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雷公藤多苷对佐剂性关节炎模型大鼠关节中核因子κB受体激活剂配基表达的影响 被引量:16
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作者 罗波 胡永红 +2 位作者 张明敏 涂胜豪 曾克勤 《医药导报》 CAS 2006年第5期395-397,共3页
目的探讨雷公藤多苷对佐剂性关节炎大鼠关节中核因子κB受体激活剂配基(RANKL)和护骨素(OPG)表达的影响。方法建立大鼠佐剂性关节炎模型,关节炎起病后分别灌胃给予雷公藤多苷和甲氨蝶呤,关节炎病程高峰期运用免疫组化和图像分析技术测... 目的探讨雷公藤多苷对佐剂性关节炎大鼠关节中核因子κB受体激活剂配基(RANKL)和护骨素(OPG)表达的影响。方法建立大鼠佐剂性关节炎模型,关节炎起病后分别灌胃给予雷公藤多苷和甲氨蝶呤,关节炎病程高峰期运用免疫组化和图像分析技术测定关节滑膜和骨组织RANKL和OPG的表达,同时测定胫骨关节端骨密度。结果给予雷公藤多苷和甲氨蝶呤的大鼠骨密度均高于模型组(均P<0.05),大鼠关节滑膜、软骨下骨和小梁骨区域中RANKL表达量均低于模型组(P<0.01或P<0.05),OPG关节骨组织表达量均低于模型组(均P<0.05)。结论抑制炎性关节中RANKL表达可能是雷公藤多苷和甲氨蝶呤抑制类风湿关节炎关节骨侵蚀的机制之一。 展开更多
关键词 雷公藤多苷 甲氨蝶呤 因子-κb受体激活剂配基 护骨素 关节炎 实验性
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p38MAPK抑制对成骨细胞核因子-κB受体激活配体和骨保护素表达的影响 被引量:2
2
作者 李瑞霞 肖喜荣 +2 位作者 顾超 徐嬿 李斌 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期39-42,共4页
目的观察p38MAPK信号转导通路在成骨细胞分化及核因子-κB受体激活配体(receptor activator of nuclear factor-κBligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)表达中的作用。方法取第1继代BALB/c小鼠颅盖骨成骨细胞,药物刺激组分别... 目的观察p38MAPK信号转导通路在成骨细胞分化及核因子-κB受体激活配体(receptor activator of nuclear factor-κBligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)表达中的作用。方法取第1继代BALB/c小鼠颅盖骨成骨细胞,药物刺激组分别加入10-8mol/L 17β-雌二醇和10-7mol/L雷洛昔芬;含阻断剂组预先添加5μmol/L SB202190阻断p38MAPK通路后,再加17β-雌二醇或雷洛昔芬。72 h后用PNPP法测定成骨细胞内碱性磷酸酶(alkaliphosphatase,ALP)活性;RT-PCR法检测成骨细胞ALP、OPG和RANKL的转录水平。结果17β-雌二醇和雷洛昔芬能够促进成骨细胞分化,促进OPG、RANKL的表达(P<0.05),OPG/RANKL无明显变化(P>0.05);阻断p38MAPK信号转导通路后,成骨细胞分化受抑,OPG、RANKL的表达和OPG/RANKL降低(P<0.05)。结论p38MAPK抑制可干扰体外培养成骨细胞分化,抑制RANKL和OPG的过度表达。 展开更多
关键词 p38 MAPK 17Β-雌二醇 雷洛昔芬 成骨细胞 骨保护素 因子-κb受体激活配体
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核因子-κB受体激活剂配体-核因子-κB受体激活剂信号传导通路在骨髓瘤骨病中的研究进展 被引量:1
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作者 冯妍 唐文娇 +3 位作者 邹忠晴 崔健 张丽 牛挺 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期686-692,共7页
多发性骨髓瘤是一种恶性克隆性浆细胞疾病,目前仍无法治愈,约90%多发性骨髓瘤患者在疾病的进程中出现骨髓瘤骨病,严重影响了患者的生活质量和疾病预后。骨髓瘤骨病的传统治疗包括双膦酸盐、放疗、手术治疗等。近年来随着研究证实核因子-... 多发性骨髓瘤是一种恶性克隆性浆细胞疾病,目前仍无法治愈,约90%多发性骨髓瘤患者在疾病的进程中出现骨髓瘤骨病,严重影响了患者的生活质量和疾病预后。骨髓瘤骨病的传统治疗包括双膦酸盐、放疗、手术治疗等。近年来随着研究证实核因子-κB受体激活剂配体(RANKL)-核因子-κB受体激活剂(RANK)信号传导通路在骨髓瘤骨病中发挥重要作用,为治疗骨髓瘤骨病提供了新靶点。本文就RANKL-RANK信号传导通路在骨髓瘤骨病中的发病机制及靶向治疗新进展进行综述。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 骨髓瘤骨病 因子-κb受体激活剂配体
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苦参碱调节IL-6/STAT3/NF-κB信号通路对炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡的影响 被引量:16
4
作者 吴茸 王栋 +2 位作者 王晶敏 张玮宇 陶庆松 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期809-816,共8页
