细胞的损伤也随之升高,CYP450蛋白的表达呈升高的趋势,在10μg/mL时表达最明显,10μg/mL LPS处理48h,对CYP3A4、CYP1A1mRNA表达的抑制作用较明显,模型组TNF-ɑ和IL-1β的含量极显著高于对照组(P<0.01)。本试验表明,10μg/mL LPS作用48h可建立可靠的蹄真皮细胞炎症模型。 展开更多

关键词 LPS 奶牛 蹄真皮细胞 炎症模型

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大肠埃希菌致兔慢性输卵管炎症模型的建立 被引量：3

12

作者 冯子聪 张昭 +4 位作者 黎哲 冯博仪 陈思艾 李君宇 肖小敏 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期19-23,共5页

目的利用大肠埃希菌建立新西兰兔输卵管慢性炎症模型。方法制备3×109/m L的混合菌液(大肠埃希菌:金葡菌:链球菌按2∶1∶1体积混合)和3×108/m L大肠埃希菌混悬液。18只新西兰雌兔随机分三组,其中正常组2只、混合菌液实验组8只... 目的利用大肠埃希菌建立新西兰兔输卵管慢性炎症模型。方法制备3×109/m L的混合菌液(大肠埃希菌:金葡菌:链球菌按2∶1∶1体积混合)和3×108/m L大肠埃希菌混悬液。18只新西兰雌兔随机分三组,其中正常组2只、混合菌液实验组8只、大肠埃希菌液实验组8只。通过经阴道宫腔插管灌注术分别将混合菌液和大肠埃希菌液注入两组实验兔体内。于菌液宫腔灌注术后第5、10、15、20天观察大体标本及光镜下输卵管炎症形成情况。结果混合菌液组和大肠埃希菌液组兔均于灌注术第15天呈慢性输卵管炎症改变。结论两种建模方法均具有接近人体感染途径、成模率高、操作简便的优点,是建立输卵管慢性炎症动物模型的有效方法。 展开更多

关键词 慢性输卵管炎症模型 混合菌液 大肠埃希菌液 经阴道宫腔内插管灌注术

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阿那其根醇提取物对两种炎症模型作用机制研究 被引量：6

13

作者 黄海 刘长江 金小越 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2018年第1期47-50,共4页

目的:研究阿那其根醇提取物(EERAP)对二甲苯致小鼠炎症模型和脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞炎症模型的影响。方法:将50只小鼠,随机分为对照组(饮用水)、EERAP高剂量组(640 mg/kg)、中剂量组(320 mg/kg)、低剂量组(160 mg/kg)和阿司匹林组... 目的:研究阿那其根醇提取物(EERAP)对二甲苯致小鼠炎症模型和脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞炎症模型的影响。方法:将50只小鼠,随机分为对照组(饮用水)、EERAP高剂量组(640 mg/kg)、中剂量组(320 mg/kg)、低剂量组(160 mg/kg)和阿司匹林组(120 mg/kg),采用二甲苯建立小鼠炎症模型,比较小鼠耳廓肿胀度及耳廓毛细血管通透性的变化,ELISA法测定各组炎症渗出液丙二醛(MDA)、超氧化歧化酶(SOD)的含量;LPS诱导RAW264.7细胞建立细胞炎症模型,ELISA法测定核转录因子kappa B(NF-κB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果:在二甲苯致小鼠炎症模型中,EERAP高、中、低剂量组均能抑制小鼠耳廓肿胀度,减少小鼠耳廓毛细血管通透性,减少渗出率,与空白对照组比较均有统计学差异(P<0.01);EERAP高、中、低剂量组均能降低血清中MDA含量(P<0.05),显著升高SOD含量(P<0.01);在LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型中,EERAP在3.125~200μg/m L范围内可降低TNF-α含量,而在2μg/m L时也可以降低细胞NF-κB含量(P<0.05),与阿司匹林组无统计学差异。结论:EERAP可能是通过抑制MDA、TNF-α和NF-κB的生成,升高SOD的水平,起到抗炎、抗氧化作用。 展开更多

