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基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法快速鉴定食品中肠杆菌科细菌及耐药性分析
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作者 张璐 高腾 +7 位作者 黄亮 王世洁 李卉 赵培蓓 连莹莹 方彦飞 路瑞玲 李伟昊 《食品安全质量检测学报》 2025年第8期131-138,共8页
目的了解邯郸地区3类食品中肠杆菌科细菌的污染分布与耐药情况,构建食源性肠杆菌科的污染数据库。方法采集邯郸市2023—2024年市售食药物质、特殊膳食用食品和坚果与籽类及其加工制品类食品,通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行... 目的了解邯郸地区3类食品中肠杆菌科细菌的污染分布与耐药情况,构建食源性肠杆菌科的污染数据库。方法采集邯郸市2023—2024年市售食药物质、特殊膳食用食品和坚果与籽类及其加工制品类食品,通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行肠杆菌科分离鉴定,同时对肠杆菌科开展定量计数和药敏检测。结果196份食品中,检出肠杆菌科阳性样品22份,阳性率11.2%。散装食品中肠杆菌科检出率20.0%高于预包装食品中的检出率6.3%,差异有统计学意义(χ^(2)=8.415,P<0.05)。肠杆菌科细菌污染量总范围在1.00~4.67 lg CFU/g之间。22份阳性食品中鉴定出31株肠杆菌科细菌,其中包括9个属17种细菌。15种抗生素的药敏实验中32.26%的肠杆菌科细菌为耐药株,其中氨苄西林(25.81%)和头孢他啶(12.90%)耐药率相对较高,氯霉素、复方新诺明、粘菌素、头孢噻肟、氨苄西林/舒巴坦和四环素耐药率较低(耐药率均≤10.00%),而对厄他培南、美罗培南、头孢他啶/阿维巴坦、替加环素、环丙沙星、萘啶酸和阿米卡星的敏感率均为100.00%。散装红枣中检出1株非脱羧勒克氏菌耐抗生素种类最多。结论邯郸地区食品中存在一定程度的肠杆菌科细菌污染,散装食品明显比预包装食品污染率高,肠杆菌科细菌检出种类繁多,不同细菌耐药性差异明显,需进一步加强针对性监测工作,以防控食源性疾病。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法 食源性疾病 肠杆菌科 耐药性
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应用激光解吸电离飞行时间质谱法研究芳香聚硫醚醚砜环状低聚物 被引量:2
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作者 季怡萍 张红明 +2 位作者 齐颖华 陈天禄 姚冬 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期184-186,共3页
应用激光解吸电离飞行时间质谱法对芳香环状聚硫醚醚砜低聚物结构进行了分析,比较了四种不同基质对环状物结构分析结果的影响,发现1,8,9 蒽三酚为此类芳香环状低聚物的有效基质。探讨了金属阳离子对此类芳香环状低聚物的影响,认为三氟... 应用激光解吸电离飞行时间质谱法对芳香环状聚硫醚醚砜低聚物结构进行了分析,比较了四种不同基质对环状物结构分析结果的影响,发现1,8,9 蒽三酚为此类芳香环状低聚物的有效基质。探讨了金属阳离子对此类芳香环状低聚物的影响,认为三氟乙酸银是此种芳香环状低聚物的有效阳离子剂。 展开更多
关键词 聚硫醚醚砜 芳香环状低聚物 激光解吸电离飞行时间质谱法 结构 1 8 9-蒽三酚 金属阳离子 三氟乙酸银
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免疫富集联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法测定牛奶、鸡蛋中的沙门氏菌 被引量:6
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作者 赵宏 杨柳 +9 位作者 赵良娟 师三媛 王晓康 张宏伟 张霞 张峰 曾静 赵化冰 张滨 董志珍 《食品安全质量检测学报》 CAS 2020年第9期2936-2945,共10页
目的建立免疫富集联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)检测牛奶、鸡蛋中沙门氏菌的方法。方法沙门氏菌经免疫磁珠特异性富集后采用MA... 目的建立免疫富集联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)检测牛奶、鸡蛋中沙门氏菌的方法。方法沙门氏菌经免疫磁珠特异性富集后采用MALDI-TOF MS鉴定,并优化富集过程中的抗体、免疫磁珠添加量以及捕获时间,研究其特异性,并用于实际样品中沙门氏菌的检测。结果富集过程最佳反应条件为:每1 mg磁珠中抗体添加量为250μg,1 mL菌样中免疫磁珠添加量为600μL,捕获时间为30 min,免疫磁珠捕获沙门氏菌具有特异性;用于检测牛奶和鸡蛋中的沙门氏菌时,将浓度为3 CFU/mL的沙门氏菌特异性富集后选择性增菌9h即可被MALDI-TOF MS准确鉴定。结论该方法具有选择性好,特异性高,耗时短,结果准确的优点,为食品中沙门氏菌的检测提供相关参考。 展开更多