目的探讨苦参碱(MT)调节白细胞介素-6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)/核转录因子κB(NF-κB)通路对炎症性肠病大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法按照随机数字表法将SD大鼠分为空白对照组(CK组)、Model... 目的探讨苦参碱(MT)调节白细胞介素-6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)/核转录因子κB(NF-κB)通路对炎症性肠病大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法按照随机数字表法将SD大鼠分为空白对照组(CK组)、Model组,低、中、高剂量MT组(MT-L组,50 mg/kg;MT-M组,100 mg/kg;MT-H组,200 mg/kg),美沙拉嗪组(MSLM组,0.42 g/kg)、MT-H+rIL-6(IL-6激活剂)组(200 mg/kg+0.05 mg/kg),每组18只。除CK组外,其余组大鼠均采用50 g/L三硝基苯磺酸(20 mg/kg)缓冲液与500 mL/L乙醇按照1∶1比例混匀后灌肠以构建炎症性肠病大鼠模型,建模成功后,分别进行给药处理,每天1次,持续7周。分别在给药1、3、5、7周时对大鼠进行体质量的测量;比较各组大鼠结肠长度的变化;HE染色检测大鼠结肠组织病理损伤;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-17(IL-17)、IL-10水平;流式细胞术检测大鼠外周血中Th17、Treg细胞比例;Western blotting检测大鼠结肠组织中维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头框蛋白P3(Foxp3)、IL-6、p-STAT3、p-NF-κB p65蛋白表达。结果与CK组比较,Model组大鼠结肠组织病理损伤严重,体质量(3、5、7周时)、IL-10水平、Treg细胞比例、Foxp3蛋白表达降低,结肠变短,TNF-α、IL-17水平、Th17细胞比例、Th17/Treg比值、RORγt、IL-6、p-STAT3、p-NF-κB p65蛋白表达增高(P<0.05);与Model组比较,MT-L组、MT-M组、MT-H组、MSLM组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);rIL-6减弱了高剂量MT对炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡的促进作用。结论MT可能通过抑制IL-6/STAT3/NF-κB信号通路,促进炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡。 展开更多
关键词 苦参碱 炎症性肠病 白细胞介素-6/信号转导和转录激活因子3/转录因子κb(IL-6/STAT3/NF-κb)通路 辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)
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跑台运动训练对脊髓损伤后大鼠肺损伤及HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路表达的影响 被引量:8
5
作者 唐丹 王先斌 +1 位作者 杨香莲 吴霜 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期159-166,共8页
目的:探讨跑台运动训练对脊髓损伤(SCI)后大鼠肺损伤及HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路表达的影响。方法:选取54只SD雌性大鼠,随机分成3组,包括假手术组、SCI制动组、SCI运动组。SCI运动组及SCI制动组分别于术后第3天开始跑台运动训练或制动... 目的:探讨跑台运动训练对脊髓损伤(SCI)后大鼠肺损伤及HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路表达的影响。方法:选取54只SD雌性大鼠,随机分成3组,包括假手术组、SCI制动组、SCI运动组。SCI运动组及SCI制动组分别于术后第3天开始跑台运动训练或制动干预,BBB评分评定大鼠脊髓损伤后后肢运动功能。分别在运动或制动后第3天、第7天取肺组织,HE染色检测大鼠肺组织病理结构变化;免疫组化检测肺组织HMGB1蛋白表达情况;qRT-PCR检测HMGB1、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α m RNA表达情况;Western Blot检测HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表达情况。结果:BBB评分结果显示,与假手术组比较,SCI制动组、SCI运动组BBB评分均显著下降(P<0.05);SCI运动组与SCI制动组评分结果比较无显著性差异(P>0.05)。HE染色结果显示,SCI制动组及SCI运动组第3天、第7天肺组织中均出现水肿、出血、炎性细胞浸润,相较于SCI制动组,SCI运动组肺损伤评分显著降低(P<0.05)。qRT-PCR、免疫组化、Western Blot结果均显示,与假手术比较,SCI制动组、SCI运动组第3天、第7天肺组织中HMGB1、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α等因子的表达均显著上调(P<0.05),且SCI运动组较SCI制动组显著降低(P<0.05)。结论:跑台运动训练可改善脊髓损伤后大鼠肺损伤,其机制可能与调节HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路,抑制肺组织炎症反应相关。 展开更多
