运用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对酶解螺蛳腹足肌得到的血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽进行两步分离提纯,第一步主要得到8个组分;选取其中活性最高的组分进一步分离,得到2个组分,其中活性较高组分的ACE半抑制浓度为43.5μm o l/L,基本为...运用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对酶解螺蛳腹足肌得到的血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽进行两步分离提纯,第一步主要得到8个组分;选取其中活性最高的组分进一步分离,得到2个组分,其中活性较高组分的ACE半抑制浓度为43.5μm o l/L,基本为单一肽组分。对提纯的组分分别使用高效液相色谱/电喷雾离子质谱法(HPLC/E S I-M S)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(MALD I-TO F M S)进行分析,同时结合氨基酸组成分析结果,最终得到的肽链一级结构为Lys-G lu-Ile-Trp(KE IW),符合已知的高活性ACE抑制肽的结构规律。经过对两种方法分析过程的比较,认为E S I-M S可以得到多方面的信息,但无法确定肽的序列;MALD I-TO F M S可以得到精确的二级质谱图(m/z精确至0.000 1),从而可以得到确定的肽的序列。展开更多
文摘运用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对酶解螺蛳腹足肌得到的血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽进行两步分离提纯,第一步主要得到8个组分;选取其中活性最高的组分进一步分离,得到2个组分,其中活性较高组分的ACE半抑制浓度为43.5μm o l/L,基本为单一肽组分。对提纯的组分分别使用高效液相色谱/电喷雾离子质谱法(HPLC/E S I-M S)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(MALD I-TO F M S)进行分析,同时结合氨基酸组成分析结果,最终得到的肽链一级结构为Lys-G lu-Ile-Trp(KE IW),符合已知的高活性ACE抑制肽的结构规律。经过对两种方法分析过程的比较,认为E S I-M S可以得到多方面的信息,但无法确定肽的序列;MALD I-TO F M S可以得到精确的二级质谱图(m/z精确至0.000 1),从而可以得到确定的肽的序列。