关键词 免疫磁珠 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法 沙门氏菌 鉴定
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法鉴定食品中金黄色葡萄球菌 被引量:13
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作者 杨祖顺 汤晓召 +2 位作者 邹颜秋硕 国译丹 杨庆文 《食品安全质量检测学报》 CAS 2017年第10期3710-3714,共5页
目的评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对食源性金黄色葡萄球菌的鉴定效果。方法应用MALDI-TOF MS对210株食源性金黄色葡萄球菌进行... 目的评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对食源性金黄色葡萄球菌的鉴定效果。方法应用MALDI-TOF MS对210株食源性金黄色葡萄球菌进行鉴定,与传统的生化鉴定结果进行比较,并用SPSS19.0软件分析鉴定结果。结果 MALDI-TOF MS将210株金黄色葡萄球菌鉴定到种、属水平分别为98.10%和1.43%,与VITEK 2鉴定方法无差异(P>0.05)。结论 MALDI-TOF MS具有简便、快速、准确等优点,适用于对食源性金黄色葡萄球菌进行高通量、低成本的快速鉴定。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 金黄色葡萄球菌 鉴定
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基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法的3种中药材中污染菌的快速鉴定 被引量:6
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作者 白雯静 刘兴国 +2 位作者 田妮娜 周斌 刘荔 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第7期2650-2655,共6页
目的运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrixa ssisted laser analytical ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)对9批中药材中相关污染菌进行快速鉴定,考察其微生物污染情况。方法参照2015年版《中国药... 目的运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrixa ssisted laser analytical ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)对9批中药材中相关污染菌进行快速鉴定,考察其微生物污染情况。方法参照2015年版《中国药典》四部,并结合MALDI-TOF-MS对分离出来的菌落进行鉴定。结果甘草、黄芪、党参的lg TAMC(需氧菌总数, total aerobic microbial count)、lg TYMC(霉菌和酵母菌总数, total yeasts and molds count)分别为4.91~7.04、1.0~4.11, lgTB(耐热菌总数, total thermophilic bacteria count)为1.48~2.65,而且经过100℃、30 min热处理后lgTAMC数值下降百分比均在50%以上。鉴定结果中显示污染概率最大的是成团泛菌、简单芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。结论甘草、黄芪、党参药材中污染的微生物多为成团泛菌和芽孢杆菌,在后期药材加工环节,可以采用有针对性的、有效的处理方法,从而避免由于原药材本身带来的不利影响。 展开更多
关键词 微生物污染 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法 甘草 黄芪 党参
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致病菌快速检测管联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法鉴定即食食品中的大肠埃希氏菌O157:H 被引量:6
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作者 史方 李轲 +3 位作者 阴甜甜 张莹莹 张璐 唐慧骥 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第1期253-260,共8页