关键词 跑台运动训练 脊髓损伤 肺损伤 高迁移率族蛋白1 激活因子-κb Toll样受体4
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转化生长因子β1/Smad信号通路在破骨细胞分化发育中的研究进展 被引量:1
6
作者 庄新晨 苏佳灿 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期622-626,共5页
破骨细胞是来源于单核造血髓系细胞的多核巨细胞,它的激活在炎症性骨破坏及骨质疏松症的发生和发展中起着十分重要的作用。破骨细胞的分化和功能受到多种细胞因子和生长因子的调节,已有研究表明,TGF-β1与其下游信号转导蛋白Smad2/3、Sm... 破骨细胞是来源于单核造血髓系细胞的多核巨细胞,它的激活在炎症性骨破坏及骨质疏松症的发生和发展中起着十分重要的作用。破骨细胞的分化和功能受到多种细胞因子和生长因子的调节,已有研究表明,TGF-β1与其下游信号转导蛋白Smad2/3、Smad1/5可促进或抑制破骨细胞分化、发育和成熟,其机制与调节核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)/核因子κB受体激活蛋白(RANK)信号通路及其下游介质有关。本文主要针对TGF-β1/Smad信号通路在破骨细胞分化和发育中的作用进行综述。 展开更多
关键词 破骨细胞 转化生长因子Β SMAD蛋白 因子κb受体激活蛋白配体
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补肾通络方抑制NF-κB/RANK/RANKL通路减轻胶原蛋白诱导关节炎(CIA)大鼠骨破坏 被引量:9
7
作者 刘海龙 王钢 +4 位作者 王佳 王涛 田杰祥 王丽琴 杨芳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期205-211,共7页
目的探讨补肾通络方(BSTL)对胶原蛋白诱导关节炎(CIA)大鼠模型骨破坏的改善作用以及对核因子κB/核因子κB受体激活蛋白/核因子κB受体激活蛋白配体(NF-κB/RANK/RANKL)信号通路的影响。方法将SD大鼠随机分为空白对照组、CIA模型组、1 m... 目的探讨补肾通络方(BSTL)对胶原蛋白诱导关节炎(CIA)大鼠模型骨破坏的改善作用以及对核因子κB/核因子κB受体激活蛋白/核因子κB受体激活蛋白配体(NF-κB/RANK/RANKL)信号通路的影响。方法将SD大鼠随机分为空白对照组、CIA模型组、1 mg/kg甲氨喋呤(MTX)处理组、(0.5、2)g/kgBSTL处理组,每组10只。除空白对照组外,其余大鼠采用含有卡介苗的完全Freund佐剂和牛Ⅱ型胶原蛋白(Col2)混合乳液免疫刺激,建立CIA模型。建模15 d后(第0天)根据关节炎指数(AI)评价造模是否成功。自第0天起,连续给予MTX或BSTL处理28 d,免疫组织化学染色法检测滑膜组织NF-κB p65的表达,ELISA检测大鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、抗总Col2抗体及亚型(Col2-IgG、Col2-IgG1、Col2-IgG2a)水平,Western blot法检测滑膜组织RANKL、RANK、护骨因子(OPG)蛋白表达。结果与CIA模型组相比,2 g/kg BSTL处理28 d的大鼠足容积、AI值降低,血清IL-1β、IL-18、TNF-α、Col2-IgG、Col2-IgG2a以及RANK和RANKL水平均降低,OPG水平升高;大鼠滑膜组织中NF-κB p65、RANK和RANKL蛋白表达均降低,OPG蛋白表达增加。结论BSTL可通过抑制全身炎症反应,降低滑膜组织中NF-κB p65、RANK、RANKL蛋白的表达,上调OPG蛋白表达,缓解CIA模型大鼠关节炎症和肿胀。 展开更多
关键词 补肾通络方(bSTL) 类风湿性关节炎(RA) 因子κb受体激活蛋白配体(RANKL) 因子κb p65(NF-κb p65) 胶原蛋白诱导关节炎(CIA)
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白细胞介素17通过激活p38MAPK信号通路调控人牙周膜成纤维细胞RANKL和OPG的表达 被引量:2
8
作者 农冬梅 覃雅庆 +1 位作者 周华 康娜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期545-551,共7页
目的使用p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路抑制剂确定白细胞介素17(IL-17)是否通过该通路参与调控人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)和护骨因子(OPG)的表达。方法组织块法分离培养HPDLF,20 ng/mL IL-1... 目的使用p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路抑制剂确定白细胞介素17(IL-17)是否通过该通路参与调控人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)和护骨因子(OPG)的表达。方法组织块法分离培养HPDLF,20 ng/mL IL-17分别刺激0、20、40、60、80 min,Western blot法检测HPDLF磷酸化的p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白水平。