关键词 阿那其根醇提取物 炎症模型 抗炎 抗氧化

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奶牛蹄真皮细胞卡拉胶炎症模型的建立 被引量：1

14

作者 侯海婷 王承玉 +1 位作者 秦建华 马玉忠 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期96-98,130,共4页

为了建立卡拉胶诱导的奶牛蹄真皮细胞炎症模型,以组织块培养法分离培养到的奶牛蹄真皮细胞为研究对象,用不同浓度的卡拉胶作用于奶牛蹄真皮细胞。采用MTT法检测卡拉胶作用后细胞的存活率,West-ern blot法检测NF-κB蛋白的表达,ELISA法... 为了建立卡拉胶诱导的奶牛蹄真皮细胞炎症模型,以组织块培养法分离培养到的奶牛蹄真皮细胞为研究对象,用不同浓度的卡拉胶作用于奶牛蹄真皮细胞。采用MTT法检测卡拉胶作用后细胞的存活率,West-ern blot法检测NF-κB蛋白的表达,ELISA法检测细胞上清液中TNF-α的浓度。结果表明:随着卡拉胶浓度的升高,对细胞的抑制作用加强,200μg/mL的卡拉胶对细胞的抑制率最接近10%。200μg/mL卡拉胶作用蹄细胞48h,NF-κB的蛋白表达升高,且细胞上清液中TNF-α的含量显著高于对照组(P<0.05)。即200μg/mL卡拉胶作用48h,可成功建立奶牛蹄真皮细胞的炎症模型。 展开更多

关键词 卡拉胶 奶牛 蹄真皮细胞 炎症模型

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新视角重探小鼠胶质细胞体外培养技术与炎症模型 被引量：1

15

作者 吴相枝 徐铭枝 +3 位作者 张东伟 付洁 王伊 宋海峰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1030-1036,共7页

目的 通过比较新材料与传统材料在胶质细胞培养中的优劣及特点,优化小鼠胶质细胞炎症模型。方法利用qPCR、流式细胞术、免疫荧光等手段,表征胶质细胞组成比例与细胞纯度。在LPS刺激下,从mRNA与蛋白水平,评估不同包被材料对细胞炎症反应... 目的 通过比较新材料与传统材料在胶质细胞培养中的优劣及特点,优化小鼠胶质细胞炎症模型。方法利用qPCR、流式细胞术、免疫荧光等手段,表征胶质细胞组成比例与细胞纯度。在LPS刺激下,从mRNA与蛋白水平,评估不同包被材料对细胞炎症反应的影响。结果 LPS(100 μg·L^-1 )刺激48 h,混合胶质细胞炎症因子表达量明显高于小胶质细胞,如PDL包被时,混合胶质细胞TNF-α表达量为(903.8±322.2)ng·L^-1 ,明显高于小胶质细胞(565.4±159.8)ng·L^-1;Matrigel包被时,混合胶质细胞表层的小胶质细胞状态更佳。而小胶质细胞在未包被时,对LPS更为敏感,TNF-α水平为(6861.4±1606.6)ng·L^-1 。结论 Matrigel包被培养的混合胶质细胞,可最大程度模拟体内环境,为建立胶质细胞炎症模型的最佳条件;评估炎症模型应以蛋白水平检测结果为主要指标。 展开更多

关键词 乳鼠 培养 分选 小胶质细胞 混合胶质细胞 炎症模型

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C57BL/6J小鼠急性足肿胀炎症模型的建立及指标评价 被引量：9

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作者 孙韬 王春霞 +2 位作者 李东海 赵谊 曾婷婷 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期175-178,共4页