目的建立基于致病菌快速检测管技术联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)快速、高效、准确鉴定即时食品中大肠埃希氏菌(Escherichia c... 目的建立基于致病菌快速检测管技术联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)快速、高效、准确鉴定即时食品中大肠埃希氏菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7的方法。方法选取改良胰蛋白胨大豆肉汤(modified tryptone soya broth,mTSB)为初筛培养基,制作出针对即时食品中E.coli O157:H7的致病菌快速检测管,初筛阳性结果采用MALDI-TOF MS技术鉴定。结果5株常见E.coli O157:H7菌株均能特异检出,而其他非E.coli O157:H7均未检出,灵敏度可达51 CFU/mL;通过对人工污染样品和自然样品检测,鉴定结果和GB 4789.36—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验》方法完全一致,且检测效率提高了30%。结论两种技术联合应用建立的鉴定即时食品中E.coli O157:H7的新方法,操作简便、成本低廉,适合推广,为快速、准确鉴定即时食品中E.coli O157:H7打开了新思路。 展开更多
关键词 即时食品 致病菌快速检测管 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法 大肠埃希氏菌O157:H7
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法对环境中芽孢杆菌的鉴定及溯源 被引量:4
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作者 吴丽娜 王伟 +9 位作者 王萍 殷培军 李正义 黄小华 张秋艳 唐静 徐玮 姜英辉 吕宁 贾俊涛 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2022年第9期2848-2854,共7页
目的 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption lionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)对芽孢杆菌进行快速鉴定及聚类分析,研究MALDI-TOF MS对芽孢杆菌溯源的可行性。方法 实... 目的 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption lionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)对芽孢杆菌进行快速鉴定及聚类分析,研究MALDI-TOF MS对芽孢杆菌溯源的可行性。方法 实验菌株利用甲酸提取法提取蛋白,应用MALDI-TOF MS对22株环境分离菌株和枯草芽孢杆菌标准菌株CGMCC(B)1.1086进行鉴定。采集22株实验菌株的蛋白质指纹图谱,使用SARAMIS软件进行聚类分析。结果 枯草芽孢杆菌标准菌株CGMCC(B)1.1086的鉴定结果可信度为99.9%。22株环境菌均为芽孢杆菌,其中,6株菌鉴定到属水平,16株菌鉴定到种水平。在相似水平为80%的条件下,22株芽孢杆菌分为22个分支。结论 应用MALDI-TOF MS对芽孢杆菌进行快速鉴定与分型,对于芽孢杆菌溯源有重要意义,能够满足环境中芽孢杆菌检测及溯源的需求。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法 快速鉴定 聚类分型
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法检测副溶血性弧菌 被引量:5
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作者 种婷 董慧明 +6 位作者 刘霓 胡嵩 马妮 赵飞 谷岩 孙葳 赵虹 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2022年第6期1866-1871,共6页
目的建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)检测副溶血性弧菌的方法。方法从样品预处理方法、分析菌量、培养基、培养时间方面分析各... 目的建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)检测副溶血性弧菌的方法。方法从样品预处理方法、分析菌量、培养基、培养时间方面分析各因素对MALDI-TOF-MS方法重复性、鉴定结果准确性的影响。将从市售420份水产品中分离并用全自动微生物鉴定及药敏分析系统生化鉴定为副溶血性弧菌的123株菌株,用MALDI-TOF-MS对其进行鉴定,对比2种方法的鉴定结果。结果采用混合溶液法进行预处理,3%NaCl营养琼脂培养基,36℃培养24 h,分析菌量为8 mg,用MALDI-TOF-MS进行分析所得到的特征峰多、峰型稳定、杂峰少,质谱图的准确性和重复性高、与生化鉴定匹配性好。分离得到的123株副溶血性弧菌鉴定分值大于2.000的达98.4%。结论MALDI-TOF-MS作为一种快速、准确、高效的检测方法,可用于食品中副溶血性弧菌快速检测。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法 副溶血性弧菌 快速检测