HPDLF随机分为空白对照组、二甲基亚砜(DMSO)组、p38MAPK抑制剂SB203580组、IL-17组、IL-17联合DMSO组、IL-17联合SB203580组。IL-17及联合处理组,分别添加10μmol/L SB203580、20 ng/mL IL-17。实时定量PCR检测HPDLF的RANKL、OPG mRNA水平,Western blot法检测RANKL蛋白水平、ELISA检测OPG蛋白含量。结果p-p38MAPK蛋白水平在IL-17刺激后的0~60 min内随时间增加,在60 min时达到最高,在80 min时下降。IL-17可上调HPDLF中RANKL mRNA及蛋白表达,下调OPG mRNA和蛋白表达。较单纯使用IL-17刺激,添加SB203580通路抑制剂后,RANKL mRNA和蛋白水平均降低,OPG的mRNA水平升高。结论IL-17通过激活p38MAPK信号通路,上调HPDLF的RANKL表达,抑制OPG mRNA表达。 展开更多
关键词 白细胞介素17(IL-17) 人牙周膜成纤维细胞(HPDLF) p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK) 因子κb受体激活蛋白配体(RANKL) 护骨因子(OPG)
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阿伦膦酸盐在不同分化阶段对破骨细胞生成及骨吸收功能的影响 被引量:3
9
作者 董伟 戚孟春 +2 位作者 刘强 于静 邓久鹏 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期195-198,共4页
目的:研究阿伦膦酸盐作用在不同分化阶段对破骨细胞生成及骨吸收功能的影响。方法:体外分离骨髓单核细胞,用30μg/L M-CSF对其预诱导3d,然后将细胞分为A、B、C、D四组。A组(对照组),用50μg/L M-CSF+100μg/L RANKL进行破骨细胞诱导;B、... 目的:研究阿伦膦酸盐作用在不同分化阶段对破骨细胞生成及骨吸收功能的影响。方法:体外分离骨髓单核细胞,用30μg/L M-CSF对其预诱导3d,然后将细胞分为A、B、C、D四组。A组(对照组),用50μg/L M-CSF+100μg/L RANKL进行破骨细胞诱导;B、C、D组除加入上述诱导因子外,在不同时间点加入0.1μmol/L阿伦膦酸盐(ALN),加入时间分别为:B组第0~2天加入,C组第3~4天加入,D组第5~6天加入。检测每组细胞正式诱导第6天TRAP染色情况及牙本质磨片吸收陷窝情况。结果:各组细胞均有TRAP阳性多核破骨细胞生成,并在牙本质磨片上形成吸收陷窝;但A组TRAP阳性多核细胞数目、吸收陷窝数目及陷窝面积最高,D组次之,B组最差。结论:阿伦膦酸盐在破骨细胞分化阶段作用越早,对破骨细胞生成的抑制效应越大,所形成破骨细胞骨吸收能力越差。 展开更多
关键词 破骨细胞 巨噬细胞集落刺激因子 阿伦膦酸盐 因子κb受体激活因子配体 抗酒石酸酸性磷酸酶
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三七总皂甙对骨髓基质细胞成骨分化及成骨作用的调节 被引量:15
10
作者 李学东 陈斌 +2 位作者 郑创义 刘钊勇 杜世新 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2009年第5期371-373,326,共4页
目的探讨三七总皂甙对骨髓基质细胞体外成骨分化及成骨作用的影响。方法分离、纯化大鼠骨髓基质细胞(bone marrow strowal cells,BMSCs),采用常规培养液、成骨诱导液及含100 mg/L PNS的成骨诱导液培养,对各组细胞进行形态学观察,采用... 目的探讨三七总皂甙对骨髓基质细胞体外成骨分化及成骨作用的影响。方法分离、纯化大鼠骨髓基质细胞(bone marrow strowal cells,BMSCs),采用常规培养液、成骨诱导液及含100 mg/L PNS的成骨诱导液培养,对各组细胞进行形态学观察,采用MTT法、对硝基苯磷酸盐法、茜素红染色方法及ELISA法观察各组细胞增殖、ALP活性、矿化结节的形成及RANKL的表达。结果骨诱导组、PNS组较培养液组细胞增殖明显(P〈0.05),而PNS组高于骨诱导组(P〈0.05);骨诱导组、PNS组ALP活性、钙结节形成高于培养液组(P〈0.01),PNS组高于骨诱导组(P〈0.05);骨诱导组、PNS组RANKL表达低于培养液组(P〈0.05),PNS组低于骨诱导组(P〈0.05)。结论BMSCs成骨诱导过程中,PNS可促进其成骨分化、下调其RANKL表达从而具有抑制破骨细胞生成的潜能。 展开更多
关键词 三七总皂甙 骨髓基质细胞 因子κb受体激活蛋白配体 成骨作用
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骨保护素与RANKL在骨折愈合期的表达及其意义 被引量:6
11
作者 严斌 何沛恒 +1 位作者 罗震 李庆标 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第9期1464-1467,共4页