目的:建立C57BL/6J小鼠急性足肿胀炎症模型进行模型指标评价。方法:将24只SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组,即正常组、模型组和吲哚美辛对照组。采用角叉菜胶法诱导模型组和吲哚美辛对照组小鼠发病建立急性足肿胀炎症模型。正常组小... 目的:建立C57BL/6J小鼠急性足肿胀炎症模型进行模型指标评价。方法:将24只SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组,即正常组、模型组和吲哚美辛对照组。采用角叉菜胶法诱导模型组和吲哚美辛对照组小鼠发病建立急性足肿胀炎症模型。正常组小鼠不做任何处理。各组分别于注射角叉菜胶后1、2、3、4、5、6 h测量足趾厚度,随后处死小鼠取血清标本进行炎性因子检测,取足部组织进行病理学观察。结果:致炎1 h后模型组小鼠足部开始肿胀,2 h后肿胀明显,5 h后达到肿胀高峰。与模型组相比,吲哚美辛对照组则在2 h明显抑制肿胀(P=0.004),抑制作用持续到6 h(P=0.000)。正常组小鼠无明显变化;模型组较吲哚美辛对照组和正常组小鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)都明显升高(P=0.000);模型组小鼠足趾病理切片见大量中性粒细胞浸润,吲哚美辛对照组小鼠见少量中性粒细胞浸润,正常组小鼠足部病理未见明显异常。结论:C57BL/6J小鼠急性足肿胀炎症模型方法可靠、可重复性较高以及阳性对照药物吲哚美辛抗足肿胀效果明显,可适用于抗炎药物的常规筛选及评价。足趾厚度改变、血清炎性因子TNF-α和IL-1β升高以及炎症部位病理改变是评价急性足肿胀炎症模型的重要指标。 展开更多

关键词 炎症模型 C57BL/6J小鼠 足肿胀

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连翘有效成分对炎症模型的作用 被引量：7

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作者 厉世伟 司宁宁 +3 位作者 李龙 谢安 张艳华 况玲 《中兽医医药杂志》 2012年第1期16-19,共4页

目的:研究连翘提取物对细胞炎症模型的抗炎作用。方法:将连翘提取物按不同浓度作用于细胞炎症模型,观察细胞的形态变化,利用MTT法测定各孔的光吸收值。结果:连翘苷和连翘黄酮对照组细胞形态镜检观察未见明显变化,OD值略比空白对照组低;... 目的:研究连翘提取物对细胞炎症模型的抗炎作用。方法:将连翘提取物按不同浓度作用于细胞炎症模型,观察细胞的形态变化,利用MTT法测定各孔的光吸收值。结果:连翘苷和连翘黄酮对照组细胞形态镜检观察未见明显变化,OD值略比空白对照组低;黄酮对照组细胞几乎全部破碎;不同浓度的大肠杆菌对照组细胞破裂、聚集成团,作用显著(P<0.05),且随着浓度的升高,对细胞形态的改变愈加显著。结论:连翘提取物对炎性细胞有不同程度保护,与同浓度菌液对照组相比,保护作用显著(P<0.05),在100μL浓度菌液中保护作用尤甚,具有一定的抗炎作用。 展开更多

关键词 连翘 细胞炎症反应模型 MTT法 连翘苷

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环状RNA Circ0000316在大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎症模型中的表达研究

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作者 谢晓刚 李丹 +5 位作者 罗艳 贾燕青 薛增迪 张振仓 马乃祥 权富生 《动物医学进展》 北大核心 2021年第5期14-18,共5页

奶牛乳腺炎是奶牛场的多发病和常发病,在世界各地的养殖场均有很高的发病率。环状RNA(circular RNA,circRNA)作为近年来被广泛研究的非编码RNA在奶牛乳腺炎发生过程中也发挥了一定的作用。采集患有乳腺炎的奶牛乳腺组织和健康乳腺组织检... 奶牛乳腺炎是奶牛场的多发病和常发病,在世界各地的养殖场均有很高的发病率。环状RNA(circular RNA,circRNA)作为近年来被广泛研究的非编码RNA在奶牛乳腺炎发生过程中也发挥了一定的作用。采集患有乳腺炎的奶牛乳腺组织和健康乳腺组织检测circ0000316的表达量,同时采用大肠埃希氏菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)刺激奶牛乳腺上皮细胞,建立奶牛乳腺上皮细胞炎症模型,检测炎症模型中circ0000316的表达量。结果显示,成功建立了奶牛乳腺上皮细胞炎症模型,且circ0000316在奶牛乳腺炎组织和奶牛乳腺上皮细胞炎症模型中均呈现低表达,为研究circRNA在乳腺炎发生过程中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 环状RNA 奶牛乳腺炎 大肠埃希氏菌 金黄色葡萄球菌 炎症模型