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法对中药材霉菌污染的快速鉴定 被引量:2
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作者 徐小雁 苏越 郭寅龙 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期546-551,共6页
通过N-烷基吡啶同位素季铵化反应(NAPIQ)结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对中药材的霉变情况进行了快速鉴定。运用氯仿对中药材中的甾醇进行提取后,以吡啶、氘代吡啶以及三氟甲磺酸酐作为衍生化试剂对提取出的甾醇... 通过N-烷基吡啶同位素季铵化反应(NAPIQ)结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对中药材的霉变情况进行了快速鉴定。运用氯仿对中药材中的甾醇进行提取后,以吡啶、氘代吡啶以及三氟甲磺酸酐作为衍生化试剂对提取出的甾醇进行衍生化反应以提高其质谱响应,并利用MALDI-TOF MS进行检测。利用该方法在新鲜的药材中仅检测到谷甾醇、豆甾醇等植物甾醇,而在霉变的药材中,除了植物甾醇外,还检测到羊毛甾醇等动物甾醇以及麦角甾醇等菌类甾醇。将该方法与药典中的微生物计数法进行了对照,在只检测到植物甾醇的新鲜药材中未发现霉菌,而在产生了动物甾醇和菌类甾醇的霉变药材中检测到的微生物数均大于药典规定的10~2 cfu/g,证明了该方法符合药典标准,可以对中药材受霉菌污染的状况进行快速评价。 展开更多
关键词 中药材 霉菌污染 植物甾醇 动物甾醇 NAPIQ 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS )
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不同类型基质对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析寡糖和多糖的影响
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作者 张子豪 王君巧 聂少平 《食品科学》 北大核心 2025年第14期225-237,共13页
本实验研究二元基质(氨基-4-羟基苯甲酸(amino-4-hydroxybenzoic acid,AHB)/2,5-二羟基苯甲酸(2,5-dihydroxybenzoic acid,DHB)、3-羟基香豆素(3-hydroxycoumarin,3-HC)/DHB)、离子液体基质(N,N-二甲基苯胺/DHB、2-(对羟基苯偶氮)苯甲酸... 本实验研究二元基质(氨基-4-羟基苯甲酸(amino-4-hydroxybenzoic acid,AHB)/2,5-二羟基苯甲酸(2,5-dihydroxybenzoic acid,DHB)、3-羟基香豆素(3-hydroxycoumarin,3-HC)/DHB)、离子液体基质(N,N-二甲基苯胺/DHB、2-(对羟基苯偶氮)苯甲酸/1,1,3,3-四甲基胍(1,1,3,3-tetramethylguanidine,TMG)、4-羟基香豆酸/TMG、2,4,6-三羟基苯乙酮(2,4,6-trihydroxyacetophenone,THAP)/TMG、N-甲基苯胺(N-methylaniline,NMA)/DHB)和反应性基质(3-肼基苯甲酸(3-hydrazylbenzoic acid,3-HBA)/DHB、6-肼烟酸(6-hydrazine niacin,HYNIC)/DHB、2-肼吡啶(2-hydrazopyridine,2-HPM))对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)检测麦芽八糖、半乳糖醛酸三糖和Dextran T6效果的影响,并与3种固体基质对比(DHB、THAP、α-氰基-4-羟基肉桂酸)。以麦芽八糖为例,研究各基质溶剂对检测寡糖效果的影响,针对反应性基质还研究了溶剂、反应时间、反应温度对衍生化率的影响。结果表明,对于麦芽八糖,3类基质均具有较理想的检测效果,谱图重现性好、质谱峰强度增加。对于反应性基质,其衍生化的反应温度至少为65℃,其中2-HPM在各条件下均具有高衍生效率((96.28±0.28)%),且能在较短时间(15 min)内完成衍生化反应,但是衍生化寡糖的信噪比(RSN)不高,而3-HBA/DHB和HYNIC/DHB衍生化寡糖的RSN高,但是衍生化效率较低,且反应时间至少需要60 min。此外,寡糖浓度对衍生化效率影响显著,当浓度低于108 fmol/L,衍生化寡糖信号很低或未被检测到。当THAP及3-HBA/DHB为基质时,其半乳糖醛酸三糖的质谱信号显著高于其余基质类型;对于Dextran T6,二元基质和离子液体基质的检测效果较优,其中AHB/DHB、3-HC/DHB、THAP/TMG、NMA/DHB为基质具有更广的分子质量测定范围,最高均可检测聚合度为36的多糖质谱峰。本实验系统研究不同类型基质对MALDI-TOF-MS检测3种不同类型碳水化合物效果的影响,研究结果可为碳水化合物的分析鉴定提供参考依据。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 基质 寡糖 多糖