目的:探讨在骨折患者血肿部位及骨折愈合期内血清中骨保护素(OPG)与核因子κB受体激活因子配基(RANKL)的浓度表达及其意义。方法:收集就诊闭合型骨干骨折患者60例,检测血肿部位、骨折后及术后1、2、4、6、8、12、24、48周血清中OP... 目的:探讨在骨折患者血肿部位及骨折愈合期内血清中骨保护素(OPG)与核因子κB受体激活因子配基(RANKL)的浓度表达及其意义。方法:收集就诊闭合型骨干骨折患者60例,检测血肿部位、骨折后及术后1、2、4、6、8、12、24、48周血清中OPG/RANKL浓度水平,并设对照组30例。结果:(1)在血肿处OPG血清浓度明显高于骨折后血清浓度[(30.27±5.38)pmol/L vs.(5.14±1.55)pmol/L],骨折后患者血清OPG浓度高于对照组[(5.14±1.55)pmol/L vs.(2.9±0.81)pmol/L],差异具有统计学意义(P〈0.05)。血肿部位RANKL血清浓度、骨折后血清浓度与对照组浓度分别为(0.055±0.053)、(0.053±0.045)、(0.049±0.075)pmol/L,差异无统计学意义(P〉0.05)。在骨折愈合期,患者血清中OPG浓度波动于2.53-5.84 pmol/L,与对照组相比差异有统计学意义(P〈0.05)、RANKL的浓度波动于0.030-0.046 pmol/L,与对照组相比差异无统计学意义(P〉0.05)。(2)在血肿部位RANKL/OPG比值最低;与对照组相比,骨折组RANKL/OPG比值在骨折术后1周达最低,随后缓慢增高(P〈0.05)。结论:骨折血肿部位及患者血清中OPG的浓度升高明显,RANKL/OPG比值远远低于对照组。 展开更多
关键词 骨折 愈合期 骨保护素 因子κb受体激活因子配基
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类风湿性关节炎患者外周血T细胞RANKL增加且血清Dickkopf1降低 被引量:7
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作者 陈林 李立新 +5 位作者 黄卓春 牛倩 黄凤誉 张君龙 杨滨 王兰兰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期373-377,共5页
目的探讨骨代谢相关分子在类风湿性关节炎(RA)患者骨代谢异常和疾病进展过程中的作用。方法纳入RA患者66例及健康对照20例,搜集相关临床信息。利用电化学发光免疫分析法检测受试者血清中骨钙素N端中段(OC-N-MID)和1型胶原蛋白交联羧基... 目的探讨骨代谢相关分子在类风湿性关节炎(RA)患者骨代谢异常和疾病进展过程中的作用。方法纳入RA患者66例及健康对照20例,搜集相关临床信息。利用电化学发光免疫分析法检测受试者血清中骨钙素N端中段(OC-N-MID)和1型胶原蛋白交联羧基末端肽(CTX)水平。采用液相悬浮芯片法检测Wnt抑制因子Dickkopf1(DKK1)、核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)含量。利用流式细胞术检测外周血T细胞上RANKL的水平。结果与健康对照组相比,RA患者血清中OC-N-MID、CTX含量无显著性差异,RANKL水平升高,DKK1水平降低。RA患者外周血T细胞上RANKL水平增加,尤其CD3+T细胞亚群上RANKL增加显著。结论 RA患者T细胞上RANKL水平增加,血清中RANKL含量升高,DKK1水平降低。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 骨代谢 Dickkopf1(DKK1) 因子κb受体激活蛋白配体(RANKL)
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人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞条件培养液诱导破骨前体细胞的分化成熟 被引量:4
13
作者 汤丽苑 徐钰 +2 位作者 陈瑾 刘新华 俞康 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期649-654,共6页
目的:探讨人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞条件培养液对破骨前体细胞RAW264.7的影响。方法:Western blotting检测可溶性核因子κB受体激活剂配体(soluble receptor activator of NF-κB ligand,sRANKL)的蛋白表达。抗酒石酸酸性磷酸酶(tart... 目的:探讨人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞条件培养液对破骨前体细胞RAW264.7的影响。方法:Western blotting检测可溶性核因子κB受体激活剂配体(soluble receptor activator of NF-κB ligand,sRANKL)的蛋白表达。抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察RAW264.7细胞的分化成熟情况。RT-PCR法检测RAW264.7细胞TRAP和cathepsin K mRNA的表达。结果:Western blotting法证实RPMI8226细胞条件培养液中含有sRANKL。TRAP染色发现RPMI 8226细胞条件培养液能诱导RAW264.7细胞分化为TRAP阳性的多核成熟破骨细胞。人抑制性RANKL单克隆抗体拮抗30%RPMI 8226细胞条件培养液中sRANKL的作用,且具有剂量依赖性。30%RPMI 8226细胞条件培养液能刺激RAW264.7细胞上调TRAP和cathepsin KmRNA表达。结论:人多发性骨髓瘤细胞RPMI 8226条件培养液中的sRANKL具有促RAW264.7破骨前体细胞分化成TRAP阳性的多核成熟破骨细胞的生物活性。人抑制性RANKL单克隆抗体阻断30%RPMI 8226细胞条件培养液中sRANKL的诱导分化作用,且具有浓度依赖性。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 破骨细胞 因子κb受体激活剂配体
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秋葵总黄酮通过抑制炎症反应对糖尿病小鼠的心脏保护作用 被引量:5