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罗汉果苷ⅡE在巨噬细胞糖尿病炎症模型中的作用

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作者 黄凯 肖娟 李爱丽 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1454-1458,共5页

为研究罗汉果苷IIE在脂多糖(LPS)和棕榈酸(PA)联合诱导小鼠巨噬细胞糖尿病炎症模型中的作用,该研究采用1 ng·μL^(-1)的LPS和100μmol·L^(-1)的PA联合处理小鼠巨噬细胞RAW 264.7构建糖尿病炎症模型,并运用qRT-PCR分别检测0、1... 为研究罗汉果苷IIE在脂多糖(LPS)和棕榈酸(PA)联合诱导小鼠巨噬细胞糖尿病炎症模型中的作用,该研究采用1 ng·μL^(-1)的LPS和100μmol·L^(-1)的PA联合处理小鼠巨噬细胞RAW 264.7构建糖尿病炎症模型,并运用qRT-PCR分别检测0、1、3、6、12、24 h六个不同时间点细胞中炎症因子TNF-αmRNA的表达水平变化。结果表明:(1)1 ng·μL^(-1)的LPS和100μmol·L^(-1)的PA两者共同处理小鼠巨噬细胞RAW 264.7在24 h时产生的炎症协同作用最好;(2)在LPS(1 ng·μL^(-1))和PA(100μmol·μL^(-1))联合诱导小鼠巨噬细胞12 h后,进而用20μmol·L^(-1)的罗汉果苷IIE处理12 h,qRT-PCR检测结果发现,20μmol·L^(-1)的罗汉果苷IIE处理12 h可显著降低LPS和PA联合诱导的细胞内炎症因子TNF-αmRNA表达水平,说明罗汉果苷IIE能够有效降低巨噬细胞的炎症水平。综上认为,罗汉果苷IIE可能在治疗糖尿病中起到一定的作用,该研究结果为糖尿病治疗新策略的提出提供了参考。 展开更多

关键词 糖尿病炎症模型 罗汉果苷IIE 脂多糖 棕榈酸 小鼠巨噬细胞

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大肠杆菌脂多糖体外诱导羔羊外周血单个核细胞炎症模型的建立

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作者 董宁 郭洪冉 +1 位作者 王志超 杨雨鑫 《家畜生态学报》 北大核心 2022年第12期52-58,共7页

为了建立大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)体外诱导羔羊外周血单个核细胞炎症模型,该试验探究了不同作用时间(3 h、6 h、12 h)和不同作用浓度(0、0.016、0.08、0.2、0.4、1、2、4、6、8、10、50μg/mL)的大肠杆菌LPS溶液对羔羊... 为了建立大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)体外诱导羔羊外周血单个核细胞炎症模型,该试验探究了不同作用时间(3 h、6 h、12 h)和不同作用浓度(0、0.016、0.08、0.2、0.4、1、2、4、6、8、10、50μg/mL)的大肠杆菌LPS溶液对羔羊外周血单个核细胞相对活力和炎症因子相对表达量的影响。结果表明:在处理时间小于12 h时,细胞相对活性没有显著差异,处理浓度高于6μg/mL时,细胞相对活性普遍低于对照组;在处理时间为6 h时,除0.4μg/mL以外其余各组炎症因子IL-1β的相对表达量高于3 h和12 h,均显著高于对照组(P<0.05);处理时间为3 h,处理浓度为6μg/mL时,IL-6的相对表达量显著高于对照组且达到峰值(P<0.01);当处理时间为6 h,处理浓度为4μg/mL时,IL-10的相对表达量极显著高于对照组且达到峰值(P<0.01);TNF-α的相对表达量在处理时间为6 h、处理浓度为1μg/mL时达到峰值且显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,LPS处理时间为6 h时,各细胞炎症因子表达量普遍较高,结合细胞相对活力结果,应选取浓度为4μg/mL、处理时间为6 h建立LPS体外诱导的羔羊外周血单个核细胞炎症模型,用于后续试验。 展开更多

关键词 脂多糖 外周血单个核细胞 炎症模型 羔羊

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