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基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法快速测定米饭和乳制品中蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide
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作者 曾羲 王宇 +3 位作者 徐巨才 黄穗东 王涓 徐振林 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第1期232-238,共7页
建立基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)法分析蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide的快速检测方法。分析了Cereulide标准物质的裂解规律,考... 建立基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)法分析蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide的快速检测方法。分析了Cereulide标准物质的裂解规律,考察基质种类、点靶方式、基质溶剂和用量、激光强度等对Cereulide的质谱信号强度的影响,并进行方法学验证和实际样品检测。结果表明,选择以α-氰基-4-羟基肉桂酸为基质,均匀分散在50%乙腈-水(含0.1%三氟乙酸)中,采用先点基质再点样品的点样方式,反射线性正离子模式下选择激光强度70%进行食品中MALDI-TOF MS筛查时,可检测到Cereulide的[M+Na]^(+)和[M+K]^(+)目标离子峰,此质谱信号稳定、强度高、响应重复性好。方法学验证结果表明,Cereulide的[M+Na]^(+)和[M+K]^(+)目标离子峰在5~100 ng/mL范围内线性好,相关系数(r)>0.99;方法的检出限分别为3.0 ng/g和5.0 ng/g;对米饭和牛乳样品的加标回收率为73.3%~118.2%,相对标准偏差为0.3%~10.9%(n=6)。本方法分析速度快、准确性高、灵敏度好、抗干扰能力强、无需内标即可实现对米饭和乳制品中Cereulide的批量筛查和检测。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸-电离飞行时间质谱 蜡样芽孢杆菌 呕吐毒素 α-氰基-4-羟基肉桂酸
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基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法测定α/β-二羰基类化合物与标准瓜氨酸化肽段之间的衍生化反应活性
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作者 李雁凤 周丹丹 +7 位作者 陈旭飞 赵娟娟 高春丽 邱兴泰 唐紫超 邓楠 赵伟宁 边阳阳 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期711-720,共10页
蛋白质瓜氨酸化是一种由生物酶调控的不可逆翻译后修饰,其与免疫相关疾病、癌症、神经系统性疾病和老年痴呆症等重大疾病的发生和发展密切相关。蛋白质的瓜氨酸化修饰丰度低、缺乏亲和标签、m/z变化小且易受同位素及脱酰胺化作用干扰,... 蛋白质瓜氨酸化是一种由生物酶调控的不可逆翻译后修饰,其与免疫相关疾病、癌症、神经系统性疾病和老年痴呆症等重大疾病的发生和发展密切相关。蛋白质的瓜氨酸化修饰丰度低、缺乏亲和标签、m/z变化小且易受同位素及脱酰胺化作用干扰,因此对蛋白质的瓜氨酸化修饰进行质谱分析面临着巨大挑战。通过对瓜氨酸侧链脲基进行化学衍生反应,可以提高瓜氨酸化肽段的m/z差值,引入亲和富集标签,可有效提高瓜氨酸化分析的灵敏度和精准度。本研究以标准瓜氨酸化肽段为研究对象,以基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)为检测手段,对一系列二羰基类化合物与瓜氨酸化肽段之间的化学反应活性进行测定。在对α-二羰基类化合物的考察中发现,苯乙二醛、丙酮醛、1,2-环己二酮和1,10-邻二氮杂菲-5,6-二酮对瓜氨酸化肽段的衍生化效率很高,并且能够生成单一的衍生化产物;2,3-丁二酮、乙二醛与瓜氨酸化肽段之间的反应效率也很高,但会生成一系列副反应产物。在对β-二羰基类化合物的考察中发现,1,3-环己二酮、2,4-戊二酮在与瓜氨酸化肽段进行反应后,均可以产生单一的衍生化产物,但反应效率很低,不适用于瓜氨酸化肽段的化学衍生反应。实验结果表明,α-二羰基结构是实现高效、特异性瓜氨酸化肽段化学衍生反应的基础,α-二羰基类化合物中不同的侧链结构又决定了衍生化产物的结构、衍生化效率及副产物的生成。通过进一步合成含有亲和标签的α-二羰基类化合物,可以实现瓜氨酸化肽段的特异性富集和精准鉴定,有助于瓜氨酸化蛋白质及其位点鉴定的新方法开发。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 二羰基结构 瓜氨酸化肽段 化学衍生