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作者 张梦宇 于万德 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第4期359-366,共8页
目的 秋葵中提取的总黄酮(TFA)具有抗氧化、抑制纤维化等作用,心肌细胞在长期高糖刺激下出现过度的氧化应激,产生并释放大量的炎症因子,导致糖尿病心肌病(DCM)。文章将探讨TFA对DCM的影响及其相关机制。方法 将4周龄C57BL/6雄性小鼠分成... 目的 秋葵中提取的总黄酮(TFA)具有抗氧化、抑制纤维化等作用,心肌细胞在长期高糖刺激下出现过度的氧化应激,产生并释放大量的炎症因子,导致糖尿病心肌病(DCM)。文章将探讨TFA对DCM的影响及其相关机制。方法 将4周龄C57BL/6雄性小鼠分成4组:对照组、TFA组、糖尿病心肌病组(STZ组)及糖尿病心肌病+TFA组(STZ+TFA组)。利用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)100 mg/kg构建DCM模型,STZ+TFA组在STZ注射后每日喂食300 mg/kg TFA。通过血清生化检测、心脏超声及心脏活检评估各组小鼠的生理状况,并应用Western Blot与qPCR法分别比较激活核因子κB(NF-κB)及炎症因子的mRNA表达水平。同时,将H9C2株心肌细胞分为6组:低糖对照组、低糖TFA组、高糖组(HG组)、高糖+TFA组(HG+TFA组)、高糖+p65过表达组(HG+pCNDA-p65组)及高糖+TFA+p65过表达组(HG+TFA+pCNDA-p65组),利用正常的DMEM培养基内加D-葡萄糖,配置成含葡萄糖浓度为33 mmol/L的高糖培养基,pCDNA-p65转染H9C2株心肌细胞过表达p65。通过细胞免疫荧光实验对比细胞NF-κB入核水平,应用qPCR法检测细胞内IL-1、IL-6、TNF-α水平。结果 16周时STZ+TFA组心脏质量/体重(4.73±0.29)较STZ组(5.65±0.35)明显降低(P<0.05),血糖有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),对照组、TFA组、STZ组和STZ+TFA组心率差异无统计学意义(P>0.05);心超结果显示TFA明显改善糖尿病心肌病小鼠的左室扩大以及左室的收缩及舒张功能(P<0.05);HE染色与Masson染色显示TFA抑制糖尿病心肌病小鼠的心肌重构并降低心肌纤维化水平;并且给予TFA后,小鼠组织中的NF-κB、IL-1、IL-6、TNF-α水平明显下调(P<0.01)。在细胞水平,TFA预处理的心肌细胞予高糖环境刺激后,NF-κB入核水平减少并且细胞内IL-1、IL-6、TNF-α水平下调(P<0.01);过表达心肌细胞内的NF-κB后,TFA对于由高糖引起的高水平IL-1、IL-6、TNF-α不起作用。结论 TFA通过抑制NF-κB入核下调IL-1、IL-6、TNF-α水平,改善糖尿病心肌病。 展开更多
关键词 总黄酮 秋葵 糖尿病心肌病 激活核因子κb 白细胞介素-1 白细胞介素-6 肿瘤坏死因子
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黄芩苷对人牙周膜细胞RANKL-OPG表达的影响及其作用机制 被引量:4
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作者 陈悦 吴织芬 杨连甲 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期492-497,共6页
目的研究黄芩苷对人牙周膜细胞核因子-κB受体激活物配基和骨保护素(RANKL-OPG)表达的影响及其作用机制。方法首先构建转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βⅡR)靶向siRNA真核表达载体,转染正常人外周血T细胞,使T细胞表面的TGF-βⅡR基因沉默... 目的研究黄芩苷对人牙周膜细胞核因子-κB受体激活物配基和骨保护素(RANKL-OPG)表达的影响及其作用机制。方法首先构建转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βⅡR)靶向siRNA真核表达载体,转染正常人外周血T细胞,使T细胞表面的TGF-βⅡR基因沉默,继而将转染与未转染靶向性TGF-βⅡR基因沉默的T细胞和正常人牙周膜成纤维细胞置于加有黄芩苷和内毒素的培养基中,分为6组:①正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+转染siRNA1的T细胞+黄芩苷;②正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+转染siRNA1的T细胞;③正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+正常T细胞+黄芩苷;④正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+正常T细胞;⑤正常牙周膜成纤维细胞+黄芩苷;⑥正常牙周膜成纤维细胞。共培养48h,RT-PCR检测牙周膜细胞RANKL和OPG的表达,计算RANKL/OPG比值。结果①酶切鉴定正确的克隆测序结果与设计的目的序列完全一致;②转染siRNA1的T细胞组的TGF-βⅡRmRNA的表达被明显抑制;③RANKL/OPG的比值在各组间的差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建了TGF-βⅡR靶向siRNA真核表达载体并成功转染T细胞;黄芩苷可以降低牙周膜细胞表面RANKL/OPG比值;TGF-β的信号传导在黄芩苷影响牙周膜成纤维细胞表面的RANKL/OPG表达过程中起着重要作用;黄芩苷并非只通过TGF-β信号传导通路,而是亦通过其他通路对牙周膜成纤维细胞表面的RANKL/OPG进行调控。 展开更多
关键词 转化生长因子βⅡ型受体 小干扰RNA 因子-κb受体激活物配基 骨保护素 牙周膜成纤维细胞
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前列腺素E2调节大鼠成骨细胞RANKL/OPGmRNA表达的信号通路研究 被引量:2
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作者 权金星 王宝利 +1 位作者 郑纺 邱明才 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 2008年第1期46-52,共7页
目的探讨前列腺索E2(PGE2)对大鼠成骨细胞RANKL和OPGmRNA表达的调节及其信号转导机制。方法培养大鼠UMR106成骨细胞,采用不同浓度的PGE2、不同信号通路的激动剂和阻断剂干预细胞不同时间后收集细胞提取总RNA,实时荧光定量PCR检测RA... 目的探讨前列腺索E2(PGE2)对大鼠成骨细胞RANKL和OPGmRNA表达的调节及其信号转导机制。方法培养大鼠UMR106成骨细胞,采用不同浓度的PGE2、不同信号通路的激动剂和阻断剂干预细胞不同时间后收集细胞提取总RNA,实时荧光定量PCR检测RANKL和OPGmRNA的表达水平。结果PGE2、Forskolin和db—cAMP均可促进RANKLmRNA表达,抑制OPGmRNA的表达。PMA促进RANKL和OPGmRNA表达而A23187则下调RANKL和OPG表达。KT-5720下调PGE2诱导的RANKLmRNA表达约53%(P〈0.001),而chelerythrine、维拉帕米、W7、KN-62和PD98059则对PGE,诱导的RANKLmRNA表达无明显影响(P〉0.05)。KT-5720(P=0.01)、维拉帕米(P=0.029)和W7(P〈0.001)均能部分阻断PGE,对OPGmRNA表达的下调作用,KN-62、PD98059和chelerythrine则不影响PGE2对OPG表达的调节(P〉0.05)。结论PGE2诱导的RANKL表达是由PKA信号通路介导的,而PKA和钙/钙调蛋白信号通路则介导了PGE2对OPG表达的抑制作用。 展开更多
关键词 前列腺素E2 因子-κb受体激活物配基 护骨素 信号通路 钙调蛋白
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瘦素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖及OPG/RANKL mRNA表达的影响 被引量:6
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作者 刘爱茹 董进 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2008年第8期552-555,共4页
目的初步探讨瘦素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖及骨保护蛋白、核因子κB激活受体配体mRNA表达的影响。方法以小鼠成骨细胞MC3T3-E1为体外实验模型,用MTT法检测瘦素作用MC3T3-E1细胞后的增殖情况,RT-PCR方法检测OPG、RANKL mRNA表达... 目的初步探讨瘦素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖及骨保护蛋白、核因子κB激活受体配体mRNA表达的影响。方法以小鼠成骨细胞MC3T3-E1为体外实验模型,用MTT法检测瘦素作用MC3T3-E1细胞后的增殖情况,RT-PCR方法检测OPG、RANKL mRNA表达。结果瘦素(10、20、40、80和160ng.mL-1)作用于MC3T3-E1细胞24h后,可促进其增殖,OD值显著增加(P<0.01),增加骨保护蛋白mRNA表达,同时降低核因子κB激活受体配体mRNA表达,且呈浓度依赖性。结论瘦素促进MC3T3-E1细胞增殖,同时通过调节骨保护蛋白mRNA和核因子κB激活受体配体mRNA的表达,从而促进骨形成,抑制骨吸收。 展开更多
关键词 瘦素 瘦素受体 成骨细胞 破骨细胞 骨保护蛋白 因子κb激活受体配体
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基于OPG/RANKL信号轴探讨二至丸治疗绝经后骨质疏松的作用机制 被引量:14
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作者 姜宜妮 梁健 +2 位作者 刘江源 伍庆华 闵建新 《世界中医药》 CAS 2022年第1期92-97,共6页
目的:探讨二至丸治疗绝经后骨质疏松模型鼠的作用机制。方法:将108只雌性SD鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(PMOP)组、雌激素治疗(E_(2))组、二至丸低剂量治疗(EZW-L)组、二至丸中剂量治疗(EZW-M)组、二至丸高剂量治疗(EZW-H)组,每组18... 目的:探讨二至丸治疗绝经后骨质疏松模型鼠的作用机制。方法:将108只雌性SD鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(PMOP)组、雌激素治疗(E_(2))组、二至丸低剂量治疗(EZW-L)组、二至丸中剂量治疗(EZW-M)组、二至丸高剂量治疗(EZW-H)组,每组18只。E_(2)组接受E_(2)针剂皮下注射,EZW-L组、EZW-M组、EZW-H组分别予以6 g/kg、9 g/kg、12 g/kg混悬液灌胃,Sham组与PMOP组均予以1 mL生理盐水灌胃,均干预12周。