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基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱法溯源分析云南省肉制品中金黄色葡萄球菌 被引量:6
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作者 杨祖顺 汤晓召 +2 位作者 邹颜秋硕 国译丹 杨庆文 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第22期7494-7501,共8页
目的利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALD1-TOF MS)技术对zj南省肉制品中金黄色葡萄球菌进行溯源。方法通过MALDI-TOF MS,主成分分析及聚类分... 目的利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALD1-TOF MS)技术对zj南省肉制品中金黄色葡萄球菌进行溯源。方法通过MALDI-TOF MS,主成分分析及聚类分析等方法,对来源于云南省肉制品的88株金黄色葡萄球菌,包括耐苯唑西林或敏感金黄色葡萄球菌株(MRSA/MSSA)的进行溯源研究。结果86株金黄色葡萄球菌可鉴定到种的水平,2株可鉴定到属的水平。用MALD丨-TOF M S鉴定金黄色葡萄球菌与生化和血清学方法的分型高度相关,聚类分析表明,88株菌株在距离水平为500的情况下被划分为4个类型,其中5型同数据库中来自欧美的9株标准菌株亲缘关系最近。88株金黄色葡萄球菌中来源相同地区的菌株MALDI-TOF M S肽指纹图谱相似性较好,相同类别来源或地区来源的金黄色葡萄球菌菌体蛋白表达更为相似,MRSA和MSSA菌株MALDI-TOF M S肽指纹图谱未观察到显著差异。结论MALDI-TOF M S是一种快速、高敏感、高通量、高精度的金黄色葡萄球菌鉴定技术,具有良好的可追溯性。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法 溯源
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱快速检测生菜中嗜麦芽窄食单胞菌
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作者 魏超 代晓航 +3 位作者 张涛 杨强 李辉 刘文娟 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第23期303-309,共7页
目的评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)在即食果蔬中微生物风险监测的应用价值,确定生菜中的危害微生物及蛋白指纹图谱特征。方法对... 目的评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)在即食果蔬中微生物风险监测的应用价值,确定生菜中的危害微生物及蛋白指纹图谱特征。方法对成都地区50份生菜样品进行微生物的检测,对分离的嗜麦芽窄食单胞菌进行生化鉴定和MALDI-TOF MS鉴定,采用维恩分析(包括小于0.85‰偏差)对生菜中分离的嗜麦芽窄食单胞菌指纹图谱进行拟合,采用系统聚类法对分离的嗜麦芽窄食单胞菌指纹图谱进行聚类分析。结果50份生菜样品中检出11株嗜麦芽窄食单胞菌,MALDI-TOF MS获得其蛋白图谱拟合出特征性标识峰指纹图16组,与数据库中超级谱图比对有9组不同标识峰,为生菜分离菌特征峰;蛋白指纹图谱聚类结果表明嗜麦芽窄食单胞指纹图谱有一定来源指向性,但仍需更多数据修正。结论嗜麦芽窄食单胞菌在生菜中检出率较高,可作为危害风险特征微生物继续研究,MALDI-TOF MS可获得更多农产品中致病微生物特征信息,作为农产品危害识别微生物快速鉴定及差异性分析应更深入的研究和扩大数据量,并建立农产品微生物数据库系统。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 生菜 嗜麦芽窄食单胞菌 特征指纹图谱
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基质辅助激光解吸飞行时间质谱技术快速检测水产品中5种致病菌
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作者 肖艳霞 董志军 +3 位作者 杨林军 朱家强 潘娟 钱云开 《食品安全质量检测学报》 2025年第1期28-35,共8页
目的建立水产品中5种常见致病菌的自动化快速高分辨检测手段,提高水产品致病微生物检测的效率和准确性。方法设计引物对霍乱弧菌、副溶血性弧菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌的特异基因owpW、tlh、invA、femA、p... 目的建立水产品中5种常见致病菌的自动化快速高分辨检测手段,提高水产品致病微生物检测的效率和准确性。方法设计引物对霍乱弧菌、副溶血性弧菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌的特异基因owpW、tlh、invA、femA、prfA进行多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增;设计特异探针以PCR产物为模板进行单碱基延伸,延伸产物在基质辅助激光解吸飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)上进行检测。基因owpW、tlh、invA、femA、prfA的探针分子量分别为4848、5435、5890、6560、7096 Da,单基因延伸后探针的分子量分别为5119 Da(加A)、5697 Da(加T)、6137 Da(加C)、6822 Da(加T)、7383 Da(加G)。最终确定的体系方法通过重现性试验、特异性试验、灵敏度试验、人工污染水产样本检测试验进行验证。结果以混合5种菌DNA的样本为模板做核酸质谱检测,对应的5个探针可以同时延伸,延伸效率大于80%,在以干扰菌为模板的样本中不会检出上述5种菌,检出沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌、霍乱弧菌的灵敏度分别可达到150、350、160、130、180 CFU/mL。结论此方法展现出良好的重现性、特异性和灵敏度,可以满足一次反应同时检测水产品中上述5种微生物的需求。 展开更多
关键词 致病菌 基质辅助激光解吸飞行时间质谱技术 单碱基延伸
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基质辅助激光解吸-飞行时间质谱结合随机森林融合模型用于白术的产地溯源分析
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作者 王颖琦 赵汉卿 +1 位作者 方焕 王童 《分析测试学报》 北大核心 2025年第6期1147-1153,共7页
该研究利用基质辅助激光解吸-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析技术结合两种改进的随机森林融合算法对白术进行产地溯源分析。首先通过MALDI-TOF MS获取了来自3个省份白术样本的质谱数据,每个样本的数据大小为1×234154。鉴于样本数... 该研究利用基质辅助激光解吸-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析技术结合两种改进的随机森林融合算法对白术进行产地溯源分析。首先通过MALDI-TOF MS获取了来自3个省份白术样本的质谱数据,每个样本的数据大小为1×234154。鉴于样本数据量庞大,故采用数据分箱策略进行初步简化(1×6600)。然后通过设定的累计方差贡献率阈值进行主成分分析,对数据进行降维。利用降维后的数据构建自适应增强极端随机森林模型(AERF)和自适应增强平衡随机森林模型(ABRF),最终通过模型融合策略获得AERF-ABRF模型对白术进行产地溯源。结果表明,所提出的基于降维数据构建的AERF-ABRF能够准确区分来自3个省份的白术样本,其对测试集和预测集的分类准确率均达到100%。同时,与单一判别模型相比,模型融合策略具有更高的分类准确率。 展开更多
关键词 随机森林 模型融合 白术 产地溯源 基质辅助激光解吸-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在食源性致病菌鉴定中的应用 被引量:3
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作者 任婷 史敏 +2 位作者 刘聪慧 黄一刚 裴金金 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第5期62-68,共7页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)作为近年来发展的新型食源性致病菌鉴定技术,具有灵敏、准确、检测速度快等优点,该技术为食品病原微... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)作为近年来发展的新型食源性致病菌鉴定技术,具有灵敏、准确、检测速度快等优点,该技术为食品病原微生物靶标性监测和食品安全事件应急检验提供了一种高效的鉴别技术参考,在保障民众生命健康和经济社会发展上发挥了重要作用。本文检索了近年来国内外MALDI-TOF MS技术在食源性致病菌检测中的相关研究案例,简要综述了MALDI-TOF MS检测原理、工作流程,影响鉴定结果的主要因素,介绍了MALDI-TOF MS技术应用于食源性致病菌检测中的实际案例,在此基础上分别从参考菌株数据库建设、标准化程序规范等方面对MALDI-TOF MS技术在食源性致病菌检测领域的未来研究方向进行展望,以期为后续食品安全检测及快速监管食源性致病菌污染提供技术支持。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 食源性致病菌 鉴定
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基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱法鉴定检疫性病菌炭疽菌 被引量:1
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作者 程颖慧 王颖 +3 位作者 杨晓朱 章桂明 冯建军 汪莹 《广东农业科学》 CAS 2018年第7期100-104,173,共6页