检测各组大鼠右侧股骨头骨密度(BMD)、股骨生物力学/病理变化以及骨代谢血清标志物BALP、TRACP-5b、Cath-K、OPG、RANK、RANKL的水平变化。结果:药物干预12周后,与PMOP组比较,EZW-M组、E_(2)组、EZW-H组的BMD、弹性模量、最大载荷、BV/TV、Tb.Th、Joint、血清骨代谢标志物BALP、TRACP-5b、Cath-K的蛋白表达均显著增高(均P<0.05),FLAW显著降低(P<0.05);HE染色显示PMOP组骨组织出现明显病理改变,E_(2)组和EZW-H组疏松病理现象改善明显。POMP组、EZW-L组、EZW-M组股骨中OPG蛋白含量较Sham组、E_(2)组、EZW-H组明显下降;RANK、RANKL蛋白含量升高。与PMOP组比较,EZW-M组的OPG/RANKL比值显著增高(P<0.05),RANK/RANKL比值显著降低(P<0.05),E_(2)组、EZW-H组的OPG/RANKL比值显著增高(P<0.01),E_(2)组、EZW-H组的RANK/RANKL比值显著降低(P<0.01)。结论:二至丸可改善骨质疏松,其作用机制可能是OPG骨保护素重组蛋白/核因子κB受体激活物配体/RANKL信号轴抑制破骨细胞成熟分化实现的。 展开更多
关键词 骨质疏松 绝经后 二至丸 生物力学 病理改变 机制 骨保护素重组蛋白 因子κb受体激活物配体
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CaMKIIδ在破骨细胞分化不同阶段表达规律的研究 被引量:5
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作者 陆大壮 刘娟娟 +3 位作者 戚孟春 温黎明 李任 孙红 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1870-1874,共5页
目的:研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(Ca MKII)δ在破骨细胞分化不同阶段的表达规律,以揭示其在破骨细胞分化中的作用。方法:应用50μg/L核因子κB受体激活因子配体(RANKL)诱导小鼠RAW264.7细胞向破骨细胞分化;通过抗酒石酸酸性... 目的:研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(Ca MKII)δ在破骨细胞分化不同阶段的表达规律,以揭示其在破骨细胞分化中的作用。方法:应用50μg/L核因子κB受体激活因子配体(RANKL)诱导小鼠RAW264.7细胞向破骨细胞分化;通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色及骨磨片吸收陷窝检测评价破骨细胞生成情况;同时于诱导第0、1、3、5天末通过免疫荧光细胞化学、RT-q PCR和Western blot法检测Ca MKIIδ的mRNA及蛋白表达水平。结果:TRAP染色及骨吸收陷窝检测显示于诱导第5天有多核破骨细胞生成。第0、1、3、5天Ca MKIIδ的mRNA表达水平分别为1.028±0.041、2.478±0.087、10.524±1.284和42.914±2.667,蛋白相对水平分别为0.762、0.963、1.802和3.136,免疫荧光细胞化学检测显示Ca MKIIδ的荧光6强度呈时间依赖性递增。结论:Ca MKIIδ的表达随破骨细胞分化逐步增高,提示Ca MKIIδ在破骨细胞分化中可能起着关键调控作用。 展开更多
关键词 钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶IIδ 破骨细胞 因子κb受体激活因子配体 抗酒石酸酸性磷酸酶
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异丙肾上腺素对大鼠牙移动过程中牙槽骨微结构的影响 被引量:1
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作者 罗金莉 杜希希 袁小平 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第11期1698-1701,共4页
目的:探索异丙肾上腺素(ISO)对大鼠牙齿移动过程中牙槽骨微结构的影响。方法:50只实验大鼠,随机数字表法分成ISO组与对照组,建立大鼠牙移动模型,分别腹腔注射ISO[1 mg/(kg·d)]和等体积生理盐水,每晚定时给药。14 d后处死每组大鼠各... 目的:探索异丙肾上腺素(ISO)对大鼠牙齿移动过程中牙槽骨微结构的影响。方法:50只实验大鼠,随机数字表法分成ISO组与对照组,建立大鼠牙移动模型,分别腹腔注射ISO[1 mg/(kg·d)]和等体积生理盐水,每晚定时给药。14 d后处死每组大鼠各5只,Mirco-CT测量骨体积分数(BV/TV)、骨小梁分离度(Tb.Sp)、骨小梁数目(Tb.N)。结果:ISO组目标牙槽骨的BV/TV下降,Tb.N降低,Tb.Sp上升(P<0.05)。在第0(未给药)、7、14、21天分别处死每组大鼠各5只,链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP)检测β2-肾上腺素受体(ADRB2)以及核因子-κB激活受体配体(RANKL)的表达,计算平均光密度值,ISO组的ADRB2以及RANKL平均光密度值高于对照组(P<0.05)。结论:ISO在正畸牙移动过程中能促进牙槽骨骨吸收并增加ADRB2和RANKL的表达。 展开更多
关键词 异丙肾上腺素 骨微结构 β2-肾上腺素受体 因子-κb激活受体配体
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