基于基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS),对样品处理过程中的各条件进行优化,建立了基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱快速鉴定炭疽菌的方法。炭疽病菌菌丝采用70%甲酸:100%乙腈(1∶1)进行提取、50μL70%甲酸∶100%乙腈(1... 基于基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS),对样品处理过程中的各条件进行优化,建立了基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱快速鉴定炭疽菌的方法。炭疽病菌菌丝采用70%甲酸:100%乙腈(1∶1)进行提取、50μL70%甲酸∶100%乙腈(1∶1)重悬后再超声提取,然后以HCCA为基质,乙腈∶三氟乙酸∶无菌去离子水(50%∶2.5%∶47.5%)为基质溶剂,运用改进的干滴法点样,进行MALDI-TOF-MS分析。应用此方法获得了咖啡浆果炭疽病菌特有的9个蛋白图谱峰,建立12种炭疽菌的蛋白指纹图谱库,从而建立MALDITOFMS分析炭疽菌的标准方法。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱 炭疽菌 鉴定 蛋白指纹图谱
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在李斯特菌检测和鉴定中的应用 被引量:17
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作者 龚艳清 陈信忠 +3 位作者 杨俊萍 郭书林 马群飞 石椿丽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第6期209-214,共6页
为建立食品中各种李斯特菌的快速检测和鉴定方法,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对单增李斯特菌、绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌、威尔斯李斯特菌和格氏李斯特菌5种李斯特菌进行检测,并与传统的生化鉴定方法(VITEK... 为建立食品中各种李斯特菌的快速检测和鉴定方法,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对单增李斯特菌、绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌、威尔斯李斯特菌和格氏李斯特菌5种李斯特菌进行检测,并与传统的生化鉴定方法(VITEK 2)和聚合酶链式反应(PCR)方法检测结果进行比较;用不同培养基和不同培养时间培养的单增李斯特菌对该方法进行检测,还对60份人工感染5种李斯特菌的食品样品分别进行MALDI-TOF-MS、PCR以及传统生化方法的检测和鉴定。结果表明:MALDI-TOF-MS能够快速、可靠地区分上述5种李斯特菌,而且具有很好的稳定性和重复性,在检测时间、重复性和准确性方面的总体表现优于传统生化鉴定方法。MALDI-TOF-MS技术适用于对李斯特菌等食源性病原菌进行高通量、低成本的快速鉴定。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 李斯特菌 检测 鉴定
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床病原菌鉴定中的应用 被引量:14
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作者 王卫萍 奚海燕 +4 位作者 黄梅 王洁 范明 陈勇 邵海枫 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第5期337-340,共4页
目的探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)系统用于快速鉴定临床分离菌的可靠性和实用性。方法收集南京军区南京总医院2013年7~10月... 目的探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)系统用于快速鉴定临床分离菌的可靠性和实用性。方法收集南京军区南京总医院2013年7~10月自临床标本分离的非重复细菌1 061株,分别使用MALDI-TOF MS和Vitek 2 Compact全自动细菌鉴定仪系统进行鉴定,结果不一致的菌株采用16S r DNA测序验证。结果 1 061株临床分离菌中1 058株(99.7%)经MALDI-TOF MS系统正确鉴定到属水平,1 016株(95.8%)正确鉴定到种,其余3株(0.3%)未给出鉴定结果。5株鉴定结果不一致的菌株经16S r DNA测序确认,结果与MALDI-TOF MS和Vitek 2 Compact鉴定符合率分别为40.0%(2/5)和0(0/5)。结论 MALDI-TOF MS可以作为一个快速、准确和价廉的工具应用于临床分离菌的鉴定。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 临床菌株 快速鉴定
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